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1、实验一微生物染色实验一微生物染色一、实验目的一、实验目的 学习微生物的染色原理、染色的基本操作技术,从而掌握微生物的一般染色法和革兰氏染色法。7镜检 用显微镜观察,并用铅笔绘出细菌形态图。(二二)细菌的革兰氏染色步骤细菌的革兰氏染色步骤 涂片干燥固定初染水洗媒染水洗脱色水洗复染水洗干燥观察1取大肠杆菌和枯草杆菌(均以无菌操作)分别做涂片、干燥、固定,方法均与简单染色的相同。2用草酸铵结晶紫染色1min后水洗。3加碘液媒染1min后水洗。4斜置载玻片,滴加95乙醇脱色,至流出的乙醇不现紫色 为止,大约需时2030s,随即水洗。5用蕃红染液复染1min,水洗。6用吸水纸吸掉水滴,待标本片干后置显微
2、镜下,用低倍镜观察,发现目的物后用油镜观察,注意细菌细胞的颜色。绘出细菌的形态图并说明革兰氏染色的结果革兰氏染色的结果。六、注意事项六、注意事项1革兰氏染色成败的关键是脱色时间关键是脱色时间,如脱色过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为革兰氏阴性菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被误认为是革兰氏阳性菌。因此必须 严格把握脱色时间。 2 选用培养18- -24小时菌龄小时菌龄的细菌为宜,若细菌太老,由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。思考题及实验作业思考题及实验作业1 不经复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和阴性菌?2 通过革兰氏染色,你认为它在微生物学中有何实践意义?七、实验结果七、实验结果简单染色 : 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌和枯草杆菌染成( )色。革兰氏染色(大肠杆菌大肠杆菌与枯草杆菌) : 将结果填于下表中