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1、黄曲霉毒素黄曲霉毒素B1酶联免疫竞争检测法酶联免疫竞争检测法 Hangzhou, Sept. 24, 20021酶酶联免疫竞争法工作原理联免疫竞争法工作原理Hangzhou, Sept. 24, 20022样 品Hangzhou, Sept. 24, 20023样品样品黄曲霉毒素B1分子Hangzhou, Sept. 24, 20024微孔板Hangzhou, Sept. 24, 20025微微 孔孔 表表 面面 情情 况况 AFB1抗体抗体Hangzhou, Sept. 24, 20026标准品Hangzhou, Sept. 24, 20027标准溶液Hangzhou, Sept. 24,
2、20028酶标抗原Hangzhou, Sept. 24, 20029酶酶标抗原标抗原酶AFB1Hangzhou, Sept. 24, 200210标准标准品品, 样品样品 和和 酶酶标抗原标抗原加加进微孔进微孔Hangzhou, Sept. 24, 200211样品酶标抗原 样 品 孔先加后加Hangzhou, Sept. 24, 200212标准品酶标抗原标 准 孔先加后加Hangzhou, Sept. 24, 200213孵育孵育30分钟分钟 抗抗 原原 与与 抗抗 体体 结结 合合Hangzhou, Sept. 24, 200214微微 孔孔 清清 洗洗Hangzhou, Sept. 2
3、4, 200215洗涤洗涤5次，间隔次，间隔2分钟分钟Hangzhou, Sept. 24, 200216加入加入酶催化反应底物酶催化反应底物Hangzhou, Sept. 24, 200217加入加入反应底物反应底物A和和B孵孵 育育 15 分分 钟钟Hangzhou, Sept. 24, 200218显显 色色Hangzhou, Sept. 24, 200219Hangzhou, Sept. 24, 200220反反反反 应应应应 孔孔孔孔Hangzhou, Sept. 24, 200221阴阴阴阴 性性性性 对对对对 照照照照 孔孔孔孔Hangzhou, Sept. 24, 200222
4、阴阴性对照孔性对照孔=没有黄曲霉毒素没有黄曲霉毒素B1分子与酶标抗原竞争分子与酶标抗原竞争所有所有抗体都与酶标抗原结合抗体都与酶标抗原结合Hangzhou, Sept. 24, 200223阳阳阳阳 性性性性 对对对对 照照照照 孔孔孔孔Hangzhou, Sept. 24, 2002241 ng/ml 标准孔标准孔 = 黄曲霉黄曲霉毒素毒素B1分子结合到抗体上分子结合到抗体上剩余剩余的抗体再与酶标抗原结合的抗体再与酶标抗原结合Hangzhou, Sept. 24, 200225阳阳 性性 样样 品品酶标酶标抗原结合得越少，颜色越浅抗原结合得越少，颜色越浅Hangzhou, Sept. 24, 200226加加入终止液，反应液由蓝色变成黄色，入终止液，反应液由蓝色变成黄色，上酶标仪读取数据，画标准曲线上酶标仪读取数据，画标准曲线Hangzhou, Sept. 24, 200227调零孔阴性孔0.1 ng/ml0.5 ng/ml1 ng/ml5 ng/ml10 ng/ml酶酶酶酶联免疫竞争法标准曲线联免疫竞争法标准曲线联免疫竞争法标准曲线联免疫竞争法标准曲线 0.1 1 10 ng/mlO.D.Hangzhou, Sept. 24, 200228
