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1、课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数关于菌种的筛选和计数1菌株的筛选(1)自然界中目的菌株的筛选生存环境根据它对_的要求到相应的环境中去寻找。从土壤中分离出目的菌株。(2)实验室目的菌株的筛选原理：人为提供有利于_菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 值等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。目的2统计菌落数目的方法(1)_计数法直接显微镜过程：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在_下计算一定容积里样品中微生物的数量。缺点：不能区分死菌和活菌。(2)间接计数法(活菌计数法)根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个_繁殖而成，按比例稀释样品后，将稀释液接种培养，统计_的数目。单细胞菌落
2、分离与计数土壤中分解尿素的细菌的实验1菌种筛选尿素(1)培养基：_培养基。(2)特点：_是唯一氮源。2统计菌落数目(1)计算方法：直接计数法；间接计数法。(2)平板计数公式(C/V)M每克样品中的菌株数_选择3设置对照(1)对照实验的概念除了被测试条件以外，其他条件都相同的实验。(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响。4实验流程操作步骤操作要求和注意事项土壤取样从距离地面 38 cm 的土壤层取样样品稀释4 5 6测定细菌：选用稀释 10 、10 、10 倍3 4 5测定放线菌：选用稀释 10 、10 、10 倍2 3 4测定真菌：选用稀释 10 、10 、10 倍培养与观察细
3、菌：3037 ；12 d放线菌：2528 ；57 d真菌：2528 ；34 d计数每克样品中的菌株数(C/V)M，C某一稀释液浓度下平板上生长的平均菌落数；V涂布平板所用稀释液体积(ml)；M稀释倍数从土壤中分离微生物的方法与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1关于选择培养基(1)概念：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。(2)举例：以纤维素作唯一碳源的选择性培养基，可以分离到分解纤维素的微生物；缺氮培养基可以分离到固氮微生物等。2分解尿素的细菌的鉴别(1)在培养基中加入酚红指示剂，则培养基会变红；(2)检测 pH 的变化来判断
4、是否存在。3分离分解尿素的细菌的实验设计原则(1)设立重复组原则统计某一稀释度下的平板上的菌落数时，要至少涂布 3 个平板作重复组，来增强实验结果的说服力与准确性。(2)对照原则判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上的菌落数目，进行对比得出结论。利用培养基分离微生物【例 1】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称作()A鉴别培养基C选择培养基B加富培养基D基础培养基【名师点拨】：基础培养基是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，
5、例如牛肉膏蛋白胨培养基；加富培养基一般用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物；鉴别培养基是在培养基中加入某种特殊化学物质，其能与微生物的代谢产物发生特定化学反应，产生明显的特征变化；选择培养基是在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。【答案】：C【配对练习 1】对表层土壤中自生固氮菌的分离采取的原理(方法)是()A依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源B依据不同微生物生长繁殖所需 pH 不同C依据不同微生物生长繁殖所需温度条件不同D依据不同微生物代谢类型不同解析：本题考查培养基的选择性、微生物的生长发育特点、影响微生物正常生长的因素。影响微生物生长的
6、因素有多种，除培养基的营养外还有温度、pH、氧等。在无氮培养基上只有固氮菌能正常生长繁殖。答案：A分离能分解尿素的细菌【例 2】选择土壤中分解尿素的微生物，所用氮源为()A硝酸C尿素B氨D蛋白胨【名师点拨】：只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，从而受到抑制，所以，以尿素为唯一氮源的培养基能够选择出分解尿素的微生物。【答案】：C【配对练习 2】在做“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于()A空白对照C相互对照B标准对照D条件对照解析：本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理，为条件对照。答案：D
