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1、 基因扩增实验室常用仪器设备基因扩增实验室常用仪器设备的使用和维护的使用和维护卫生部临床检验中心 王露楠2021/9/211PCR热循环仪（热循环仪（DNA扩增仪）扩增仪）高速高速( 冷冻冷冻)离心机离心机漩涡振荡混旋器漩涡振荡混旋器恒温水浴箱恒温水浴箱/ /恒温金属浴恒温金属浴洗板机（洗板机（PCR-ELISA)PCR-ELISA)酶标仪酶标仪(PCR-ELISA)(PCR-ELISA)加样器加样器2021/9/212PCR热循环仪（热循环仪（DNA扩增仪）扩增仪）PCR扩增仪的原理及发展状况扩增仪的原理及发展状况： PCRPCR扩增仪原理扩增仪原理 国内常见扩增仪简介国内常见扩增仪简介 国
2、内常见荧光定量国内常见荧光定量PCR仪简介仪简介PCR扩增仪的使用与保养扩增仪的使用与保养2021/9/213PCR扩增仪的原理及发展状况扩增仪的原理及发展状况（1 1）梯度水浴法）梯度水浴法2021/9/214 （2 2）空气驱动循环恒温装置）空气驱动循环恒温装置本本系系统统力力求求降降低低部部件件的的成成本本，用用空空气气作作为为热热传传导导媒媒介介。装装置置包包括括机机箱箱（外外壳壳）、热热源源、冷空气源、控制器和辅助电器元件等部分。冷空气源、控制器和辅助电器元件等部分。优优点点：不不用用金金属属的的精精密密加加工工，成成本本降降低低。整整个个系系统统没没有有液液体体流流动动，不不用用致
3、致冷冷液液，因因而而安安全程度高。恒温精度可达全程度高。恒温精度可达 1 。缺缺点点：单单纯纯靠靠外外部部空空气气制制冷冷，受受环环境境温温度度影影响。响。2021/9/215（3）变温金属块作恒温装置）变温金属块作恒温装置加热方式有电热发热、半导体发热，制加热方式有电热发热、半导体发热，制冷方式有半导体制冷和压缩机制冷等多冷方式有半导体制冷和压缩机制冷等多种方式。种方式。国外产品的特点是产品质量和性能较稳国外产品的特点是产品质量和性能较稳定。定。机型：适用，建议机型：适用，建议 8*12孔德模式。孔德模式。2021/9/216国内常见扩增仪简介国内常见扩增仪简介T11-IIT11-II型基因
4、扩增仪（华美生物工程型基因扩增仪（华美生物工程公司）公司）温度设定范围：温度设定范围：温度设定范围：温度设定范围： 室温室温室温室温-99-99-99-99 C C C C样品批量能力：样品批量能力：样品批量能力：样品批量能力：48484848 0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml或或或或16161616 1.5ml1.5ml1.5ml1.5ml离心管离心管离心管离心管动动动动态态态态显显显显示示示示内内内内容容容容: : : : 实实实实时时时时温温温温度度度度、到到到到计计计计数数数数时时时时间间间间、到到到到计计计计数循环数数循环数数循环数数循环数主主主主要要要要功功功功能能能能：整
5、整整整机机机机全全全全自自自自动动动动化化化化运运运运行行行行，线线线线性性性性运运运运动动动动臂臂臂臂同同同同时具有自动和手动功能；具有断时具有自动和手动功能；具有断时具有自动和手动功能；具有断时具有自动和手动功能；具有断电恢复功能；可贮存电恢复功能；可贮存电恢复功能；可贮存电恢复功能；可贮存128128128128个用户文件。个用户文件。个用户文件。个用户文件。2021/9/2172400型型DNA扩增系统扩增系统( 美国应用生物系统公司）美国应用生物系统公司）最最大大样样本本数数：可可同同时时扩扩增增3*83*8个个0.2ml 0.2ml PCRPCR反反应应管。管。温度范围：温度范围：
6、4-99.94-99.9加加热热冷冷却却速速度度：样样本本实实际际升升降降温温速速度度平平均均为为1/1/秒。秒。静态样本均衡性：静态样本均衡性： 0.50.5，35-10035-100范围。范围。温度精度：温度精度：35-10035-100间误差小于间误差小于0.750.75。特特点点：所所附附加加热热盖盖保保证证防防止止样样品品蒸蒸发发，无无需需加加石石蜡蜡油油操操作作，满满足足最最小小5 5 l l体体积积；扩扩增增反反应应的的要要求求；可可储储存存6868个个PCRPCR方方法法，每每个个方方法法包包括括PCRPCR前前处处理理，保保温温，PCRPCR循循环环及及PCRPCR扩扩增增后
7、后保保温温条条件件；断电后有自动启动功能。断电后有自动启动功能。2021/9/218PTC-200 热循环仪（MJ公司产品）最最最最大大大大样样样样本本本本数数数数：多多多多样样样样本本本本载载载载板板板板可可可可选选选选择择择择，其其其其中中中中包包包包括括括括扩扩扩扩增增增增96969696个个个个0.2ml PCR0.2ml PCR0.2ml PCR0.2ml PCR反应管。反应管。反应管。反应管。温度范围：温度范围：温度范围：温度范围：-5-105-5-105-5-105-5-105加热速度：样本实际升温速度为加热速度：样本实际升温速度为加热速度：样本实际升温速度为加热速度：样本实际升
8、温速度为3.5/3.5/3.5/3.5/秒。秒。秒。秒。温度精度：孔间温度差异小于温度精度：孔间温度差异小于温度精度：孔间温度差异小于温度精度：孔间温度差异小于0.30.30.30.3。特特特特点点点点：采采采采用用用用可可可可调调调调压压压压力力力力和和和和高高高高度度度度的的的的热热热热盖盖盖盖，防防防防止止止止样样样样品品品品蒸蒸蒸蒸发发发发，无无无无需需需需加加加加石石石石蜡蜡蜡蜡油油油油操操操操作作作作；三三三三种种种种温温温温控控控控选选选选择择择择：模模模模块、样本内参或电脑模拟计算。块、样本内参或电脑模拟计算。块、样本内参或电脑模拟计算。块、样本内参或电脑模拟计算。2021/9
9、/219Eppendorf梯度PCR仪最最最最大大大大样样样样本本本本数数数数：是是是是唯唯唯唯一一一一可可可可同同同同时时时时防防防防置置置置0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml和和和和0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml反反反反应应应应管管管管的的的的扩扩扩扩增增增增仪仪仪仪，可可可可同同同同时时时时扩扩扩扩增增增增96969696个个个个0.2ml 0.2ml 0.2ml 0.2ml PCRPCRPCRPCR反应管和反应管和反应管和反应管和77777777个个个个0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml反应管。反应管。反应管。反应管。温度范围：温度范围：温度范围：温度范围：4-9
10、94-994-994-99加热速度：加热速度：加热速度：加热速度：3/3/3/3/秒。冷却速度：秒。冷却速度：秒。冷却速度：秒。冷却速度： 2/ 2/ 2/ 2/秒。秒。秒。秒。温度准确性：温度准确性：温度准确性：温度准确性： 0.2 0.2 0.2 0.2 。特特特特点点点点：循循循循环环环环时时时时可可可可对对对对变变变变性性性性、退退退退火火火火和和和和延延延延伸伸伸伸同同同同时时时时设设设设温温温温度梯度。度梯度。度梯度。度梯度。2021/9/2110PCR扩增仪的使用与保养扩增仪的使用与保养PCRPCR仪应放在临床基因扩增实验室的第三区。仪应放在临床基因扩增实验室的第三区。仪应放在临
11、床基因扩增实验室的第三区。仪应放在临床基因扩增实验室的第三区。仪器应放置水平台上，电源电压须与仪器要求仪器应放置水平台上，电源电压须与仪器要求仪器应放置水平台上，电源电压须与仪器要求仪器应放置水平台上，电源电压须与仪器要求电压相一致，并连接可靠的地线。仪器远离水电压相一致，并连接可靠的地线。仪器远离水电压相一致，并连接可靠的地线。仪器远离水电压相一致，并连接可靠的地线。仪器远离水源、明火及腐蚀性物质。源、明火及腐蚀性物质。源、明火及腐蚀性物质。源、明火及腐蚀性物质。工作室温要求：工作室温要求：工作室温要求：工作室温要求：15-25 15-25 ，通风保证散热。，通风保证散热。，通风保证散热。，
12、通风保证散热。接稳压电源。尤其是半导体升温降温的设备。接稳压电源。尤其是半导体升温降温的设备。接稳压电源。尤其是半导体升温降温的设备。接稳压电源。尤其是半导体升温降温的设备。每每每每次次次次实实实实验验验验时时时时，最最最最好好好好能能能能将将将将扩扩扩扩增增增增仪仪仪仪内内内内的的的的孔孔孔孔位位位位全全全全部部部部放放放放置置置置样样样样品品品品管管管管，若若若若样样样样品品品品管管管管少少少少时时时时可可可可用用用用空空空空管管管管代代代代替替替替，以以以以保保保保证实验的一致性和重复性。证实验的一致性和重复性。证实验的一致性和重复性。证实验的一致性和重复性。2021/9/2111PCR
13、扩增仪的使用与保养扩增仪的使用与保养实实验验结结束束后后应应及及时时擦擦干干孔孔位位内内呆呆能能存存在在的水分，盖上机盖。的水分，盖上机盖。应定期使用电子测温仪校准温度。应定期使用电子测温仪校准温度。水浴式扩增仪应及时补充水，以免水量水浴式扩增仪应及时补充水，以免水量过少，影响温度稳定性。过少，影响温度稳定性。定期清洁热盖和反应孔。定期清洁热盖和反应孔。2021/9/2112国内常见荧光定量国内常见荧光定量PCR仪简介仪简介GeneAmp 5700GeneAmp 5700型荧光定量型荧光定量PCRPCR仪仪Lightcycler 荧光定量荧光定量PCR系统系统ABI 7000ABI 7000型
14、荧光定量型荧光定量PCRPCR仪仪杭州博日杭州博日 Line-gene Line-gene2021/9/2113LightCycler (Roche)Rotor-Gene (Corbett Research)ABI Prism (Applied Biosystems)2021/9/2114GeneAmp 5700GeneAmp 5700型荧光定量型荧光定量PCRPCR仪仪仪器特点外标定量，熔点曲线分析。外标定量，熔点曲线分析。外标定量，熔点曲线分析。外标定量，熔点曲线分析。57005700采用基于采用基于采用基于采用基于C CT T值之实时动态荧光定量值之实时动态荧光定量值之实时动态荧光定量值
15、之实时动态荧光定量PCRPCR方方方方法，结果重复性好，线性范围广，可分别用于法，结果重复性好，线性范围广，可分别用于法，结果重复性好，线性范围广，可分别用于法，结果重复性好，线性范围广，可分别用于TaqMan TaqMan 荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量PCRPCR和和和和SYBR SYBR GreenGreen荧光染料作定量荧光染料作定量荧光染料作定量荧光染料作定量PCRPCR。一次最多可同时分析一次最多可同时分析一次最多可同时分析一次最多可同时分析9696个样品，荧光检测波长个样品，荧光检测波长个样品，荧光检测波长个样品，荧光检测波长范围范围范围
16、范围530-590nm530-590nm。2021/9/2115GeneAmp 5700GeneAmp 5700型荧光定量型荧光定量PCRPCR仪仪 影响测定结果的因素域值设定域值设定域值设定域值设定光路维护光路维护光路维护光路维护加样的准确性和反应体系的均一性加样的准确性和反应体系的均一性加样的准确性和反应体系的均一性加样的准确性和反应体系的均一性反应管中是否有气泡反应管中是否有气泡反应管中是否有气泡反应管中是否有气泡反应管不符合荧光检测要求或疏水性差反应管不符合荧光检测要求或疏水性差反应管不符合荧光检测要求或疏水性差反应管不符合荧光检测要求或疏水性差反应管或反应槽被荧光物质污染反应管或反应
17、槽被荧光物质污染反应管或反应槽被荧光物质污染反应管或反应槽被荧光物质污染反应管用记号笔做标记反应管用记号笔做标记反应管用记号笔做标记反应管用记号笔做标记2021/9/21162021/9/21172021/9/2118Lightcycler 荧光定量荧光定量PCR系统系统 原理和特点可使用外标法定量，可加内对照，可做熔点曲线分析。单一光路的三个检测点对样本同时进行三个波长的荧光检测，扩赠与检测同时进行，提供实时分析和在线监测。引入独特的颜色补偿试剂和软件以消除个检测通道其它染料荧光的干扰。一次可做32个样本。公用热室，保证单次PCR个样本的状况连续一致。循环速度快，20-30分钟完成30-40
18、个循环，一次检测样本数32个。2021/9/2119Lightcycler 荧光定量荧光定量PCR系统系统清洁和维护清洁和维护反应槽和内壁均可用家用洗涤剂清洁，反应槽和内壁均可用家用洗涤剂清洁，但反应槽必须在取出后才能进行清洁。但反应槽必须在取出后才能进行清洁。当毛细管破碎时，首先用仪器厂家提供当毛细管破碎时，首先用仪器厂家提供的毛刷将碎片去除，再用的毛刷将碎片去除，再用70%乙醇清洗乙醇清洗反应槽。反应槽。光路部分须用无水乙醇清洁光路部分须用无水乙醇清洁2021/9/2120ABI 7000ABI 7000型荧光定量型荧光定量PCRPCR仪仪检测原理和特点检测原理和特点采用精确的化学原理和多
19、组分计算方法，可准采用精确的化学原理和多组分计算方法，可准采用精确的化学原理和多组分计算方法，可准采用精确的化学原理和多组分计算方法，可准确检测和处理确检测和处理确检测和处理确检测和处理PCRPCR指数级扩增的数据，得出高指数级扩增的数据，得出高指数级扩增的数据，得出高指数级扩增的数据，得出高精度重现的精度重现的精度重现的精度重现的C Ct t值，多色荧光检测，实时数据监值，多色荧光检测，实时数据监值，多色荧光检测，实时数据监值，多色荧光检测，实时数据监控，并有熔点曲线分析。控，并有熔点曲线分析。控，并有熔点曲线分析。控，并有熔点曲线分析。荧光波长范围荧光波长范围荧光波长范围荧光波长范围500
20、-660nm500-660nm，可分别用于可分别用于可分别用于可分别用于TaqMan TaqMan 荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量荧光探针技术作定量PCRPCR和和和和SYBR SYBR GreenGreen荧光染料作定量荧光染料作定量荧光染料作定量荧光染料作定量PCRPCR。2021/9/2121杭州博日杭州博日 Line-gene Line-gene检测原理和特点检测原理和特点内标定量和外标定量，激发光波长内标定量和外标定量，激发光波长470nm，荧光检测波长，荧光检测波长530nm、640nm和和710nm。对对PCR扩增全过程进行实时动态监测。扩增全过程进行实时
21、动态监测。一次最多可同时分析一次最多可同时分析33个样品，最大循个样品，最大循环数为环数为99。2021/9/2122高速高速( 冷冻冷冻)离心机离心机使用方法使用方法注意事项注意事项维护和保养维护和保养2021/9/2123使用方法使用方法离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。震动。震动。震动。打打打打开开开
22、开电电电电源源源源开开开开关关关关，按按按按要要要要求求求求装装装装上上上上所所所所需需需需的的的的转转转转头头头头，将将将将预预预预先先先先平平平平衡衡衡衡好好好好的的的的样样样样品品品品放放放放置置置置于于于于转转转转头头头头样样样样品品品品架架架架上上上上（离离离离心心心心筒筒筒筒须与样品同时平衡），关闭机盖。须与样品同时平衡），关闭机盖。须与样品同时平衡），关闭机盖。须与样品同时平衡），关闭机盖。按按按按功功功功能能能能选选选选择择择择键键键键，设设设设置置置置各各各各项项项项要要要要求求求求：温温温温度度度度、速速速速度度度度、时时时时间间间间、加加加加速速速速度度度度及及及及减减减
23、减速速速速度度度度，带带带带电电电电脑脑脑脑控控控控制制制制的的的的机机机机器器器器还还还还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。需按储存键，以便记忆输入的各项信息。需按储存键，以便记忆输入的各项信息。需按储存键，以便记忆输入的各项信息。待待待待离离离离心心心心机机机机完完完完全全全全停停停停止止止止转转转转动动动动时时时时打打打打开开开开机机机机盖盖盖盖，取取取取出出出出离离离离心心心心样样样样品品品品，用用用用柔柔柔柔软软软软干干干干净净净净的的的的布布布布擦擦擦擦净净净净转转转转头头头头和和和和机机机机腔腔腔腔内内内内壁壁壁壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。待离心机腔内温度与室
24、温平衡后方可盖上机盖。待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。2021/9/2124注意事项注意事项机机机机体体体体应应应应始始始始终终终终处处处处于于于于水水水水平平平平位位位位置置置置，外外外外接接接接电电电电源源源源系系系系统统统统的的的的电电电电压要匹配，并要求有良好的接地线。压要匹配，并要求有良好的接地线。压要匹配，并要求有良好的接地线。压要匹配，并要求有良好的接地线。开开开开机机机机前前前前应应应应检检检检查查查查转转转转头头头头按按按按装装装装是是是是否否否否牢牢牢牢固固固固，机机机机腔腔腔腔有有有有无无无无异异异异物掉入。物掉入。物掉
25、入。物掉入。样品应预先平衡。样品应预先平衡。样品应预先平衡。样品应预先平衡。离离离离心心心心机机机机运运运运行行行行时时时时，离离离离心心心心机机机机周周周周围围围围30cm30cm30cm30cm范范范范围围围围内内内内不不不不能能能能有有有有人和危险物品。人和危险物品。人和危险物品。人和危险物品。挥挥挥挥发发发发性性性性或或或或腐腐腐腐蚀蚀蚀蚀性性性性液液液液体体体体离离离离心心心心时时时时，应应应应使使使使用用用用带带带带盖盖盖盖的的的的离离离离心心心心管管管管，并并并并确确确确保保保保液液液液体体体体不不不不外外外外漏漏漏漏以以以以免免免免腐腐腐腐蚀蚀蚀蚀机机机机腔腔腔腔或或或或造造造
26、造成成成成事故。事故。事故。事故。2021/9/2125注意事项注意事项易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。易燃易爆以及易与其他物质发生反应的物质不能离心。在在在在没没没没有有有有相相相相应应应应的的的的防防防防护护护护措措措措施施施施时时时时，不不不不能能能能离离离离心心心心有有有有毒毒毒毒的的的的、放放放放射射射射性性性性的物质或病原微生物。的物质或病原微生物。的物质或病原微生物。的物质或病原微生物。离心机运行时不可人为地打开盖子。离心机运行时不可人为地打开盖子。离心机运行时不可人为
27、地打开盖子。离心机运行时不可人为地打开盖子。如如如如果果果果转转转转头头头头和和和和盖盖盖盖子子子子有有有有可可可可见见见见的的的的腐腐腐腐蚀蚀蚀蚀或或或或磨磨磨磨损损损损的的的的痕痕痕痕迹迹迹迹，则则则则应应应应立立立立即停止使用。即停止使用。即停止使用。即停止使用。使使使使用用用用的的的的玻玻玻玻璃璃璃璃或或或或塑塑塑塑料料料料离离离离心心心心管管管管应应应应能能能能承承承承受受受受相相相相应应应应的的的的离离离离心心心心力力力力并并并并大大大大小合适。非金属转头不可用紫外照射。小合适。非金属转头不可用紫外照射。小合适。非金属转头不可用紫外照射。小合适。非金属转头不可用紫外照射。如如如如果
28、果果果被被被被离离离离心心心心的的的的物物物物品品品品密密密密度度度度大大大大于于于于说说说说明明明明书书书书的的的的规规规规定定定定范范范范围围围围，应应应应根根根根据据据据RCFRCFRCFRCF计算公式，减小离心体积。计算公式，减小离心体积。计算公式，减小离心体积。计算公式，减小离心体积。2021/9/2126维护和保养维护和保养转转转转头头头头应应应应定定定定期期期期清清清清洗洗洗洗和和和和消消消消毒毒毒毒。擦擦擦擦拭拭拭拭离离离离心心心心机机机机腔腔腔腔时时时时动动动动作作作作要要要要轻轻轻轻，以免损坏机腔内温度感应器。以免损坏机腔内温度感应器。以免损坏机腔内温度感应器。以免损坏机腔
29、内温度感应器。使使使使用用用用消消消消毒毒毒毒液液液液处处处处理理理理时时时时，温温温温度度度度不不不不可可可可超超超超过过过过25252525，时时时时间间间间不不不不可可可可超超超超过规定时间。过规定时间。过规定时间。过规定时间。可可可可以以以以用用用用高高高高压压压压消消消消毒毒毒毒的的的的转转转转头头头头，应应应应在在在在清清清清洗洗洗洗后后后后，121 121 121 121 消消消消毒毒毒毒20202020分钟，转头务必平放，并不受挤压，以免变形。分钟，转头务必平放，并不受挤压，以免变形。分钟，转头务必平放，并不受挤压，以免变形。分钟，转头务必平放，并不受挤压，以免变形。每每每每次
30、次次次操操操操作作作作完完完完毕毕毕毕；应应应应作作作作好好好好使使使使用用用用情情情情况况况况记记记记录录录录，并并并并定定定定期期期期对对对对机机机机器器器器各项性能进行检修。各项性能进行检修。各项性能进行检修。各项性能进行检修。离离离离心心心心过过过过程程程程中中中中若若若若发发发发现现现现异异异异常常常常现现现现象象象象，应应应应立立立立即即即即关关关关闭闭闭闭电电电电源源源源，报报报报请请请请有关技术人员检修。有关技术人员检修。有关技术人员检修。有关技术人员检修。2021/9/2127洗板机洗板机机理及主要类型机理及主要类型国内常见洗板机简介国内常见洗板机简介选购洗板机的注意事项选购
31、洗板机的注意事项洗板机使用中注意事项洗板机使用中注意事项2021/9/2128机理及主要类型机理及主要类型简易型也可称为手动式洗板器，一般由负压泵与清洗简易型也可称为手动式洗板器，一般由负压泵与清洗简易型也可称为手动式洗板器，一般由负压泵与清洗简易型也可称为手动式洗板器，一般由负压泵与清洗头，可完成最基本的吸液，也有可完成加液动作的装头，可完成最基本的吸液，也有可完成加液动作的装头，可完成最基本的吸液，也有可完成加液动作的装头，可完成最基本的吸液，也有可完成加液动作的装置。这类装置，由于成本极低，使用方便，工作量不置。这类装置，由于成本极低，使用方便，工作量不置。这类装置，由于成本极低，使用方
32、便，工作量不置。这类装置，由于成本极低，使用方便，工作量不大时可以使用。大时可以使用。大时可以使用。大时可以使用。自动式洗板机：可根据用户的设置完成规定次数与条自动式洗板机：可根据用户的设置完成规定次数与条自动式洗板机：可根据用户的设置完成规定次数与条自动式洗板机：可根据用户的设置完成规定次数与条数的洗板工作，有的具有简单的存贮功能。主要目的数的洗板工作，有的具有简单的存贮功能。主要目的数的洗板工作，有的具有简单的存贮功能。主要目的数的洗板工作，有的具有简单的存贮功能。主要目的是利用自动化技术，替代手工劳动。其中有条式与板是利用自动化技术，替代手工劳动。其中有条式与板是利用自动化技术，替代手工
33、劳动。其中有条式与板是利用自动化技术，替代手工劳动。其中有条式与板式之分。如式之分。如式之分。如式之分。如LABSYSTEMLABSYSTEM的的的的W4W4、BIO-RADBIO-RAD早期的早期的早期的早期的12501250、拓普公司的、拓普公司的、拓普公司的、拓普公司的DEM-2DEM-2等。等。等。等。集成环境式洗板机特点在于提供良好的洗板环境，强集成环境式洗板机特点在于提供良好的洗板环境，强集成环境式洗板机特点在于提供良好的洗板环境，强集成环境式洗板机特点在于提供良好的洗板环境，强调洗涤效果而非自动化，具有一定的智能特性，如调洗涤效果而非自动化，具有一定的智能特性，如调洗涤效果而非自
34、动化，具有一定的智能特性，如调洗涤效果而非自动化，具有一定的智能特性，如LABSYSTEMLABSYSTEM的的的的ACSENT WASHACSENT WASH，拓普的，拓普的，拓普的，拓普的DEM-3DEM-3等。等。等。等。2021/9/2129国内常见洗板机简介适用微孔板适用微孔板清洗头清洗头 加液量加液量(uL)残留量残留量(uL)浸泡时间浸泡时间震动震动两点吸液两点吸液底部冲洗底部冲洗洗液种类洗液种类2021/9/2130选购洗板机的注意事项选购洗板机的注意事项关键指标：残留量关键指标：残留量 3uL。能否提供可选择的洗板环境。能否提供可选择的洗板环境。是否对国产试剂盒具有兼容性与扩
35、展性。是否对国产试剂盒具有兼容性与扩展性。考察仪器的可靠性与洗涤效果的可靠性。考察仪器的可靠性与洗涤效果的可靠性。售后服务是否及时、价格是否合理。售后服务是否及时、价格是否合理。2021/9/2131洗板机使用中注意事项洗板机使用中注意事项有一定的洗涤次数：多次洗涤有利于取得好的效果，有一定的洗涤次数：多次洗涤有利于取得好的效果，有一定的洗涤次数：多次洗涤有利于取得好的效果，有一定的洗涤次数：多次洗涤有利于取得好的效果，一般不超过一般不超过一般不超过一般不超过6 6次。次。次。次。注意每孔的加液量；以加满为宜，一般为每孔注意每孔的加液量；以加满为宜，一般为每孔注意每孔的加液量；以加满为宜，一般
36、为每孔注意每孔的加液量；以加满为宜，一般为每孔350350微升微升微升微升建议在洗涤前进行位置调节，吸针要到微孔底部，以建议在洗涤前进行位置调节，吸针要到微孔底部，以建议在洗涤前进行位置调节，吸针要到微孔底部，以建议在洗涤前进行位置调节，吸针要到微孔底部，以降低残留量。降低残留量。降低残留量。降低残留量。建议用户采用两点吸液与底部冲洗方式，以得到好的建议用户采用两点吸液与底部冲洗方式，以得到好的建议用户采用两点吸液与底部冲洗方式，以得到好的建议用户采用两点吸液与底部冲洗方式，以得到好的洗涤效果。洗涤效果。洗涤效果。洗涤效果。洗涤结束后，不能像常规洗涤结束后，不能像常规洗涤结束后，不能像常规洗涤
37、结束后，不能像常规ELISAELISA扣板；扣板；扣板；扣板；每天使用完毕后应冲洗管路及清洗头。每天使用完毕后应冲洗管路及清洗头。每天使用完毕后应冲洗管路及清洗头。每天使用完毕后应冲洗管路及清洗头。定期维护、检修仪器及配件。定期维护、检修仪器及配件。定期维护、检修仪器及配件。定期维护、检修仪器及配件。2021/9/2132加样器加样器基因扩增实验室应备有4套连续可调加样器，分别用于试剂准备、样本处理、扩增和产物检测四个试验区。2021/9/2133加样器加样器加样器的类型加样器的类型P型移液器的型号和取液范围型移液器的型号和取液范围加样器的使用加样器的使用P型移液器的应用范围型移液器的应用范围
38、P型移液器技术指标型移液器技术指标加样器的校准加样器的校准2021/9/2134加样器的类型加样器的类型单道连续可调式移液器单道连续可调式移液器多通道连续可调式移液器多通道连续可调式移液器单道连续移液器单道连续移液器单道移液管配合使用的移液器单道移液管配合使用的移液器2021/9/2135P型移液器的型号和取液范围型移液器的型号和取液范围型号型号型号型号 所用量程范围（所用量程范围（所用量程范围（所用量程范围（L L） GILSON eppendorf GILSON eppendorfP2 0.1 P2 0.1 2 2P10 0.5 P10 0.5 10 0.5 10 0.5 10 10 P2
39、0 2 P20 2 20 2 20 2 2020P100 20 P100 20 100 10 100 10 100100P200 30 P200 30 200 20 200 20 200200P1000 200 P1000 200 1000 100 1000 100 100010002021/9/2136加样器的使用加样器的使用2021/9/2137吸液的位置吸液的位置把按钮压至第一停点垂直握持移液器，使吸嘴浸入液样中，浸入液体深度视型号而定：P2和P10 1mmP20和P100 2-3mmP200和P1000 2-4mmP5000 3-6mmP10ML 5-7mm2021/9/2138设定容
40、量值设定容量值2021/9/2139P型移液器的应用范围型移液器的应用范围P2，P10: 超微量计量及移液，超微量计量及移液，应用于应用于DNA定序及酶分析等。定序及酶分析等。P20，P100，P200和和P1000应用于一般应用于一般水溶液、酸、硷的计量和移液。水溶液、酸、硷的计量和移液。P5000和和P10ML大体积移液和计量。大体积移液和计量。2021/9/2140P型移液器技术指标型移液器技术指标(1)(GILSON)型号型号 容量容量 准确度（标准误差）准确度（标准误差） 精度（重复性）精度（重复性）2 (L) 绝对误差绝对误差(L) 相对误差相对误差(%) 标准误差标准误差(L)
41、相对离差相对离差(%)P2 最小最小 0.2 0.024 12 0.012 6 0.5 0.025 5 0.012 2.50 最大最大 2 0.030 1.5 0.014 0.70P10最小最小 1 0.025 2.5 0.012 1.25 5 0.075 1.5 0.030 0.60 最大最大 10 0.10 1 0.040 0.40P20 最小最小 2 0.1 5.0 0.03 1.50 5 0.1 2.0 0.04 0.80 10 0.1 1.0 0.05 0.50 最大最大 20 0.2 1.0 0.06 0.30 2021/9/2141P型移液器技术指标型移液器技术指标(2) (GI
42、LSON)型号型号 容量容量 准确度（标准误差）准确度（标准误差） 精度（重复性）精度（重复性）2 (L) 绝对误差绝对误差(L) 相对误差相对误差(%) 标准误差标准误差(L) 相对离差相对离差(%)P100 最小最小 20 0.35 1.8 0.10 0.5 50 0.4 0.8 0.12 0.24 最大最大 100 0.8 0.8 0.15 0.15P200最小最小 50 0.5 1 0.2 0.40 100 0.8 0.8 0.25 0.25 最大最大 200 1.6 0.8 0.30 0.15P1000 最小最小 200 3.0 1.5 0.6 0.3 500 4.0 0.8 1.0
43、 0.2 最大最大 1000 8.0 0.8 1.5 0.15 2021/9/2142P型移液器技术指标型移液器技术指标(3) (eppendorf)型号型号 容量容量 (L) 不准确度不准确度(%) 不精密度不精密度(%)P10 最小最小 0.5 5.0 2.8 1 2.5 1.8 最大最大 10 1.0 0.4P20最小最小 2 5.0 1.5 最大最大 20 1.0 0.3P100 最小最小 10 3.0 1.0 最大最大 100 0.8 0.2 P200 最小最小 20 2.5 0.7 最大最大 200 0.6 0.2P1000 最小最小 100 3.0 0.6 最大最大 1000 0
44、.6 0.2 2021/9/2143加样器的校准加样器的校准校准环境和用具要求校准环境和用具要求：室室 温：温：2025，测定中波动范围不大于，测定中波动范围不大于0.50.5。电电子子天天平平：放放置置于于无无尘尘和和震震动动影影响响的的台台面面上上，房房间间尽尽可可能能有有空空调调。称称量量时时，为为保保证证天天平平内内的的湿湿度度（相相对对湿湿度度60-90%60-90%），天平内应放置一装有天平内应放置一装有10 ml10 ml蒸馏水的小烧杯。蒸馏水的小烧杯。小烧杯：小烧杯： 5 510 ml10 ml体积。体积。测定液体：温度为测定液体：温度为2025的去气双蒸水。的去气双蒸水。选定
45、校准体积：选定校准体积：（拟校准体积；拟校准体积；（加样器标定体积的中间体积；加样器标定体积的中间体积；（最小可调体积（不小于拟校准体积的最小可调体积（不小于拟校准体积的10%）。）。 如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。如为固定体积加样器，则只有一种校准体积。2021/9/2144 校准步骤校准步骤：将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；调节好天平；调节好天平；来回吸吹蒸馏水来回吸吹蒸馏水3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头垂直握住加样器，将吸头浸入液面垂直握住加样器，将吸头浸入液面23 mm处，缓慢（处，缓慢（13
46、秒）秒）一致地吸取蒸馏水；一致地吸取蒸馏水；将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；将加样器将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；将加样器以以30角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一角放入称量烧杯中，缓慢一致地将加样器压至第一 档，等待档，等待13秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；记录称量值；记录称量值；擦干吸头外面；擦干吸头外面；按上述步骤称量按上述步骤称量10次；次；取取10次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附次测定值的均值作为最后加样器吸取的蒸馏水重量，按附表所列蒸馏水表所列蒸馏水Z因子计算体积。按校准
47、结果调节加样器。因子计算体积。按校准结果调节加样器。2021/9/2145注意事项注意事项 根据所需取液量选择相应的移液器及吸头，基根据所需取液量选择相应的移液器及吸头，基因扩增实验要求使用带滤芯的吸头，防止交叉污因扩增实验要求使用带滤芯的吸头，防止交叉污染。染。吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液吸取液体时应缓慢匀速吸取，避免液体溅到移液器头上；打出液体后拇指不应松开按钮，将吸液器头上；打出液体后拇指不应松开按钮，将吸液嘴压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。嘴压掉后再将拇指松开，避免液体回吸。在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注在调整取液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意计数器显示
48、的数值不要超过其可调范围。意计数器显示的数值不要超过其可调范围。连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有连续可调式移液器不可在无吸头时使用，吸头有液体时不可平放或倒置。液体时不可平放或倒置。2021/9/2146注意事项注意事项操操作作时时要要慢慢和和稳稳，吸吸嘴嘴浸浸入入液液体体深深度度要要合合适适，吸吸液液过过程程尽尽量量保保持持不不变变；改改吸吸不不同同液液体体、样样品品或或试试剂剂前前要要换换新新吸吸嘴嘴；发发现现吸吸嘴嘴内内有有残残液液时时必必须须更更换换；新吸嘴使用前应先预测。新吸嘴使用前应先预测。为为防防止止液液体体进进入入移移液液器器套套筒筒内内，注注意意以以下下几几点点：压
49、压放放按按钮钮时时保保持持平平稳稳；移移液液器器不不得得倒倒转转；吸吸嘴嘴中中有有液液体体时时不不可可将将移移液液器器平平放放；P5000及及P10ML移移液器一定要加过滤芯。液器一定要加过滤芯。切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。切勿用油脂等润滑活塞或密封圈。使使用用了了酸酸或或有有腐腐蚀蚀蒸蒸气气的的溶溶液液后后，最最好好拆拆下下套套筒筒，用蒸馏水清洗活塞及密封圈。用蒸馏水清洗活塞及密封圈。2021/9/2147注意事项注意事项连连续续可可调调式式移移液液器器在在取取样样加加样样过过程程中中应应注注意意移移液液嘴嘴不不能能触触及及其其他他物物品品，以以免免被被污污染染；移移液液嘴嘴盒盒（架架子子
50、）、废废液液瓶瓶、所所取取试试剂剂及及加加样样的的样样品品管管应应摆摆放放合合理理，以以方方便便操操作作过过程程、避避免免污污染染为为原则。原则。连连续续可可调调式式移移液液器器在在使使用用完完毕毕后后应应置置于于以以液液器器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。架上，远离潮湿及腐蚀性物质。在在取取液液之之前前，所所取取液液体体应应在在室室温温（15-25 C）平平衡衡；液液体体温温度度与与室室温温有有异异时时，将将吸吸嘴嘴预预洗洗多多次再用；移液温度不得超过次再用；移液温度不得超过70。不可把容量计数调超其适用范围。不可把容量计数调超其适用范围。2021/9/2148维护维护 加加样样器器应应根根据据
51、使使用用频频率率进进行行维维护护，但但至至少少应应每每3个个月月进行一次，具体方法如下：进行一次，具体方法如下：1一一般般维维护护可可用用中中性性洗洗涤涤剂剂（如如洗洗餐餐具具用用的的洗洗涤涤灵灵）清清洁洁，或或者者用用60%的的异异丙丙醇醇，然然后后用用蒸蒸馏馏水水反反复复洗洗涤涤，去去除除洗洗涤涤剂剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的润滑剂。2如如果果有有液液体体进进入入加加样样器器内内的的严严重重污污染染，可可以以将将加加样样器器拆拆开开后后进进行行清清洁洁，具具体体拆拆开开步步骤骤参参照照加加样样器器说说明明书书（不不同同的的加加样样器的拆开方式有所不同）。器的拆开方式有所不同）。3高高压压消消毒毒，有有的的加加样样器器的的吸吸管管部部分分可可高高压压消消毒毒（121及及1巴巴压压力力下下消消毒毒20分分钟钟），如如Eppendor的的Research单单道道可可调调加加样样器器。但但消消毒毒时时不不可可超超温温超超时时，也也不不能能挤挤压压放放置置，以以免免造造成变型。成变型。4各各区区（试试剂剂准准备备、样样本本提提取取、扩扩增增和和产产物物检检测测）的的加加样样器器应有各自的标识，清洁和消毒应有各自的标识，清洁和消毒 时，应分别处理。时，应分别处理。2021/9/21492021/9/2150
