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1、实验1显微镜的使用保养与中药临时制片技术一、一、显微微镜的使用和保养的使用和保养p显微微镜的的结构构镜座座镜臂臂镜筒筒载物台物台光路系光路系统：目：目镜、物、物镜、集光器、光源、集光器、光源p物物镜低倍低倍镜：4、10 用于用于观察整体察整体结构、构、寻找特定特征。找特定特征。高倍高倍镜：40 、100 （油（油镜）用于用于观察特定察特定细微微结构与构与组织特征，特征，油油镜较为少用。少用。p使用注意与技巧使用注意与技巧先低倍后高倍，即先整体后局部先低倍后高倍，即先整体后局部之字形之字形扫描式描式寻找需要找需要观察的特征察的特征由低倍由低倍镜转成高倍成高倍镜后，只能使用微后，只能使用微调高倍高
2、倍镜观察察时，应通通过控制光源控制光源强度、度、 集光器高低、虹彩光集光器高低、虹彩光阑的的张合，并合，并结合合 微微调，使被，使被观察物清晰。察物清晰。p使用使用过程及使用后的保养程及使用后的保养显微制片必微制片必须将多余的装置液清理干将多余的装置液清理干净， 以免沾染以免沾染镜头。如目如目镜与物与物镜被沾染，被沾染，则以以镜头纸从中从中 央向四周以划央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要圈的方式擦拭。必要时 还要使用去要使用去污剂擦拭。擦拭。使用完使用完毕后，移去玻片，按上述方法擦后，移去玻片，按上述方法擦 拭，将最低倍物拭，将最低倍物镜转入光路，入光路，载物台复位。物台复位。关关闭电源，拔下插
3、座，盖上防源，拔下插座，盖上防尘罩。罩。在相在相应使用登使用登记本上本上签名。名。二、粉末二、粉末临时制片制片p粉末粉末临时制片操作要制片操作要领粉末用量：米粒大小。粉末用量：米粒大小。每次滴加装置液每次滴加装置液23滴。滴。每次滴加装置液后需要每次滴加装置液后需要搅拌均匀。拌均匀。控制控制搅拌范拌范围约为盖玻片大小。盖玻片大小。如加如加热透化，透化，则重复重复进行行34次，次， 沸即离火，勿沸即离火，勿烧干、焦。干、焦。加盖玻片加盖玻片时应先一先一侧接触装置液，接触装置液，缓缓 放下，最后抽出放下，最后抽出镊子，以排除气泡。子，以排除气泡。以吸水以吸水纸吸去溢出的装置液。吸去溢出的装置液。稍
4、放置待凉后，稍放置待凉后，镜检。p水装片或斯氏液装片水装片或斯氏液装片适用于适用于观察淀粉粒。察淀粉粒。装置液：蒸装置液：蒸馏水或斯氏液（甘油醋酸）。水或斯氏液（甘油醋酸）。不可加不可加热，否，否则淀粉粒糊化。淀粉粒糊化。天花粉粉末天花粉粉末淀粉粒淀粉粒p水合水合氯醛加加热透化装片透化装片适用于除淀粉粒、菊糖以外的大多数适用于除淀粉粒、菊糖以外的大多数组织、细胞、胞、细胞后含物的胞后含物的观察。察。装置液：水合装置液：水合氯醛（水合三（水合三氯乙乙醛）、）、 稀甘油。稀甘油。需要加需要加热。天花粉粉末天花粉粉末石石细胞胞天花粉粉末天花粉粉末石石细胞胞天花粉粉末天花粉粉末具具缘纹孔孔导管管p水合
5、水合氯醛或乙醇装片或乙醇装片适用于适用于观察菊糖。察菊糖。装置液：水合装置液：水合氯醛或乙醇。或乙醇。不可加不可加热，否，否则菊糖溶解。菊糖溶解。党参菊糖（水合党参菊糖（水合氯醛装置）装置）p水合水合氯醛装置液的作用装置液的作用使使细胞膨胞膨胀, ,便于便于观组织、细胞及其胞及其 内含物特征。内含物特征。去除去除细胞表面或内部胞表面或内部杂质。增增强透明度。透明度。p稀甘油装置液的作用稀甘油装置液的作用增加透明度。增加透明度。防止气泡生成。防止气泡生成。防止水合防止水合氯醛结晶析出。晶析出。三、整体透化装片三、整体透化装片p整体透化装片的目的与操作整体透化装片的目的与操作目的：避免出目的：避免
6、出现有些有些组织在粉末中破碎在粉末中破碎 或不完整而影响或不完整而影响观察。察。材料：多材料：多为叶或花。叶或花。操作：切或剪取叶或花操作：切或剪取叶或花约4mm2 ，外表朝，外表朝 上，透化后上，透化后观察。察。装置液：水合装置液：水合氯醛、稀甘油。、稀甘油。需要加需要加热。金金银花两种非腺毛花两种非腺毛金金银花花花花粉粉粒粒四、叶表皮撕片四、叶表皮撕片p叶表皮撕片适用叶表皮撕片适用对象及操作象及操作适用适用对象：象：观察表皮察表皮细胞、气孔、毛茸。胞、气孔、毛茸。材料：通常材料：通常为叶下表皮。叶下表皮。操作：以操作：以镊子自下表面子自下表面夹住少住少许叶片，往叶片，往 一一侧撕取表皮。将
7、撕下的表皮外表面朝上撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有置于滴有12滴水的滴水的载玻片上，使其自然展玻片上，使其自然展 开，盖片开，盖片观察。察。何首何首乌叶下表皮叶下表皮组织五、徒手制片五、徒手制片p徒手制片的目的及材料徒手制片的目的及材料目的：目的：观察察组织构造、构造、细胞特征；胞特征；材料：新材料：新鲜、干燥或、干燥或经固定的材料固定的材料常用固定液常用固定液FAA固定液：固定液：70乙醇乙醇 90ml福福尔马林（林（3740甲甲醛） 5ml冰醋酸冰醋酸 5ml取材取材 材料分割成适当大小，直径必材料分割成适当大小，直径必须小于小于 盖玻片。盖玻片。材料材料软化或冲洗化或冲洗 坚
8、硬的干燥材料于稀甘油硬的干燥材料于稀甘油10醋酸液中醋酸液中煮至表面无气泡。煮至表面无气泡。 固定材料需在流水中冲洗固定材料需在流水中冲洗12小小时以上。以上。操作：取新操作：取新鲜或已或已软化的中化的中药材，用拇指及材，用拇指及食指和中指食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另住材料，下端用无名指托住，另外一只手持刀片，自左向右移外一只手持刀片，自左向右移动手腕，手腕，牵曳切曳切片。片。操作操作时材料的断面与刀口材料的断面与刀口须经常用水湿常用水湿润。以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿以毛笔将切好的薄片移入在盛水培养皿 中浸泡。中浸泡。装片装片 将切片以将切片以镊子子夹出，置于滴加了甘油的出，置于滴加了甘油的载玻片上，加上盖玻片；或滴加水合玻片上，加上盖玻片；或滴加水合氯醛加加热透透化，滴加稀甘油后加上盖玻片。化，滴加稀甘油后加上盖玻片。p作作业与思考与思考1 1、实验完成后完成后应做哪些善后工作？做哪些善后工作？2 2、由低倍、由低倍镜转换成高倍成高倍镜后，后，调焦焦时应注意注意什么？什么？3.3.寻找被找被观察物察物时应如何操作？如何操作？4 4、进行粉末水合行粉末水合氯醛加加热透化透化过程中，程中，应注注意哪些关意哪些关键问题？5 5、制片中水合、制片中水合氯醛及稀甘油作用是什么？及稀甘油作用是什么？
