骨骼肌单收缩和复合收缩--生理学实验

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1、骨骼肌单收缩和复合收缩骨骼肌纤维受运动神经纤维的控制, 神经纤维受到刺激后, 其兴奋延神经纤维以动作电位的形式传导到相应的肌纤维, 触发肌纤维收缩。若通过神经给予肌肉一次刺激, 使肌肉产生一次收缩,称为单收缩。如果肌肉受到连续的刺激,则其收缩可出现复合现象。本实验用蟾蜍的坐骨神经-腓肠肌标本,使用机-电换能器,通过 powerLab 系统来获得肌肉的收缩曲线,分析单收缩和复合收缩产生的机制与特点。实验动物:蟾蜍实验器材和药品:PowerLab 8S主机,生物电放大器,铁架台,标本盒,任氏液。蛙手术器械,实验步骤:1标本制备:蟾蜍坐骨神经标本制备方法参见P18蟾蜍基本技术操作。将标本浸在任氏液中

2、约 5 分钟,待其兴奋性稳定后实验。2仪器装置及程序设置:. 连接仪器(图 3-4)。图 3-4.骨骼肌单收缩和复合收缩的实验框图其中,S1 和 S2 为刺激电极,与 PowerLab 的 output I 相连。 参数设置:启动计算机,打开PowerLab 主机电源,在桌面上单击Chart4 for windows图标,进入 Chart 应用程序窗口。* 选择采样速度为 40K/s,显示比例为 500:1。* 在 Channel 1显示骨骼肌收缩曲线。 放大器参数设置参见P38放大器参数设置。 Range 为200mV, Low Pass 为 100Hz。如果在 Bridge Amplifi

3、er 设置对话框左侧的信号显示窗口中看不到输入信号,可用鼠标左键单击右侧的zero 按钮,系统自动调整输入信号的零位。单击 Bridge Amplifier设置对话框下方的 units 按钮, 进入 Units Conversion(单位转换)对话框。单位转换的方法参见P39信号幅度范围的设置和单位的转换。* 在 Channel 2 显示刺激方波。在刺激参数设置对话框下方的Stimulator Marker 框中选取Channel 2。刺激设置方法参见P42刺激输出的设置。设置完毕后,单击菜单栏的setup,选取 Stimulator Panel(刺激面板),弹出Stimulator Pane

4、l,在实验中可以方便地由刺激面板来设置刺激频率、幅度和波宽等参数。单次刺激: 设置 Mode 为 Pulse, 单击 Hz 选项, Frequency 取 1Hz, Pulse Duration选 0.1ms。选中 Set number of pulse 选项,在 Number 中键入 1,表示一次刺激输出 1 个刺激方波。Output Range 为 10V ,Amplitude 为 0,然后可在实验中逐渐增大刺激幅度。双次刺激: 设置 Mode 为 Pulse, 单击 Hz 选项, Frequency 取 1Hz, Pulse Duration选 0.1ms。选中 Set number o

5、f pulse 选项,在 Number 中键入 2(双刺激)。Output Range 为 10V,Amplitude 选择最大刺激强度。在实验中通过Stimulator Panel(刺激面板)逐渐增大Frequency(刺激频率)。连续刺激: Frequency 取 1Hz,Pulse Duration 选 0.1ms。为避免连续刺激使标本受损,故选中 Set number of pulse选项, 在 Number 中键入 5, 其余参数同上。 实验中通过 StimulatorPanel(刺激面板)逐渐增大 Frequency(刺激频率),使骨骼肌收缩表现为单收缩、不完全强直收缩和完全强直收

6、缩。实验中如要对标本进行刺激, 应先用鼠标左键单击开始/停止切换按钮, 程序开始采样记录,然后单击刺激面板的 On 按钮,即可产生刺激输出,同时Channel 2(2 通道)显示刺激方波。把坐骨神经-腓肠肌标本固定在肌槽上,用棉线把腓肠肌与换能器相连。观察项目:1单次刺激:观察腓肠肌收缩的情况。逐渐增大刺激强度,使肌肉的收缩幅度增大,直至收缩幅度不再随刺激强度增大而增大。 刚使收缩幅度达到最大的最小刺激强度为最大刺激强度。2测量最大刺激强度时骨骼肌收缩的潜伏期、收缩期、舒张期时程和收缩幅度。测量方法参见P46实验数据的计算、分析和统计。3双次刺激:逐渐增大Stimulator Panel 中的

7、刺激频率,使第二个收缩波向第一个收缩波靠拢的过程中, 逐渐叠加在第一个波的舒张期或收缩期, 产生收缩的舒张期复合和收缩期复合。4连续刺激:逐渐增大Stimulator Panel 面板中的刺激频率,使骨骼肌收缩表现为不完全强直收缩和完全强直收缩。5打印上述实验结果,打印方法参见P49实验数据的打印。注意事项:1分离坐骨神经时,避免过度牵拉神经,绝对不允许用手或镊子夹神经。2股骨要牢固地固定在肌槽的小孔中。3坐骨神经要与刺激电极和记录电极紧密接触,但不要损伤神经。4防止神经、肌肉标本干燥,需经常在神经和肌肉上以任氏液湿润。5长时间刺激标本可能使骨骼肌的收缩能力下降,因此每个步骤后应让肌肉休息片刻。6把腓肠肌悬挂在换能器上的棉线应松紧适中,也不要过长并和换能器平面保持垂直。7实验的采样速度较快,为避免过度消耗硬盘和内存,不要长时间记录。思考题:为什么骨骼肌的收缩可以发生收缩波的复合,而引起神经干动作电位却没有复合现象?

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