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实验一实验一a a酵母菌的形态观察酵母菌的形态观察 美蓝是一种无毒的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色,借此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。Sexual sporeslAscosporeFormed in a sac (ascus)三 材料与器材l菌种:同前.l试剂:5孔雀绿水溶液,0.5番红水溶液,95乙醇.l显微镜,玻片等.四四 操作步骤操作步骤1、菌种活化将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上,2528培养24h左右,然后再转种23次。 2、产孢培养将经活化的菌种转接到麦氏琼脂斜面上,2528培养约1周。 3、制片取经产孢培养的酵母斜面培养物,在净洁载玻片上按常规涂片、干燥、固定。 4、染色滴加5%孔雀绿染色1min。5、脱色用95%乙醇脱色30s,水洗。6、复染用0.5%番红复染30s,水洗,用吸水纸吸干。7、镜检干后用油镜观察(子囊孢子呈绿色,菌体和子囊呈粉红 色)。五 注意事项 菌种活化时,要采用新配制、表面湿润的斜面培养基。六 思考题 如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊外的子囊孢子?