动物实验设计和实施

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1、动物实验设计及实施动物实验设计及实施 n动物实验的定义动物实验的定义 是指以是指以实验动物实验动物为材料,采用各种方法在实为材料,采用各种方法在实验动物身上做试验,研究动物在实验过程中的反验动物身上做试验,研究动物在实验过程中的反应、表现及发生、发展规律和有关技术问题。应、表现及发生、发展规律和有关技术问题。21.1.弄清动物实验的目的及必要性弄清动物实验的目的及必要性2.2.做好动物实验的设计做好动物实验的设计3.3.选择适宜的实验动物选择适宜的实验动物4.4.做好实验操作和实验条件保障工作做好实验操作和实验条件保障工作5.5.搞好动物实验结果的统计、分析和资料的整理、搞好动物实验结果的统计

2、、分析和资料的整理、归档工作归档工作 3如何做好动物实验?如何做好动物实验?一、动物实验前的准备一、动物实验前的准备(一)理论准备(一)理论准备(二)条件准备(二)条件准备(三)预备实验(三)预备实验1. 了解实验动物方面的基础知识了解实验动物方面的基础知识动物物实验人人员应掌掌握握实验动物物科科学学基基本本知知识和和基基本本技能。技能。必必须了了解解国国家家、省省、市市及及所所在在单位位实验动物物机机构构有有关关实验动物物和和动物物实验的的管管理理法法规和和制制度度,并并能能够切切实遵照遵照执行。行。参参与与动物物实验的的人人员都都必必须参参加加实验动物物从从业人人员上上岗培培训,并取得上,

3、并取得上岗资格格证书。5(一)动物实验前的理论准备(一)动物实验前的理论准备2. 正确选题立项和设定假设正确选题立项和设定假设选题的一般原则:选题的一般原则: 科科学学性性。即即选题应具具有有明明确确的的理理论意意义和和实践践意意义,符符合合科科学学性性的的原原则。应当当在在理理论学学习、技技能能掌掌握握、文文献献检索索、研研究究积累累的的基基础上提出假上提出假说,设计新的新的实验。 创新新性性。创新新性性是是科科学学的的灵灵魂魂,选题能能够探探索索生生命命科科学学中中的的未未知知事事物物或或未未知知过程程,或或能能揭揭示示已已知知事事物物中中的的未未知知规律律,或或提提出出新新见解、新技解、

4、新技术、新方法。、新方法。 可可行行性性。选题应切切合合研研究究者者的的学学术水水平平、技技术水水平平,具具备开开展展实验的条件,能的条件,能够顺利得以利得以实施。施。6(一)动物实验前的理论准备(一)动物实验前的理论准备2. 正确选题立项和设定假设正确选题立项和设定假设选题的一般原则:选题的一般原则: 伦理原理原则 实验动物物同同样是是生生命命体体,同同样需需要要考考虑伦理理问题。动物物实验设计应按按照照“R R”原原则进行行评估估和和设计。在在满足足研研究究需需要要的的前前提提下下,尽尽可可能能少少用用实验动物物,或或寻找找替替代代方方法法;实验应当当在在动物物没没有有痛痛苦苦的的条条件件

5、下下进行行,需需要要手手术或或其其他他损伤性性实验时,应当当给动物麻醉或物麻醉或镇静。静。实验后的后的动物物应给予很好的予很好的护理。理。 7(一)动物实验前的理论准备(一)动物实验前的理论准备2. 正确选题立项和设定假设正确选题立项和设定假设设定假说:设定假说: 假假说是是预先先假假定定的的答答案案或或解解释,即即实验的的预期期结果果。假假说是是实验研研究究设计的的前前提提。如如果果没没有有假假说,实验和和观察察就就会会失失去去目目标。假假说关关系系着着实验研研究究的的目目的的性性、计划划性性和和预见性性。假假说必必须根根据据实验情情况况及及时加以修正。加以修正。8(一)动物实验前的理论准备

6、(一)动物实验前的理论准备3. 实验研究计划和方案的制订实验研究计划和方案的制订 是指对动物实验研究中涉及的各项基本问题的是指对动物实验研究中涉及的各项基本问题的合理安排。尽可能做到周密合理、切实可行。合理安排。尽可能做到周密合理、切实可行。9(一)动物实验前的理论准备(一)动物实验前的理论准备4. 实验方法的选定实验方法的选定 要求:可靠性、优越性、创造性要求:可靠性、优越性、创造性10(一)动物实验前的理论准备(一)动物实验前的理论准备n内容:实验仪器、药品、试剂、实验动物等。内容:实验仪器、药品、试剂、实验动物等。n要求:实验手段和实验方法标准化。要求:实验手段和实验方法标准化。11(二

7、)动物实验前的条件准备(二)动物实验前的条件准备1. 实验场所实验场所必须持有实验动物使用许可证;必须持有实验动物使用许可证;必须是标准化的条件,规范化的管理。必须是标准化的条件,规范化的管理。2. 仪器、药品、试剂仪器、药品、试剂仪器要校准,好用、会用;仪器要校准,好用、会用;药品、试剂要提前预定,按照说明书进行配制,特别注意的是,生药品、试剂要提前预定,按照说明书进行配制,特别注意的是,生物试剂要在确认有合格的实验动物和其它条件都具备的情况下才可物试剂要在确认有合格的实验动物和其它条件都具备的情况下才可配制;配制;各种实验器械要消毒、配套。各种实验器械要消毒、配套。12(二)动物实验前的条

8、件准备(二)动物实验前的条件准备3. 实验动物实验动物实验动物是特殊的材料,是有生命的物质。实验前应了实验动物是特殊的材料,是有生命的物质。实验前应了解实验动物品种、品系、等级、许可证、动物质量合格解实验动物品种、品系、等级、许可证、动物质量合格证情况,进一步提交详细的使用计划。证情况,进一步提交详细的使用计划。对本单位不能提供的实验动物,则必须联系购买,购买对本单位不能提供的实验动物,则必须联系购买,购买的程序、要求、运输等都要认真考虑。的程序、要求、运输等都要认真考虑。13(二)动物实验前的条件准备(二)动物实验前的条件准备n检查各项准备工作是否完善检查各项准备工作是否完善n实验方法和步骤

9、是否切实可行实验方法和步骤是否切实可行n测试指标是否稳定可靠测试指标是否稳定可靠n可初步了解实验结果与预期结果的距离,从而为正可初步了解实验结果与预期结果的距离,从而为正式实验提供补充、修正、完善的意见和经验。式实验提供补充、修正、完善的意见和经验。14(三)预实验(三)预实验二、动物实验的设计二、动物实验的设计(1 1)处理因素)处理因素 人为施加不同试验条件(给受试对象以各人为施加不同试验条件(给受试对象以各种物理、化学或生物学刺激),以揭示生物体的内在规律。种物理、化学或生物学刺激),以揭示生物体的内在规律。控制处理水平(如剂量、时间、强度、频率等)在合理的范控制处理水平(如剂量、时间、

10、强度、频率等)在合理的范围。围。(2 2)试验对象)试验对象 选择合适的实验动物或动物组织和细胞等。选择合适的实验动物或动物组织和细胞等。必须保证试验对象的一致性,试验对象应当对处理因素敏感,必须保证试验对象的一致性,试验对象应当对处理因素敏感,并且反应稳定。并且反应稳定。 (3 3)试验效应的观察)试验效应的观察 采用适当的观察指标,包括定量指采用适当的观察指标,包括定量指标、定性指标和半定量指标,观察动物对各种试验施加因子标、定性指标和半定量指标,观察动物对各种试验施加因子的反应。选择指标时应当考虑到指标的关联性、客观性、灵的反应。选择指标时应当考虑到指标的关联性、客观性、灵敏度和可用性,

11、以提高效应观察的敏感性和特异性。敏度和可用性,以提高效应观察的敏感性和特异性。16实验设计的几个因素实验设计的几个因素1. 对照性原则对照性原则同体对照同体对照,即同一动物在施加实验因素前后所获得的不同结,即同一动物在施加实验因素前后所获得的不同结果和数据各成一组,作为前后对照,或同一动物在施加实验果和数据各成一组,作为前后对照,或同一动物在施加实验因素的一侧与不施加实验因素的另一侧作左右对照;因素的一侧与不施加实验因素的另一侧作左右对照;异体对照异体对照,即实验动物均分为两组或多组,一组不施加实验,即实验动物均分为两组或多组,一组不施加实验因素,另一组或几组施加实验因素。因素,另一组或几组施

12、加实验因素。没有对照组的实验结果往往是难以令人信服的。对照应在没有对照组的实验结果往往是难以令人信服的。对照应在同同时同地同条件下进行时同地同条件下进行。17(一)动物实验设计的基本原则(一)动物实验设计的基本原则2. 一致性原则一致性原则 是指在实验中,实验组与对照组除了处理因素是指在实验中,实验组与对照组除了处理因素不同外,非处理因素基本保证均衡一致。这是处理不同外,非处理因素基本保证均衡一致。这是处理因素具有可比性的前提。因素具有可比性的前提。18(一)动物实验设计的基本原则(一)动物实验设计的基本原则3. 重复性原则重复性原则 是指同一处理要设置多个样本例数。重复的作用是估计是指同一处

13、理要设置多个样本例数。重复的作用是估计试验误差,降低试验误差,增强代表性,提高精确度。重复试验误差,降低试验误差,增强代表性,提高精确度。重复的目的就是要保证实验结果能在同一个体或不同个体中稳定的目的就是要保证实验结果能在同一个体或不同个体中稳定地再现。为此,必须有足够的样本数。样本数过少,实验处地再现。为此,必须有足够的样本数。样本数过少,实验处理效应将不能充分显示;样本数过多,又会增加工作量,也理效应将不能充分显示;样本数过多,又会增加工作量,也不符减少实验动物用量的原则。不符减少实验动物用量的原则。19(一)动物实验设计的基本原则(一)动物实验设计的基本原则4. 随机性原则随机性原则 按

14、照机遇均等的原按照机遇均等的原则来来进行分行分组。其目。其目的是使一切干的是使一切干扰因素造成的因素造成的实验误差尽量减差尽量减少,防止少,防止实验者的主者的主观因素或其他偏性因素或其他偏性误差差造成的影响。造成的影响。 如抽签、投硬币法等形式,但最好的方如抽签、投硬币法等形式,但最好的方法是使用随机数字表或计算器。法是使用随机数字表或计算器。20(一)动物实验设计的基本原则(一)动物实验设计的基本原则5. 客观性原则客观性原则 是指所选择的观测指标尽可能不带有主观成是指所选择的观测指标尽可能不带有主观成分。所有观测指标尽可能便于定性定量,结果判分。所有观测指标尽可能便于定性定量,结果判断要以

15、客观数据为依据。断要以客观数据为依据。23(一)动物实验设计的基本原则(一)动物实验设计的基本原则 如何选择实验动物如何选择实验动物? ?1. 相似性原则相似性原则u是指利用动物与人类某些机能、代谢、结构及疾病是指利用动物与人类某些机能、代谢、结构及疾病特点的相似性选择实验动物。特点的相似性选择实验动物。u尽量选择研究对象的结构、功能、代谢及疾病性质尽量选择研究对象的结构、功能、代谢及疾病性质与人类相似的动物。与人类相似的动物。25(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则2. 特殊性原则特殊性原则 利用不同种系实验动物机体存在的特殊构造或某些特利用不同种系实验动物机体存在的特殊

16、构造或某些特殊反应选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的动物。殊反应选择解剖、生理特点符合实验目的和要求的动物。u如,犬、猴、猫对呕吐反应敏感,适宜做呕吐实验;家兔对如,犬、猴、猫对呕吐反应敏感,适宜做呕吐实验;家兔对致热物质十分敏感,可用于发热、解热和致热源的研究。致热物质十分敏感,可用于发热、解热和致热源的研究。u同种属不同品系的动物对同一刺激的反应有很大的差异。如,同种属不同品系的动物对同一刺激的反应有很大的差异。如,DBA/2DBA/2小鼠小鼠100%100%可发生听源性癫痫;可发生听源性癫痫;C3H C3H 小鼠乳腺癌发病率小鼠乳腺癌发病率为为97%97%;NODNOD小鼠易发糖尿病

17、。小鼠易发糖尿病。26(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则3. 标准化原则标准化原则 是指动物实验中选择和使用与研究内容相匹配是指动物实验中选择和使用与研究内容相匹配的标准化的实验动物。的标准化的实验动物。u标准化动物:是指遗传背景明确或来源清楚的,对标准化动物:是指遗传背景明确或来源清楚的,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,模型性状显著其携带的微生物和寄生虫实行控制,模型性状显著且稳定的动物。且稳定的动物。27(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则4. 规格化原则规格化原则 是指选择与实验要求一致的动物规格。由于不同动物对是指选择与实验要求一致的动物规格

18、。由于不同动物对外界刺激的反应存在着个体差异,选择时,除了注意动物的外界刺激的反应存在着个体差异,选择时,除了注意动物的种类及品系外,还应考虑到动物的年龄、体重、性别、生理种类及品系外,还应考虑到动物的年龄、体重、性别、生理及健康状况等,符合规格,这也是保证实验结果可靠性和可及健康状况等,符合规格,这也是保证实验结果可靠性和可重复性的一个重要环节。重复性的一个重要环节。28(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则1. 年龄与体重年龄与体重一般动物实验应选用成年动物;慢性实验可选择幼龄一般动物实验应选用成年动物;慢性实验可选择幼龄动物;有些特殊实验如老年病学的研究,则考虑用老动物

19、;有些特殊实验如老年病学的研究,则考虑用老龄动物。龄动物。动物实验时要注意动物实验时要注意“天文学时间天文学时间”和和“生物学时间生物学时间”的区别。的区别。实验动物年龄与体重一般呈正相关性,可按体重推算实验动物年龄与体重一般呈正相关性,可按体重推算年龄。年龄。 一般来说,实验动物年龄、体重应尽可能一致,相差一般来说,实验动物年龄、体重应尽可能一致,相差不得超过不得超过10%10%。29(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则品系品系初生初生1周周2周周3周周4周周5周周6周周7周周8周周 昆明昆明2.015.828.3514.8022.6033.2539.2539.9040.

20、051.955.547.9013.5521.3527.9032.8034.0734.80BALB/c1.463.505.607.4012.4516.1017.4018.6520.251.403.355.507.3211.6014.7515.6016.1018.16C57BL/61.443.505.606.9012.5718.1020.5021.6022.401.403.425.556.4012.2016.9018.4019.0020.256151.584.647.969.8319.0022.5825.9627.9628.831.584.647.969.8315.7520.7521.8823.1

21、224.16C3H1.444.407.709.7013.3017.2020.0021.2022.301.444.407.709.7012.1015.2017.8018.0019.27(1)小鼠日龄与体重的关系)小鼠日龄与体重的关系(2)大鼠日龄与体重的关系)大鼠日龄与体重的关系日日龄/d/d初生初生 10 20 30 40 10 20 30 40 体重体重/g/g6 67 177 1725 3525 3550 5550 5590 10090 100150150日日龄/d/d 50 50 60 60 70 70 80 80体重体重/g/g150150210 210 170170240240 21

22、0210270270 240 24032032032不同种属实验动物的寿命与人类具有很大差异不同种属实验动物的寿命与人类具有很大差异犬与人的年龄对应关系犬与人的年龄对应关系 1岁的犬岁的犬 15岁的人;岁的人; 2岁的犬岁的犬 24岁的人;岁的人; 5岁的犬岁的犬 36岁的人;岁的人; 8岁的犬岁的犬 48岁的人;岁的人; 10岁的犬岁的犬 56岁的人;岁的人; 12岁的犬岁的犬 64岁的人;岁的人; 14岁的犬岁的犬 72岁的人;岁的人;16岁的犬岁的犬 80岁的人岁的人2. 动物性别动物性别不同性别的动物对同一药物的敏感程度是有差不同性别的动物对同一药物的敏感程度是有差异的,如实验无特殊要

23、求应选择异的,如实验无特殊要求应选择雌雄各半雌雄各半做实做实验,以避免因性别差异所造成的结果误差。验,以避免因性别差异所造成的结果误差。33(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则3. 生理及健康状态生理及健康状态特殊的生理状态下,如发情、妊娠及哺乳期,特殊的生理状态下,如发情、妊娠及哺乳期,机体对实验的反应性发生改变。机体对实验的反应性发生改变。应选择健康动物用于实验研究。应选择健康动物用于实验研究。34(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则5. 经济性原则经济性原则 是指尽量选用容易获得、价格便宜和饲养经济是指尽量选用容易获得、价格便宜和饲养经济的动物。在

24、不影响整个实验质量的前提下,尽量做的动物。在不影响整个实验质量的前提下,尽量做到方法简便和降低成本,选用易于获得、最经济和到方法简便和降低成本,选用易于获得、最经济和最易饲养管理的实验动物。最易饲养管理的实验动物。35(二)选择实验动物的基本原则(二)选择实验动物的基本原则1.单组比较设计单组比较设计 是指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指标的变化。此法优点是能是指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指标的变化。此法优点是能消除个体间生物差异,但不适合在同一个体上多次进行实验。消除个体间生物差异,但不适合在同一个体上多次进行实验。2.配对比较设计配对比较设计 是指实验前将动物按性别、体重或

25、其他有关因素加以配对,以基本相同的是指实验前将动物按性别、体重或其他有关因素加以配对,以基本相同的两个动物为一对,配成若干对,然后将一对动物随机分配于两组中。此法优点两个动物为一对,配成若干对,然后将一对动物随机分配于两组中。此法优点可以减少误差及动物间的个体差异。可以减少误差及动物间的个体差异。3.随机区组设计随机区组设计 将全部动物按体重、性别及其他条件等分为若干组,每组中动物数目与拟将全部动物按体重、性别及其他条件等分为若干组,每组中动物数目与拟划分的组数相等,体质条件相似,再将每个区组中的每一只随机分配到各组。划分的组数相等,体质条件相似,再将每个区组中的每一只随机分配到各组。36(三

26、)动物实验设计方法介绍(三)动物实验设计方法介绍4.完全随机设计完全随机设计 是将每个实验对象随机分配在各组,并从各组实验结是将每个实验对象随机分配在各组,并从各组实验结果的比较中得出结论。通常用随机数字表法进行完全随机果的比较中得出结论。通常用随机数字表法进行完全随机化分组。化分组。5.拉丁方设计拉丁方设计 是指由拉丁字母所组成的正方形排列,在同一横行与是指由拉丁字母所组成的正方形排列,在同一横行与同一纵列中都没有重复的字母。同一纵列中都没有重复的字母。n正交设计正交设计 37(三)动物实验设计方法介绍(三)动物实验设计方法介绍三、动物实验数据的收集整理三、动物实验数据的收集整理和分析和分析

27、1.实验数据的来源实验数据的来源 动物实验过程中获取的原始资料或各种数据。动物实验过程中获取的原始资料或各种数据。2.实验数据的记录实验数据的记录 清晰、清晰、 准确、规范。准确、规范。3.实验数据的贮存实验数据的贮存 记录本、硬盘、光盘等,注意保存,做好备份记录本、硬盘、光盘等,注意保存,做好备份实验数据的记录。实验数据的记录。39一、实验数据的记录和贮存一、实验数据的记录和贮存1.计数资料计数资料 指用计数方式而获得的资料。指用计数方式而获得的资料。 如,产仔数、成活数、鸡产蛋数等。如,产仔数、成活数、鸡产蛋数等。1.计量资料计量资料 指通过直接计量而得来的以数量指通过直接计量而得来的以数

28、量为特征的资料。如产奶量、体长、体重等。为特征的资料。如产奶量、体长、体重等。2.质量性状资料质量性状资料 指一些能观察到而不能直接指一些能观察到而不能直接测量的性状资料,又称属性性状资料。如,测量的性状资料,又称属性性状资料。如,毛色、性别、生死等。毛色、性别、生死等。40二、实验数据的分类二、实验数据的分类1.算术平均数算术平均数 一般简称平均数或均数,它是统计学中一般简称平均数或均数,它是统计学中最常用的表示一组观察值(或变量)的集中趋势、中最常用的表示一组观察值(或变量)的集中趋势、中心位置或平均水平的指标。公式:心位置或平均水平的指标。公式:2.方差方差 是衡量一组数据的波动情况。方

29、差越大说明数是衡量一组数据的波动情况。方差越大说明数据的差异越大。公式:据的差异越大。公式:3.标准差标准差 表示一组变量值离散程度的指标。均数与标表示一组变量值离散程度的指标。均数与标准差结合能更全面地说明一组变量的分布情况。准差结合能更全面地说明一组变量的分布情况。 公式:公式:41三、实验数据的统计描述三、实验数据的统计描述p对定量资料的分析用对定量资料的分析用t检验、检验、F检验(方差分析)检验(方差分析)等。等。p对定性资料的分析用卡方(对定性资料的分析用卡方(2)检验等。)检验等。42四、实验数据的分析四、实验数据的分析p统计学上统计学上P0.05,表示差别有统计学意义;,表示差别

30、有统计学意义;P 0.05,表示差别无统计学意义。过去习惯上称差别有,表示差别无统计学意义。过去习惯上称差别有“显著性显著性”,不能理解为差异很大,也不能理解为医学,不能理解为差异很大,也不能理解为医学上有显著的价值。上有显著的价值。p差别的统计学意义是统计结论,而差别的实际意义则差别的统计学意义是统计结论,而差别的实际意义则是对应的专业结论,统计结论必须和专业结论有机的是对应的专业结论,统计结论必须和专业结论有机的结合,才能得出符合客观实际的最终结论。结合,才能得出符合客观实际的最终结论。43正确理解正确理解P P值与差别有无统计学意义值与差别有无统计学意义p例如,临床上用某药治疗高血压患者

31、例如,临床上用某药治疗高血压患者45名,另以名,另以45名患者服用某常用抗高血压药作为对照,分别测定两名患者服用某常用抗高血压药作为对照,分别测定两组病人的服药后舒张压,得两组舒张压下降值之差的组病人的服药后舒张压,得两组舒张压下降值之差的平均数为平均数为2.5 mmHg,经统计学检验,经统计学检验P0.05,有统,有统计学意义,但两组高血压病人服药后舒张压下降之差计学意义,但两组高血压病人服药后舒张压下降之差较小,不足有临床意义的差值较小,不足有临床意义的差值5 mmHg,故并没有实,故并没有实际的临床意义。际的临床意义。44正确理解正确理解P P值与差别有无统计学意义值与差别有无统计学意义

32、 t 检验是用来比较检验是用来比较两组两组不同数据的平均值,不同数据的平均值,看它们之间的差异是随机差异还是本质上的差看它们之间的差异是随机差异还是本质上的差异。异。单样本单样本t检验检验 独立样本独立样本t检验检验配对样本配对样本t检验检验 45t t检验(检验(t testt test)p单样本单样本 t 检验检验 就是检验一个观测的样本平均值是否来自就是检验一个观测的样本平均值是否来自已知平均值的总体,也就是说比较的是一个样已知平均值的总体,也就是说比较的是一个样本的平均值与某个指定的值的差异。本的平均值与某个指定的值的差异。46t t 检验(检验(t testt test)p例如,观察

33、高海拔地区饲养的兔子的红细胞数例如,观察高海拔地区饲养的兔子的红细胞数是否高于兔子的正常红细胞数?是否高于兔子的正常红细胞数? 47t t检验(检验(t testt test)p配对样本配对样本 t 检验检验 就是将实验对象按某些重要特征相近的原则配成对就是将实验对象按某些重要特征相近的原则配成对子,每对中的两个个体随机地给予两种处理,称为随子,每对中的两个个体随机地给予两种处理,称为随机配对设计。机配对设计。同一受试对象实验前和实验后的结果比较;同一受试对象实验前和实验后的结果比较;同一受试对象,分别接受两种不同处理的结果比较;同一受试对象,分别接受两种不同处理的结果比较;两组受试对象配成对

34、子,分别接受两种处理的结果比两组受试对象配成对子,分别接受两种处理的结果比较。较。48t t检验(检验(t testt test)p例如例如1,测定糖尿病小鼠治疗前后血糖指标的差异。,测定糖尿病小鼠治疗前后血糖指标的差异。p例如例如2,将某疫苗腹腔免疫小鼠,间隔两周,共免疫两,将某疫苗腹腔免疫小鼠,间隔两周,共免疫两次,测定一免后一周与二免后一周血清次,测定一免后一周与二免后一周血清IgG差异。差异。p例如例如3,将小鼠分别按性别、体重、年龄配成对子,然,将小鼠分别按性别、体重、年龄配成对子,然后将每对中的小鼠分别给予两种不同的降压药,每天后将每对中的小鼠分别给予两种不同的降压药,每天测定血压

35、,并统计两种降压药是否有差异。测定血压,并统计两种降压药是否有差异。49配对样本配对样本t t检验检验p两独立样本两独立样本 t 检验检验 是指将试验单位完全随机地分成两组,各实施一试验处理。所是指将试验单位完全随机地分成两组,各实施一试验处理。所得的两个样本观察值相互独立。得的两个样本观察值相互独立。必须具备两个假设条件:必须具备两个假设条件:两个总体都呈正态分布;两个总体都呈正态分布;两个总体具有相同的方差,即齐性方差。若两个总体具有相同的方差,即齐性方差。若Levines Test for Equality of Variances检验的显著性概率(检验的显著性概率(Sig.)大于)大于

36、0.05,就说明两组的方差是相等的,用就说明两组的方差是相等的,用t检验;若小于检验;若小于0.05,则用校正,则用校正t检验。检验。50t t检验(检验(t testt test)51t t检验(检验(t testt test)p例如,用高蛋白和低蛋白两种饲料饲养例如,用高蛋白和低蛋白两种饲料饲养一月龄大鼠,在一月龄大鼠,在3个月时测定两组大鼠个月时测定两组大鼠体重,试问两组大鼠体重是否有差异?体重,试问两组大鼠体重是否有差异?52两独立样本两独立样本t t检验检验pF检验,亦称方差分析,是检验两个以上样本检验,亦称方差分析,是检验两个以上样本均数间差别有无统计学意义的方法。均数间差别有无统

37、计学意义的方法。单因素方差分析(完全随机设计方差分析)单因素方差分析(完全随机设计方差分析) 多因素方差分析(随机区组设计方差分析)多因素方差分析(随机区组设计方差分析)53F F检验(方差分析)检验(方差分析)p单因素方差分析单因素方差分析 是一种将研究对象随机地分配到处理因素各水是一种将研究对象随机地分配到处理因素各水平组的单因素设计方法,其研究目的是推断处理因素平组的单因素设计方法,其研究目的是推断处理因素不同水平下的实验结果的差异是否有统计学意义。不同水平下的实验结果的差异是否有统计学意义。 例如,为了解某新疫苗对小鼠淋巴细胞增殖效果,例如,为了解某新疫苗对小鼠淋巴细胞增殖效果,将小鼠

38、随机分成三组,疫苗组、阳性对照组、阴性对将小鼠随机分成三组,疫苗组、阳性对照组、阴性对照组,免疫后观察三组淋巴细胞增殖情况是否有差异照组,免疫后观察三组淋巴细胞增殖情况是否有差异?54F F检验(方差分析)检验(方差分析)p多因素方差分析多因素方差分析 两个或两个以上处理因素间,以及各个因两个或两个以上处理因素间,以及各个因素不同水平间实验结果的差异是否有统计学意素不同水平间实验结果的差异是否有统计学意义。义。 55F F检验(方差分析)检验(方差分析)p例如,探讨某中药有效成分在不同温度例如,探讨某中药有效成分在不同温度(85、 95 )和不同试剂(甲醇、)和不同试剂(甲醇、乙醇)条件下提取

39、浓度的比较。乙醇)条件下提取浓度的比较。 56多因素方差分析多因素方差分析p多个样本均数的两两比较多个样本均数的两两比较 用方差分析对多组均数作显著性检验,如果差异有用方差分析对多组均数作显著性检验,如果差异有显著性意义,只说明总起来说各组均数之间有显著性显著性意义,只说明总起来说各组均数之间有显著性差异,并不意味着任意两两之间的均数差异有显著性差异,并不意味着任意两两之间的均数差异有显著性意义。意义。 常用的统计方法是常用的统计方法是Student Newman Keuls检验检验(简写为(简写为NK或或SNK),也可用),也可用Least Significant Difference Te

40、st(简写为(简写为LSD)。)。57F F检验(方差分析)检验(方差分析)p卡方检验是一种用途比较广泛的假设检验方法,卡方检验是一种用途比较广泛的假设检验方法,常用于对两个(或多个)常用于对两个(或多个)分类计数资料分类计数资料之间的之间的差别是否有统计学意义进行检验。差别是否有统计学意义进行检验。58卡方检验(卡方检验(2 2检验)检验)pEXCEL,SPSS,SAS等。等。59常用统计学软件常用统计学软件四、动物实验报告与论文的撰写四、动物实验报告与论文的撰写及注意事项及注意事项 动物实验报告是描述动物实验过程,动物实验报告是描述动物实验过程,记录动物实验结果的材料,是表达研究记录动物实

41、验结果的材料,是表达研究成果的一种形式。成果的一种形式。611 1、真实性、真实性 动物实验报告最突出的特征动物实验报告最突出的特征 实事求是,绝对真实,杜绝主观,重视实事求是,绝对真实,杜绝主观,重视“反常反常”2 2、可重复性、可重复性 动物实验报告的关键动物实验报告的关键3 3、可操作性、可操作性 62撰写动物实验报告的原则撰写动物实验报告的原则 动物实验报告一般包括实验名称、实验目的、动物实验报告一般包括实验名称、实验目的、实验器材、实验步骤、实验结果和实验结论等内实验器材、实验步骤、实验结果和实验结论等内容。容。 实验结论是根据实验过程观察到的现象和测实验结论是根据实验过程观察到的现

42、象和测得的数据等感性材料进行理论上的分析、推理而得的数据等感性材料进行理论上的分析、推理而产生的理性认识的客观表述。实验结论不是实验产生的理性认识的客观表述。实验结论不是实验结果的简单重复。结果的简单重复。63动物实验报告的基本格式与要求动物实验报告的基本格式与要求64一般动物实验报告式一般动物实验报告式仿学术论文式仿学术论文式题目(内容)题目(内容)题目题目目的(原理)目的(原理)引言(导言)引言(导言)实验对象与用品实验对象与用品材料与方法材料与方法方法步骤方法步骤结果与分析结果与分析结果与分析结果与分析结论或结语(讨论)结论或结语(讨论)讨论讨论 与结论与结论附录:原始记录附录:原始记录

43、附录:原始记录,公式推导,附录:原始记录,公式推导,参考文献等参考文献等常用的两种格式:一般实验报告式,仿学术论文式常用的两种格式:一般实验报告式,仿学术论文式撰写动物实验报告应以事实为根据,不得修改、编撰写动物实验报告应以事实为根据,不得修改、编造数据。造数据。报告要求格式标准、整洁、图表准确、字迹端正、报告要求格式标准、整洁、图表准确、字迹端正、简明精练。简明精练。写报告不得使用圆珠笔,绘图宜用铅笔。写报告不得使用圆珠笔,绘图宜用铅笔。注意文字规范,用词专业,语句通顺。注意文字规范,用词专业,语句通顺。计量单位与统计学符号应按有关规定书写。计量单位与统计学符号应按有关规定书写。65注意事项

44、注意事项应当重视实验动物应用状况的描述应当重视实验动物应用状况的描述1 1、实验动物种系名称、实验动物种系名称准确描述实验动物的种系名称,不用不规范的俗名,如准确描述实验动物的种系名称,不用不规范的俗名,如“大白鼠大白鼠”、“小白鼠小白鼠”、“黑鼠黑鼠”等。等。2 2、实验动物质量及来源、实验动物质量及来源 实验动物的遗传学控制分类、实验动物微生物学控制分实验动物的遗传学控制分类、实验动物微生物学控制分类,提供实验动物的单位名称及生产许可证号等。如:类,提供实验动物的单位名称及生产许可证号等。如:5050只只SPFSPF级近交系级近交系BALB/cBALB/c小鼠,由小鼠,由XXXXXX(单位

45、)提供,动(单位)提供,动物质量合格证号:物质量合格证号:XXX.XXX.66动物实验论文撰写注意事项动物实验论文撰写注意事项3 3、性别、规格等、性别、规格等动物准确数量、性别比例、体重及年龄、健康状况。动物准确数量、性别比例、体重及年龄、健康状况。4 4、动物实验条件、动物实验条件 动物饲养环境条件、动物实验环境条件,动物饲养动物饲养环境条件、动物实验环境条件,动物饲养管理方式管理方式 5 5、动物实验的某些处理方式、动物实验的某些处理方式 动物实验设计分组:随机、对照动物实验设计分组:随机、对照 麻醉剂:种类、剂量、给药方法;动物的处死方法麻醉剂:种类、剂量、给药方法;动物的处死方法等。等。67动物实验论文撰写注意事项动物实验论文撰写注意事项谢谢谢谢

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