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1、中国食品药品检定研究院中国食品药品检定研究院 National Institutes for Food and Drug Control质谱分析法药品质量控制中的应用质谱分析法药品质量控制中的应用20112011年华东六省一市药物分析交流会年华东六省一市药物分析交流会李晓东李晓东2011-10-18，济南National Institutes for Food and Drug Control提提纲纲一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类二、质谱法在药品质量控制中的应用二、质谱法在药品质量控制中的应用三、质谱法应用展望三、质谱法应用展望National Institutes for
2、Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱法质谱法（Mass Spectrometry） 通过将被测物质原子或分子离子化，利通过将被测物质原子或分子离子化，利用电磁学原理，对荷电粒子或碎片粒子依用电磁学原理，对荷电粒子或碎片粒子依其质量和电荷的比值（质荷比，其质量和电荷的比值（质荷比，m/z）进行）进行分离和分析，以达到确认其元素组成及分分离和分析，以达到确认其元素组成及分子结构的目的。子结构的目的。 National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱
3、法的特点质谱法的特点质谱不属波谱范围，质谱图与电磁波的波长和分子内质谱不属波谱范围，质谱图与电磁波的波长和分子内 某种物理量的改变无关。某种物理量的改变无关。质谱是分子离子及碎片离子的质量与其相对强度的质谱是分子离子及碎片离子的质量与其相对强度的 谱谱, , 谱图与分子结构有关。谱图与分子结构有关。 质谱法进样量少质谱法进样量少, , 灵敏灵敏, , 快速，特异，化学计量快速，特异，化学计量（Sensitivity，Speed，Specificity，Stoichiometry）质谱是唯一可以给出分子量质谱是唯一可以给出分子量, , 确定分子式的方法确定分子式的方法, , 而而 分子式的确定对
4、化合物的结构鉴定是至关重要的。分子式的确定对化合物的结构鉴定是至关重要的。National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类因质谱技术获诺贝尔奖的五位科学家因质谱技术获诺贝尔奖的五位科学家National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类MSMS：Mass Spectrometry, Mass Spectrometer质谱仪的分类：质谱仪的分类： (1) (1) 有机质谱仪：有机质谱仪： - - 气质联用，液质联用气质联
5、用，液质联用，傅立叶质谱仪，激光解吸，傅立叶质谱仪，激光解吸 飞行时间质谱仪飞行时间质谱仪(2) (2) 无机质谱仪无机质谱仪- - 电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱, , 同位素质谱仪，二次同位素质谱仪，二次 离子质谱离子质谱, ,氦质谱检漏仪氦质谱检漏仪National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱仪分析标准程序：质谱仪分析标准程序：（1 1）样品的导入）样品的导入（2 2）样品的离子化）样品的离子化（3 3）被测离子进入电场或磁场）被测离子进入电场或磁场（4 4）离子按质荷比（）离子按
6、质荷比（m/zm/z）进行分析）进行分析 （5 5）按质荷比）按质荷比m/zm/z. .进行检测进行检测National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱图质谱图以荷质比以荷质比m/zm/z为横座标，以对基峰为横座标，以对基峰( (最强离子峰，规定最强离子峰，规定相对强度为相对强度为100%)100%)相对强度为纵座标所构成的谱图。相对强度为纵座标所构成的谱图。National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱图
7、质谱图1527314546m/e相对丰度乙醇有机质谱图有机质谱图无机质谱图无机质谱图National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类同位素质谱图同位素质谱图氯苯质谱图氯苯质谱图溴丙烷质谱图溴丙烷质谱图National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类质谱图质谱图 质谱在有机结构分析上的应用主要有两方面： 确定相对分子质量和分子式； 在低分辨质谱中，由分子结构与裂解方式的经验规律，鉴定某些官能团，给出分子的结构信息； 定
8、量模式：GC/MS SIMLC/MS/MS SIM or MRMICP/MS SIMNational Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类计算机控制系统计算机控制系统样品样品导入导入离子离子源源质量质量分析分析放大放大记录记录检测检测器器真空系统真空系统GCGCHPLCHPLCICPICP* 2005版起版起中国药典中国药典二部附录收载质谱二部附录收载质谱法法National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类* 实现质谱技术
9、的关键实现质谱技术的关键-高真空高真空 离子源和质量分析器的压力在离子源和质量分析器的压力在 104 105 Pa和105 106 Pa 或10-610-7mmHg和10-710-8mmHg* 仪器类型：机械泵机械泵+涡轮分子泵涡轮分子泵InletIonsourceMass AnalyzerDetectorDataSystemHigh Vacuum SystemNational Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类* 实现质谱技术的关键实现质谱技术的关键-高真空高真空 -质谱是检测带电粒子质谱是检测带电粒子,带
10、电粒子在电磁场的作用下，带电粒子在电磁场的作用下，加速运动。如果有空气，带电粒子可能和空气中的其他加速运动。如果有空气，带电粒子可能和空气中的其他分子发生碰撞，使离子很快淬灭而达不到检测器，并分子发生碰撞，使离子很快淬灭而达不到检测器，并引引起额外的离子分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化，起额外的离子分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化，影响分离及检测。影响分离及检测。National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类* 气质联用气质联用National Institutes for Food and Dru
11、g Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类* 液质联用液质联用单四极杆和串联质谱。 空间串联：空间串联：QQQ、Q-Trap、Q-TOF、TOF-TOF 时间串联：时间串联：Ion Trap、Orbitrap、FT-MSESI APCI- - APIAPI是液相色谱是液相色谱/ /质谱联用质谱联用仪最常用的离子化方式。仪最常用的离子化方式。National Institutes for Food and Drug Control一、质谱仪器的原理及分类一、质谱仪器的原理及分类* 电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱四极杆，双聚焦、飞行时间质谱 National In
12、stitutes for Food and Drug Control* 电感耦合等离子体质谱电感耦合等离子体质谱二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用* 液相色谱液相色谱-质谱联用法质谱联用法* 气相色谱气相色谱-质谱联用法质谱联用法National Institutes for Food and Drug Control* 电感耦合等离子体质谱：电感耦合等离子体质谱：可进行定性、半定量、定量可进行定性、半定量、定量分析及同位素比值的准确测量，还可与其他技术如分析及同位素比值的准确测量，还可与其他技术如HPLCHPLC、HPCEHPCE、GCGC联用进行元素的形态、分布特性等
13、的分析，广泛应联用进行元素的形态、分布特性等的分析，广泛应用于环境、半导体、医学、生物、冶金、石油、核材料分析用于环境、半导体、医学、生物、冶金、石油、核材料分析等领域。等领域。 * 气质联用：气质联用：灵灵敏度高，适合于低分子化合物（分子量敏度高，适合于低分子化合物（分子量气溶胶 -固体颗粒 -气体分子 -原子 -离子 汽化 去溶剂化 气化 原子化 离子化ICP炬管炬管二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug ControlICP-MS检测限及质量分析范围检测限及质量分析范围二、质谱法在药品检验用的应用
14、二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control市场上金属元素分析仪器对比市场上金属元素分析仪器对比二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用根据溶液的浓度举例如下，供参考：每个样品测定1-3个元素，元素浓度为亚或低于ppb级，如果被测元素要求能满足的情况下，G-AAS是最合适的。每个样品5-20个元素，含量为亚ppm至%，ICP-AES是最合适的。每个样品需测4个以上的元素，在亚ppb及ppb含量，而且样品的量也相当大，ICP-MS是较合适的。National Institutes for Food and
15、Drug Control电感耦合等离子体质谱仪，电感耦合等离子体质谱仪，ICP-MS（1） 在中药材及中药注射剂检验中的应用在中药材及中药注射剂检验中的应用 阿胶，白芍，丹参，甘草，枸杞子，黄芪，金银花，山楂，西洋参阿胶，白芍，丹参，甘草，枸杞子，黄芪，金银花，山楂，西洋参 人参总皂苷，人参茎叶总皂苷，薄荷脑，灯盏花素，茵陈提取物，人参总皂苷，人参茎叶总皂苷，薄荷脑，灯盏花素，茵陈提取物， 三七总皂苷，共三七总皂苷，共15个品种个品种-铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万
16、分之二十。千万分之二；铜不得过百万分之二十。 （2） 在制品分析中的应用在制品分析中的应用- Al、Ni、Pd等过程代入的金属元素等过程代入的金属元素二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（1） 在化妆品检验中的应用在化妆品检验中的应用气相色谱气相色谱-质谱联用仪，质谱联用仪，GC/MS（2） 在塑化剂检验中的应用在塑化剂检验中的应用（3） 在农药残留检验中的应用在农药残留检验中的应用二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for
17、Food and Drug Control（1） 在化妆品检验中的应用在化妆品检验中的应用 - 风险及限用物质：二噁烷、苯酚等风险及限用物质：二噁烷、苯酚等 以二噁烷为例：以二噁烷为例：SN/T 1784-2006顶空气相色谱顶空气相色谱- -质谱法：质谱法： -顶空进样，交联顶空进样，交联5%5%苯基甲基硅烷毛细管柱苯基甲基硅烷毛细管柱 ，质谱检测器，质谱检测器下限下限2.5mg/kg检测离子（m/z）离子相对丰度比（%）允许相对偏差（%）8810058应用标准品测定离子相对丰度比2043应用标准品测定离子相对丰度比25二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National
18、 Institutes for Food and Drug Control（2） 在塑化剂检验中的应用在塑化剂检验中的应用 GB/T 21911-2008 含含16中中邻苯二甲酸苯二甲酸酯类增塑增塑剂，不包含，不包含邻苯二甲酸二异壬苯二甲酸二异壬酯DINP和和邻苯二甲酸二苯二甲酸二异癸异癸酯DIDP. .二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2） 在塑化剂检验中的应用在塑化剂检验中的应用DIDP 1ppmDIDP 10ppm二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用Nat
19、ional Institutes for Food and Drug Control GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中水果和蔬菜中500种农药及相关化学品种农药及相关化学品残留的测定残留的测定 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法GB/T 19426-2003 蜂蜜、果汁和果酒中蜂蜜、果汁和果酒中304种农药多残留种农药多残留测定方法测定方法 气相色谱气相色谱-质谱和液相色谱质谱和液相色谱-串联质谱法串联质谱法GB/T 19650-2005 动物组织中动物组织中437种农药多残留测定方法种农药多残留测定方法 气相色谱气相色谱-质谱和液相色谱质谱和液相色谱-串联质谱法串联质谱法 （已作废）
20、（已作废） （3） 在农药残留检验中的应用在农药残留检验中的应用二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control2010年版年版中国药典中国药典一部附录收载一部附录收载“农药残留量测定法农药残留量测定法”采用气相色谱法，采用气相色谱法，ECD，NPD检测检测收载品种：甘草，黄芪，人参总皂苷，人参茎叶总皂苷收载品种：甘草，黄芪，人参总皂苷，人参茎叶总皂苷（3） 在农药残留检验中的应用在农药残留检验中的应用二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用发展趋势：发展趋势：测定方法分两个层次：
21、测定方法分两个层次： 一为色谱法（一为色谱法（GCGC、HPLCHPLC） 方法包括样品前处理（提取、净化）、色谱测定、方法包括样品前处理（提取、净化）、色谱测定、 色谱验证和质谱确证色谱验证和质谱确证 二为色二为色- -质联机法（质联机法（GC/MSGC/MS、LC/MSLC/MS） 方法包括样品前处理（提取、净化）、色谱质联机测定方法包括样品前处理（提取、净化）、色谱质联机测定National Institutes for Food and Drug Control液相色谱液相色谱-质谱联用仪，质谱联用仪，LC/MS（1） 在药典中的应用在药典中的应用（3） 非法添加及有害残留检验中的应用
22、非法添加及有害残留检验中的应用（2） 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用（4） 基因工程药品检验中的应用基因工程药品检验中的应用二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（1） 在药典中的应用在药典中的应用 2010年版年版 中国药典中国药典一部收录三个品种一部收录三个品种- - 川楝子及苦楝皮中的川楝素进行含量测定川楝子及苦楝皮中的川楝素进行含量测定 川楝素川楝素(Toosendanin): C30H38O11 MW.574.62 反相C18体系，乙腈-0.01%甲酸
23、溶液（31:69）为流动相，采用单级四级杆质谱检测器，电喷雾离子化（ESI）负离子模式下选择质荷比（m/z）为573的离子进行检测。理论塔板数按川楝素计算应不低于8000。通过外标法，以川楝素两个峰面积之和计算川楝素的含量。二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（1） 在药典中的应用在药典中的应用 2010年版年版 中国药典中国药典一部收录三个品种一部收录三个品种- - 千里光中的阿多尼弗林碱进行了杂质检查千里光中的阿多尼弗林碱进行了杂质检查 阿多尼弗林碱阿多尼弗林碱 Adonifoli
24、ne C18H23NO7，MW= 365具有细胞毒性具有细胞毒性 反相C18体系，乙腈-0.5%甲酸溶液（7:93）为流动相,采用单级四级杆质谱为检测器，电喷雾离子化（ESI）正离子模式下选择质荷比（m/z）为366离子进行检测。理论塔板数按阿多尼弗林碱计算应不低于8000。以百合碱为内标，计算校正因子，测定阿多尼弗林碱的含量。二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（1） 在药典中的应用在药典中的应用 USP32- 血管升压素（血管升压素（Vasopressin Vasopressin
25、）: ESI+: ESI+，10841084（单电荷）和（单电荷）和 543543（双电荷）；（双电荷）；- 人重组血清白蛋白（人重组血清白蛋白（Recombinant Albumin HumanRecombinant Albumin Human）: 585: 585个个 氨基酸组成，分子量氨基酸组成，分子量66,438 66,438 DaDa，ESI+ESI+多电荷质谱图去卷积，多电荷质谱图去卷积， 20Da20Da之内误差；之内误差； - 醋酸去氨加压素（醋酸去氨加压素（DesmopressinDesmopressin Acetate Acetate）: ESI+: ESI+，m/zm/z
26、 10691069，MS/MSMS/MS，m/zm/z 641641、 742742和和 995995子离子。子离子。二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2） 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用* 药典中的定性鉴别（已知物的鉴别） 化学、红外、紫外、色谱保留时间化学、红外、紫外、色谱保留时间* 液质联用定性鉴别（未知物的鉴别） 色谱保留时间色谱保留时间 (1)(1) 一级质谱分子离子一级质谱分子离子 (2)(2) 二级质谱全扫描二级质谱全扫描 (4)(4)* *
27、 EU guideline: 46 Identification points 一个一个多反应监测多反应监测MRM (2)MRM (2)- - 欧盟欧盟96/23/EC96/23/EC及及2002/657/EC2002/657/EC指令指令- - D,HubertD,Hubert F, F, et.alet.al，Trends in Analytical ChemistryTrends in Analytical Chemistry, , 2001, 20(8), 20(8), 435二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Foo
28、d and Drug Control（2） 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用鉴定数据点系统鉴定数据点系统质谱技术质谱技术IP / IP / ionion低分辨率质谱低分辨率质谱 (LR-MS)(LR-MS)1.01.0低分辨率质谱低分辨率质谱L LR-MSR-MSn n 母离子母离子1.01.0低分辨低分辨率质谱率质谱( (LR-MSLR-MSn n )Transition)Transition productsproducts1.51.5高分辨率质谱高分辨率质谱( (HR-MS)HR-MS)2.02.0高分辨率质谱（高分辨率质谱（HR-MSHR-MSn n ）母离子）
29、母离子2.02.0高分辨率质谱高分辨率质谱( (HR-MSHR-MSn)n) TransitionTransition productsproducts2.52.5低分辨率质谱二级全扫描低分辨率质谱二级全扫描 (LR-MS(LR-MS Full Scan Full Scan) )4.04.0二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2） 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用相相对丰度丰度(% (% 基峰基峰) )GC-MS/EIGC-MS/EIGC-MS/CI, GC-
30、MS/GC-MS/CI, GC-MS/MSMSn n LC-MS, LC-MS-LC-MS, LC-MS-MSMSn n 50 % 50 % 10 % 10 % 20 % 20 % 20 % - 50 % 20 % - 50 % 15 % 15 % 25 % 25 % 10 % - 20 % 10 % - 20 % 20 % 20 % 30 % 30 % 10 % 10 % 50 % 50 % 50 % 50 %相对强度的容许量相对强度的容许量二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2）
31、 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用相对强度的容许量相对强度的容许量 20 % 20 % 25 % 30 % 50 %二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2） 主成分及有关物质分析中的应用主成分及有关物质分析中的应用- - 盐酸洛美沙星光降解分析盐酸洛美沙星光降解分析 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control盐酸洛美沙星光降解分析盐酸洛美沙星光降解分析 AB
32、CAM+H 308.0M+H 308.0BM+H 294.3M+H 294.3CM+H 368.0M+H 368.0二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（2） 非法添加及有害残留检验中的应用非法添加及有害残留检验中的应用 2006年年3月，月，SFDA通用补充检验方法及项目的批准通用补充检验方法及项目的批准 - 治疗肥胖症中成药（治疗肥胖症中成药（SFDA2006004） 麻黄碱、芬氟拉明、西布曲明麻黄碱、芬氟拉明、西布曲明 - 治疗消渴症中成药（治疗消渴症中成药（SFDA200600
33、5） 苯乙双胍、格列吡嗪、格列本脲苯乙双胍、格列吡嗪、格列本脲 - 消肿止痛类中成药（消肿止痛类中成药（SFDA2006006） 双氯芬酸、氨基比林双氯芬酸、氨基比林 - 止咳平喘类中成药（止咳平喘类中成药（SFDA2006007） 茶碱茶碱 - 镇静安神类中成药（镇静安神类中成药（SFDA2006008） 地西泮、氯硝西泮地西泮、氯硝西泮 - 镇静安神类中成药（镇静安神类中成药（SFDA2006024） 艾司唑仑艾司唑仑 - 补肾壮阳类中成药（补肾壮阳类中成药（SFDA2006009） 西地那非、他达拉非西地那非、他达拉非二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用Nationa
34、l Institutes for Food and Drug Control（3） 非法添加及有害残留检验中的应用非法添加及有害残留检验中的应用UV 235nmUV 254nm(+) ESI-MS(-) ESI-MS八种降糖药液质联用方法的建立八种降糖药液质联用方法的建立 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（3） 非法添加及有害残留检验中的应用非法添加及有害残留检验中的应用* * 糖皮质激素的基本结构中糖皮质激素的基本结构中均具有环戊烷骈多氢菲母核，均具有环戊烷骈多氢菲母核，其中其中
35、C3C3的酮基、的酮基、C20C20的羰基的羰基及及C4-5C4-5的双键是保持生理功的双键是保持生理功能所必需，结构上可通过在能所必需，结构上可通过在C1C12 2引入双键，在引入双键，在C6C6、 C9C9、 C16 C16 、C21C21引入结构修饰基引入结构修饰基团来增强其抗炎作用，减弱团来增强其抗炎作用，减弱水盐代谢作用。水盐代谢作用。M1+准分子离子峰：泼尼松龙 m/z361.2泼尼松 m/z359.3地塞米松 m/z393.2醋酸可的松 m/z403.2醋酸泼尼松龙 m/z403.2醋酸泼尼松 m/z401.3醋酸地塞米松 m/z435.1二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在
36、药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（3） 非法添加及有害残留检验中的应用非法添加及有害残留检验中的应用 糖皮质糖皮质激素类药物激素类药物HPLC-UV MS色谱图 （a）七种糖皮质激素对照品；（b）供试品 * * 以泼尼松计算，柱上灵敏度达到以泼尼松计算，柱上灵敏度达到0.5ng0.5ng 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control保健食品：肥胖症、消渴症、消肿止痛、补肾壮阳保健食品：肥胖症、消渴症、消肿止痛、补肾壮阳伐
37、地那非伐地那非_ _VardenafilVardenafil（LevitraLevitra，艾力达，利维他），艾力达，利维他）他达那非他达那非_ _TadalafilTadalafil（CialisCialis，希爱力，西力士，希爱力，西力士) )西地那非西地那非_ _SildenafilSildenafil（ VIAGRAVIAGRA，万艾可，伟哥），万艾可，伟哥） - -磷酸二酯酶磷酸二酯酶5 5（PDE5PDE5）抑制剂类）抑制剂类二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control磷酸二酯酶磷
38、酸二酯酶5 5（PDE5PDE5）抑制剂类）抑制剂类Sildenafil (Viagra)MS: 474.2 Homosildenafil MS: 488.2Hydroxy-homosildenafilMS: 504.2Acetildenafil（Hongdenafil） MS: 466.3TadalafilMS: 389.1 Vardenafil MS: 488.2Aildenafil MS: 488.2HydroxysildenafilMS: 490.2二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Con
39、trol西地那非西地那非M+1:475.2M+1:475.2Hydroxy-homosildenafil- - 磷酸二酯酶磷酸二酯酶5 5（PDE5PDE5）抑制剂类药物类似物分析）抑制剂类药物类似物分析 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 问题（问题（1 1）成盐药物检验结论的描述）成盐药物检验结论的描述 - 改善药物理化性质 - 增强药物的稳定性，溶解性 - 影响药物的作用时间 - 减轻了毒副作用等功能， 保持药物疗效是成盐的前提 -氨茶碱，盐酸克伦特罗，双氯芬酸钠、枸橼酸西地那
40、非等。 - -例：检出双氯芬酸，以双氯芬酸钠计含量为例：检出双氯芬酸，以双氯芬酸钠计含量为_%_%二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 问题（问题（2 2） 最小检出限的确定最小检出限的确定m/z28325m/z31170m/z34346m/z377100m/z28322m/z31153m/z34361m/z377100m/z28325m/z31133m/z34326m/z3771002ng1ng100ng二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Ins
41、titutes for Food and Drug Control 问题（问题（3 3）未检出结论的描述未检出结论的描述 - - 仪器灵敏度的表述仪器灵敏度的表述 - LOD- LOD的重要性的重要性 - - 残留与非法添加（底线的选取）残留与非法添加（底线的选取） - -毒害性、治疗作用、污染造成、需复核毒害性、治疗作用、污染造成、需复核 问题（问题（4 4）检出非法添加含量极低检出非法添加含量极低(1.5）二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 基因工程蛋白药物中抗生素残留检测基因工
42、程蛋白药物中抗生素残留检测M+H=349.8-H2O-COOH-CO氨苄西林氨苄西林MS/MSConv.= 0.0525 g/mL， 0.5ng（10 L），）， SN4二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 食品中氯霉素的残留检测食品中氯霉素的残留检测 HPLC & MRM（ODS，MeCN-H2O，Gradient program） ESI(-)ESI(-)， Q1=Q1=321,Q3=152, 194 and 257TIC321-152321-194321-257C11H12Cl2
43、N2O5 FW=323.13二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 食品中氯霉素的残留检测食品中氯霉素的残留检测( (样品样品) )二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control甲氨蝶呤中的长春新碱检测甲氨蝶呤中的长春新碱检测“甲氨蝶呤甲氨蝶呤”事事件件二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Con
44、trol“力百汀力百汀”塑化剂事塑化剂事件件定性方法重复：定性方法重复：C18C4HPLC/MS/MS： Merck LiChroCART RP-18e C18，5 m，2.0 125 mm，5%乙酸铵乙酸铵-95甲醇梯度淋洗甲醇梯度淋洗HPLC/MS/MS： VyDAC 214MS C4，5 m，2.0 150 mm，5%乙酸铵乙酸铵-95甲甲醇梯度淋洗醇梯度淋洗二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control“力百汀力百汀”塑化剂事塑化剂事件件Thermo LTQ-orbitrap XL静电场
45、轨道离子阱质谱仪Waters AcquityTMUPLC，Quattro Premier XE 三重四级杆液相质谱仪二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control（4） 基因工程药品检验中的应用基因工程药品检验中的应用14H14+人人 生生 长长 激激素素ESI-MSESI-MS去卷褶去卷褶去卷褶去卷褶M=2212215H15+甲酰化甲酰化人人 生生 长长 激激素素ESI-MSESI-MS去卷褶去卷褶去卷褶去卷褶M=22255(M+131)二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用
46、National Institutes for Food and Drug Control 多肽质量谱图测定多肽质量谱图测定蛋白质，多肽蛋白质，多肽酶切酶切混合肽段混合肽段HPLC分离分离质量肽谱质量肽谱肽谱肽谱HPLC/MSn肽段分子量肽段分子量MS/MS一级结构一级结构翻译后修饰翻译后修饰二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control 重组人甲状旁腺素重组人甲状旁腺素rh-PTH(134)MSUVT1T1T5T2T3二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National I
47、nstitutes for Food and Drug Control 重组人甲状旁腺素重组人甲状旁腺素rh-PTH(134)* FW: 4118.7, Coverage: 80%, Score: 40.17, PI: 8.29SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNFT1SVSEIQLMHNLGK (FW=1456)T2HLNSMER (FW=886)T3VEWLR (FW=702)T4LQDVHNF (FW=872)T5KLQDVHNF (FW=1000) 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Fo
48、od and Drug Control生物制品的分析生物制品的分析 分子量分子量 糖基化及序列糖基化及序列 轻链重链肽序列及连接轻链重链肽序列及连接 翻译后修饰翻译后修饰二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control贝伐单抗的分析贝伐单抗的分析 二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control突发事件导致药害主要物质原因用药途径临床不良反应毒性作用机理刺五加注射液刺五加注射液热原物原物质（细菌）菌）
49、细菌菌污染染静脉静脉给药休克性死亡休克性死亡重度重度热原反原反应静丙事件静丙事件高分子蛋白聚合物高分子蛋白聚合物高温高温导致聚合物致聚合物产生生静脉静脉给药猝死猝死血栓形成，心血栓形成，心源性死亡源性死亡肝素肝素钠事件事件多硫酸多硫酸软骨素骨素难以以预测（现有知有知识不足不足导致）致）静脉静脉给药过敏性休克、敏性休克、死亡死亡过敏反敏反应甲氨蝶呤事件甲氨蝶呤事件混入混入长春新碱春新碱生生产线清洗不清洗不彻底底导致混入致混入鞘内鞘内给药瘫痪神神经毒性毒性欣弗事件欣弗事件热原物原物质（细菌）菌）灭菌不菌不彻底（不符合底（不符合GMPGMP操作）操作）静脉静脉给药休克性死亡休克性死亡重度重度热原反原
50、反应齐二二药事件事件二甘醇（二甘醇（辅料）料）辅料使用料使用错误静脉静脉给药肾功能急性衰肾功能急性衰竭竭肾衰竭衰竭二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control药害事件药害事件检验项目检验项目分析方法分析方法力百汀事件力百汀事件增塑增塑剂（DIDPDIDP等）等）气气质联用、液用、液质联用用金港狂苗金港狂苗聚肌胞聚肌胞电泳、液相、液泳、液相、液质联用用刺五加注射液刺五加注射液热原物原物质（细菌）菌）微生物、微生物、热源源检验静丙事件静丙事件高分子蛋白聚合物高分子蛋白聚合物体体积排阻色排阻色谱、M
51、ALDI-TOF-MSMALDI-TOF-MS肝素肝素钠事件事件多硫酸多硫酸软骨素骨素毛毛细管管电泳、核磁共振泳、核磁共振甲氨蝶呤事件甲氨蝶呤事件长春新碱春新碱液相色液相色谱、液、液质联用用欣弗事件欣弗事件热原物原物质（细菌）菌）微生物、微生物、热源源检验齐二二药事件事件二甘醇二甘醇气相色气相色谱、气、气质联用用二、质谱法在药品检验用的应用二、质谱法在药品检验用的应用National Institutes for Food and Drug Control三、质谱法应用展望三、质谱法应用展望National Institutes for Food and Drug Control致谢致谢谢谢 谢！谢！National Institutes for Food and Drug Control联系方式联系方式李晓东李晓东中国食品药品检定研究院分析测试室中国食品药品检定研究院分析测试室中国食品药品检定研究院分析测试室中国食品药品检定研究院分析测试室电话：电话：010-67095655010-67095655传真：传真：010-67095748010-67095748E-mail：
