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1、实验一实验一人类细胞中巴氏小体的观察人类细胞中巴氏小体的观察实验目的实验目的 1.了解x染色体失活假设及剂量补偿效应的机制。 2.学习人类性染色质的检查方法。X染色质的相关知识：发现过程及基本形态 形成过程 本质 临床应用实验原理实验原理1. 1949年Barr等在雌猫的神经元细胞中发现一种浓缩小体，而雄猫无。而且在其他物种的雌性个体组织细胞核中都有。因此X染色质又称Barr小体。发现过程及其基本形态发现过程及其基本形态女性：女性：46，XX男性：男性：46，XY女性细胞内女性细胞内X X染色体上基染色体上基因翻译蛋白质的量是男性因翻译蛋白质的量是男性的两倍吗？的两倍吗？NOX染色质的形成过程
2、染色质的形成过程不论细胞内有几条不论细胞内有几条不论细胞内有几条不论细胞内有几条X X X X染色体，只有一染色体，只有一染色体，只有一染色体，只有一条是具有转录活性的，其余的形成条是具有转录活性的，其余的形成条是具有转录活性的，其余的形成条是具有转录活性的，其余的形成异固缩的异固缩的异固缩的异固缩的X X X X染色质。染色质。染色质。染色质。X染色质的本质染色质的本质v异固缩的X染色体随机失活。v胚胎发育第16天，出现失活；卵子与精子受精后，其中失活的X染色质变为常染色质恢复活性。X染色质为兼性异染色质染色质为兼性异染色质相关概念：剂量补偿效应：指在xy性别决定的生物中，使性连锁基因在两种
3、性别中有相等或近乎相等的有效剂量的遗传效应。主要类型：1.X染色体的转录速率不同（果蝇）。2.雌性体细胞中有一条x染色体是失活的。（人、哺乳类） Lyon假说：假说：1961年由年由Lyon提出，又称单个活性提出，又称单个活性X染色体染色体假说。假说。1正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条正常雌性哺乳动物的体细胞中，两条X染染色体中只有一条有活性色体中只有一条有活性(activation X, Xa)，另一条失活，另一条失活(inactivation X, Xi)；2失活是随机的；失活是随机的；3失活发生在胚胎发育的早期；失活发生在胚胎发育的早期；4杂合体雌性在伴性基因的作用上是嵌合体杂合体雌性在
4、伴性基因的作用上是嵌合体(mosaic)。 核膜核膜X染色质染色质正常女性间期细胞正常女性间期细胞核中核中X X染色质阳性率染色质阳性率为为1030，而，而男性则低于男性则低于1。X染色质检查的临床应用染色质检查的临床应用性别的快速鉴定性别的快速鉴定胎儿性别鉴定胎儿性别鉴定 取口腔上皮细胞涂于载玻片上，自然干燥 甲醇，冰醋酸（3：1）固定15分钟，干燥 依次放入95%乙醇、70%乙醇、50%乙醇，蒸馏水中，每次2-3分钟 5NHcl分化5秒钟 蒸馏水漂洗3次，每次2-3分钟 硫堇染色10分钟 冲洗干净，电吹风吹干 镜检（油镜）实验步骤实验步骤vX染色质的识别方法：一般位于核膜内侧缘，形状多样，
5、多为半圆形，三角形。实验结果的观察实验结果的观察可计数细胞的标准：可计数细胞的标准：a：核较大，：核较大，轮廓清除完整，无缺损、皱褶，轮廓清除完整，无缺损、皱褶，染色清晰。染色清晰。b：核质呈细网状或均：核质呈细网状或均匀的细颗粒状，无深染大颗粒及匀的细颗粒状，无深染大颗粒及细菌污染细菌污染 X染色质的形态染色质的形态：1.结构致密的浓染小体，轮廓清楚；结构致密的浓染小体，轮廓清楚；2.大小约大小约1u左右，常附着于核膜边缘或靠左右，常附着于核膜边缘或靠近内侧；近内侧；3.其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒其形状有微凸形、三角形、卵形、短棒形及双球形；形及双球形；一.实验目的二.记录试验过程三.绘图表示实验结果. 绘人x染色质图。实验报告实验报告
