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1、第14章螺旋体SpirochaeteDepartment of Microbiology, Harbin Medical University教学大纲n n掌握内容uu钩端螺旋体致病性钩端螺旋体致病性uu梅毒螺旋体致病性梅毒螺旋体致病性n n了解内容uu诊断检查法及防治原则诊断检查法及防治原则 Department of Microbiology, Harbin Medical University螺旋体螺旋体 （Spirochaete）n n一一一一类类类类细细细细长长长长、柔柔柔柔软软软软、呈呈呈呈螺螺螺螺旋旋旋旋状状状状弯弯弯弯曲曲曲曲、运运运运动动动动活活活活泼泼泼泼的的的的原原原原核
2、细胞型微生物核细胞型微生物核细胞型微生物核细胞型微生物。uu细胞壁含脂多糖和胞壁酸细胞壁含脂多糖和胞壁酸细胞壁含脂多糖和胞壁酸细胞壁含脂多糖和胞壁酸uu有核质有核质有核质有核质uu以二分裂形式繁殖以二分裂形式繁殖以二分裂形式繁殖以二分裂形式繁殖uu对抗生素敏感对抗生素敏感对抗生素敏感对抗生素敏感n n对人和动物致病对人和动物致病对人和动物致病对人和动物致病uu钩端螺旋体属钩端螺旋体属钩端螺旋体属钩端螺旋体属uu密螺旋体属密螺旋体属密螺旋体属密螺旋体属uu疏螺旋体属疏螺旋体属疏螺旋体属疏螺旋体属Department of Microbiology, Harbin Medical Universi
3、tyuu钩端螺旋体属：螺旋非常细密、规则，一端或钩端螺旋体属：螺旋非常细密、规则，一端或钩端螺旋体属：螺旋非常细密、规则，一端或钩端螺旋体属：螺旋非常细密、规则，一端或两端弯曲呈钩状两端弯曲呈钩状两端弯曲呈钩状两端弯曲呈钩状uu密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖密螺旋体属：螺旋细密规则，两端尖uu疏螺旋体属：螺旋稀疏不规则呈波浪状疏螺旋体属：螺旋稀疏不规则呈波浪状疏螺旋体属：螺旋稀疏不规则呈波浪状疏螺旋体属：螺旋稀疏不规则呈波浪状Department of Microbiology, Harbin Medical Universit
4、y第一节 钩端螺旋体属形态结构与染色螺旋细密而规则螺旋细密而规则镀银染色法染成棕褐色镀银染色法染成棕褐色Department of Microbiology, Harbin Medical University螺旋细密、规则，形似细小珍珠排列的细链。一端或两端呈钩状。运动活泼 ,常使菌体呈C、S或8字型革兰染色阴性，不易着染FontanaFontana镀银染色法镀银染色法染成棕褐色运动活泼1.形态与染色一、生物学性状Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn n培养特性n n营养要求复杂，常用Korthof培养基(含含蛋蛋白白胨
5、胨、磷磷酸酸盐盐、10%兔兔血血清清） 适宜生长温度为2830n n钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢,1-2周才可见。n n需氧或微需氧。Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn抵抗力n n热抵抗力弱，601min即死亡。n n0.2%来苏、1:2000升汞、1%石炭酸经1030min被杀灭。n n对青霉素、庆大霉素敏感。n n在湿土或水中可存活数月Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn n抗原构造与分类(1)抗原分类抗原分类FF属特异性蛋白抗原属特异性蛋白
6、抗原属特异性蛋白抗原属特异性蛋白抗原只存在于钩体属中只存在于钩体属中只存在于钩体属中只存在于钩体属中FF群特异性抗原群特异性抗原群特异性抗原群特异性抗原脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖FF型特异性抗原型特异性抗原型特异性抗原型特异性抗原多糖蛋白复合物多糖蛋白复合物多糖蛋白复合物多糖蛋白复合物根据抗原性不同问号钩体分根据抗原性不同问号钩体分根据抗原性不同问号钩体分根据抗原性不同问号钩体分2525个血清群、个血清群、个血清群、个血清群、273273个个个个血清型血清型血清型血清型我国已发现致病性钩体至少我国已发现致病性钩体至少我国已发现致病性钩体至少我国已发现致病性钩体至少1 19 9群，群，群，群，74
7、74型型型型 (2)DNA分类分类 问号状钩体分问号状钩体分问号状钩体分问号状钩体分7 7个基因种个基因种个基因种个基因种Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn致病物质致病物质uu溶血素溶血素溶血素溶血素FF不耐热，对氧稳定。破坏红细胞膜而溶血。不耐热，对氧稳定。破坏红细胞膜而溶血。不耐热，对氧稳定。破坏红细胞膜而溶血。不耐热，对氧稳定。破坏红细胞膜而溶血。 uu细胞毒因子细胞毒因子细胞毒因子细胞毒因子（CTFCTFCTFCTF）uu内毒素样物质内毒素样物质内毒素样物质内毒素样物质（ELSELSELSELS）FF毒毒毒毒性性
8、性性作作作作用用用用与与与与内内内内毒毒毒毒素素素素相相相相似似似似（脂脂脂脂多多多多糖糖糖糖），但但但但活活活活性性性性较较较较低低低低。可使动物发热，出现炎症与坏死。可使动物发热，出现炎症与坏死。可使动物发热，出现炎症与坏死。可使动物发热，出现炎症与坏死。uu脂酶、脱氢酶等脂酶、脱氢酶等脂酶、脱氢酶等脂酶、脱氢酶等Department of Microbiology, Harbin Medical University所致疾病所致疾病钩端螺旋体病钩端螺旋体病-一种人畜共患传染病一种人畜共患传染病传染源传染源传播途径传播途径鼠和猪鼠和猪经粘膜或破损皮肤进入经粘膜或破损皮肤进入;经胎盘垂直传播
9、经胎盘垂直传播临床表现临床表现进而损伤全身毛细血管内皮细胞进而损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，及肝、肾、肺心及中枢神经，可出现休克、可出现休克、DIC、黄疸、出血、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。心肾功能不全、脑膜炎等。先形成钩体血症：头疼、发热、乏力先形成钩体血症：头疼、发热、乏力疾病特点疾病特点起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结起病急、高热、乏力、全身酸痛、眼结膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大膜充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn n临床表现uu高热、全身酸痛高热
10、、全身酸痛uu眼结膜充血、腓肠肌压痛眼结膜充血、腓肠肌压痛uu表浅淋巴结肿大表浅淋巴结肿大uu可可可可出出出出现现现现休休休休克克克克、黄黄黄黄疸疸疸疸、出出出出血血血血、心心心心肾肾肾肾功功功功能能能能不不不不全全全全、脑脑脑脑膜炎，以肺大出血最为凶险膜炎，以肺大出血最为凶险膜炎，以肺大出血最为凶险膜炎，以肺大出血最为凶险 Department of Microbiology, Harbin Medical UniversityDepartment of Microbiology, Harbin Medical UniversityDepartment of Microbiology, Ha
11、rbin Medical University免疫性n n可获得对同型钩体较持久的免疫力n n以体液免疫为主Department of Microbiology, Harbin Medical University三、微生物学检查法三、微生物学检查法1.1.病原体检测病原体检测 发病发病1010天内取血液天内取血液;1;1周后取尿液周后取尿液; ;有脑膜刺激者取脑脊液有脑膜刺激者取脑脊液 直接镜检直接镜检-有无钩体存在有无钩体存在 分离与鉴定分离与鉴定-接种至接种至KorthofKorthof培养基，置培养基，置2828孵育。孵育。 阳阳性性标标本本：在在2 2周周内内可可见见培培养养液液呈呈
12、轻轻度度混混浊浊暗暗视视野野显显微镜检查微镜检查有有则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。 阴性标本阴性标本: :分离培养应连续观察分离培养应连续观察4 4个月，仍无生长者。个月，仍无生长者。动物接种动物接种 幼龄豚鼠或金地鼠腹腔幼龄豚鼠或金地鼠腹腔分子生物学方法分子生物学方法：PCR PCR 和和 ELASAELASA Department of Microbiology, Harbin Medical University2.血清学诊断血清学诊断病初和发病后第病初和发病后第3 34 4周各采血清一次。有脑膜刺激周各采血清一次。有脑膜刺激 症状者采取脑脊
13、液症状者采取脑脊液方法方法: : 显微镜凝集试验显微镜凝集试验( (MAT)-MAT)-抗原抗体结合发生凝抗原抗体结合发生凝 集集 间接凝集试验间接凝集试验 以乳胶以乳胶 ( (聚苯乙烯聚苯乙烯) )或活性炭微粒为载体，或活性炭微粒为载体， 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物Department of Microbiology, Harbin Medical University四、防治原则四、防治原则防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。防鼠、灭鼠，加强对带菌家畜的管理。在在常常年年流流行行地地区区，对对易易感感人人群群和和与与疫疫水水接接触触者者宜宜接接种种包
14、包含含当当地地流流行行株株在在内内的的多多价钩端螺旋体疫苗。价钩端螺旋体疫苗。治疗：首选青霉素治疗：首选青霉素Department of Microbiology, Harbin Medical University第二节第二节 梅毒梅毒螺旋体属（螺旋体属（T.pallidum ）苍白密螺旋体苍白亚种苍白密螺旋体苍白亚种一一、生物学性状、生物学性状n n形态与染色：形态与染色：uu两端尖直两端尖直,8-14,8-14个规个规则螺旋则螺旋uu3-43-4根内鞭毛根内鞭毛, ,运动活运动活泼泼uu革兰染色阴性，不易革兰染色阴性，不易着染着染uuFontanaFontana镀银染色法镀银染色法染成棕
15、褐色染成棕褐色Department of Microbiology, Harbin Medical UniversityDepartment of Microbiology, Harbin Medical Universityn n不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖n n在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢。在家兔上皮细胞培养中能有限生长，繁殖慢。n n人工培养至今尚未解决。人工培养至今尚未解决。人工培养至今尚未解决。人工培养至今尚未解决。培养抵抗力极弱n n对温度和干燥特别敏感。对温度和干燥特别敏感。对温度和干燥特别敏感。对温度和干燥特别敏感。4 4C
16、 3C 3天天,40,40C 2C 2小时小时. .n n对常用化学消毒剂亦敏感，对常用化学消毒剂亦敏感，1%2%1%2%石炭酸内石炭酸内数分钟就死亡。数分钟就死亡。n n对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。对青霉素、四环素、红霉素或砷剂均敏感。Department of Microbiology, Harbin Medical University致病性与免疫性n n致病物质致病物质 外膜蛋白外膜蛋白-粘附宿主细胞和抗吞噬作用粘附宿主细胞和抗吞噬作用 粘多糖粘多糖粘多糖粘多糖-使内皮细胞间的连接被解离和破坏使内皮细胞间的连接被解离和破坏使内皮细胞间的连接被解离和破坏使内皮细胞间的连接被解离
17、和破坏n n所致疾病-梅毒梅毒 人是梅毒的唯一传染源人是梅毒的唯一传染源 获得性获得性 - - 性接触传播，性接触传播，输血或经体表伤口输血或经体表伤口输血或经体表伤口输血或经体表伤口( ( ( (少见少见少见少见) ) ) ) 先天性先天性 -母体母体胎盘胎盘胎儿胎儿 获得性梅毒获得性梅毒期（初期）梅毒期（初期）梅毒：感染性极强，破坏性小：感染性极强，破坏性小 感染后感染后3 3周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外周左右局部出现无痛性硬下疳，多见于外生殖器，一般生殖器，一般4 48 8周后，常自愈。周后，常自愈。期梅毒期梅毒：感染性强，破坏性小：感染性强，破坏性小 发生于硬下疳出现后发生于硬
18、下疳出现后2 28 8周。周。苍白亚种苍白亚种螺旋体血症，螺旋体血症，全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有全身皮肤、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴结肿大，有时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。时亦累及骨、关节、眼及其他脏器。期期( (晚期晚期) )梅毒梅毒：感染性小，破坏性大：感染性小，破坏性大 发发生生于于感感染染2 2年年以以后后，亦亦可可长长达达10101515年年的的。病病变变可可波波及及全全身身组组织织和和器器官官。基基本本损损害害为为慢慢性性肉肉芽芽肿肿，局局部部组组织织坏坏死死。损损害害常常进进展展和和消消退退交交替替出出现现。皮皮肤肤、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命。肝、脾和骨
19、骼常被累及。可危及生命。Department of Microbiology, Harbin Medical University期（初期）梅毒期（初期）梅毒 Department of Microbiology, Harbin Medical University期梅毒期梅毒 Department of Microbiology, Harbin Medical University期梅毒期梅毒Department of Microbiology, Harbin Medical University期期(晚期晚期)梅毒梅毒 Department of Microbiology, Harbin
20、Medical UniversityDepartment of Microbiology, Harbin Medical Universityn n先先先先天天天天性性性性梅梅梅梅毒毒毒毒（胎胎胎胎传传传传梅梅梅梅毒毒毒毒）：流流流流产产产产、早早早早产产产产或或或或死死死死胎胎胎胎；梅梅梅梅毒毒毒毒儿儿儿儿（马马马马鞍鞍鞍鞍鼻鼻鼻鼻、先先先先天天天天性性性性耳耳耳耳聋聋聋聋、楔楔楔楔状齿、间质性角膜炎等）状齿、间质性角膜炎等）状齿、间质性角膜炎等）状齿、间质性角膜炎等）Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn n以细胞免疫为
21、主n n潜伏期长，属有菌免疫免疫性Department of Microbiology, Harbin Medical University三、微生物学检查法三、微生物学检查法1.标本标本期梅毒期梅毒-硬下疳渗出液硬下疳渗出液期梅毒期梅毒-梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液2.显微镜检查显微镜检查-运动活泼的密螺旋体运动活泼的密螺旋体3.血清学诊断血清学诊断 Department of Microbiology, Harbin Medical University非特异性：非密螺旋体抗原试验非特异性：非密螺旋体抗原试验 抗原抗原( (正常牛心肌的心脂质正常牛心肌的心脂
22、质) )血清中的反应素血清中的反应素( (抗脂质抗脂质抗体抗体) ) 适用于大量过筛适用于大量过筛特异性：密螺旋体抗原试验特异性：密螺旋体抗原试验 抗原（抗原（NicholsNichols株螺旋体）株螺旋体）螺旋体特异抗体螺旋体特异抗体 优点：特异性强，可用作梅毒证实试验优点：特异性强，可用作梅毒证实试验 常用方法：常用方法：FTA-ABSFTA-ABS试验和试验和MHA-TPMHA-TP试验试验其他：其他：PCRPCR和免疫印迹（和免疫印迹（westenwesten blot blot）Department of Microbiology, Harbin Medical University
23、免疫印迹（免疫印迹（westen blot）PCR电泳图电泳图Department of Microbiology, Harbin Medical UniversityDepartment of Microbiology, Harbin Medical University防治原则n n加强性卫生的宣传教育和严格社会管理n n早期确诊并彻底治疗n n青霉素治疗 第三节第三节 疏螺旋体属疏螺旋体属伯氏疏螺旋体伯氏疏螺旋体(B.burgdorferi) 伯氏疏螺旋体是莱姆病（Lyme）的病原体。Department of Microbiology, Harbin Medical Universit
24、y疏螺旋体属（borrelia）n n伯氏疏螺旋体n n回归热疏螺旋体n n奋森螺旋体Department of Microbiology, Harbin Medical University伯氏螺旋体n n螺旋稀疏而两端稍尖，运动活泼n nGiemsa染色法染色呈淡紫色Department of Microbiology, Harbin Medical University致病性n n莱姆病uu人畜共患病，人畜共患病，是一种自然疫源性传染病是一种自然疫源性传染病uu储存宿主：鼠类和鹿储存宿主：鼠类和鹿uu传播媒介：硬蜱传播媒介：硬蜱Department of Microbiology, Ha
25、rbin Medical University致病性n n临床表现uu丘疹丘疹经经经经330d330d潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行潜伏期，在叮咬部位可出现一个或数个慢性移行性红斑性红斑性红斑性红斑(ECM)(ECM) （）（）uu早期早期 乏力、发热、关节炎等乏力、发热、关节炎等uu晚期晚期 慢性关节炎、神经系统异常慢性关节炎、神经系统异常Department of Microbiology, Harbin Medical University免疫性n n人和动物感染伯氏螺旋体，可产生特异性抗体D
26、epartment of Microbiology, Harbin Medical University主要靠血清学试验和分子生物学技术来诊断n n特异性抗体检测uuELISAELISAuu间接免疫荧光法间接免疫荧光法uu微生物学检查Department of Microbiology, Harbin Medical University防治原则n n避免硬蜱的叮咬n n疫苗的使用n n口服四环素、羟氨苄青霉素等Department of Microbiology, Harbin Medical University回归热螺旋体 n n传播媒介为节肢动物uu虱流行性回归热虱流行性回归热uu蜱地
27、方性回归热蜱地方性回归热n n临床表现uu高热、肝脾肿大高热、肝脾肿大uu回归热回归热 回归热疏螺旋体形态银染色，2000Department of Microbiology, Harbin Medical Universityn n回归热是由多种疏螺旋体引起的急性传染病。其临床特点为急起急退的高热，间隔个周，全身肌肉酸痛，1次或多次复发，肝、脾肿大，重症可出现黄疸和出血倾向Department of Microbiology, Harbin Medical University三、奋森螺旋体三、奋森螺旋体n n革兰阴性，培养为厌氧性。革兰阴性，培养为厌氧性。n n正正常常情情况况下下，与与梭梭形形梭梭杆杆菌菌共共寄寄居居在在人人的的口腔、齿龈及咽部，一般不致病。口腔、齿龈及咽部，一般不致病。n n条条件件感感染染，引引起起奋奋森森咽咽峡峡炎炎，溃溃疡疡性性口口腔腔炎等。炎等。n n预预防防要要注注意意口口腔腔清清洁洁卫卫生生及及防防止止感感染染。治治疗可用青霉素、四环素等。疗可用青霉素、四环素等。Department of Microbiology, Harbin Medical University课后题钩端螺旋体和梅毒螺旋体的致病性钩端螺旋体和梅毒螺旋体的致病性
