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2、酶酶、普通、普通、普通、普通的的的的DNADNA聚合聚合聚合聚合酶酶酶酶等等等等耐耐耐耐热热热热的的的的DNADNA聚合聚合聚合聚合酶酶酶酶(Taq(Taq聚合聚合聚合聚合酶酶酶酶) )温度温度温度温度条件条件条件条件细细细细胞内温和条件胞内温和条件胞内温和条件胞内温和条件需控制温度，在需控制温度，在需控制温度，在需控制温度，在较较较较高高高高温度下温度下温度下温度下进进进进行行行行合成的合成的合成的合成的对对对对象象象象DNADNA分子分子分子分子DNADNA片段或基因片段或基因片段或基因片段或基因联联联联系系系系模板：均需要脱氧核苷酸模板：均需要脱氧核苷酸模板：均需要脱氧核苷酸模板：均需要
3、脱氧核苷酸链链链链作作作作为为为为模板模板模板模板进进进进行行行行物物物物质质质质合成合成合成合成原料：均原料：均原料：均原料：均为为为为四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸酶酶酶酶：均需要：均需要：均需要：均需要DNADNA聚合聚合聚合聚合酶酶酶酶进进进进行催化行催化行催化行催化引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使引物：均需要引物，使DNADNA聚合聚合聚合聚合酶酶酶酶从引物从引物从引物从引物的的的的33端开始端开始端开始端开始连连连连接脱氧核苷酸接脱氧核苷酸接脱氧核苷酸接脱氧核苷酸受体受体受体受体细细细细胞胞胞胞方法方法方法方法植物植物植物植物细
4、细细细胞胞胞胞( (体体体体细细细细胞胞胞胞) )农农农农杆菌杆菌杆菌杆菌转转转转化法：目的基因插入化法：目的基因插入化法：目的基因插入化法：目的基因插入TiTi质质质质粒的粒的粒的粒的T-DNAT-DNA农农农农杆菌杆菌杆菌杆菌导导导导入植物入植物入植物入植物细细细细胞胞胞胞稳稳稳稳定定定定维维维维持和表达持和表达持和表达持和表达基因基因基因基因枪枪枪枪法：是法：是法：是法：是单单单单子叶植物中常用的一种子叶植物中常用的一种子叶植物中常用的一种子叶植物中常用的一种基因基因基因基因转转转转化方法，但是成本化方法，但是成本化方法，但是成本化方法，但是成本较较较较高高高高花粉管通道法：花粉管通道法
5、：花粉管通道法：花粉管通道法：这这这这是我国科学家独是我国科学家独是我国科学家独是我国科学家独创创创创的的的的一种方法，是一种十分一种方法，是一种十分一种方法，是一种十分一种方法，是一种十分简简简简便便便便经济经济经济经济的方法的方法的方法的方法动动动动物物物物细细细细胞胞胞胞( (受精卵受精卵受精卵受精卵) )显显显显微注射法：含有目的基因微注射法：含有目的基因微注射法：含有目的基因微注射法：含有目的基因的表达的表达的表达的表达载载载载体提体提体提体提纯纯纯纯取卵取卵取卵取卵( (受精受精受精受精卵卵卵卵) )显显显显微注射微注射微注射微注射受精卵受精卵受精卵受精卵发发发发育育育育获获获获得
6、具有新性状的得具有新性状的得具有新性状的得具有新性状的动动动动物物物物微生物微生物微生物微生物细细细细胞胞胞胞( (原核原核原核原核细细细细胞胞胞胞) )CaCa2 2处处处处理理理理细细细细胞胞胞胞感受感受感受感受态细态细态细态细胞胞胞胞表达表达表达表达载载载载体与感受体与感受体与感受体与感受态细态细态细态细胞混胞混胞混胞混合合合合感受感受感受感受态细态细态细态细胞吸收胞吸收胞吸收胞吸收DNADNA分分分分子子子子目的基因随受体目的基因随受体目的基因随受体目的基因随受体细细细细胞的胞的胞的胞的繁殖而复制繁殖而复制繁殖而复制繁殖而复制比比比比较较较较起始起始起始起始( (终终终终止止止止) )
7、密密密密码码码码子子子子启启启启动动动动( (终终终终止止止止) )子子子子本本本本质质质质三个相三个相三个相三个相邻邻邻邻碱基碱基碱基碱基DNADNA片段片段片段片段位置位置位置位置位于位于位于位于mRNAmRNA上上上上位于位于位于位于DNADNA上上上上作用作用作用作用启启启启动动动动( (终终终终止止止止) )翻翻翻翻译译译译启启启启动动动动( (终终终终止止止止) )转录转录转录转录类类类类型型型型步步步步骤骤骤骤检测检测检测检测内容内容内容内容方法方法方法方法结结结结果果果果显显显显示示示示分子分子分子分子水平水平水平水平检测检测检测检测第一步第一步第一步第一步目的基因是目的基因是
8、目的基因是目的基因是否否否否进进进进入受体入受体入受体入受体细细细细胞胞胞胞DNADNA分子分子分子分子杂杂杂杂交交交交(DNA(DNA和和和和DNADNA之之之之间间间间) )是否成功是否成功是否成功是否成功显显显显示出示出示出示出杂杂杂杂交交交交带带带带第二步第二步第二步第二步目的基因是目的基因是目的基因是目的基因是否否否否转录转录转录转录出出出出mRNAmRNA分子分子分子分子杂杂杂杂交交交交技技技技术术术术(DNA(DNA和和和和mRNAmRNA之之之之间间间间) )是否成功是否成功是否成功是否成功显显显显示出示出示出示出杂杂杂杂交交交交带带带带第三步第三步第三步第三步目的基因是目的基
9、因是目的基因是目的基因是否翻否翻否翻否翻译译译译出蛋出蛋出蛋出蛋白白白白质质质质抗原抗原抗原抗原抗抗抗抗体体体体杂杂杂杂交交交交是否成功是否成功是否成功是否成功显显显显示出示出示出示出杂杂杂杂交交交交带带带带个体个体个体个体水平水平水平水平鉴鉴鉴鉴定定定定需要做抗虫、抗病的接种需要做抗虫、抗病的接种需要做抗虫、抗病的接种需要做抗虫、抗病的接种实验实验实验实验，以确定是，以确定是，以确定是，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程否有抗性以及抗性的程度；基因工程否有抗性以及抗性的程度；基因工程否有抗性以及抗性的程度；基因工程产产产产品品品品与天然与天然与天然与天然产产产产品的功能品的功能品的功能品的功能进进进进行活性比行活性比行活性比行活性比较较较较，以确定，以确定，以确定，以确定二者的功能活性是否相同等二者的功能活性是否相同等二者的功能活性是否相同等二者的功能活性是否相同等
