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1、1临床实验室风险评估临床实验室风险评估医学检验中心医学检验中心张朝霞张朝霞2大纲要求大纲要求教学目的教学目的: : 在学习常用的血栓与止血的检测的基础上,在学习常用的血栓与止血的检测的基础上,学会常用项目的临床意义,正确地选用检验项目。学会常用项目的临床意义,正确地选用检验项目。教学要求教学要求: :1 1、掌握:、掌握:PTPT、APTTAPTT、PLTPLT的参考值,临床意义。的参考值,临床意义。2 2、熟悉:临床、熟悉:临床常见出血性疾病的实验诊断。常见出血性疾病的实验诊断。3 3、了解:、了解:正常止血与凝血机制。正常止血与凝血机制。3止血与血栓检测的应用止血与血栓检测的应用手术前病人
2、出凝血机能检查手术前病人出凝血机能检查抗凝及溶栓治疗效果的监测抗凝及溶栓治疗效果的监测血栓性及血栓性及DICDIC疾病的预测和诊断疾病的预测和诊断凝血因子缺乏及出血性疾病疾病的诊断凝血因子缺乏及出血性疾病疾病的诊断掌握掌握4常用止血与凝血检测内容常用止血与凝血检测内容一、止血一、止血: :二、凝血二、凝血: :三、抗凝:三、抗凝:四、纤溶:四、纤溶:掌握掌握5(二)血小板的作用(二)血小板的作用熟悉熟悉止血止血: : 血管损伤后自然出血到自血管损伤后自然出血到自然仃止的过程然仃止的过程. .止血的基本过程:止血的基本过程:血管收缩血管收缩血小板凝聚成白色血栓血小板凝聚成白色血栓形成纤维蛋白凝块
3、形成纤维蛋白凝块ClotFormationClotDissolution6(二)血小板的作用(二)血小板的作用熟悉熟悉止血主要相关因素止血主要相关因素: :血管壁的结构、功能,血管壁的结构、功能,血小板的质和量血小板的质和量部分凝血因子有关部分凝血因子有关( (血管性假血友病因子血管性假血友病因子vWFvWF致血致血小板的粘附聚集功能发生障碍小板的粘附聚集功能发生障碍 ,由内皮细胞、,由内皮细胞、巨核细胞及血小板合成巨核细胞及血小板合成 ) )。7熟悉熟悉止血相关的检测项目:筛查:包括出血时间(BT)、血小板计数(PLT)、血块收缩时间(CRT)。进一步检查:1)血管内皮细胞功能检测2)血小板
4、体积 (MPV)、血小板功能检测(包括血小板粘附、聚集和释放试验)。3) 血小板相关抗体测定4)VWF检测8熟悉熟悉血液由流动的液体状态转变成不流动的凝胶状态称为血液凝固。 主要与凝血因子 有关( (二二) ) 凝凝 血血9IIaCa2+VIII-VIIIaIIIPlt-PF3Ca2+IIaXaVVaCa2+正常凝血过程(瀑布学说)正常凝血过程(瀑布学说)PF3磷脂磷脂凝血酶原凝血酶原(II)凝血酶凝血酶(IIa)纤维蛋白原纤维蛋白原(I)可溶性纤维蛋白可溶性纤维蛋白稳固性纤维蛋白稳固性纤维蛋白 内源性途径内源性途径 胶原等带负电荷表面胶原等带负电荷表面PKaPKXIIXIIaHMWK 外源性
5、途径外源性途径 组织损伤释放组织损伤释放组织因子(组织因子(IIIIII)XIXIaIIaIXIXaVIIaVIIXIIIXIIIa参加因子:参加因子:所需时间:所需时间:XXXaXa(凝血旁路)(凝血旁路)VIII、IX、XI、XIIV、X、II、IIII、VIICaCa2+2+、PFPF3 3、磷脂、磷脂38min10常用凝血筛选试验常用凝血筛选试验内内源源性性凝凝血血途途径径外源性凝血途径外源性凝血途径共同途径共同途径凝固凝固CT,aPTT PTTT/Fib11内源性凝血途径试验内源性凝血途径试验( (aPTT)PF3白陶土Ca艹 测定凝固所需的时间 甲、乙、丙血友病vWF缺乏(VIII
6、-R)严重的肝脏疾病使用抗凝剂治疗DICXIIXICa+Ca+Ca+IVIIIIXVIXVIIICa+12外源性凝血途径试验外源性凝血途径试验 组织凝血活酶组织凝血活酶 磷脂磷脂 CaCa艹艹 测定凝固所需的时间测定凝固所需的时间VIIVII、V V、X X、IIII、I I、XIIIXIII因子因子缺乏缺乏VITKVITK缺乏缺乏严重的肝脏疾病严重的肝脏疾病使用抗凝剂治疗使用抗凝剂治疗DICDICXIIXICa+Ca+Ca+IVIIIIXVIXVIIICa+13XIIIaXIIIaXIIIXIIIXIIIXIII凝血酶凝血酶纤维纤维蛋白蛋白纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋纤维蛋白单体白单体IXaI
7、XaXaXaVaVaVaVa凝血酶原凝血酶原(Prothrombinase)(Prothrombinase)PL, CaPL, Ca2+2+VIIIaVIIIaVIIIaVIIIaPL, CaPL, Ca2+2+X X X X共同途径共同途径共同途径共同途径共同途径因共同途径因子子: V, X, : V, X, XIII, II, XIII, II, I I14共同途径试验共同途径试验 (TT(TT、FIB)FIB)Ca+Ca+IIIXV 凝血酶凝血酶测定凝固所需的时间测定凝固所需的时间DICDIC使用抗凝剂治疗使用抗凝剂治疗FIBFIB是急性时相反应蛋白是急性时相反应蛋白FIBFIB由肝脏合
8、成由肝脏合成15血浆纤维蛋白原测定血浆纤维蛋白原测定(fibrinogen, Fgfibrinogen, Fg ) 正常值正常值 2 24g/L4g/L增高:妊娠、心梗、急性肾炎、恶性肿瘤等。增高:妊娠、心梗、急性肾炎、恶性肿瘤等。降低:降低:DIC、原发性纤溶症、重症肝炎等。、原发性纤溶症、重症肝炎等。16熟悉熟悉诊断试验血浆纤维蛋白原定量血浆因子、和促凝活性测定血浆因子、促凝活性测定血浆因子定性试验可溶性纤维蛋白单体复合物测定17三个体系三个体系抗凝血酶抗凝血酶-III-III、蛋白蛋白C C系统、系统、组织因子途径抑制物。组织因子途径抑制物。 三、抗凝血三、抗凝血18( (一一) ) 抗
9、凝血途径抗凝血途径( (蛋白蛋白C)C) FVIIIaFXaFXFVaPL,Ca2+凝血酶原凝血酶原凝血酶凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白蛋白蛋白C活化蛋白活化蛋白CAPCThrombin-ThrombomodulinComplexFV蛋白蛋白S灭活灭活纤溶酶原激活剂抑制物纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI-3)(PAI-3)a a1 1抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶 ( (抑制凝血酶因子抑制凝血酶因子aa、纤溶酶、纤溶酶 ) )a a2 2巨球蛋白巨球蛋白 ( (抑制纤溶酶抑制纤溶酶 ) )19(二二)抗凝血途径抗凝血途径(ATIII)蛋白C(肝产生)活化蛋白C(APC) 灭活a、a、 阻碍a生
10、成及作用。血栓调理蛋白(TM)内皮细胞表面与凝血酶结合,激活蛋白C 凝血酶凝血酶原凝血活性AT(丝氨酸蛋白酶抑制物) 肝素抑制凝血酶活性20纤维蛋白纤维蛋白纤维蛋白纤维蛋白FXaFXaFXaFXaVaVaVaVa纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白原PLPLPLPLFXFXFXFX( (二二) ) 抗凝血途径抗凝血途径(TFPI)(TFPI)抗凝血酶抗凝血酶IIIIIITFTFTFTFFVIIaFVIIaFVIIaFVIIaTFPITFPI可与可与a和和a形形成无活性的复合物成无活性的复合物 Heparin Heparin (cofact(cofactor)or)21筛查:PT、APTT、T
11、T延长,FIB正常进一步检查: AT-活性与抗原测定 、蛋白C系统检测 、组织因子途径抑制物(TFPI)检测 、肝素 22(四)、纤(四)、纤 维维 蛋蛋 白白 溶溶 解解 系系 统统23纤维蛋白降解产物纤维蛋白降解产物测定临床意义测定临床意义 增高见于原发与继发性纤溶亢进(DIC)、恶性肿瘤、白血病、肺栓塞、深部静脉血栓形成和各种疾病引起的休克,溶栓治疗时FDP可显著增高。24D-二聚体测定临床意义 D二聚体在原发性纤溶亢进症时正常,在继发性纤溶亢进则显著增高,是两者鉴别的重要标志。增高见于深部静脉血栓形成、肺梗塞、DIC、继发性纤溶亢进等疾病。25纤溶亢进筛检试验的选择与应用纤溶亢进筛检试
12、验的选择与应用FDPsD-D结果判断疾病NN纤溶活性正常,临床症状可能与纤溶症无关+-原发性纤溶DIC-+继发性纤溶DIC+继发性纤溶DIC和溶栓治疗后26血血栓栓和和止止血血检检查查Tests of thrombus and haemostasis?原发性血小板增多症原发性血小板增多症血小板数量增加血小板数量增加vWD血小板功能异常,血小板功能异常, 凝血因子缺乏凝血因子缺乏过敏性紫癜过敏性紫癜单纯血管通透性和脆性增加单纯血管通透性和脆性增加 所致的血管性紫癜所致的血管性紫癜特发性血小板特发性血小板血小板数量减少血小板数量减少减少性紫癜减少性紫癜BTPltBTPltBTPltBTPlt27男
13、,21岁,因骑自行车时膝关节受伤,血肿达半月不消,检验结果:血小板180109/L,BT5min(Ivy法),CT23min(玻璃试管法),APTT90s(对照30s),PT14s(正常对照12s)。 最可能诊断是:A. 血友病 B. 因子缺乏症 C. 血管性血友病D. 原发性纤溶亢进 E因子缺乏症 哪种检查最有诊断价值? A.出血时间B束臂试验C. 因子:C检查 TT D.血块退缩试验 E.抗人球蛋白试验28(二)血小板的作用(二)血小板的作用熟悉熟悉29掌握掌握1 1纤纤2 2凝凝3 3组织组织4 4钙钙5 5变变7 7稳定稳定8 8甲甲9 9乙乙1010前期前期1111前质前质1212触
14、触1313纤稳不忘记纤稳不忘记(三)凝血因子的作用(三)凝血因子的作用3031二、出血与血栓性疾病的分类二、出血与血栓性疾病的分类(一)出血性疾病(一)出血性疾病1 1、一期止血缺陷、一期止血缺陷 血管因素、血小板因素血管因素、血小板因素2 2、二期止血缺陷、二期止血缺陷 凝血因子减少或结构异常,病理抗凝物质凝血因子减少或结构异常,病理抗凝物质3 3、纤溶活性亢进、纤溶活性亢进 遗传性、获得性遗传性、获得性4 4、综合性因素、综合性因素 DICDIC、重症肝病等、重症肝病等熟悉熟悉32(二)血栓性疾病(二)血栓性疾病先天性疾病先天性疾病缺乏抗凝血因子活性、缺乏抗凝血因子活性、缺乏纤溶活性缺乏纤
15、溶活性获得性疾病获得性疾病血液病、非血液病、血液病、非血液病、治疗引起治疗引起33三、毛细血管壁的常用检验三、毛细血管壁的常用检验掌握掌握(一)毛细血管抵抗力试(一)毛细血管抵抗力试验验(CRT)(CRT)(二)出血时间测定(二)出血时间测定(BT)(BT)(三)血管性血友病因子(三)血管性血友病因子抗原抗原(vWF:Ag)(vWF:Ag)测定测定34(一)毛细血管抵抗力试验(一)毛细血管抵抗力试验(CRT)(CRT)又称毛细血管脆性试验或又称毛细血管脆性试验或束臂试束臂试验验。【参考值参考值】直径直径5cm圆圈内新出圆圈内新出血点的数目:男性小于血点的数目:男性小于5个;女个;女性及儿童小于
16、性及儿童小于10个。个。【临床意义临床意义】阳性见于:阳性见于:遗传遗传性出血性毛细血管扩张症;性出血性毛细血管扩张症;过过敏性紫癜;敏性紫癜;维生素维生素C或或P缺乏症;缺乏症;原发性和继发性血小板减少症,原发性和继发性血小板减少症,血小板增多症,先天性和获得性血小板增多症,先天性和获得性血小板功能缺陷症;血小板功能缺陷症;血管性血血管性血友病友病vWD)等。等。35(二)出血时间测定(二)出血时间测定(bleeding timebleeding time,BTBT)原理:刺破毛细血管后血液自然流出到自然原理:刺破毛细血管后血液自然流出到自然停止所需的时间停止所需的时间影响因素:血小板的数量
17、、功能以及血管壁影响因素:血小板的数量、功能以及血管壁的通透性、脆性的变化的通透性、脆性的变化参考值:出血时间测定器法参考值:出血时间测定器法6.92.16.92.1分钟分钟临床意义:延长见于血小板明显减少,血小临床意义:延长见于血小板明显减少,血小板功能异常,凝血因子缺乏,血管异常,药板功能异常,凝血因子缺乏,血管异常,药物干扰等。物干扰等。熟悉熟悉36了解了解37(三)血管性血友病因子抗原(三)血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)(vWF:Ag)测定测定【参考值参考值】94.194.132.532.5。【临床意义临床意义】 1 1减低减低 见于血管性血友病(见于血管性血友病(vWDvWD)
18、,是诊断),是诊断vWDvWD及其分型的指标之一。及其分型的指标之一。 2 2增高增高 见于见于血栓性疾病:如急性心肌梗死、血栓性疾病:如急性心肌梗死、心绞痛、脑血栓形成等;心绞痛、脑血栓形成等;肾脏疾病:急性肾炎、肾脏疾病:急性肾炎、肾病综合征、慢性肾炎等;肾病综合征、慢性肾炎等;其他:妊娠高血压其他:妊娠高血压综合征、糖尿病、大手术后等。综合征、糖尿病、大手术后等。熟悉熟悉38四、血小板的常用检验四、血小板的常用检验(一)血小板计数、血小板平均容积和血小板分(一)血小板计数、血小板平均容积和血小板分布宽度测定布宽度测定熟悉熟悉39一一) )正常参考值:正常参考值: (100-300100-
19、300)10109 9/L/L二二) )临床意义:临床意义:1.1.生理变化生理变化 1)1)正常人每天正常人每天PLTPLT可波动数有可波动数有6%10%6%10%的波动。的波动。2)2)剧剧烈烈活活动动和和饱饱餐餐后后血血小小板板增增加加,休休息息后后又又可恢复到原来水平。可恢复到原来水平。3)3)妇女经期前少,经期后逐渐上升。妇女经期前少,经期后逐渐上升。4)4)妊娠中晚期升高,分娩后妊娠中晚期升高,分娩后1212天降低。天降低。5)5)新生儿比婴儿低,出生三个月后才达到成新生儿比婴儿低,出生三个月后才达到成人水平。人水平。 掌握掌握40 2.2.病理变化病理变化 A.A.增加可见于增加
20、可见于 1)1)可可见见于于反反应应性性增增多多:如如急急性性大大出出血血及及溶溶血血、手手术术后后、慢慢性性化化脓脓性性感感染染、许许多多恶恶性性肿瘤的早期、肾移植发生排异现象时。肿瘤的早期、肾移植发生排异现象时。 2)2)原原发发性性增增多多:真真性性红红细细胞胞增增多多症症、慢慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤。性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤。 B. PLTB. PLT减少可见于:减少可见于: 1)1)生生成成减减少少: :再再障障,急急性性白白血血病病,药药物物中中毒。毒。 2)PLT2)PLT破坏增多破坏增多, ,免疫性免疫性PLTPLT减少、脾亢。减少、脾亢。 3)PLT3)PLT消
21、耗增加消耗增加,DIC DIC 掌握掌握41三)血小板的异常形态三)血小板的异常形态 了解了解42(二)血小板粘附试验(二)血小板粘附试验(platelet adhesion test ,PAdT)(platelet adhesion test ,PAdT)【参考值参考值】玻璃柱法:玻璃柱法:62.562.58.618.61 ( (瑞金医院瑞金医院) );玻璃球旋转法:玻璃球旋转法:34.934.95.955.95( (中国医学科学院血液中国医学科学院血液学研究所学研究所) );玻璃滤器法:玻璃滤器法:31.931.910.910.9( (苏州医院苏州医院) )。【临床意义临床意义】1 1PA
22、dTPAdT增高增高 见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗见于血栓前状态和血栓性疾病,如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、深静脉血栓形成、肾小球病变、死、心绞痛、糖尿病、深静脉血栓形成、肾小球病变、妊娠高血压综合征、口服避孕药等。妊娠高血压综合征、口服避孕药等。2 2PAdTPAdT减低减低 见于血小板无力症、血管性血友病见于血小板无力症、血管性血友病(vWD)(vWD)、巨大血小板综合征、骨髓增生异常综合征巨大血小板综合征、骨髓增生异常综合征(MDS)(MDS)、纤维、纤维蛋白原血症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、服用抗蛋白原血症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、服用抗血小板药物等。血小板药物等。掌握
23、掌握43(三)血小板聚集试验(三)血小板聚集试验(platelet aggregation test, PAgT)(platelet aggregation test, PAgT)【参考值参考值】血小板聚集图像的参考值见表血小板聚集图像的参考值见表2-172-17。【临床意义临床意义】 1 1PAgTPAgT减低减低 见于血小板无力症、巨大血小板综见于血小板无力症、巨大血小板综合征、低合征、低( (无无) )纤维蛋白原血症、尿毒症、肝硬化、纤维蛋白原血症、尿毒症、肝硬化、贮存池病、骨髓增生性疾病、急性白血病、服用抗贮存池病、骨髓增生性疾病、急性白血病、服用抗血小板药物等。血小板药物等。 2 2
24、PAgTPAgT增高增高 反应血小板聚集功能增强,见于血反应血小板聚集功能增强,见于血栓前状态和血栓性疾病,如急性心肌梗死、心绞痛、栓前状态和血栓性疾病,如急性心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、深部静糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、深部静脉血栓形成脉血栓形成(DVT)(DVT)、口服避孕药、抗原、口服避孕药、抗原- -抗体复合物抗体复合物反应、人工瓣膜等。反应、人工瓣膜等。掌握掌握44(四)(四)血块收缩试验血块收缩试验(clot retraction test,CRT)(clot retraction test,CRT)血块收缩率血块收缩率( ()=)=血清血清(
25、m1)(m1)全血全血(m1)(100(m1)(100HctHct)100)100。【参考值参考值】65.865.811.011.0。【临床意义临床意义】 1 1血块收缩不良或不收缩血块收缩不良或不收缩 见于血小板无力症、见于血小板无力症、ITPITP、低、低(无)纤维蛋白原血症、多发(无)纤维蛋白原血症、多发性骨髓瘤、红细胞增多症等。性骨髓瘤、红细胞增多症等。 2 2血块收缩过度血块收缩过度 见于先天见于先天性和凝血因子性和凝血因子XIIIXIII缺乏症等。缺乏症等。掌握掌握45五、凝血因子的常用检验五、凝血因子的常用检验掌握掌握CT(内源性)APTT(内源性)FIB(共同)PT(外源性)4
26、647(一)全血凝固时间测定(一)全血凝固时间测定(clotting time,CT)(clotting time,CT)一一) )原理原理: : 血液离开血管至血液离开血管至自然凝固所需要自然凝固所需要的时间。的时间。二二) )参考值:参考值: 试试管管法法 4 41212分分钟钟三三)临临床床意意义义:与与APTTAPTT相同相同熟悉熟悉48(二)活化部分凝血活酶时间(二)活化部分凝血活酶时间(APTT(APTT)原理:取抗凝血浆,用原理:取抗凝血浆,用激活剂激活剂激活激活因子,因子,加入磷脂和加入磷脂和CaCa2+2+, ,观察其凝固时间。观察其凝固时间。参考值:参考值: 3243S32
27、43S 病病人人结结果果较较正正常常对对照照延延长长1010秒秒以以上上有有病病理意义。理意义。熟悉熟悉49三)三)APTTAPTT延长临床意义:延长临床意义:1.VIII1.VIII、IXIX、XIXI因因子子的的严严重重减减少少,如如甲甲型型、乙乙型、丙型血友病和血管性假血友病。型、丙型血友病和血管性假血友病。2.2.严严重重的的因因子子、和和纤纤维维蛋蛋白白原原减减少少或或缺缺乏乏, ,如如先先天天性性无无纤纤维维蛋蛋白白原原血血症症、重重症症肝脏疾病等。肝脏疾病等。3.3.纤维蛋白溶解活性增强,纤维蛋白溶解活性增强, 常见于常见于DICDIC。4.4.血血循循环环中中有有抗抗凝凝物物质
28、质,如如用用肝肝素素、华华法法令令、双香豆素等药物治疗时。双香豆素等药物治疗时。 掌握掌握50(三)凝血酶原时间(三)凝血酶原时间(PTPT)原理:将抗凝血浆加入原理:将抗凝血浆加入组织因子和组织因子和CaCa2+2+, ,观察其凝固时间。观察其凝固时间。参考值:参考值:11111313秒秒报告方式:时间(秒)报告方式:时间(秒)比值(比值(PTRPTR) 病人病人PT/PT/混合血浆混合血浆PTPT国际标准化比值(国际标准化比值(INRINR)= PTR= PTRISIISIISI = ISI = 国际敏感指数国际敏感指数熟悉熟悉5152临床意义临床意义: :延长见于延长见于1.1.维维生生
29、素素K K不不足足:凝凝血血酶酶原原及及第第、因子的合成都需要维生素因子的合成都需要维生素K K。 (1) (1) 维维生生素素K K的的来来源源:绿绿叶叶食食物物含含K1K1,蛋蛋黄、肝含黄、肝含K2K2。胆汁可促进维生素。胆汁可促进维生素K K的吸收。的吸收。 (2)(2)维维生生素素K K缺缺乏乏的的原原因因:大大量量服服用用抗抗菌菌素素、慢性腹泻、新生儿肠道无菌慢性腹泻、新生儿肠道无菌, ,阻塞性黄疸阻塞性黄疸. .掌握掌握53 2.2.广泛而严重的肝实质损伤广泛而严重的肝实质损伤 3.DIC 3.DIC 4.4.其它:新生儿自然出血症、先天性凝血其它:新生儿自然出血症、先天性凝血酶元
30、缺乏症、先天性纤维蛋白原缺乏症,酶元缺乏症、先天性纤维蛋白原缺乏症,抗凝治疗时。抗凝治疗时。PTPT缩短见于缩短见于: 血栓前状态或血栓性疾病、血栓前状态或血栓性疾病、DICDIC早期及口早期及口服避孕药等。服避孕药等。 掌握掌握54(四)单个凝血因子测定方法(四)单个凝血因子测定方法免疫学法:抗原、抗体反应免疫学法:抗原、抗体反应凝固法:观察待测血浆所含因子活性凝固法:观察待测血浆所含因子活性相当于正常人的活性的百分比相当于正常人的活性的百分比熟悉熟悉55因子测定因子测定纤维蛋白原(因子纤维蛋白原(因子)测定)测定血浆因子血浆因子、和和XIIXII促凝活性测定促凝活性测定血浆因子血浆因子II
31、II、V V、X X促凝活性测定促凝活性测定熟悉熟悉56(五)凝血项目检查测定注意事项(五)凝血项目检查测定注意事项抗凝剂:抗凝剂:10109 9mmol/Lmmol/L枸橼酸钠溶枸橼酸钠溶液液抗凝剂与标本比例为抗凝剂与标本比例为1:91:9标本勿溶血、凝血标本勿溶血、凝血标本采集、运送应在规定时间内标本采集、运送应在规定时间内完成完成了解了解57六、抗凝因子的常用检验六、抗凝因子的常用检验 (一)血浆抗凝血酶活性(一)血浆抗凝血酶活性 (antithrombin (antithrombin activity,AT:A)activity,AT:A)(二)蛋白(二)蛋白C C活性活性 (prot
32、ein C (protein C activity, PC:A)activity, PC:A)(三)血浆普通肝素定量(三)血浆普通肝素定量(heparin quantitativeheparin quantitative)熟悉熟悉58(一)血浆抗凝血酶活性(一)血浆抗凝血酶活性 (antithrombin activity,AT:A)(antithrombin activity,AT:A)【参考值参考值】108.5108.55.35.3。【临床意义临床意义】1 1增高增高 见于血友病、白血病和再生障见于血友病、白血病和再生障碍贫血等的急性期、口服抗凝剂、应用碍贫血等的急性期、口服抗凝剂、应用黄
33、体酮等。黄体酮等。 2 2减低减低 见于先天性和获得性见于先天性和获得性ATAT缺乏症,缺乏症,后者见于肝脏疾病、后者见于肝脏疾病、DICDIC、外科手术后、外科手术后、血栓前状态和血栓性疾病。血栓前状态和血栓性疾病。熟悉熟悉59(二)蛋白(二)蛋白C C活性活性 (protein C activity, PC:A)(protein C activity, PC:A)【原理】蛋白【原理】蛋白C C活性测定采用发色底物法,受检活性测定采用发色底物法,受检血浆中加入特异激活剂,在血浆中加入特异激活剂,在PCPC转变为活化转变为活化PC(APC)PC(APC)后作用于发色底物后作用于发色底物chro
34、mozym-9chromozym-9,释放产,释放产色基团对硝基苯胺色基团对硝基苯胺 (PNA) (PNA),显色深浅与,显色深浅与APCAPC呈线呈线性关系。性关系。 【参考值】【参考值】100.2100.213.1813.18。 【临床意义】【临床意义】PC:APC:A减低:见于先天性或获得性减低:见于先天性或获得性PCPC缺乏症,后者见于缺乏症,后者见于DICDIC,肝脏疾病,手术后,肝脏疾病,手术后,口服抗凝剂,急性呼吸窘迫综合征等。口服抗凝剂,急性呼吸窘迫综合征等。APCRAPCR现象:现象:因子对因子对APCAPC的抵抗现象。的抵抗现象。熟悉熟悉60(三)血浆普通肝素定量(三)血浆
35、普通肝素定量(heparin quantitativeheparin quantitative)【原理原理】肝素与肝素与ATAT结合形成结合形成1 1:1 1的复合物的复合物可灭活凝血酶和因子可灭活凝血酶和因子XaXa,在加入的过量因,在加入的过量因子子XaXa的反应中,测定剩余因子的反应中,测定剩余因子XaXa对基质血对基质血浆的促凝活性,基质血浆与标本中的肝素浆的促凝活性,基质血浆与标本中的肝素含量呈正相关。含量呈正相关。 【参考值参考值】0.0050.1 IU0.0050.1 IUmlml。 【临床意义临床意义】用于监测肝素的合理用量,用于监测肝素的合理用量,血浆肝素浓度以血浆肝素浓度以
36、0.20.20.4IU0.4IUmlml为宜。为宜。熟悉熟悉61七、纤溶活性的检测七、纤溶活性的检测(一(一) )血浆凝血酶时间测定血浆凝血酶时间测定 (thrombin time,TT)(thrombin time,TT)(二)血浆(二)血浆D-D-二聚体测定二聚体测定 (D-dimer,DD)(D-dimer,DD)熟悉熟悉62(一(一) )血浆凝血酶时间测定血浆凝血酶时间测定 (thrombin time,TT)(thrombin time,TT)【原理原理】血浆凝血酶时间测定:受检血浆中加血浆凝血酶时间测定:受检血浆中加入标准化的凝血酶溶液后,在凝血酶的作用下,入标准化的凝血酶溶液后,
37、在凝血酶的作用下,纤维蛋白原转变成纤维蛋白,使血浆凝固所需纤维蛋白原转变成纤维蛋白,使血浆凝固所需的时间为凝血酶时间。的时间为凝血酶时间。【参考值参考值】正常对照为正常对照为161618s18s,比正常对照,比正常对照延长延长3s3s以上为异常。以上为异常。【临床意义临床意义】TTTT延长见于延长见于DICDIC纤溶亢进期、低纤溶亢进期、低( (无无) )纤维蛋白原血症及异常纤维蛋白原血症、纤维蛋白原血症及异常纤维蛋白原血症、血中有肝素或类肝素物质存在(如肝素治疗中、血中有肝素或类肝素物质存在(如肝素治疗中、肝脏疾病、肝脏疾病、SLESLE等)。等)。TTTT缩短无临床意义。缩短无临床意义。熟
38、悉熟悉6364(二)血浆(二)血浆D-D-二聚体测定二聚体测定 (D-dimer,DD)(D-dimer,DD)【原理原理】 1 1胶乳凝集法胶乳凝集法 在受检血浆中加入标有抗在受检血浆中加入标有抗D-D-二聚体单抗的胶乳颗二聚体单抗的胶乳颗粒悬液,如血浆中粒悬液,如血浆中DDDD含量含量0.5mg0.5mgL L,则胶乳颗粒发生凝集反应。,则胶乳颗粒发生凝集反应。2 2ELISAELISA法法 抗抗DDDD抗体具有较高的特异性,仅与血浆中抗体具有较高的特异性,仅与血浆中DDDD发生反应,发生反应,将此单抗包被固相载体,加入受检血浆后,加酶标记的抗体,再将此单抗包被固相载体,加入受检血浆后,加
39、酶标记的抗体,再加入底物显色,显色深浅与加入底物显色,显色深浅与DDDD含量呈正相关。含量呈正相关。【参考值参考值】胶乳凝集法:为阴性;胶乳凝集法:为阴性;ELISAELISA法:小于法:小于200g200gL L。【临床意义临床意义】 1 1DDDD是纤溶酶作用于交联纤维蛋白的特异性分子标记物,在继发是纤溶酶作用于交联纤维蛋白的特异性分子标记物,在继发性纤溶时为阳性或增高;性纤溶时为阳性或增高;而在原发性纤溶时不增高,是鉴别二者而在原发性纤溶时不增高,是鉴别二者的重要指标;的重要指标;2 2本试验对本试验对DVTDVT和肺栓塞和肺栓塞的排除有重要价值,也是溶栓治疗的监的排除有重要价值,也是溶
40、栓治疗的监测指标之一。测指标之一。熟悉熟悉65八、出血性疾病的实验室诊断步骤八、出血性疾病的实验室诊断步骤一期止血缺陷的选择:一期止血缺陷的选择:BTBT、PLTPLT二期止血缺陷的选择:二期止血缺陷的选择:PTPT、APTTAPTT确诊试验:血管、血小板、因子确诊试验:血管、血小板、因子纤溶纤溶亢进的试验选择:亢进的试验选择:FDPFDP、DDDD抗栓治疗的监测:肝素:抗栓治疗的监测:肝素:APTTAPTT 口服抗凝剂:口服抗凝剂:PTPT 溶栓治疗:溶栓治疗:DDDD等等熟悉熟悉66一期止血缺陷一期止血缺陷BTBT及及PLTPLT都正常都正常BTBT延长,延长,PLTPLT减少减少BTBT
41、延长,延长,PLTPLT增加增加BTBT延长,延长,PLTPLT正常正常熟悉熟悉67二期止血缺陷二期止血缺陷PTPT和和APTTAPTT都正常都正常PTPT正常,正常,APTTAPTT延长延长PTPT延长,延长,APTTAPTT正常正常PTPT和和APTTAPTT都延长都延长熟悉熟悉68纤维蛋白溶解综合征纤维蛋白溶解综合征FDPFDP和和DDDD均正常均正常FDPFDP阳性,阳性,DDDD阴性阴性FDPFDP阴性,阴性,DDDD阳性阳性FDPFDP和和DDDD均阳性均阳性熟悉熟悉69了解了解易栓症易栓症:病人易引起血栓栓塞病人易引起血栓栓塞使用使用DDDD作为排除试验作为排除试验70DICDI
42、C的实验诊断积分标准的实验诊断积分标准PLT10010PLT100109 9/L(0/L(0分分) )或或100100(1 1分)分)5050(2 2分)分)FIB1.0g/LFIB1.0g/L(01.0g/L(0分分) )可溶性纤维蛋白单体复合物可溶性纤维蛋白单体复合物(sFMC)(sFMC)水平增水平增高高(3P(3P实验实验) )、FDPFDP:未增高:未增高(0(0分分) ),中度增,中度增高(高(2 2分),重度增高(分),重度增高(3 3分)分)PTPT未延长或延长未延长或延长366秒(秒(2 2分)分) 5 5分:分:DIC,DIC, =2=2分,非显性分,非显性DICDIC熟悉
43、熟悉71观察和诊断血栓前状态应考虑观察和诊断血栓前状态应考虑筛选试验:筛选试验:血小板聚集试验增加、血小板聚集试验增加、PTPT及及APTTAPTT缩短、缩短、FIBFIB含量增高、全血和含量增高、全血和血浆粘度增高等。血浆粘度增高等。常用实验:常用实验:vWFvWF增高、增高、sFMCsFMC增高、增高、ATAT:A A减低、减低、FDPsFDPs或或DDDD减少减少特异指标:特异指标:1.1.血管壁损伤试验血管壁损伤试验2. 2. 血小血小板试验板试验3.3.凝血试验凝血试验4.4.抗凝试验抗凝试验5.5.纤溶纤溶试验试验了解了解72抗血栓治疗的监测抗血栓治疗的监测使用肝素时:用使用肝素时
44、:用APTTAPTT及血小板监测及血小板监测口服抗凝剂:用口服抗凝剂:用PTPT监测监测PTR=PTPTR=PT(病人)(病人)/PT/PT(正常人)(正常人)INR=PTRINR=PTRISIISIISIISI:国际敏感指数,:国际敏感指数,INRINR:国际标准化比值:国际标准化比值INRINR(0.80.81.51.5),PTR,PTR(0.850.851.151.15)口服抗凝剂口服抗凝剂INRINR应控制在应控制在2.02.03.03.0之间之间了解了解73溶血栓治疗的监测溶血栓治疗的监测避免发生出血的监测指标避免发生出血的监测指标: :数小时后数小时后检测检测FIB1.2-1.5g
45、/L,TTFIB1.2-1.5g/L,TT维持在正常维持在正常1.5-2.51.5-2.5倍以上。倍以上。提示溶栓有效的指标:提示溶栓有效的指标:DDDD、FDPFDP先上先上升后下降,升后下降,FIBFIB下降,下降,TTTT延长延长了解了解74小小结结 本章节的主要内容是:本章节的主要内容是: 凝血和抗凝机制,毛细血管壁与血小凝血和抗凝机制,毛细血管壁与血小板相互作用的试验,血小板计数的正常参板相互作用的试验,血小板计数的正常参考值和临床意义,凝血功能检验如:凝血考值和临床意义,凝血功能检验如:凝血酶原时间,活化部分凝血活酶时间测定的酶原时间,活化部分凝血活酶时间测定的原理,正常参考值和临
46、床意义。临床常见原理,正常参考值和临床意义。临床常见出血性疾病的原因;实验室检查的要点;出血性疾病的原因;实验室检查的要点;播散性血管内凝血(播散性血管内凝血(DICDIC)的定义及过筛试)的定义及过筛试验和确证试验。验和确证试验。 小结小结75思考题思考题1 1、与止血有关的主要因素是哪些?、与止血有关的主要因素是哪些?2 2、与凝血检测有关的主要因素是哪些?、与凝血检测有关的主要因素是哪些?4 4、严重的肝脏疾病可使哪些止凝血检测项目异常?、严重的肝脏疾病可使哪些止凝血检测项目异常?5 5、DICDIC时,可使哪些止凝血检测项目异常?时,可使哪些止凝血检测项目异常?6 6、血友病时,可使哪些止凝血检测项目异常?、血友病时,可使哪些止凝血检测项目异常?7 7、血小板增高降低的生理因素和病理原因有哪些?、血小板增高降低的生理因素和病理原因有哪些?8 8、抗凝功能和纤溶功能检查中的凝血酶凝固时间,、抗凝功能和纤溶功能检查中的凝血酶凝固时间,DDDD试验的临床意义。试验的临床意义。部分资料从网络收集整理而来,供大家参考,感谢您的关注!