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1、第20章 高效液相色谱法高效液相色谱法High Performance liquid Chromatography (HPLC)伍嘱鹿镣捶陕菜渊沉予睦及仪黎壁撕述亢圆坛北和罪韶哀坦嘘躺蚂宝燕裂20-高效液相色谱分析化学120.1 20.1 概述概述 高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）：）：在经典液相色谱的在经典液相色谱的基础上，引入了气相色谱法的理论和实验方法，基础上，引入了气相色谱法的理论和实验方法，采用了采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器，发展而成的一种现代液相色谱分析方法。发展而成的一种现代液相色谱分析方法。一、一、一、一、HPLCHPLC
2、与与与与GCGC差别差别差别差别二、特点二、特点二、特点二、特点版壮蚀皮守汇军索咏仕斗妈舵哪喳屁楼仟句徐娃诞艳史激狈宣涕旱缠滩碘20-高效液相色谱分析化学2一、一、HPLC与与GC差别差别相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测相同：兼具分离和分析功能，均可以在线检测 主要差别：分析对象的差别和流动相的差别主要差别：分析对象的差别和流动相的差别1分析对象分析对象 GC：能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品，能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品， 高高沸沸点点、挥挥发发性性差差、热热稳稳定定性性差差、离离子子型型及及高高聚聚 物的样品不可检测物的样品不可检测 占有机物的占有机物的20% HPLC
3、：溶解后能制成溶液的样品，溶解后能制成溶液的样品， 不不受受样样品品挥挥发发性性和和热热稳稳定定性性的的限限制制, 分分子子量量大大、 难难气气化化、热热稳稳定定性性差差及及高高分分子子和和离离子子型型样样品品均均 可检测用途广泛可检测用途广泛 占有机物的占有机物的80%俺咕抠撇鸟绦纯孕澈柴湛盒届循鼠持纳摧懒唁灭望捍竖徽咽春吴斟肿稳能20-高效液相色谱分析化学3vGC：流动相为惰性气体：流动相为惰性气体流流动动相相与与组组分分无无亲亲合合作作用用力力，仅仅起起运运载载作作用用；组组分分只与固定相作用只与固定相作用 vHPLC：流动相为液体：流动相为液体流流动动相相与与组组分分间间有有亲亲合合作
4、作用用力力，为为提提高高柱柱的的选选择择性性、改善分离度增加了因素，对分离起很大作用改善分离度增加了因素，对分离起很大作用流动相种类较多，选择余地广流动相种类较多，选择余地广流流动动相相极极性性和和pHpH值值的的选选择择也也对对分分离离起起到到重重要要作作用用 选选用用不不同同比比例例的的两两种种或或两两种种以以上上液液体体作作为为流流动动相相 可以增大分离选择性可以增大分离选择性2流动相差别流动相差别萎总富虫懒咯羌弓刁血鞭粮嗜锑竟枝缉脯哈廷陋瓣余摧灭留侨泉隋半乔警20-高效液相色谱分析化学4二、二、HPLC的特点的特点适适适适用用用用范范范范围围围围广广广广（可可可可分分分分析析析析80%
5、80%有有有有机机机机化化化化合合合合物物物物，广广广广泛泛泛泛应应应应用用用用于各种药物及其制剂的分析测定）于各种药物及其制剂的分析测定）于各种药物及其制剂的分析测定）于各种药物及其制剂的分析测定）分离性能好分离性能好分离性能好分离性能好分析速度快分析速度快分析速度快分析速度快流动相可选择性范围宽流动相可选择性范围宽流动相可选择性范围宽流动相可选择性范围宽灵敏度高灵敏度高灵敏度高灵敏度高色谱柱可反复使用（与经典色谱相比）色谱柱可反复使用（与经典色谱相比）色谱柱可反复使用（与经典色谱相比）色谱柱可反复使用（与经典色谱相比）流出组分容易收集流出组分容易收集流出组分容易收集流出组分容易收集安全安全
6、安全安全烤舷抄赢殿渗蛇峻鸡芬笑悯茅佬柞隶婉孔淤怕战舞线拢劲醚革嚼洋剥膛恫20-高效液相色谱分析化学520.2 HPLC20.2 HPLC的分类和基本原理的分类和基本原理20.2.1 HPLC20.2.1 HPLC的分类的分类 1按固定相的聚集状态分：按固定相的聚集状态分： 液液-液色谱法（液色谱法（LLC）和液）和液-固色谱法（固色谱法（LSC）2按分离机制分：按分离机制分： 分配色谱分配色谱分配色谱分配色谱 吸附色谱吸附色谱吸附色谱吸附色谱 离子交换色谱离子交换色谱离子交换色谱离子交换色谱 分子排阻色谱分子排阻色谱分子排阻色谱分子排阻色谱 化学键合相色谱化学键合相色谱化学键合相色谱化学键合相
7、色谱 亲合色谱亲合色谱亲合色谱亲合色谱 手性色谱手性色谱手性色谱手性色谱控戈婚炽娘茄煎搭善谍瞒氧磨微窃收吨静箩唾蚤澳侯豹尾揪罕烫谓憾皑贷20-高效液相色谱分析化学620.2.2 20.2.2 基本原理基本原理l 塔板理论塔板理论l 速率理论速率理论 在在高高效效液液相相色色谱谱中中, 液液体体的的扩扩散散系系数数仅仅为为气气体体的的万万分分之之一一，则速率方程中的分子扩散项则速率方程中的分子扩散项B/u较小，可以忽略不计，即较小，可以忽略不计，即： H=A+ B/u+Cu H = A + C u 故液相色谱故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。
8、经典液相色谱法经典液相色谱法 + 气相色谱法气相色谱法 液液体体的的粘粘度度比比气气体体大大一一百百倍倍，密密度度为为气气体体的的一一千千倍倍，故故降降低低传传质质阻阻抗抗是是提提高高柱柱效效主要途径主要途径琶睡曹鄂赦炭差俘项嘻由留氟蝎颠久丸折肺琶皂涩财拒骚虎蕴全造肢靴嘻20-高效液相色谱分析化学7采采用用小小粒粒度度、窄窄分分布布的的球球形形固固定定相相，均均匀匀装装柱柱。A A采用低黏度流动相，低流速。采用低黏度流动相，低流速。C C ，u u 液液相相色色谱谱中中，不不可可能能通通过过增增加加柱柱温温来来改改善善传传质质。一般恒温操作。一般恒温操作。H = A + C u由由Van De
9、emter 方程式可以获得方程式可以获得HPLC分离条件：分离条件：搅墙釉霞荒波侠嘘前莽苛粱淀唐娜膨策襄效通积淘酪甲妆胚漆掐咏订雅象20-高效液相色谱分析化学820.3 20.3 各类高效液相色谱法各类高效液相色谱法20.3.2 20.3.2 液液- -液分配色谱法液分配色谱法根据流动相与固定相极性的差别，可将液根据流动相与固定相极性的差别，可将液- -液色谱分为液色谱分为极性小的先流出，适于极性组分分离极性小的先流出，适于极性组分分离正相液正相液- -液色谱液色谱 流动相极性流动相极性 BC正、反相色谱中极性和保留时间的关系正、反相色谱中极性和保留时间的关系只搭潦施夫棠烧小辩夕琅捎棺咏翟憋圆
10、肚怖贺墟贞畔烛囊惋广分芍丘坡哲20-高效液相色谱分析化学13B + H+ BH+RSO3Na RSO3- + Na+BH+ RSO3-|BH+ RSO3-3. 反相离子对色谱（反相离子对色谱（RPIC） （1）分离机理）分离机理 以分析碱类物质以分析碱类物质B B为例为例流动相流动相固定相固定相（PICB）中性离子对中性离子对扼戈愤唇逞大莎瞒里陈灿砧益捡逗设克驻仲虚良人将芥帆旧竟誊帐账礁殿20-高效液相色谱分析化学14（2）常用离子对试剂）常用离子对试剂 烷基磺酸钠烷基磺酸钠分析碱（正电荷）分析碱（正电荷）四丁基季铵盐四丁基季铵盐分析酸（负电荷）分析酸（负电荷）a与流动相的极性有关（同反相色谱
11、）与流动相的极性有关（同反相色谱）b与与R的链长有关：的链长有关：R长，极性长，极性， k， tR（3）影响）影响k的因素的因素（4）适用）适用：有机酸、碱、盐，离子型和非离子：有机酸、碱、盐，离子型和非离子型化合物的混合物。在药物分析中应用很广型化合物的混合物。在药物分析中应用很广用貌度猪本澡酝伶雷师源凯土骋事脸峨汽僧氰队喀晋烫俺辫屁余桌马缴掂20-高效液相色谱分析化学154. 离子抑制色谱（离子抑制色谱（ISC） 在反相色谱法中，在反相色谱法中，通过调节流动相的通过调节流动相的pH，抑制样品组，抑制样品组分的解离分的解离，增加它在固定相中的溶解度，以达到分离，增加它在固定相中的溶解度，以达
12、到分离有机弱酸、弱碱的目的，称为有机弱酸、弱碱的目的，称为离子抑制色谱法（离子抑制色谱法（ISCISC）（1）适用范围）适用范围 弱酸弱酸 3.0pKa 7.0弱碱弱碱 7.0pKa 8.0（2）抑制剂）抑制剂 弱酸（乙酸）、弱碱（氨水）或缓冲盐弱酸（乙酸）、弱碱（氨水）或缓冲盐（3）影响）影响k的因素的因素a与流动相的极性有关（同反相色谱）与流动相的极性有关（同反相色谱）b与流动相与流动相pH有关：弱酸有关：弱酸 pHpKa k， tR 弱碱弱碱 反之反之愉痊酝春蚌耘锌详绍耐歼颧吁缀髓铃夸奋截朴宠芜费肄凄封脏镜秤埂妙欠20-高效液相色谱分析化学167 7种四环素类抗生素对照品种四环素类抗生素
13、对照品色谱柱：色谱柱：C18（250mm*4.6mm，5m）流动相：甲醇流动相：甲醇-乙腈乙腈-0.01mol/L 草酸溶液草酸溶液（pH2.0）（11:12:67, V/V/V）检测器检测器 ：UV 267nm卤砖弹隶颤吭欲幽崩挞清袖钧彭菊补芬贰蔫那巩渗豁辑神之凑舒净筒熔诵20-高效液相色谱分析化学1720.4 20.4 固定相固定相（stationary stationary phasephase）20.4.1 20.4.1 液液- -固色谱固定相固色谱固定相 大多具有吸附活性的吸附剂。大多具有吸附活性的吸附剂。 常用的有常用的有硅胶硅胶、氧化铝氧化铝以及以及高分子多孔微球高分子多孔微球1
14、. 硅胶硅胶无定形全多孔硅胶，球形全多孔硅胶、堆积硅珠无定形全多孔硅胶，球形全多孔硅胶、堆积硅珠2. 高分子多孔微球高分子多孔微球由苯乙烯与二乙烯苯交联而成由苯乙烯与二乙烯苯交联而成袁灸误一呀鲜丑猎善缎洒钝宜煞熬羡颅鞍六鹃纵检系赏殉哦虏浴昼目观貉20-高效液相色谱分析化学18 化学键合固定相化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相；目前应用最广、性能最佳的固定相； 一般的键合相用硅胶为载体：一般的键合相用硅胶为载体： a. 硅氧碳键型：硅氧碳键型： SiOC b. 硅氧硅碳键型：硅氧硅碳键型：SiOSi C (ODS）（）（P527） 20.4.2 20.4.2 化学键合相化学键合相1
15、. 非极性键合相非极性键合相 键合相表面基团为非极性烃基，键合相表面基团为非极性烃基，如如C18 、C8、 C1 和苯基等。和苯基等。一般用于反相色谱一般用于反相色谱钥弱尖鞍唱混峭粹坐荣陵衫阔篡剖敞褪彭揩秸涝绿芹窃络仪璃镰嘶鲁颇禽20-高效液相色谱分析化学19（1） 载体性质载体性质多数产品采用全多孔多数产品采用全多孔YWG、YQG或堆积硅珠作载体或堆积硅珠作载体 YQG-C18H37（5 5m m）、）、YWG-C6H5（10 m） Nucieosil C18、Zorbax-ODS（2） 表面覆盖度表面覆盖度 参加反应的硅醇基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例参加反应的硅醇基数目占硅胶表面硅醇基
16、总数的比例覆盖度的大小，决定是分配还是吸附作用占主导。覆盖度的大小，决定是分配还是吸附作用占主导。（3） 键合基团的链长键合基团的链长 链长链长、极性、极性、载样量、载样量、k k值值陌作液粹迸镍嚷演斜款握逗耿羔隶拍离慧灌戎绸阀它抠泽摩干晰颁婉睬狐20-高效液相色谱分析化学20时间，时间，min固定相：固定相：C1固定相：固定相：C8固定相：固定相：C18硅胶硅胶-烷基键合相中烷基链长对反相色谱分离的影响烷基键合相中烷基链长对反相色谱分离的影响1-尿嘧啶；尿嘧啶；2-苯酚；苯酚；3-乙酰苯；乙酰苯；4-硝基苯；硝基苯；5-苯甲酸甲酯；苯甲酸甲酯；6-甲苯甲苯可见：反相键合色谱中，键合相碳链越长
17、，分离效果越好。可见：反相键合色谱中，键合相碳链越长，分离效果越好。羊绿榔肘貌哼埋版娶馅铣谴白挝腿笔暇辙毕芦钎溅裂措岂赣评衍还骂赏乍20-高效液相色谱分析化学21 常见的有醚基和二羟基键合相。常见的有醚基和二羟基键合相。 此类固定相应用较少。此类固定相应用较少。2. 中等极性键合相中等极性键合相3. 极性键合相极性键合相常用极性键合相为氨基键合相（强极性）、常用极性键合相为氨基键合相（强极性）、氰基（中强极性）键合相。氰基（中强极性）键合相。一般用于正相色谱。一般用于正相色谱。暗朝纸简师孵奖戊胖俄轻赊酌但森驻枕侣攀劝漫湍釉醒倪省戈簿迫墩凡寡20-高效液相色谱分析化学22流动相又称为：淋洗液，洗
18、脱剂。流动相又称为：淋洗液，洗脱剂。流流动动相相组组成成改改变变，极极性性改改变变，可可显显著著改改变变组组分分分分离状况。离状况。不与固定相发生化学反应不与固定相发生化学反应对试样有适宜的溶解度，对试样有适宜的溶解度，k=25纯度要高，粘度要小纯度要高，粘度要小必须与检测器相适应必须与检测器相适应20.5 20.5 流动相（溶剂系统）流动相（溶剂系统）流动相的基本要求流动相的基本要求抄昭唐憨帧矩蘸问勤屈曼寻苇檄护赘味荤羌鞋雷贝捞考摄子枪勃缄巫拳续20-高效液相色谱分析化学23流动相类别流动相类别按流动相组成分：按流动相组成分：单组分和多组分；单组分和多组分；按极性分：按极性分：极性、弱极性、
19、非极性；极性、弱极性、非极性；按使用方式分：按使用方式分：等度洗脱和梯度洗脱。等度洗脱和梯度洗脱。常常用用溶溶剂剂： 己己烷烷、四四氯氯化化碳碳、甲甲苯苯、乙乙酸酸乙乙酯酯、乙乙醇醇、乙腈、甲醇、水。乙腈、甲醇、水。 采采用用二二元元或或多多元元组组合合溶溶剂剂作作为为流流动动相相可可以以灵灵活活调调节节流流动动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。蔼雁祝鸭型启折渭蜗弥睬市冻另哦幕潍肪舌价裔潍税夺碧蝎煞亿量抨牵巫20-高效液相色谱分析化学243. 3. 流动相选择流动相选择 采用正相液采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，液分
20、配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。 也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。保留时间缩短。 在选择溶剂时，在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据溶剂的极性是选择的重要依据。正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强 反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强执厢螟有潘堵霄疏柒国饼逮踩草恋刷襟肉堪衰愧碴束刮笆褒贸甥酬骚曳部20-高效液相色谱分析化学25选择流动相时应注意的几个问题选择流动相
21、时应注意的几个问题（1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。（2）使用前需要用微孔滤膜过滤，除去固体颗粒。）使用前需要用微孔滤膜过滤，除去固体颗粒。（3）流动相使用前最好脱气。）流动相使用前最好脱气。委宾机科俺泞湛江纷绳搞努罐蓉袍凡斟毖涌弗糙缀售辫孪踊迁触撒受诫夷20-高效液相色谱分析化学2620.6 20.6 高效液相色谱仪高效液相色谱仪循念车拉祁亡京歉荣险盼洱笨妊砧绵堑冈轮尼屡门孙趋迪雇射撩孜翔弱缝20-高效液相色谱分析化学27输液系统输液系统进样系统进样系统色谱柱系统
22、色谱柱系统检测系统检测系统温控系统温控系统记录系统记录系统液液相色谱相色谱法的一般法的一般流程流程简略图简略图淀赢月态裴辩矣蜗曼怎沸铀戮块避陋春咱牲哟氮最绩湘铭距痞虞丈守著橱20-高效液相色谱分析化学281. 柱塞往复泵柱塞往复泵无脉动无脉动流量恒定流量恒定能自由调节流量能自由调节流量耐高压耐高压耐腐蚀等特性耐腐蚀等特性20.6.1 输液泵输液泵给勺森椅炽惟蘑蹬泡哗弘匹亢舜技勾哀赡脸疵臭丘缄戴换部漱嗜抠仿赁峨20-高效液相色谱分析化学292. 梯度洗脱装置梯度洗脱装置高压二元梯度高压二元梯度: 利用两台高压输液利用两台高压输液泵，将两种不同极性的泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入溶剂按一
23、定的比例送入梯度混合室，混合后进梯度混合室，混合后进入色谱柱。入色谱柱。低压梯度低压梯度: 在常压下在常压下, 通过比例通过比例调节阀调节阀,将两种或多种不同将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。抽入高压泵中混合。掠彩捐掷坯琢搞唾店裕滚疲赖帮扮陨屉捐锑乓戒湘缀高易高彤浦抓爱维疥20-高效液相色谱分析化学3020.6.2 进样器与色谱柱进样器与色谱柱1. 进样器进样器 流路中为高压力工作状态，流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的通常使用耐高压的六通阀进样装置六通阀进样装置 滓扇近犹古萄错杯袄稚殴俗轨线是未竣蜕伸俭绥亮隶掳棒等吊瑰姚吩范蓄20-高效液相
24、色谱分析化学312. 色谱柱色谱柱 柱体为直型不锈钢管，内径柱体为直型不锈钢管，内径24.6 mm，柱长，柱长1025 cm。3. 色谱柱柱效的评价色谱柱柱效的评价药典规定，用药典规定，用HPLCHPLC建立分析方法时，需进行建立分析方法时，需进行“系统适用性试验系统适用性试验”最小理论塔板数、分离度、重复性和拖尾因子最小理论塔板数、分离度、重复性和拖尾因子认穿操么癌碗蚜当节疏毫蚕息谱乳颂召往彰城励喀妒友浴缸钎苹鳞讥宾歉20-高效液相色谱分析化学3220.6.3 液相色谱检测器液相色谱检测器特点：特点： 灵敏度高；灵敏度高； 噪音低；噪音低； 不破坏样品；不破坏样品； 对流动相的流速和温度波动
25、不敏感；对流动相的流速和温度波动不敏感； 可用于梯度洗脱可用于梯度洗脱 属于浓度型检测器属于浓度型检测器 1. 紫外检测器紫外检测器应用最广，对大部分有机化合物有响应。应用最广，对大部分有机化合物有响应。阑叶却裹姆玖帧搅触寿偏郁菜木播课疆鼠青凿味怖说缴机正湖思葵繁锁酝20-高效液相色谱分析化学33紫外检测器的弱点紫外检测器的弱点只能检测有紫外吸收的样品只能检测有紫外吸收的样品流动相的选择有一定的限制，检测波长须大流动相的选择有一定的限制，检测波长须大于流动相的截止波长于流动相的截止波长截止波长截止波长紫外检测器的类型紫外检测器的类型用用1cm1cm光径的吸收池装光径的吸收池装待测溶剂待测溶剂，
26、用空气作参比，用空气作参比，改变照射波长，当吸光值改变照射波长，当吸光值A=1A=1时，此时的波长称为时，此时的波长称为该溶剂的该溶剂的截止波长截止波长固定波长、固定波长、可变波长可变波长、光电二极管阵列光电二极管阵列溅疆谣夕博钞卒怀外渴牛彬像弃祥持丰草乃博瘫烙杉镜关滨蔫痪疤尽妙唤20-高效液相色谱分析化学34（3 3） 光电二极管阵列检测器（光电二极管阵列检测器（DADDAD） 紫外检测器的重要进展；紫外检测器的重要进展； 光光电电二二极极管管阵阵列列检检测测器器：1024个个二二极极管管阵阵列列，各各检检测测特特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。定波长，计算机快速处理，三维立
27、体谱图，如图所示。殷办咎嗡爹蚜痹革川豹雌估侣泌缅帮钾庙秆岔肺丫独桂卫臂禹剿舌健桩秩20-高效液相色谱分析化学35浴彼财少暗暂器番摧爷似障梗堆阀绚湃刊茧厦趟揉鱼渝牡永浑鸵灿袱宫砾20-高效液相色谱分析化学36光电二极管阵列检测器光电二极管阵列检测器矿疮蘑锌蚁露匣怯凳胞沸玩蓑磋擎底班唬清肝乐蚂叫完锗与刺误的罗驭铜20-高效液相色谱分析化学372. 荧光检测器（荧光检测器（FD）高灵敏度、高选择性；高灵敏度、高选择性；只只适适用用于于产产生生荧荧光光或或其其衍衍生物能发荧光的物质生物能发荧光的物质对对氨氨基基酸酸、多多环环芳芳烃烃，维维生生素素、甾甾体体化化合合物物及及酶酶类类等有响应等有响应常用于
28、体内药物分析常用于体内药物分析倔斧子涨挂期冰勘悼婿蚜谜郧拥赫屏蚜撂卉夏臀谱辕殉谆呢癸虎哭分虽多20-高效液相色谱分析化学3818.8 HPLC的的应用应用 1. 1. 环境中有机氯农药残留量分析环境中有机氯农药残留量分析 可对水果、蔬菜中的农药可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。残留量进行分析。固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶(37 50 m)流动相：正己烷流动相：正己烷流流 速：速：1.5 mL/min色谱柱：色谱柱：50cm 2.5mm(内径内径)检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器奥泊豁贵控召透论蕊单亡求三育首毯钨痪祁螺骸印笛济楼靶薯瑟纬蔷愿胳20-高效液相色谱分析化学392. 2. 稠环芳烃的分析稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。 固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：流动相：20%甲醇甲醇-水水 100%甲醇甲醇 线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，2%/min 流流 速：速：1mL/min 柱柱 温：温：50 C 柱柱 压：压：70 104 Pa 检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器舆熏织搽鞠乡白酮室炮瞥萨直怕汞廷溪赐食澜状弹濒巢挛膳腾光馋峨茹哦20-高效液相色谱分析化学40
