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1、尿理学及湿化学检验尿理学及湿化学检验医学检验系医学检验系尿液尿液pH测定测定l原理 PH试纸是多种指示剂适当配合的试带，显色范围为棕红至深黑l器材 洁净试管或尿杯。l试剂 pH广泛试纸1套(包括试带和标准色板)。l标本 新鲜尿液。 操作操作l将手洗净擦干或配戴手套，取试纸1条，将其一端浸入尿液约0.5s取出自然光线下与标准色板比色读取尿液pH。 注意事项注意事项l1试带应密封、避光、干燥保存，远离酸性和碱性物质以防失效。l2在规定时间内比色，1min内。 l3标本应新鲜，放置过久会因细菌繁殖或丧失挥发性酸而使pH增高。尿比密测定（折射仪法）尿比密测定（折射仪法）目的 熟悉折射仪的工作原理、使用
2、及校正方法。原理 折射率与媒质的密度有关，密度越高，折射率越大；其次也与光的波长及温度有关。 经过大批量尿标本的研究，已经建立了折射率、比密和总固体量的经验公式，并将数字列成线图刻在目镜系列的适当位置中，测量时直接读数即可。 器材 临床折射计，尿杯、吸水纸、滴管、镊子。 标本 新鲜尿液。 操作操作 零点校准 每次测试前必须用纯净水进行零点校准：向标本室中加入足够的蒸馏水，轻微调节旋转螺丝使边界线重合在1.000刻线上。 标本测定程序 拭干标本室和标本盖上的蒸馏水，在标本室内滴入足够的尿液，通过接目镜读取数值或查表得出结果。 注意事项注意事项l1用过的滤纸、棉球等应及时焚毁，以免污染环境。l2尿
3、酸盐所致的浑浊可影响结果，需要加温溶解后再测定，切不可弃去。l3细胞等有形成分增多时，应离心后测定上清液，测试完毕后用纯净蒸馏水擦拭干净。尿蛋白测定（磺基水杨酸法）尿蛋白测定（磺基水杨酸法）目的 掌握尿蛋白定性的磺基水杨酸法原理及 操作原理 在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子 与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不容性 的蛋白盐沉淀，沉淀的程度可反映蛋白质 含量。 l器材 小试管、滴管、吸管l试剂 200g/l磺基水杨酸溶液l标本 人工蛋白尿操作操作1加尿液 取小试管2支，各加清晰尿液lml。2加试剂 于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶 液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加 试剂作空白对照，1min内观察
4、结果。3判断结果 按P70表2-2判断阳性程度及蛋白 质的含量 注意事项注意事项1该法灵敏，极轻微反应无意义。判断结果应及时，否则会使阳性增高。2尿液偏碱时(pH9)，磺基水杨酸法可呈假阴性；尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。应先将尿液PH值调到56。3含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。4尽量指导患者采集中段尿，或离心后测定。l原理：根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖氧化酶特异性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使指示剂氧化而呈现颜色变化。l标本：新鲜尿l器材：一次性尿杯、尿糖试纸尿葡
5、萄糖定性检查尿葡萄糖定性检查 （一）尿糖试纸法（一）尿糖试纸法操作操作l、将试纸的试垫区浸入样本中约秒钟，并将其取出l、让试纸的边缘沿着样本容器口轻轻撩拭，以去除残余的尿液l、横握试纸，在秒内与瓶签上的比色图谱比较，记录结果。试纸与标准色版相同颜色即为尿样的尿糖值，如反应颜色在两个标准色版颜色之间，则该尿样的尿糖值也介于两者之间。注意事项注意事项l、用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快检测，尿样在室温下的放置时间不可超过小时，否则应将尿样保存在冰箱中并在小时内检测，不要在尿样中加防腐剂，尿样不可离心，测试前要将尿样混匀。注意事项注意事项l、温度越低，反应所需要的时间要相应延长l、尿糖浓度时通过试
6、纸由蓝色棕色的颜色变化来指示，蓝色为无尿糖，棕色越深，尿糖越高。l（二）班氏法班氏法（讲解）l目的 掌握班氏法原理方法l原理 葡萄糖或其他还原性的糖的醛基在热硷性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氢氧化铜，进而形成红色氧化亚铜沉淀l器材 试管架、中试管、滴管、试管夹、酒精灯l试剂 班氏试剂操作操作1鉴定班氏试剂质量 取中号试管1支，加入班氏试剂2.0ml，摇动试管徐徐加热至沸腾，观察试剂有无颜色及性状变化，若试剂仍为透明蓝色，可进行以下实验。2加尿液 向班氏试剂中加离心后的尿液0.2ml(约4滴)，混匀。3加热煮沸 继续煮沸12min，或置沸水浴5min，自然冷却。4判断结果 注意事
7、项注意事项 1试剂与尿液的比例为10：1。 2煮沸时应不时摇动试管以防爆沸喷出，也可在沸水浴中实验。 3检验糖尿病患者尿液中葡萄糖，应空腹或餐后2h留取尿标本。 目的目的 掌握改良Rothera法尿酮体定性的方法。 原理原理 亚硝基铁氢化钠Na2Fe(CN)52H2O遇尿分解为Na4Fe(CN)6、NaNO2、Fe(OH)3和Fe(CN)53- 如尿中存在可检出量的酮体(丙酮、乙酰乙酸)，在碱性环境中即与试剂作用生成异硝基(HOON=)或异硝基胺(NH2OON=)，后者与Fe(CN)53-生成紫红色化合物。 器材器材 试管或载玻片、药匙、滴管。 试剂试剂 Rothera试剂。 标本标本 新鲜尿液。尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）l操作操作l1加入酮体粉 于载玻片上(或试管内)，加入1小勺酮体粉。l2加尿液 滴加尿液于酮体粉上，至完全将酮体粉浸湿。l3观察结果 观察酮体粉的颜色变化，5min内出现紫色者为阳性。l4判断结果 判断结果的标准见P76表2-5。尿酮体测定（改良Fe(CN)53-法）作业作业l1.列表比较湿化学法与试带法的不同l2.列表说明4个实验的影响因素
