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1、Sebia 全自动凝胶电泳仪全自动凝胶电泳仪临床应用临床应用襄阳市中心医院襄阳市中心医院1Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用使用范围和检测原理使用范围和检测原理电泳技术就是利用在电场电泳技术就是利用在电场的作用下的作用下,由于待分离样由于待分离样品中各种分子带电性质以品中各种分子带电性质以及分子本身大小及分子本身大小,形状等形状等性质的差异性质的差异,使带电分子使带电分子产生不同的迁移速度产生不同的迁移速度,从从而对样品进行分离而对样品进行分离,鉴定鉴定或提纯的技术或提纯的技术.在生化检测中在生化检测中,主要用于主要用于分离各类蛋白分子分离各类蛋白分子.2Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床
2、应用发展历程发展历程1809年俄国科学家列年俄国科学家列伊斯首先发现电泳现伊斯首先发现电泳现象象1937年瑞典科学家年瑞典科学家Tiselius建立了界面电建立了界面电泳技术泳技术,并首次证明了并首次证明了血清是由白蛋白及血清是由白蛋白及 , , , , 球蛋白组成的球蛋白组成的因此获得因此获得1948年诺贝年诺贝尔化学奖尔化学奖.1950年后年后,区带电泳从区带电泳从发展到成熟发展到成熟.1980年以年以来来,毛细管电泳逐渐受毛细管电泳逐渐受到重视到重视3Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用常用的电泳技术常用的电泳技术滤纸电泳滤纸电泳醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素薄膜电泳凝胶电泳凝胶电泳琼脂
3、糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸的电泳支持介质, 成本低, 结果易保存.聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的电泳方法, 特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量, 一般用于科研.毛细管电泳毛细管电泳:经典电泳技术和现代微柱分离经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物相结合的产物4Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳血清蛋白电泳 免疫固定电泳免疫固定电泳非浓缩尿蛋白电泳非浓缩尿蛋白电泳5Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳血清蛋白电泳6Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用法国法国SEBIA凝胶电泳凝胶电泳琼脂糖凝胶介质，分子筛效应，分辨率高琼
4、脂糖凝胶介质，分子筛效应，分辨率高不吸附蛋白质，阻力小，分离清晰，透明度高不吸附蛋白质，阻力小，分离清晰，透明度高PH8.8碱性环境碱性环境根据蛋白质所带电荷的多少和蛋白分子的大小及根据蛋白质所带电荷的多少和蛋白分子的大小及形状分离不同的蛋白成分形状分离不同的蛋白成分按泳动速度分成按泳动速度分成5个区带个区带 （每个区带含每个区带含1种或更多种或更多种的蛋白成分）种的蛋白成分）7Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用30人份琼脂糖凝胶片血清蛋白电泳8Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用正常血清蛋白电泳图谱9Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳的正常参考值血清蛋白电泳的正常参考值
5、组分组分浓度浓度Alb(Albumin)Alb(Albumin)60.0-71.01 1区带球蛋白区带球蛋白1.4-2.92 2区带球蛋白区带球蛋白7.0-11.0区带蛋白区带蛋白8.0-13.0区带球蛋白区带球蛋白9.0-16.010Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用各区带构成各区带构成Alb：白蛋白白蛋白1：1酸性糖蛋白；酸性糖蛋白；1抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶1脂蛋白脂蛋白;甲胎蛋白甲胎蛋白2：HP；2巨球蛋白；巨球蛋白；脂蛋白；脂蛋白；CER：转铁蛋白；补体系统；转铁蛋白；补体系统；脂蛋白脂蛋白纤维蛋白原；纤维蛋白原；2微球蛋白微球蛋白：IgG；IgM；IgA；IgD；IgECRP11S
6、ebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳可以帮助我们精确地描绘出患者血血清蛋白电泳可以帮助我们精确地描绘出患者血清蛋白质的全貌，是生化仪测定蛋白质的完善和清蛋白质的全貌，是生化仪测定蛋白质的完善和补充补充可以提示是哪一种球蛋白异常，便于临床有的放可以提示是哪一种球蛋白异常，便于临床有的放矢的进一步检查，节省患者费用矢的进一步检查，节省患者费用12Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用对单一克隆浆细胞异常增殖产生对单一克隆浆细胞异常增殖产生M M蛋白的检测蛋白的检测, ,血血清蛋白电泳是其首选的实验诊断方法，由于清蛋白电泳是其首选的实验诊断方法，由于MMMM髓髓外病灶在肝、脾、淋巴结多见
7、，故认为肝功能异外病灶在肝、脾、淋巴结多见，故认为肝功能异常患者应进行血清蛋白电泳检测作为筛选常患者应进行血清蛋白电泳检测作为筛选可帮助对一些遗传性疾病作出诊断，如：双白蛋可帮助对一些遗传性疾病作出诊断，如：双白蛋白血症、白血症、 11抗胰蛋白酶缺陷，蛋白电泳呈现特抗胰蛋白酶缺陷，蛋白电泳呈现特征性图谱征性图谱13Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳中发现的与急性时相反应蛋白相关的疾病血清蛋白电泳中发现的与急性时相反应蛋白相关的疾病Alb Alb 脱水脱水 慢性消耗性疾病、慢性炎症、出血、烧伤、蛋白丢失、肠病、因白蛋白慢性消耗性疾病、慢性炎症、出血、烧伤、蛋白丢失、肠病、因白蛋白
8、 减低而引起的肝脏功能下降、营养失调、肾病综合征、减低而引起的肝脏功能下降、营养失调、肾病综合征、 妊娠妊娠 1 1 妊娠妊娠 低抗胰蛋白酶血症低抗胰蛋白酶血症 22 肾上腺不足、肾上腺皮质类固醇治疗、糖尿病肾上腺不足、肾上腺皮质类固醇治疗、糖尿病 、肾病综合征、肾病综合征 营养不良、巨红细胞性贫血、蛋白丢失的肠病、严重肝病、营养不良、巨红细胞性贫血、蛋白丢失的肠病、严重肝病、 Wilsons Wilsons 病病 胆汁硬化、癌症胆汁硬化、癌症 ( ( 有时有时 ) ) 、 Cushing s Cushing s 病、糖尿病病、糖尿病 ( ( 某些病例某些病例 ) ) 甲状腺机能减退、缺铁性贫
9、血甲状腺机能减退、缺铁性贫血 、恶性高血压、肾病、恶性高血压、肾病 、多动脉炎、阻塞、多动脉炎、阻塞 性黄疸、妊娠性黄疸、妊娠 营养不良营养不良 淀粉样变性、慢性感染、慢性淋巴细胞白血病、硬化淀粉样变性、慢性感染、慢性淋巴细胞白血病、硬化 、 Hodgkins Hodgkins 疾疾 病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、结缔组织病、病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、结缔组织病、 巨细胞血症巨细胞血症 血中丙种球蛋白缺乏、低丙种球蛋白症血中丙种球蛋白缺乏、低丙种球蛋白症 14Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用球蛋白区域的变化在肝病的临床意义球蛋白区域的变化在肝病的临床意义11球蛋白在肝炎初期，作为急性
10、期反球蛋白在肝炎初期，作为急性期反应物质常增加，而肝损害严重时则降应物质常增加，而肝损害严重时则降低，在致命的肝功能衰竭时可以降低低，在致命的肝功能衰竭时可以降低到很低的水平到很低的水平15Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用球蛋白区域的变化在肝病的临床意义球蛋白区域的变化在肝病的临床意义22球蛋白的降低可能由于结合珠蛋白合成球蛋白的降低可能由于结合珠蛋白合成降低所致，但在胆汁淤积性肝炎时由于降低所致，但在胆汁淤积性肝炎时由于22脂蛋白增加可见到脂蛋白增加可见到22球蛋白部位增加，当球蛋白部位增加，当亚急性肝炎和肝坏死时，亚急性肝炎和肝坏死时，22球蛋白则明显球蛋白则明显减少，故减少，故22
11、球蛋白的变化可作为肝障碍时球蛋白的变化可作为肝障碍时的特征性指标，如明显下降，提示预后不的特征性指标，如明显下降，提示预后不良良16Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用球蛋白区域的变化在肝病的临床意义球蛋白区域的变化在肝病的临床意义球蛋白在肝炎早期几乎没有变化，但由于球蛋白在肝炎早期几乎没有变化，但由于此组分也有脂蛋白，胆汁淤积性肝炎时与此组分也有脂蛋白，胆汁淤积性肝炎时与22球蛋白一样，多数明显升高，当肝细胞球蛋白一样，多数明显升高，当肝细胞损害严重时，由于肝脏合成减少则明显降损害严重时，由于肝脏合成减少则明显降低低17Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用球蛋白区域的变化在肝病的临床意义
12、球蛋白区域的变化在肝病的临床意义几乎所有肝脏疾病几乎所有肝脏疾病球蛋白均升高，且呈多球蛋白均升高，且呈多株性的，其增加的范围与疾病的严重程度株性的，其增加的范围与疾病的严重程度相一致，若转为慢性可见相一致，若转为慢性可见球蛋白明显增高球蛋白明显增高这是由于免疫球蛋白合成亢进所致。这是由于免疫球蛋白合成亢进所致。18Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳图谱在肝脏疾病的变化血清蛋白电泳图谱在肝脏疾病的变化 T-PROT Alb 1 2 T-PROT Alb 1 2 肝炎肝炎N N 肝硬化肝硬化N N N N N N -桥桥肝癌肝癌N N 甲胎蛋白甲胎蛋白 N N NN N N19Se
13、bia-全自动凝胶电泳仪的临床应用20Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳图谱在肾病的改变血清蛋白电泳图谱在肾病的改变Alb明显降低，明显降低，1-球蛋白轻度增加，球蛋白轻度增加，2-球蛋白明球蛋白明显增加，显增加， -球蛋白降低、正常、增高，球蛋白降低、正常、增高，-球蛋白球蛋白降低、正常降低、正常 小儿类脂样肾病时，小儿类脂样肾病时，-球蛋白可降低，有时可降球蛋白可降低，有时可降低至零低至零 成人肾病综合症时，成人肾病综合症时，-球蛋白通常增加，特别是球蛋白通常增加，特别是狼疮性肾病。狼疮性肾病。21Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用22Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床
14、应用23Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用24Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用25Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用26Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾病综合征27Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用急性感染综合征28Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用先天性白蛋白缺乏症29Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用双白蛋白血症30Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用1抗胰蛋白酶缺乏症31Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用贫血之高转铁蛋白32Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用免疫球蛋白增高33Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用血清蛋白电泳是血清蛋白电泳是M蛋
15、白（蛋白（MonoclonalProtein）多克隆多克隆（polyclonalProtein)寡寡克隆克隆（OligoclonalProtein)的首选检测项目的首选检测项目34Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用M蛋白疾病（蛋白疾病（Monoclonalgammap-athies,MG）是由于单一克隆浆细胞无限增殖产生的均是由于单一克隆浆细胞无限增殖产生的均一单克隆蛋白（一单克隆蛋白（Monoclonal-proteins)所导致的所导致的一组疾病。一组疾病。M蛋白疾病的蛋白疾病的“M”含义是含义是Myeloma,Macroglobulinemia和和Malignantlymphoma，
16、MonoclonalGammapathies均以均以“M”开头。开头。M蛋白在电泳上表现为高而狭窄的尖峰（高蛋白在电泳上表现为高而狭窄的尖峰（高/宽宽2:1）.35Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用多发性骨髓瘤的临床特征：多发性骨髓瘤的临床特征：骨质疏松和溶骨现象骨质疏松和溶骨现象贫血，粒细胞、血小板减少贫血，粒细胞、血小板减少肾淀粉样变性损害肾淀粉样变性损害免疫功能低下，易感增加免疫功能低下，易感增加36Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用多发性骨髓瘤的免疫学特征多发性骨髓瘤的免疫学特征:血中出现血中出现M蛋白蛋白,正常正常Ig水平明显减低水平明显减低尿中出现尿中出现M蛋白和轻链蛋白蛋
17、白和轻链蛋白(BJP)骨髓中浆细胞明显增加骨髓中浆细胞明显增加无免疫活性无免疫活性Ig导致免疫功能低下导致免疫功能低下37Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用巨球蛋白血症（巨球蛋白血症（WaldenstromWaldenstrom氏）氏）患者血中存在大量单克隆患者血中存在大量单克隆IgMIgM，血粘度明显增多，骨骼损害不常见，血粘度明显增多，骨骼损害不常见，疾病发展类似淋巴瘤。疾病发展类似淋巴瘤。38Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用轻链病轻链病 轻链病多表现为肾脏损害，极易误诊为慢轻链病多表现为肾脏损害，极易误诊为慢性肾炎。我们认为轻链有性肾炎。我们认为轻链有3种形式出现在血种形式出现
18、在血清或尿中；一是正常的轻链过剩（清或尿中；一是正常的轻链过剩（Kappa和和Lambda同时出现），多出现于慢性肝同时出现），多出现于慢性肝病，病，SLE等多克隆增殖中。二是伴随轻链。等多克隆增殖中。二是伴随轻链。三是单一轻链，血和尿中只出现单一增殖三是单一轻链，血和尿中只出现单一增殖的大量轻链。的大量轻链。39Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用重链病重链病由于制造由于制造Ig的浆细胞发生突变，并恶性增的浆细胞发生突变，并恶性增殖，只产生重链或产生的重链有缺陷，因而殖，只产生重链或产生的重链有缺陷，因而轻链和重链不能组成完整的轻链和重链不能组成完整的Ig，血中出现大血中出现大量无免疫功能
19、的量无免疫功能的Ig片段片段-重链，由此产生一重链，由此产生一系列重链病变。重链病是免疫蛋白的结构异系列重链病变。重链病是免疫蛋白的结构异常所致。常见三型。该病发病率极低。常所致。常见三型。该病发病率极低。40Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用M蛋白电泳图谱蛋白电泳图谱M蛋白是单克隆性浆细胞或淋巴细胞大量增殖而蛋白是单克隆性浆细胞或淋巴细胞大量增殖而产生的一种在氨基酸组成基排列顺序上十分均一产生的一种在氨基酸组成基排列顺序上十分均一的异常球蛋白，其本质是免疫球蛋白或其片断的异常球蛋白，其本质是免疫球蛋白或其片断M蛋白在蛋白在2区形成浓密区带区形成浓密区带用光度计可扫出基底较窄，高而尖锐的蛋
20、白峰用光度计可扫出基底较窄，高而尖锐的蛋白峰其标准为：其标准为： 在在区，蛋白峰的高和宽之比应区，蛋白峰的高和宽之比应2：1；在；在 区区和和2区应区应 1：1 41Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用42Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用43Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用44Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用位于区的单克隆IgA45Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用单克隆带46Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用寡克隆图案47Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用轻链病48Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用老年性单克隆带49Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用位
21、于2区单克隆带50Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用多发性骨髓瘤的误诊原因分析多发性骨髓瘤的误诊原因分析51Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用52Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用53Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用多发性骨髓瘤诊断标准多发性骨髓瘤诊断标准1.骨髓中浆细胞骨髓中浆细胞15，并有异常浆细胞（骨，并有异常浆细胞（骨髓瘤细胞）或骨髓活检为浆细胞瘤。为主髓瘤细胞）或骨髓活检为浆细胞瘤。为主要的诊断依据。要的诊断依据。2.血清中出现大量单血清中出现大量单克隆免疫球蛋白（克隆免疫球蛋白（M蛋白），蛋白），IgG35g/L；IgA20g/L；IgD2.0g/L；IgE2.0
22、g/L；IgM15g/L或尿中出现单克隆免疫球蛋白轻或尿中出现单克隆免疫球蛋白轻链，轻链排出链，轻链排出1g/24小时。小时。3.无其他无其他原因的溶骨病变或广泛性骨质疏松。原因的溶骨病变或广泛性骨质疏松。54Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用免疫固定电泳免疫固定电泳对对M蛋白的分型与鉴定蛋白的分型与鉴定已作为实验室常规工作已作为实验室常规工作55Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用将待测血清或其他标本在琼脂平板上作区将待测血清或其他标本在琼脂平板上作区带电泳，分离后于其上覆盖含抗带电泳，分离后于其上覆盖含抗或或轻链轻链或各类重链的抗血清滤纸，当抗体与某区或各类重链的抗血清滤纸，当抗体与
23、某区带中的单克隆免疫球蛋白结合后，便形成带中的单克隆免疫球蛋白结合后，便形成复合物而沉淀下来，再通过漂洗与染色，复合物而沉淀下来，再通过漂洗与染色，呈现浓而狭窄的着色区带，即可判断单克呈现浓而狭窄的着色区带，即可判断单克隆丙种球蛋白的轻链和重链型别。隆丙种球蛋白的轻链和重链型别。56Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用4人份琼脂糖凝胶固定免疫电泳57Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用正常血浆免疫固定电泳58Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用IgM重链及轻链59Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用轻链型IgG并其他Ig缺乏60Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用轻链型IgA并其他I
24、g缺乏61Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用寡克隆带62Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用移植病人之寡克隆带63Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用艾滋病人之寡克隆带64Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用游离轻链65Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用Electrophoreticexplorationofproteinuria非浓缩尿蛋白电泳临床应用66Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾单位生理及与血浆蛋白质关系肾脏近二百万个肾肾脏近二百万个肾单位每天过滤单位每天过滤1600升升血液并产生血液并产生180升原尿，升原尿，经肾小管重吸收后最终经肾小管重吸收后最终排出约排出
25、约1.5升终尿。升终尿。白蛋白转铁蛋白免疫球蛋白微蛋白白蛋白转铁蛋白免疫球蛋白微蛋白肾小球滤过膜肾小管重吸收微蛋白肾小管分泌(Thamm-Horsfall蛋白)终尿中白蛋白占1/3 ，球蛋白占 2/3。67Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用尿蛋白定义尿蛋白定义生理性尿蛋白为生理性尿蛋白为50150毫克天毫克天(大大约约100毫克升以下毫克升以下)主要成分为白蛋白主要成分为白蛋白(30毫克天毫克天以下以下)病理性尿蛋白为超过病理性尿蛋白为超过10毫克天毫克天蛋白质成分复杂多样蛋白质成分复杂多样68Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用尿蛋白增加的原因尿蛋白增加的原因生理性：生理性：间歇性间歇
26、性(体位体位,高蛋白饮食高蛋白饮食,剧烈运剧烈运动后动后,精神压力大精神压力大)肾前性：肾前性：高血压，高热，心脏或肝脏衰竭高血压，高热，心脏或肝脏衰竭,血中蛋白浓度血中蛋白浓度过高过高 (溢出性蛋白尿溢出性蛋白尿)肾性：肾性：肾小球或肾小管损害肾小球或肾小管损害(或两着均有或两着均有)肾后性：肾后性：泌尿生殖道损害泌尿生殖道损害69Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳（SDS-AGE）技术的分析原理SDS（SodiumDodecysulphate）是是一一种种阴阴离离子子型型表表面面活活性性剂剂，当当其其浓浓度度达达蛋蛋白白质质的的5-10倍倍时时，与与还还原
27、原剂剂共共同同作作用用，能能使使蛋蛋白白质质分分子子内内的的氢氢建建和和二二硫硫键键断断裂裂，解解离离成成单单独独的的亚亚基基与与SDS充充分分结结合合形形成成带带负负电电荷荷的的亚亚基基-SDS胶胶束束，所所带带电电荷荷量量远远远远超超过过了了蛋蛋白白质质分分子子原原有有的的电电荷荷量量，从从而而消消除除了了不不同同分分子子之之间间的的原原有有电电荷荷差差异异。根根据据流流体体动动力力学学的的研研究究证证明明，这这种种复复合合物物是是椭椭圆圆形形，短短轴轴约约为为1.8A，但但长长轴轴的的长长度度与与亚亚基基分分子子量量的的大大小小呈呈正正比比，加加之之琼琼脂脂胶胶的的分分子子筛筛作作用用，
28、使使电电泳泳的的迁迁移移率率与与摩摩擦擦系系数数的的反反比比关关系系只只表表现现在在蛋蛋白白质质分分子子量量大大小小上上，因因此此尿尿蛋蛋白白各各组组分分便便可可按按分分子子量量的的大大小小顺顺序序排排列列在琼脂糖凝胶上。在琼脂糖凝胶上。70Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用 70 kDa 70 kDa肾单位生理结构肾小球滤过膜肾小管重吸收SDS-agarose gel electrophoresis十二烷基磺酸钠SDSSDS+-71Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用尿蛋白电泳以分子量排列原理尿蛋白电泳以分子量排列原理SDSSDS+-分子量标记 (kDa)14.430436794低分子
29、量 ( 70 kDa)白蛋白72Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用Hydragel尿蛋白电泳结果解释尿蛋白电泳结果解释分子量标记(kDa)14.430436794白蛋白白蛋白肾小管标记肾小球标记73Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用Hydragel尿蛋白电泳尿蛋白电泳14 40020 00030 00043 00067 00094 000130 000溶菌酶视黄醇结合蛋白轻链白蛋白转铁蛋白免疫球蛋白2-微球蛋白微球蛋白SerSerPMSerSer74Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾小球滤过功能肾小球滤过功能低分子量蛋白质，小于低分子量蛋白质，小于70kDa,可被滤过。可被滤过。
30、其他影响每种蛋白质滤过的因数：其他影响每种蛋白质滤过的因数：形状，所带电荷，形状，所带电荷，血浆浓度。血浆浓度。滤过取决于肾动力参数。滤过取决于肾动力参数。肾小球滤过膜的损害可导致大分子量的蛋白质肾小球滤过膜的损害可导致大分子量的蛋白质(超过超过70kDa)漏出。漏出。75Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾小球性蛋白尿肾小球性蛋白尿产生原因产生原因主要是肾小球受到炎症，毒素等的损害，引起肾主要是肾小球受到炎症，毒素等的损害，引起肾小球毛细血管壁通透性增加，滤出较多的血浆蛋小球毛细血管壁通透性增加，滤出较多的血浆蛋白，超过了肾小管重吸收能力所形成的蛋白尿。白，超过了肾小管重吸收能力所形成的
31、蛋白尿。频发于成人及婴幼儿，一般尿蛋白总量常大于频发于成人及婴幼儿，一般尿蛋白总量常大于1000mg/天。天。常见于肾小球疾病如急性肾小球肾炎，某些继发常见于肾小球疾病如急性肾小球肾炎，某些继发性肾脏病变如糖尿病肾病，免疫复合物病如红斑性肾脏病变如糖尿病肾病，免疫复合物病如红斑狼疮性肾病等。狼疮性肾病等。76Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾小球损害肾小球损害 70 kDa 70 kDa白蛋白 70 kDaSer77Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用电泳图谱表现电泳图谱表现表现为漏出性蛋白尿，出现白蛋白及分子表现为漏出性蛋白尿，出现白蛋白及分子量更大的转铁蛋白，免疫球蛋白，有时甚量更
32、大的转铁蛋白，免疫球蛋白，有时甚至出现至出现2-巨球蛋白。巨球蛋白。分子量越大损伤越严重，这里可以初步估分子量越大损伤越严重，这里可以初步估计出蛋白尿的选择性，作为判断肾小球损计出蛋白尿的选择性，作为判断肾小球损伤严重程度及肾小球病变预后评价的一个伤严重程度及肾小球病变预后评价的一个重要指标重要指标。78Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾小管重吸收肾小管重吸收肾小管可重吸收被肾小球滤出的低分子量蛋肾小管可重吸收被肾小球滤出的低分子量蛋白质白质(70kDa)。(activeendocytosis)99%被肾小球滤出的蛋白质可被肾小管重吸收，被肾小球滤出的蛋白质可被肾小管重吸收，例如，白蛋白
33、每天可被滤出例如，白蛋白每天可被滤出18g，但在生理性终末，但在生理性终末尿中仅尿中仅30mg/天。天。肾小管损害可减弱对低分子量蛋白质肾小管损害可减弱对低分子量蛋白质( 70 kDa 70 kDa白蛋白 70 kDaSer混合损害，以肾小管为主81Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用电泳图谱表现电泳图谱表现出现较多的轻链二聚体，微球蛋白，游离轻链，出现较多的轻链二聚体，微球蛋白，游离轻链，视黄醇结合蛋白，溶菌酶，视黄醇结合蛋白，溶菌酶，2微球蛋白等低分子微球蛋白等低分子量蛋白质，且各蛋白组分所占比例较均一。量蛋白质，且各蛋白组分所占比例较均一。其所含浓度越大提示肾小管损伤越严重。婴幼儿其所
34、含浓度越大提示肾小管损伤越严重。婴幼儿肾小管性蛋白尿以视黄醇结合蛋白为主，而且尿肾小管性蛋白尿以视黄醇结合蛋白为主，而且尿视黄醇结合蛋白排泄量升高是较敏感的肾近曲小视黄醇结合蛋白排泄量升高是较敏感的肾近曲小管损伤的诊断指标。管损伤的诊断指标。82Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用混合损害混合损害 70 kDa 70 kDa白蛋白 70 kDa83Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾前性蛋白尿肾前性蛋白尿主要是由于高血压，高热，心脏或肝脏衰竭等造主要是由于高血压，高热，心脏或肝脏衰竭等造成成血中蛋白浓度病理性升高，超过肾小管重吸收能力时血中蛋白浓度病理性升高，超过肾小管重吸收能力时所排出
35、的包含各种特殊蛋白成分。所排出的包含各种特殊蛋白成分。原因原因游离轻链，见于多发性骨髓瘤 2 微球蛋白，见于淋巴组织增生综合征 溶菌酶，见于部分急性粒细胞白血病血红蛋白，见于溶血性疾病 1酸性糖蛋白,见于支气管肺癌肌红蛋白，见于横纹肌分解这些原因亦可导致肾脏病变这些原因亦可导致肾脏病变(有游离轻链时，可见特征性有游离轻链时，可见特征性Bence-Jones本本-周氏周氏蛋白蛋白)84Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾前性蛋白尿（溢出性蛋白尿）肾前性蛋白尿（溢出性蛋白尿） 70 kDa 70 kDa白蛋白 70 kDa2号标本 经BME处理后85Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用图谱表
36、现图谱表现在电泳图谱中表现为溢出性蛋白尿，可在小分在电泳图谱中表现为溢出性蛋白尿，可在小分子区发现少量的深染条带子区发现少量的深染条带注意要与肾小管损伤性蛋白尿区分。注意要与肾小管损伤性蛋白尿区分。如多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦病及其他如多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦病及其他原因导致的淋巴系统病理性增殖，其电泳图谱原因导致的淋巴系统病理性增殖，其电泳图谱与肾小管损伤性蛋白尿的主要区别在于本周氏与肾小管损伤性蛋白尿的主要区别在于本周氏蛋白谱带单一，各带含量大小很不均匀，自由蛋白谱带单一，各带含量大小很不均匀，自由轻链或轻链二聚体所占比例大于总量的轻链或轻链二聚体所占比例大于总量的30%；而肾小管损伤性
37、蛋白尿，分子量小于白蛋白的而肾小管损伤性蛋白尿，分子量小于白蛋白的各小分子量蛋白带出现较多，且各蛋白组分所各小分子量蛋白带出现较多，且各蛋白组分所占比例较均一。占比例较均一。溢出性血（肌）红蛋白尿与肾小管损伤性溢出性血（肌）红蛋白尿与肾小管损伤性蛋白尿的鉴别与本周氏蛋白尿相似，只是具体蛋白尿的鉴别与本周氏蛋白尿相似，只是具体谱带位置不一样而已。谱带位置不一样而已。86Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用肾后性蛋白尿肾后性蛋白尿非肾损伤性情况下终尿中混入肾以下泌尿、非肾损伤性情况下终尿中混入肾以下泌尿、生殖系血液成分、细菌菌体蛋白和毒素等生殖系血液成分、细菌菌体蛋白和毒素等蛋白质而引起的蛋白尿
38、。蛋白质而引起的蛋白尿。常见于肾盂，输尿管，膀胱，尿道的炎症，常见于肾盂，输尿管，膀胱，尿道的炎症，肿瘤，结石。肿瘤，结石。87Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用图谱表现图谱表现细菌菌体蛋白和毒素在电泳实验中因其蛋白分细菌菌体蛋白和毒素在电泳实验中因其蛋白分子量及所带电荷与人体蛋白差异较大，在特定子量及所带电荷与人体蛋白差异较大，在特定的实验条件下常不出现于电泳板的蛋白谱带可的实验条件下常不出现于电泳板的蛋白谱带可视范围内视范围内其鉴别关键在于将混入尿内的血液成分蛋白定其鉴别关键在于将混入尿内的血液成分蛋白定性且结合临床表现及尿常规结果与肾小球损伤性且结合临床表现及尿常规结果与肾小球损伤性和混合性肾损伤性蛋白尿加以鉴别。肾后性性和混合性肾损伤性蛋白尿加以鉴别。肾后性蛋白尿蛋白尿33KDa/70KDa比值远较肾小球损伤性和比值远较肾小球损伤性和混合损伤性蛋白尿的比值要小混合损伤性蛋白尿的比值要小160KDa/70KDa和和160KDa/70KDa比值要远大于后两者。比值要远大于后两者。88Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用其他项目其他项目脑脊液蛋白电泳脑脊液蛋白电泳血红蛋白电泳血红蛋白电泳糖化血红蛋白电泳糖化血红蛋白电泳LDH同功酶和同功酶和CK同功酶电泳同功酶电泳脂蛋白电泳脂蛋白电泳89Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用90Sebia-全自动凝胶电泳仪的临床应用
