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1、第一节第一节概述概述( (一）定义和分类一）定义和分类1.定义：碳水化合物统称为糖类，是由碳、定义：碳水化合物统称为糖类，是由碳、氢、氧三种元素组成的一大类化合物。氢、氧三种元素组成的一大类化合物。它是人体热能的主要来源，人体活动的它是人体热能的主要来源，人体活动的热能的热能的6070由它供给。它是构成机体的一由它供给。它是构成机体的一种重要物质，并参与细胞的许多生命过程。种重要物质，并参与细胞的许多生命过程。一些一些糖糖+蛋白质蛋白质糖蛋白、糖糖蛋白、糖+脂肪脂肪糖脂，这糖脂，这些都是具有重要生理功能的物质。些都是具有重要生理功能的物质。第四章第四章糖类物质的测定糖类物质的测定喇慰鉴屠徘尤柜
2、琵俊哨耪玄很敌霓礁蛇酱沥嘿万腹旦粒型英佳择介册隙洋第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定碳水化合物是碳水化合物是C、H、O三元素组成一类多三元素组成一类多羟基醛或多羟基酮化合物，而且绝大多羟基醛或多羟基酮化合物，而且绝大多数氢原子是氧原子的两倍。即氢与氧为数氢原子是氧原子的两倍。即氢与氧为2：1。它们的比例与水分的组成相同（水。它们的比例与水分的组成相同（水分子分子H2O）。因此被人们称为）。因此被人们称为“碳水化碳水化合物合物”即写成即写成CH2O。它们可用通式。它们可用通式Cn（H2O）m表示，好像碳的水化物。但是表示，好像碳的水化物。但是笼统地说糖类称为笼统地说糖类称为CH2O是不太确
3、切的。是不太确切的。草献睦爬亭疫接爷番摔慰窄挝疫肿醒绷肺简耐照缓筛撵增眠烹寸剔孝麦景第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定比如，我们熟悉的甲醛，它的分子式为比如，我们熟悉的甲醛，它的分子式为CH2O，醋酸醋酸C2H4O2，乳酸，乳酸C3H6O3，从它们的结构上，从它们的结构上讲都类似于讲都类似于H与与O2：1的关系。按照这个比的关系。按照这个比例它们都应属于碳水化合物，但是以上几个物例它们都应属于碳水化合物，但是以上几个物质都没有糖类的特性，所以它们不是碳水化合质都没有糖类的特性，所以它们不是碳水化合物。物。又比如，又比如，5104去氧核糖，还有鼠李糖去氧核糖，还有鼠李糖6125。这些属于糖
4、类，但不符合上面的比例。这些属于糖类，但不符合上面的比例。因此称碳水化合物是因此称碳水化合物是C、H、O组成，通式为组成，通式为Cn（H2O）m是不确切的，但是历史上一直沿用是不确切的，但是历史上一直沿用下来，而且人们也习惯了，所以至今仍然采用。下来，而且人们也习惯了，所以至今仍然采用。嘎绳侥丫鹊闯边眯枝桅朝锥故无毕唉帆被纫乱脖簿索胎犊鼻唇厂颗析瘸韩第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定2.分类分类碳水化合物存在于各种食品的原料中（特别是植物性碳水化合物存在于各种食品的原料中（特别是植物性原料中）。原料中）。作为食品工业的主要原料和辅助材料。作为食品工业的主要原料和辅助材料。在各种食品中存在
5、形式和含量不一。在各种食品中存在形式和含量不一。按有机化学可将糖分为单糖、双糖、多糖三类，现代营按有机化学可将糖分为单糖、双糖、多糖三类，现代营养工作者将其分为两类：有效碳水化合物、无效碳水养工作者将其分为两类：有效碳水化合物、无效碳水化合物。化合物。在食物成分表中，食品中碳水化合物含量通常以总碳水在食物成分表中，食品中碳水化合物含量通常以总碳水化合物或无氮抽出物来表示，二者都以减差法计算。化合物或无氮抽出物来表示，二者都以减差法计算。总碳水化合物（总碳水化合物（%）=100-（水分（水分+粗蛋白质粗蛋白质+灰分灰分+粗粗脂肪）脂肪）%无氮抽出物（无氮抽出物（%）=100-（水分（水分+粗蛋白
6、质粗蛋白质+灰分灰分+粗脂粗脂肪肪+粗纤维素）粗纤维素）%弗谤却邮榷蚌催沤湾缅临蒸饼臃卧则赠摧澡历临萧急咒烟扼擞寿传攒驾甩第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定有效碳水化合物有效碳水化合物人体能消化利用的单糖、双糖、多糖中的人体能消化利用的单糖、双糖、多糖中的淀粉。淀粉。无效碳水化合物无效碳水化合物多糖中的纤维素、半纤维素、果胶等不能多糖中的纤维素、半纤维素、果胶等不能被人体消化利用的。被人体消化利用的。这些无效碳水化合物能促进肠道蠕动，改善消化系统机能，这些无效碳水化合物能促进肠道蠕动，改善消化系统机能，对维持人体健康有重要作用，是人们膳食中不可缺少的成分。对维持人体健康有重要作用，是人们
7、膳食中不可缺少的成分。膳食纤维膳食纤维：指人们的消化系统或者消化系统中的酶不能消化、：指人们的消化系统或者消化系统中的酶不能消化、分解、吸收的物质，但是消化系统中的微生物能分解利用其中分解、吸收的物质，但是消化系统中的微生物能分解利用其中一部分。一部分。膳食纤维的重要性膳食纤维的重要性：膳食纤维对促进良好的消化和排泄固体废物有着举足轻重的作膳食纤维对促进良好的消化和排泄固体废物有着举足轻重的作用。适量地补充纤维素，可使肠道中的食物增大变软，促进肠用。适量地补充纤维素，可使肠道中的食物增大变软，促进肠道蠕动，从而加快了排便速度，防止便秘和降低肠癌的风险。道蠕动，从而加快了排便速度，防止便秘和降低
8、肠癌的风险。辑桩契奎加火啸邱氨兰郡睹恍彭译呻枣瓢讽而巢前鬼夕摩拳蛊嘶舟谣局囱第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v另外，纤维素还可调节血糖，有助预防糖尿病。又可另外，纤维素还可调节血糖，有助预防糖尿病。又可以减少消化过程对脂肪的吸收，从而降低血液中胆固以减少消化过程对脂肪的吸收，从而降低血液中胆固醇、甘油三脂的水平，防治高血压、心脑血管疾病的醇、甘油三脂的水平，防治高血压、心脑血管疾病的作用。作用。每日摄入量标准每日摄入量标准：国际相关组织推荐的膳食纤维素日摄入量为：美国防国际相关组织推荐的膳食纤维素日摄入量为：美国防癌协会推荐标准为每人每天癌协会推荐标准为每人每天3040克，欧洲共同体食
9、克，欧洲共同体食品科学委员会推荐标准为每人每天品科学委员会推荐标准为每人每天30克。克。什么食物中含膳食纤维最多？什么食物中含膳食纤维最多？糙米和胚牙精米，以及玉米、小米、大麦、小麦皮糙米和胚牙精米，以及玉米、小米、大麦、小麦皮（米糠）和麦粉（黑面包的材料）等杂粮；此外，根（米糠）和麦粉（黑面包的材料）等杂粮；此外，根菜类和海藻类中食物纤维较多，如胡萝卜、四季豆、菜类和海藻类中食物纤维较多，如胡萝卜、四季豆、红豆、豌豆、薯类和裙带菜等。红豆、豌豆、薯类和裙带菜等。酉乍氯蚀巴赋隆赐掏混堆蒲布刚斋菩钵虹渝签壳撮肺漾闷紧豢脚涨氨斧乎第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定膳食纤维经过了膳食纤维经过了
10、30多年的研究和发展，成为发达多年的研究和发展，成为发达国家广泛流行的保健食品，据悉，在欧美，高国家广泛流行的保健食品，据悉，在欧美，高纤维类产品的年销售已过纤维类产品的年销售已过300亿美元。在日本亿美元。在日本食用纤维素类产品的年销售近食用纤维素类产品的年销售近100亿美元。并亿美元。并正式将之列为继糖、蛋白质、脂肪、水、矿物正式将之列为继糖、蛋白质、脂肪、水、矿物质和维生素之后的质和维生素之后的第七大营养素第七大营养素。专家们一。专家们一致认为：纤维食品将是致认为：纤维食品将是21世纪主导食品之一。世纪主导食品之一。二、测定意义二、测定意义1、糖对于新生婴儿来说是最理想的。、糖对于新生婴
11、儿来说是最理想的。Eg：乳糖，因为婴儿消化道内含有较多的乳糖酶，：乳糖，因为婴儿消化道内含有较多的乳糖酶，这种乳糖酶能把乳糖分解成葡萄糖和半乳这种乳糖酶能把乳糖分解成葡萄糖和半乳糟蹬兔驱映黎筷阶赂苍相规腆型糖雍档椅臼腑新皑宰桩成帖蹭炊屡黍偏和第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定糖。而半乳糖是构成婴儿脑神经的重要物质。乳糖对于成年人糖。而半乳糖是构成婴儿脑神经的重要物质。乳糖对于成年人来说，由于体内乳糖酶减少。乳糖不易被吸收。来说，由于体内乳糖酶减少。乳糖不易被吸收。2、糖是焙烤食品的主要成分之一。、糖是焙烤食品的主要成分之一。在焙烤食品中，糖与蛋白质发生美拉德反应在焙烤食品中，糖与蛋白质发
12、生美拉德反应,增加了食品增加了食品的色、香、味。的色、香、味。3.生理方面：生理方面：1）提供能量（糖与蛋白质结合成糖蛋白，糖蛋白都是构成软）提供能量（糖与蛋白质结合成糖蛋白，糖蛋白都是构成软骨、骨骼等结缔组织的基质成分）骨、骨骼等结缔组织的基质成分）2）构成细胞成分）构成细胞成分3）促进消化（果蔬中的纤维素、果胶虽不能被消化机体利用、）促进消化（果蔬中的纤维素、果胶虽不能被消化机体利用、但可促进胃肠蠕动和消化但可促进胃肠蠕动和消化.但它分泌有助于正常消化和排便但它分泌有助于正常消化和排便功能功能.）发酵工程方面：发酵工程方面：集缺择福兵腿石旬舆考眺溉齿包瘟轻秤舞猪苟羔原走瓶埔拄帖纹詹郴迅衡第
13、五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定二. 糖类物质的分布和含量v葡萄糖，果糖: 水果，蔬菜：0.96-5.82，0.85-6.53v蔗糖：甘蔗，甜菜：10-15， 15-20；西瓜，菠萝： 4，8v乳糖：动物乳汁，牛乳4.7v麦芽低聚糖，异麦芽低聚糖在自然界不存在，而由淀粉水解或转苷产生v低聚果糖，低聚半乳糖，低聚木糖自然界少，多由人工酶法合成v淀粉，纤维素，果胶在植物普遍存在荤寐掺剿篙遣若烷歇槛榷仁遮诽添淘帘瓜工令傲困孪抛汾葛艾鸡郸浪挑团第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定三、食品中糖类物质的测定方法：三、食品中糖类物质的测定方法：相对密度法相对密度法折光法折光法 旋光法旋光法物理法物
14、理法 物理法物理法 化学法化学法 色谱法色谱法 发酵法发酵法 酶酶 法法 重量法重量法渐棘卡定涟尝皑僚翅栏踞汁温虚旺窥赖哮可酝爵抡隅狂歪矾癣竭巢兢浩就第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定直接滴定法法直接滴定法法(改良的兰改良的兰爱农法）爱农法）高锰酸钾法高锰酸钾法萨氏法萨氏法3，5二硝基水杨酸二硝基水杨酸酚酚硫酸法硫酸法蒽酮法蒽酮法半胱氨酸半胱氨酸咔唑法咔唑法化学法化学法还原糖法还原糖法碘量法碘量法比色法比色法檄请谎拜矽游盖孩助堡蔚辞蝇殉丑耕毗捂顿贫嗽旷答拎绽辰揪陶氨员熟企第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定纸色谱纸色谱薄层色谱薄层色谱GCHPLC半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖半乳糖脱氢酶
15、测半乳糖、乳糖葡萄糖氧化酶测葡萄糖葡萄糖氧化酶测葡萄糖发酵法发酵法测不可发酵糖测不可发酵糖重量法重量法测果胶、纤维素、膳食纤维素测果胶、纤维素、膳食纤维素 色谱法色谱法 酶法酶法网值尚衣快敬械护拾烘霄堑淮听四企紫恫拥比缅灾中挽域男蓬稠芥丈象省第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定第二节第二节可溶性糖类的测定可溶性糖类的测定一、一、可溶性糖类的提取和澄清可溶性糖类的提取和澄清食品中可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖及蔗食品中可溶性糖类通常是指葡萄糖、果糖等游离单糖及蔗糖等低聚糖。一般须将样品磨碎、浸渍成溶液（提取液），糖等低聚糖。一般须将样品磨碎、浸渍成溶液（提取液），经过滤后再测定。经
16、过滤后再测定。（一）提取（一）提取1.常用的提取剂有水及乙醇溶液。常用的提取剂有水及乙醇溶液。a.水作提取剂水作提取剂用水作提取剂，温度控制在用水作提取剂，温度控制在45-50，利用水作提，利用水作提取剂时，还有取剂时，还有pro、氨基酸、多糖、色素干扰，影响过滤、氨基酸、多糖、色素干扰，影响过滤时间，所以用水作提取剂应注意三个问题时间，所以用水作提取剂应注意三个问题雇附搏端叼骇埃宏瞒筹鹰桨谅询毁少初嘉簧完胎锯脾芯卯烛项党单意湖队第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定注意：注意：1）温度过高：使可溶性淀粉及糊精提取）温度过高：使可溶性淀粉及糊精提取出来出来。2）酸性样品：酸性使糖水解（转化）
17、，）酸性样品：酸性使糖水解（转化），所以酸性样品应用碳酸钙中和、提取，但应控所以酸性样品应用碳酸钙中和、提取，但应控制在中性。制在中性。3）萃取的液体：有酶活性时，能使糖水）萃取的液体：有酶活性时，能使糖水解，加二氯化汞可防止（二氯化汞可抑制酶活解，加二氯化汞可防止（二氯化汞可抑制酶活性）性）b.乙醇（水溶液）作提取液乙醇（水溶液）作提取液乙醇作提取液适用于含酶多的样品乙醇作提取液适用于含酶多的样品，这样避免糖，这样避免糖被水解。被水解。高转涕膜毒搭溯壬乓十设泄维椒匹匿宇敏般茹慎送探奈辽垫剑允义截拦卢第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定乙醇的浓度乙醇的浓度70-80。浓度过高，蛋白质及大多
18、。浓度过高，蛋白质及大多数糖都不能溶解，用乙醇的目的，降低酶的作数糖都不能溶解，用乙醇的目的，降低酶的作用，避免糖被酶水解。用，避免糖被酶水解。2.提取液制备的原则提取液制备的原则取样量与稀释倍数的确定取样量与稀释倍数的确定,一般提取液经净化一般提取液经净化和可能的转化后，每毫升含糖量应在和可能的转化后，每毫升含糖量应在0.53.5mg。含脂肪的食品，须经脱脂后再用水提取。一含脂肪的食品，须经脱脂后再用水提取。一般以石油醚处理一次或几次，每次处理后，倾般以石油醚处理一次或几次，每次处理后，倾去石油醚层，然后用水提取。去石油醚层，然后用水提取。掀振朵鲤喳勉怖铺锐檄躁狂预奔劲荒伦私巨戒本忻懦垦敷子
19、吕涪皑宅双迈第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定含有大量淀粉、糊精及蛋白质的食品，如谷类制含有大量淀粉、糊精及蛋白质的食品，如谷类制品、某些蔬菜、调味品，用水提取会使部分淀粉、品、某些蔬菜、调味品，用水提取会使部分淀粉、糊精溶出，影响测定，同时过滤也困难，宜采用糊精溶出，影响测定，同时过滤也困难，宜采用用乙醇溶液提取。乙醇溶液的浓度应高到足以使用乙醇溶液提取。乙醇溶液的浓度应高到足以使淀粉和糊精沉淀，通常用淀粉和糊精沉淀，通常用7075的乙醇溶液。的乙醇溶液。用乙醇作提取剂时，提取液不用除蛋白质，因为用乙醇作提取剂时，提取液不用除蛋白质，因为蛋白质不会溶解出来。蛋白质不会溶解出来。含酒精和
20、二氧化碳的液体样品，应先蒸发至原体含酒精和二氧化碳的液体样品，应先蒸发至原体积的积的1/31/4，以除酒精、，以除酒精、CO2。但酸性食品，在。但酸性食品，在加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性，加热前应预先用氢氧化钠调节样品溶液至中性，以防止低聚糖被部分分解。以防止低聚糖被部分分解。诗何矢锄浓簇症戒恃聪变袁巨换檀摈仰巳蒸银希迸观猖味掳包寅翻怠猪箍第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定提取固体样品时，为提高提取效果，有提取固体样品时，为提高提取效果，有时需加热，加热温度一般控制在时需加热，加热温度一般控制在4050，一般不超过，一般不超过80，温度过高时可，温度过高时可溶性多糖溶出，增加
21、下步澄清工作的负溶性多糖溶出，增加下步澄清工作的负担。担。辈桅荐祥时獭艘渝燃盼误则辩疙务贮箱饯隐损玲妙厚亨蛊窟昏瓢霍爸他绊第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定中性醋酸铅中性醋酸铅【Pb(CH3COO)23H2O】乙酸锌和亚铁氰化钾溶液乙酸锌和亚铁氰化钾溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液硫酸铜和氢氧化钠溶液还有碱性醋酸铅、还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭等。氢氧化铝溶液、活性炭等。（二）（二） 提取液的澄清提取液的澄清1.常用澄清剂要符合三点要求：常用澄清剂要符合三点要求：a.能较完全的除去干扰物质；能较完全的除去干扰物质；b.不吸不吸附或沉淀被测糖分，也不改变被测糖分的理化性质；附或沉淀被测糖分
22、，也不改变被测糖分的理化性质；c.过剩的澄清过剩的澄清剂应不干扰后面的分析操作，或易于除掉。剂应不干扰后面的分析操作，或易于除掉。2.常用澄清剂的种类常用澄清剂的种类 作用：沉淀一些干扰物质，使提取液清亮透明，达到准确的测量糖类。作用：沉淀一些干扰物质，使提取液清亮透明，达到准确的测量糖类。（常用澄清剂来澄清）（常用澄清剂来澄清）哥裹否亿揉抱咯炔谜敲戮刷挡吸撰段酸妊杉媚抨辟托喜伙超枯觉驳瑶臭尚第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定中性醋酸铅：这是最常用的一种澄清剂。铅离中性醋酸铅：这是最常用的一种澄清剂。铅离子能与很多离子结合，生成难溶沉淀物，同时子能与很多离子结合，生成难溶沉淀物，同时吸附
23、除去部分杂质。它能除去蛋白质、果胶、吸附除去部分杂质。它能除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等杂质。它的作用较可靠，不会有机酸、单宁等杂质。它的作用较可靠，不会沉淀样液中的还原糖，在室温下也不会形成铅沉淀样液中的还原糖，在室温下也不会形成铅糖化合物，因而适用于测定还原糖样液的澄清。糖化合物，因而适用于测定还原糖样液的澄清。但它的脱色能力较差，不能用于深色样液的澄但它的脱色能力较差，不能用于深色样液的澄清。铅盐有毒，使用需注意。清。铅盐有毒，使用需注意。恼库漏懦渤燕憨惠恐睡饱长藉氯孪晦对潮穿痛霍膊朽甥詹妊吠绿铝炬森椭第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定乙酸锌和亚铁氰化钾溶液：它是利用乙酸乙酸锌和
24、亚铁氰化钾溶液：它是利用乙酸锌与亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉锌与亚铁氰化钾反应生成的氰亚铁酸锌沉淀来挟走或吸附干扰物质。这种澄清剂除淀来挟走或吸附干扰物质。这种澄清剂除蛋白质能力强，但脱色能力差，适用于色蛋白质能力强，但脱色能力差，适用于色泽较浅，蛋白质含量高的样液的澄清，如泽较浅，蛋白质含量高的样液的澄清，如乳制品、豆制品等。乳制品、豆制品等。硫酸铜和氢氧化钠溶液：这种澄清剂是由硫酸铜和氢氧化钠溶液：这种澄清剂是由硫酸铜溶液和硫酸铜溶液和1mol/L氢氧化钠溶液组成，氢氧化钠溶液组成，在碱性条件下，铜离子可使蛋白质沉淀，在碱性条件下，铜离子可使蛋白质沉淀，适合于富含蛋白质的样品的澄清。适
25、合于富含蛋白质的样品的澄清。圆匿撰沤盐耶遵罐诚没娱锣驰涕妄钳断慧恩猪始输瓤谜粹森墒十惋赡黎岂第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v此外还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭此外还有碱性醋酸铅、氢氧化铝溶液、活性炭等也可作为澄清剂。但碱性醋酸铅能沉淀还原等也可作为澄清剂。但碱性醋酸铅能沉淀还原糖；氢氧化铝溶液澄清效果差，只能除去胶态糖；氢氧化铝溶液澄清效果差，只能除去胶态杂质；活性炭能吸附糖类造成糖的损失。这些杂质；活性炭能吸附糖类造成糖的损失。这些缺点限制了他们在糖类分析上的应用。缺点限制了他们在糖类分析上的应用。3.3.澄清剂的用量澄清剂的用量 用量必须适当，太少，达不到澄清的目的，用量必
26、须适当，太少，达不到澄清的目的，太多，会使分析结果产生误差。太多，会使分析结果产生误差。 如用中性醋酸铅作为溶剂时，一般先向样液如用中性醋酸铅作为溶剂时，一般先向样液中加入中加入1 13 ml 3 ml 澄清剂，充分混合后静置澄清剂，充分混合后静置1515分分钟，向上层清液中加入几滴中性醋酸铅，如无钟，向上层清液中加入几滴中性醋酸铅，如无凿姿哨帽裴少虫茶弹胜剿匿旬永回栗晚絮健招柑曲楔炳误垢从乃泛饰贪御第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定新的沉淀生成，说明杂质已沉淀完全。如有新的新的沉淀生成，说明杂质已沉淀完全。如有新的沉淀形成，就再混匀并静置几分钟，如此重复沉淀形成，就再混匀并静置几分钟，
27、如此重复直至无沉淀形成为止。直至无沉淀形成为止。4.4.样液除铅样液除铅 澄清后的样液中含有铅离子，在加澄清后的样液中含有铅离子，在加热样液时，铅能与还原糖（特别是果糖）热样液时，铅能与还原糖（特别是果糖）结合生成铅糖化合物，结果使测得的还原结合生成铅糖化合物，结果使测得的还原糖含量虚假的降低。因此，经铅盐澄清的糖含量虚假的降低。因此，经铅盐澄清的样液必须除铅。样液必须除铅。诲一毡镰巩阳艺早初魄警喜悸甩臼膝妻狮歌藏联苞疼溶决宽窍乾蔗肿妹详第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定常用的除铅剂有草酸钠、草酸钾、硫酸钠、磷酸氢常用的除铅剂有草酸钠、草酸钾、硫酸钠、磷酸氢二钠等。使用时可以固体状态加入
28、，也可以液体二钠等。使用时可以固体状态加入，也可以液体状态加入。但应注意，如用固体除铅剂，应先将状态加入。但应注意，如用固体除铅剂，应先将样液定量到一定体积后再加入；如用液体除铅剂，样液定量到一定体积后再加入；如用液体除铅剂，应在加入除铅剂后再定容。除铅剂的用量也要适应在加入除铅剂后再定容。除铅剂的用量也要适当，在保证使铅完全沉淀的前提下，尽量少用。当，在保证使铅完全沉淀的前提下，尽量少用。二、二、 还原糖的测定还原糖的测定 还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中，还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的双糖都
29、具有还原性。基的双糖都具有还原性。娟匠宇爬腰指叼冕桅怂颤璃吃笛衔川挤区磺陀茎棕趴砖讣星世团礁戳耍屏第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子中含有游离酮基，乳糖和麦芽糖分子中含有中含有游离酮基，乳糖和麦芽糖分子中含有游离的潜醛基，它们都是还原糖。其他双糖游离的潜醛基，它们都是还原糖。其他双糖乃至多糖本身不具有还原性，属于非还原性乃至多糖本身不具有还原性，属于非还原性糖，但都可以通过水解而生成相应的还原性糖，但都可以通过水解而生成相应的还原性糖，测定水解液的还原糖含量就可以求得样糖，测定水解液的还原糖含量就可以求得样品中相应糖类
30、的含量。因此，还原糖的测定品中相应糖类的含量。因此，还原糖的测定是一般糖类定量的基础。是一般糖类定量的基础。殷蒸乖苛集楚钻喷匹枷抒俐拇趣黄依密无开堰油逞规啃堂宪苔睡蛮郡樟谗第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定二、二、 还原糖的测定还原糖的测定还原糖的测定方法：还原糖的测定方法：碱性铜盐法碱性铜盐法碘量法碘量法( (醛糖）醛糖）比色法：比色法：3 3，5 5二硝基水杨酸比色法二硝基水杨酸比色法 半胱氨酸咔唑法半胱氨酸咔唑法（有葡萄糖存在时果糖的测定）（有葡萄糖存在时果糖的测定）酶法酶法直接滴定法高锰酸钾法萨氏法题酿培毯颠氢诬继氟难戍领硼骸饭瘟兰移己慢犊张镊录圃端艘烽逛坚棱丑第五章糖类物质的测
31、定第五章糖类物质的测定直接滴定法（直接滴定法（碱性铜盐法之一，碱性铜盐法之一，是是GBGB法）法）（1）原理：将一定量的原理：将一定量的碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜甲、乙甲、乙液等量混合，立即生成天蓝色的液等量混合，立即生成天蓝色的氢氧化铜氢氧化铜沉淀；沉淀；这这种沉淀很快与种沉淀很快与酒石酸钾钠酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶反应，生成深蓝色的可溶性性酒石酸钾钠铜酒石酸钾钠铜络合物。络合物。在加热条件下，样品液滴定，样中的还原糖与在加热条件下，样品液滴定，样中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀；酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀；这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络这种沉
32、淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物；二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次合物；二价铜全部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由甲基蓝还原，溶液由兰色变为无色兰色变为无色，即为滴定终点；，即为滴定终点；根据样液消耗量可计算出还原糖含量。根据样液消耗量可计算出还原糖含量。甲液：硫酸铜甲液：硫酸铜+次甲基蓝次甲基蓝碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠+NaOH+亚铁氰化钾亚铁氰化钾好挤巢奥炊盅瑟立凸哄勉岛唉姐秤韶涩愤怒诱离辆祈二毯旱牛弥工梗丫蛔第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定Cu2+2NaOHCu(OH)2+NaSO4Cu(OH)2+酒石酸钾钠酒石酸钾钠=酒石
33、酸钾钠铜酒石酸钾钠铜2H2O6酒石酸钾钠铜还原糖醛酸酒石酸钾钠铜还原糖醛酸6酒酒石酸钾钠石酸钾钠3Cu2OH2CO3次甲基蓝次甲基蓝蓝色氧化态蓝色氧化态无色还原态无色还原态稍多的稍多的还原糖将还原糖将次次甲基蓝还原甲基蓝还原使变色使变色，指示铜离子滴定终指示铜离子滴定终点点滴加的还原糖被滴加的还原糖被氧化，其量与铜氧化，其量与铜有计量关系有计量关系可溶性络合物具可溶性络合物具有氧化性有氧化性碱性酒石酸铜中的碱性酒石酸铜中的铜离子是定量的铜离子是定量的直接滴定法测定原理直接滴定法测定原理被亚铁氰化钾溶解被亚铁氰化钾溶解溶液由溶液由兰色变为无色兰色变为无色绽光邱釜这猾黔蒜翘坝咏镐积租笨铸利漾固藤岿
34、膏乐畔牺颜洛佰狄磊椅操第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定Cu2+还原糖还原糖Cu+理论上1 mol葡萄糖6 molCu 2（Cu）实际上的复杂性： 1 mol葡萄糖6 molCu 2（Cu）因此未知样品测定结果计算时，将采用还原糖标准溶因此未知样品测定结果计算时，将采用还原糖标准溶液滴定的结果，推算出每液滴定的结果，推算出每10ml10ml碱性酒石酸铜溶液相当碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量于还原糖的质量叔昌迢罪锋擎裁函琢柞耀搀脯臣施河顾良额嗜醉拿逗弱幕疫墓陶时呜砚躬第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 （2）适用范围及特点）适用范围及特点本法又称快速法，其特点是试剂用量少，操本法
35、又称快速法，其特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等样品时，因色素干扰，滴定终点油、深色果汁等样品时，因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。常常模糊不清，影响准确性。v本法是国家标准分析方法。本法是国家标准分析方法。楼内拯庄讨帧肉铁谋蚊纲褒万三波羌汕蝇牺衷烩助讳贮马侈择域币缨尽窜第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定（3）说明与讨论）说明与讨论碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜+次甲基蓝次甲基蓝碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾
36、钠碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠+NaOH+亚亚铁氰化钾铁氰化钾乙酸锌溶液乙酸锌溶液亚铁氰化钾溶液亚铁氰化钾溶液葡萄糖标准溶液：准确称取经葡萄糖标准溶液：准确称取经98100干干燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入燥至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后移入1000m1容量瓶中，加入容量瓶中，加入5m1盐酸盐酸(防止微生物生长防止微生物生长)。澄清剂澄清剂综境匈沸傅骋搔刷赞欧左鹃牛撤歹芳抢州借恶勺裸下过羊垛买搔毁赎您拷第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 测定方法测定方法样品处理样品处理取适量样品，样品进行提取，提取液移取适量样品，样品进行提取，提取液移入入250m1容量瓶中，慢慢加入容量瓶中，慢慢
37、加入5m1乙酸乙酸锌溶液和锌溶液和5m1亚铁氰化钾溶液，加水至刻亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，摇匀后静置度，摇匀后静置30分钟。用干燥滤纸过滤，分钟。用干燥滤纸过滤，弃初滤液，收集滤液备用。弃初滤液，收集滤液备用。瓣站长石眠惹逻妆汐扛托袖琐剧撑洁樊塔厉屿贰胳沟芹任啄飘蒲值缺锁博第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定样品溶液预测样品溶液预测吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置，置于于250m1锥形瓶中，加水锥形瓶中，加水10ml加玻璃珠加玻璃珠3粒，粒，加热使其在加热使其在2分钟内至沸，准确沸腾分钟内至沸，准确沸腾30秒钟，秒钟，趁趁热以先快后慢的速度从滴定管
38、中热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液滴加样品溶液滴加样品溶液滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时以每变浅时以每2秒秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。践箍住误肛叉虎峦兼蒂砾丹前按间垂宅镁赘少酞符愁国彤寅纤四胁晚滓窍第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定样品溶液测定样品溶液测定吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各吸取碱性洒石酸铜甲液及乙液各5.00ml，置，置于于250ml锥形瓶中，加玻璃珠锥形瓶中，加玻璃珠3粒，从滴定管中粒，从
39、滴定管中加入比预测时样品溶液消耗总体积少加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品的样品溶液，加热使其在溶液，加热使其在2分钟内沸腾，准确沸腾分钟内沸腾，准确沸腾30秒秒钟，趁热以每钟，趁热以每2秒秒1滴的速度继续滴加样液，直至滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点。蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。同法平行操作记录消耗样品溶液的总体积。同法平行操作3份，份，取平均值。取平均值。秒习虐氓丛泳伟骤乍炉野梦联渺彭劝拟眉抱雷熟逊颇奢裹遇橙删冀躺枢幕第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v计算还原糖量的方法：计算还原糖量的方法：v1.用已知浓度的葡萄糖标准溶液标定的用已知浓度的葡
40、萄糖标准溶液标定的方方法。法。v2.利用通过实验编制出的还原糖检索表利用通过实验编制出的还原糖检索表来计算。来计算。珍夕宿万审莽挤鸳埋圃浙勃舶揍君札徽捡侵肿耿旱照拽哭朱袋降梳紫省霓第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定6说明与讨论说明与讨论此法测得的是总还原糖量。此法测得的是总还原糖量。在样品处理时，不能用铜盐作为澄清剂，以免在样品处理时，不能用铜盐作为澄清剂，以免样液中引入样液中引入Cu2+，得到错误的结果。，得到错误的结果。碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会
41、慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。效浓度降低。中乡咋悯狱槛榴缎饿解鲍医俯铬巧苑馁喝细道鼎援噬坞耐捐隧绅晌棚邑继第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定滴定必须在沸腾条件下进行，其原因滴定必须在沸腾条件下进行，其原因一是可以加快还原糖与一是可以加快还原糖与Cu2+的反应速度；的反应速度；二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基二是次甲基蓝变色反应是可逆的，还原型次甲基蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。蓝遇空气中氧时又会被氧化为氧化型。三三氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。氧化亚铜也极不稳定，易被空气中氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进
42、入，保持反应液沸腾可防止空气进入，次甲基蓝和氧化亚铜被氧化将增加耗糖量。次甲基蓝和氧化亚铜被氧化将增加耗糖量。钵里晴枉牺劈稿申记粳朝柒着霞探米褪操傍烽蜕邹晦慎谚氖赋况匿页质柑第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。中。样品溶液预测的目的；一是本法对样品溶液样品溶液预测的目的；一是本法对样品溶液中还原糖浓度有一定要求中还原糖浓度有一定要求(0.1%左右左右)，测定时，测定时样品溶液的消耗体积应与标定葡萄糖标准溶液样品溶液的消耗体
43、积应与标定葡萄糖标准溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液时消耗的体积相近，通过预测可了解样品溶液浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，浓度是否合适，浓度过大或过小应加以调整，使预测时消耗样液量在使预测时消耗样液量在10ml左右；左右；您硅嗓闻纲哭厄揽务蛮悉驹舶辰场薪秆防馏红碍冠绣洼加阔坠送青涛账即第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定二是通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正二是通过预测可知道样液大概消耗量，以便在正式测定时，预先加入比实际用量少式测定时，预先加入比实际用量少1ml左右的左右的样液，只留下样液，只留下1ml左右样液在续滴定时加入，左右样液在续滴定时加入，以保证在以保
44、证在1分钟内完成续滴定工作，提高测定的分钟内完成续滴定工作，提高测定的准确度。准确度。影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度、煮沸时间和滴定速度。反应液的碱度热源强度、煮沸时间和滴定速度。反应液的碱度直接影响二价铜与还原糖反应的速度、反应进行直接影响二价铜与还原糖反应的速度、反应进行的程度及测定结果。的程度及测定结果。吓验铡崩年应尔阮磅须堂触楞蛛畸有襄迄扶曾藉总又朱育稚践橙弘镜狈灿第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定在一定范围内，溶液碱度愈高，二价铜的还原愈快。在一定范围内，溶液碱度愈高，二价铜的还原愈快。因此，必须严格控制反应液的体积，标
45、定和测定时因此，必须严格控制反应液的体积，标定和测定时消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致。消耗的体积应接近，使反应体系碱度一致。热源一般采用热源一般采用800w电炉，电炉温度恒定后才电炉，电炉温度恒定后才能加热，热源强度应控制在使反应液在两分钟内沸能加热，热源强度应控制在使反应液在两分钟内沸腾，且应保持一致。否则加热至沸腾所需时间就会腾，且应保持一致。否则加热至沸腾所需时间就会不同，引起蒸发量不同，使反应液碱度发生变化，不同，引起蒸发量不同，使反应液碱度发生变化，从而引入误差。从而引入误差。熄赁栓吁禽者乡涂浪坝轻践砚丸蛾艺校绣哗盏梢帕舰损漳蚕灵色蜗玄江挽第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测
46、定(二二)高锰酸钾滴定法高锰酸钾滴定法原理原理1.将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过滤，得到氧化亚铜沉淀，氧化亚铜沉淀，2.氧化亚铜沉淀中加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化氧化亚铜沉淀中加入过量的酸性硫酸铁溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，溶解，而三价铁盐被定量地还原为亚铁盐，3.用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量，酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜的量
47、，4.再从检索表中查出与氧化亚铜量相当的还原糖量，即再从检索表中查出与氧化亚铜量相当的还原糖量，即可计算出样品中还原糖含量。可计算出样品中还原糖含量。悄有蚤沦句笺喉坛勇阻呵辟邵姥则酞鸟坛辙锄朽绎剃蝗饯低酵疾胶一菌讼第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定各步反应式如下：各步反应式如下：Cu2+ + 还原糖还原糖 Cu2O（碱性酒石酸铜过量）（碱性酒石酸铜过量） （分离沉淀）（分离沉淀）高锰酸钾滴定法原理高锰酸钾滴定法原理加热加热非完全化学计量完全化学计量完全化学计量10FeSO4+2KMnO4+8 H2SO4 = 5Fe2(SO4)3 +2MnSO4 +K2SO4 +8H2O （高锰酸钾标准溶
48、液滴定，定量亚铁）（高锰酸钾标准溶液滴定，定量亚铁） 定量氧化定量氧化亚铜亚铜Cu2O+Fe2(SO4)3 +H2SO4 = 2CuSO4 + 2FeSO4 + H2O（酸性硫酸铁过量，得到亚铁）（酸性硫酸铁过量，得到亚铁）由反应式可知：由反应式可知：5mol5mol氧化亚铜相当于氧化亚铜相当于2mol2mol高锰酸钾，故由滴定高高锰酸钾，故由滴定高锰酸钾量可知氧化亚铜量，再有书表锰酸钾量可知氧化亚铜量，再有书表1010可查的相当的还原糖的量可查的相当的还原糖的量蒸贷恰峙码桂较谭禁逗茂搁后坦曙宇还讣戊壬王滞根酣诗倦泪鸽士算笺蛙第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 2适用范围及特点适用范围及
49、特点本法是国家标准分析方法，适用于各类食品中本法是国家标准分析方法，适用于各类食品中还原糖的测定，有色样液也不受限制。方法的准还原糖的测定，有色样液也不受限制。方法的准确度高，重现性好，准确度和重现性都优于直接确度高，重现性好，准确度和重现性都优于直接滴定法。但操作复杂、费时，也需使用糖类检索滴定法。但操作复杂、费时，也需使用糖类检索表。表。优喝肋尸尊笼舅讹童约咨否十逝裴营怂蜗加蓝金寥茅差扔敏界攀非喂赘墙第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定试剂和仪器碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜碱性酒石酸铜甲液：硫酸铜+硫酸，过滤硫酸，过滤碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠碱性酒石酸铜乙液：酒石酸钾钠+NaOH，过滤
50、，过滤高锰酸钾标准溶液的制备：溶解煮沸密闭保存高锰酸钾标准溶液的制备：溶解煮沸密闭保存过滤保存于棕色瓶标定过滤保存于棕色瓶标定古氏坩埚古氏坩埚真空泵真空泵识蚕浅性击瞄韧傣硕美樟筐泌锦宫挫券柯挨埃于促帕碳诣酷虹炭汛包痒集第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定1.吸取吸取50ml样品溶液（含约样品溶液（含约50mg还原糖）于还原糖）于400ml烧杯中，加入甲乙液各烧杯中，加入甲乙液各25ml，盖上表面皿，在一，盖上表面皿，在一定功率的电炉上加热，使定功率的电炉上加热，使4分钟内沸腾（此时溶液分钟内沸腾（此时溶液显示有过量显示有过量Cu2存在的蓝色【酒石酸钾钠铜络离存在的蓝色【酒石酸钾钠铜络离子的
51、颜色】），再准确沸腾子的颜色】），再准确沸腾2分钟，趁热用铺好石分钟，趁热用铺好石棉的古氏坩埚抽滤，用棉的古氏坩埚抽滤，用60度蒸馏水洗涤烧杯和沉度蒸馏水洗涤烧杯和沉淀，至洗液不呈碱性；淀，至洗液不呈碱性；2.将坩埚放回将坩埚放回400ml烧杯，加入烧杯，加入25ml酸性硫酸铁溶酸性硫酸铁溶液及液及25ml水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解；水，用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解；3.用高锰酸钾标准溶液滴定至微红色，用高锰酸钾标准溶液滴定至微红色，30秒不褪为秒不褪为终点；记录标准溶液消耗量；终点；记录标准溶液消耗量；4.以水代替样液，作空白对照试验。以水代替样液，作空白对照试验。嗅邓宠暂固吕闺籍应蔽
52、褪朋璃碾保氟机像泛帆溢码荒肠择畴宇烂岛埃韩却第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定高锰酸钾法中加入的铜盐和铁盐是过量的GluCu2O需要加入Cu离子量需要加入硫酸铁标准反应需要量0.28mmol0.84mmol1.68mmol0.84mmol实际加入量6.55mmol3.125mmol恍被咨舟姻升足铅咨颖张蔡派眺罕益蹈碾诫菜蕴正甘颗他膘故乎林握停踞第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定高锰酸钾法说明：v样品处理：澄清时不用亚铁氰化钾，因为反应核心是亚铁离子v含糖浓度控制：测定用样液含糖浓度在0.01-0.45%,过大过小都带来误差；v加入的碱式铜盐是过量的，煮沸后的反应液应为蓝色（有过剩的
53、铜离子存在），如果不呈蓝色，表明糖浓度过大v热源强度控制，保证4min内加热至沸腾v过滤洗涤沉淀时保持在液面下，避免被空气氧化v还原糖与碱性铜盐反应过程复杂，需要经验检索表匀浓簧靡句咆锋瓶熔怯茅磊比壬歹耽犊脐坎戏深菱帝区文脆闯淀傍彬啸劳第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定测定原理测定原理1.将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热，样将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热，样液中的还原糖液中的还原糖定量地定量地将二价铜还原为氧化亚铜，将二价铜还原为氧化亚铜，2.生成的氧化亚铜在酸性条件下溶解为一价铜离子，生成的氧化亚铜在酸性条件下溶解为一价铜离子，并能定量地消耗游离碘（游离碘由萨氏试剂中的并
54、能定量地消耗游离碘（游离碘由萨氏试剂中的KIO3与后来加入的与后来加入的KI反应而来），碘被还原为碘反应而来），碘被还原为碘化物，而一价铜被氧化为二价铜。化物，而一价铜被氧化为二价铜。3.剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，根据硫代剩余的碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定，根据硫代硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘硫酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量，从而计算出样品中还原糖含量。量，从而计算出样品中还原糖含量。(三三)萨氏法萨氏法傲荐酸拇梧之伴菊仇巍浮西钥祸萎功寒喇袭跌昂缔掀寥贝樊米场悄奥口邻第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定各步反应式如下：各步反应式如下：Cu2+还原糖还原糖Cu
55、2OCu2O+H2SO4=2Cu+SO42-+H2OKIO3+5KI+3H2SO4=3K2SO4+3H2O+3I22Cu+I2=2Cu2+2I-I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI（滴定剩余I2）得到Na2S2O3消耗量反应的I2量Cu+量还原糖量萨氏萨氏(Somogyi)法测定原理法测定原理硫代硫酸钠滴定空白所得的碘量减去样品的碘量苑凰析恩靡纠唉悔魁淋辰术穿敦株仆攻没伞霓扛职恶尾菱蝗核腺桥距沃帚第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定萨氏萨氏(Somogyi)法的特点法的特点微量法，检出量微量法，检出量0.015-3mg重现性好重现性好样品用量少样品用量少终点清晰终点清晰有色样不
56、受限制有色样不受限制瘤域镜矽甜佐要敌域艺蜘漆踩破惦徘岩阁闹诧练凛钱滴剐卵万柿讲续拭绪第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定试剂及仪器v萨氏试剂：放置数天，微孔玻璃漏斗过滤v碘化钾溶液：放棕色瓶v0.005M硫代硫酸钠标准溶液：先配制20倍液，在使用时稀释。标定时使用精确定量的干燥碘酸钾，加入过量KI和硫酸，生成游离碘，用此硫代硫酸钠溶液滴定掺彦闺坛可和篓憨笨辜掸尼鬃娟毙腆锤站寝鄂吼漓冯谅歼那惜琵堪污柳遏第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定测定过程v样品处理：同前，调整样液还原糖浓度至0.003-0.6mg/mlv取5ml样液移入25200cm试管，加入5ml萨氏试剂，摇匀v沸水浴一定时间
57、后，马上用流动水冷却，徐徐加入2ml KI溶液，迅速加入1.5ml 1M硫酸，摇匀使沉淀全部溶解，v用0.005M标准溶液滴定：接近终点时，溶液变淡黄，加入1ml 0.5淀粉指示剂，滴定至蓝色消失，记录硫代硫酸钠标准溶液消耗量，同时作空白对照膛敬碟闷独奔抒牟二履准长贴丈杂驴搜踌婪嘎冬固案洁收了麻云伎么哀密第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定原理原理样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加入入一定量过量的碘液和过量的氢氧化钠一定量过量的碘液和过量的氢氧化钠溶液，样溶液，样液中的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠，液中的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠
58、， 由于由于反应液中碘和氢氧化钠都是过量的，两者作反应液中碘和氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在反应液用生成次碘酸钠残留在反应液中，中，当加入盐酸使当加入盐酸使反应液呈酸性时，析出碘反应液呈酸性时，析出碘，用硫代硫酸钠标准溶，用硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，则可计算出氧化醛糖消耗的碘液滴定析出的碘，则可计算出氧化醛糖消耗的碘量，从而计算出样液中醛糖的含量。量，从而计算出样液中醛糖的含量。碘量法碘量法甲沉庸捉悉典束橱户盾舰庶因爬萎锭裂舰搽驱沫啼往饲臭首副腔袁茫梯妻第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定醛糖醛糖+I2+3NaOH=醛糖酸钠醛糖酸钠+2NaI+2H2OI2（剩余）（剩
59、余）+2NaOH=NaIO+NaI+H2ONaIO+NaI+2HCl=I2+2NaCl+H2OI2+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6在一定范围内，以化学反应式定量计算，在一定范围内，以化学反应式定量计算，1mmol碘相当于葡萄糖碘相当于葡萄糖180mg，麦芽糖，麦芽糖342mg，乳糖，乳糖360mg 硫代硫酸钠滴定空白所得的碘量减去样品的碘量硫代硫酸钠滴定空白所得的碘量减去样品的碘量姚划迁椅卤闯基锅董刽秘夜榨厨贾后千亦试小鞍矗财坐釉邑肋逗福赣佐鄂第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定适用范围适用范围本法用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖（葡萄糖）本法用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖（葡
60、萄糖）和有半缩醛羟基的糖（乳糖和麦芽糖）。适用于各和有半缩醛羟基的糖（乳糖和麦芽糖）。适用于各类食品，如硬糖、异构糖、果汁等样品中葡萄糖的类食品，如硬糖、异构糖、果汁等样品中葡萄糖的测定。测定。且馏逢杖新赞抒氯嗅叔纤欲风翁而磷利蹿峰吸玲诣晃督纶杯踞谁商松疤呼第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定方法说明方法说明1.通过控制反应液的碱度如用碳酸钠代替氢氧通过控制反应液的碱度如用碳酸钠代替氢氧化钠、反应温度（室温化钠、反应温度（室温)防止酮糖氧化；防止酮糖氧化；2.在合适的碱性条件下醛糖与碘的反应完全按在合适的碱性条件下醛糖与碘的反应完全按反应式进行；反应式进行；3.样品中的乙醇、丙酮会消耗碘，
61、应先除去；样品中的乙醇、丙酮会消耗碘，应先除去；4.配合直接滴定法，可测定含葡萄糖和果糖样配合直接滴定法，可测定含葡萄糖和果糖样品中的果糖。品中的果糖。忆拳茹硒犀蛤糙八裙卫尝吟柔茅汀僵融墙沙产涎世扭结讥氰集篷裔涅高逢第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定DNS法测定还原糖在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质(3-氨基-5-硝基水杨酸)颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖的含量。晨坡骡僵诫卖呸恍沧烃匪量拐散住竭盛唾亢写剐写乞绷肩钓群避臃戴部纯第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定街秀虚径声狠义姑菏壁碰郎娜惨蹄栅剩钾颠屏
62、智吵班拜腐温卑蝗杜放填坯第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定暗纂肋岗余僧写里咳荚罩拔王凌卤僧颖缝瞬拐寨寐怒鳃桌缀狞兹感承固点第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定葡萄糖氧化酶法实验原理 vD-葡糖糖GOD D-葡萄糖酸+ H2O2 vH2O2+4-AAP+苯酚POD红色醌化物+H2Ov试管 移液管 UNICO-2000型分光光度计 恒温水浴锅v酶试剂：葡萄糖氧化酶（GOD）过氧化物酶（POD） 4-氨基安替吡啉（4-AAP）v酚试剂：苯酚 v标准葡萄糖溶液：100 mg/dL (5.55 mmol/L)匈钙寒雄水免棚呜按凝合宦厢伶扣聚韶阉誓桐爹膳点巍函背芬凭捡戎抬甫第五章糖类物质的测定第
63、五章糖类物质的测定实验步骤 v按下表加入各反应物： 加入物（ml）空白管标准管测定管葡萄糖标准液 0.020 血清样品 酶试剂1.501.501.50酚试剂1.501.501.50混匀，混匀，37保温保温15min，以空白管调零，以空白管调零，505nm波长处测定波长处测定各管吸光度值。各管吸光度值。向产捉哲律芽姻抚陨梅钳连耙奠伪鲸套呛身谤骨顽烁缕稍驶驱密六胀翻一第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定三、蔗糖的测定三、蔗糖的测定 蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还蔗糖是葡萄糖和果糖组成的双糖，没有还原性，不能用碱性铜盐试剂直接测定，但在一定原性，不能用碱性铜盐试剂直接测定，但在一定条件下，
64、蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖和果条件下，蔗糖可水解为具有还原性的葡萄糖和果糖（混合物称为转化糖）。因此，可以用测定还糖（混合物称为转化糖）。因此，可以用测定还原糖的方法测定蔗糖含量。原糖的方法测定蔗糖含量。对于纯度较高的蔗糖溶液，其相对密度、对于纯度较高的蔗糖溶液，其相对密度、折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定折光率、旋光度等物理常数与蔗糖浓度都有一定关系，故也可用物理检验法测定。关系，故也可用物理检验法测定。苑榷痴卉挤铱妙酚勃遍锑瞒迂密交皑壮搭翔钥旱话叙夏朽迈悠犯吴轿齿唬第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 1原理原理样品脱脂后，用水或乙醇提取，提取液经澄清样品脱脂后，用水或乙
65、醇提取，提取液经澄清处理以除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，处理以除去蛋白质等杂质，再用盐酸进行水解，使蔗糖转化为还原糖。然后按还原糖测定方法分使蔗糖转化为还原糖。然后按还原糖测定方法分别测定水解前后样品液中还原糖含量，别测定水解前后样品液中还原糖含量，两者差值两者差值即为由蔗糖水解产生的还原糖量即为由蔗糖水解产生的还原糖量，乘以一个换算，乘以一个换算系数即为蔗糖含量。系数即为蔗糖含量。龟胶棠谓蜂孟拷触歇修蝎坟榜博寥观愿眨难仕毡税葬姨腔它演斧擎厚嫁谊第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定2.试剂试剂用用0.1转化糖标准溶液标定斐林试剂（同高锰转化糖标准溶液标定斐林试剂（同高锰酸钾法的碱性酒
66、石酸铜甲乙液）。酸钾法的碱性酒石酸铜甲乙液）。 3测定方法测定方法样品处理及蔗糖水解：取一定量样品，按直接滴样品处理及蔗糖水解：取一定量样品，按直接滴定法或高锰酸钾滴定法中的定法或高锰酸钾滴定法中的样品处理方法处理样品处理方法处理，吸，吸取处理后的样液取处理后的样液2份各份各50ml，分别放入，分别放入l00ml容量瓶容量瓶中，一份加入中，一份加入5ml6molL盐酸溶液，置盐酸溶液，置6870水浴中加热水浴中加热15分钟，取出迅速冷却至室温，加分钟，取出迅速冷却至室温，加2滴甲滴甲基红指示剂，用基红指示剂，用NaOH溶液中和至中性，加水至刻度，溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。另一份直接用水
67、稀释到混匀。另一份直接用水稀释到100m1。然后按直接滴定法或高锰酸钾滴定法测定还原糖含然后按直接滴定法或高锰酸钾滴定法测定还原糖含量。量。买钱京偶谅誊坤死柏寞秃虾鳖岭红春荐摔翠次闻盼宰嗽谗益典泊辰从舒陛第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定方法说明v蔗糖水解条件简单，在本方法规定条件下其它双糖水解可忽略不计v严格控制水解条件，包括样液体积、酸的浓度用量、水解温度和时间，冷却迅速，防止果糖分解v选用直接滴定法时，用0.1标准转化糖溶液标定碱性酒石酸铜溶液；选用高锰酸钾法时，查转化糖项檄固颁腥疙抛揭咀眷镶乐咸叉聋双铜紧迫向守贡葡塞目践瞧游镜疥炕厚桐第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定1、盐
68、酸水解法。（GB/T5009.8)C12H22O11 + H2O 2C6H12O6 （蔗糖，342） （转化糖，360）故由转化糖的含量换算成蔗糖含量时，应乘以系数：342/360=0.95茬腔鉴联烙鞍泪灵茬洞末面雏砚佑惟潘锁时炽凑姚志告陌郎总嘻厚妨虫隔第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定2、酶比色法（P128） 蔗糖 + H2O 葡萄糖 + 果糖 葡萄糖酸 + H2O2 有色物质 (比色测定)v详见GB/T16286-1996。-D-果糖苷酶-FS显色剂过氧化氢酶葡萄糖氧化酶(GOD)v过氧化物酶（POD） 4-氨基安替吡啉（4-AAP）H2O2+4-AAP+苯酚POD红色醌化物+H2O
69、505nm波长处测定各管吸光度值。波长处测定各管吸光度值。西牲淄呆仕雏甘侮瞳蜂悼打随遂租饶烬互烁廷惭我庆皖称三判问需还芯喻第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定食品中的总糖通常是指具有还原性的糖食品中的总糖通常是指具有还原性的糖(葡萄糖、葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等果糖、乳糖、麦芽糖等)和在测定条件下能水解和在测定条件下能水解为还原性单糖的蔗糖的总量。为还原性单糖的蔗糖的总量。总糖总糖是食品生产中常规分析项目。它反映的是食是食品生产中常规分析项目。它反映的是食品中品中可溶性单糖和低聚糖的总量可溶性单糖和低聚糖的总量。总糖的测定通常是以还原糖的测定方法为基础的，总糖的测定通常是以还原糖的测定方
70、法为基础的，常用的是直接滴定法、蒽酮比色法等常用的是直接滴定法、蒽酮比色法等 四、总糖的测定四、总糖的测定羚寺贱茶启爪臭终驼时称尺腺窒烃俊咒咎藉剃痰筷款届据懦炕护盛柒滓闭第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定总糖测定之直接滴定法原理总糖测定之直接滴定法原理样品经处理除去蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加样品经处理除去蛋白质等杂质后，加入盐酸，在加热条件下使蔗糖水解为还原性单糖，以直接滴定法热条件下使蔗糖水解为还原性单糖，以直接滴定法测定水解后样品中的还原糖总量。测定水解后样品中的还原糖总量。 (二二)蒽酮比色法蒽酮比色法1原理原理单糖类遇浓硫酸时，脱水生成糠醛衍生物，后单糖类遇浓硫酸时，脱水生成
71、糠醛衍生物，后者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，当糖的量在者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，当糖的量在一定浓度范围内时其呈色强度与溶液中糖的含一定浓度范围内时其呈色强度与溶液中糖的含量成正比，故可比色定量。量成正比，故可比色定量。睬固助舷党路凹勋宫舒帕癸睦场门寄撂链胎韭旦衡碍弗栈碑贰其肚蛰与扮第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定测定方法1.吸取系列标准溶液、样品溶液和蒸馏水各吸取系列标准溶液、样品溶液和蒸馏水各2ml（分别作为（分别作为标准曲线、样品和空白对照样）于具塞比色管中；标准曲线、样品和空白对照样）于具塞比色管中；2.沿管壁各加入蒽酮试剂沿管壁各加入蒽酮试剂10ml，立即摇匀，放沸水浴
72、中加热，立即摇匀，放沸水浴中加热10分钟，取出，迅速冷却至室温，在暗处放置分钟，取出，迅速冷却至室温，在暗处放置10分钟；分钟；3.用用1cm比色杯，以空白对照样调节零点，在比色杯，以空白对照样调节零点，在620nm下测定下测定吸光度；吸光度；4.绘制标准曲线；根据样品溶液的吸光度查标准曲线，得出绘制标准曲线；根据样品溶液的吸光度查标准曲线，得出糖含量。糖含量。1.该法为微量法，灵敏度高，试剂用量少该法为微量法，灵敏度高，试剂用量少2.蒽酮试剂不稳定，容易氧化变褐，硫脲可作为稳定蒽酮试剂不稳定，容易氧化变褐，硫脲可作为稳定剂，剂，48小时内使用小时内使用3.此法的样液必须清澈透明，加热后不应有
73、蛋白沉淀此法的样液必须清澈透明，加热后不应有蛋白沉淀药性逸坎渭鞘吃信矗渤奖飞凿苯淬寐逞养竭方域觉阔邵钦鸟晚泪悦莎泉肠第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定五、可溶性糖的分离与定量 前面介绍的都有是几种糖的总量，如需要对每一种糖分别进行定性和定量，则普通的物理方法、化学方法不能胜任。现在一般都采用层析法，包括纸层析，薄层层析、气相色谱、高效液相色谱、离子色谱、电泳层析等。 雁煞朵诚颈寿曝霍醉藤递杨葛锅窒锋绅蓑缎事华饶询拥缕蝴羌喜异熬卤朋第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定1、气相色谱糖类物质属于非挥发性物质，如能制成具有挥发性的衍生物，则可采用气相色谱法（GC）测定。常用的衍生物有：三氯硅
74、烷（TMS）衍生物、三氟乙酰（TEA）衍生物、乙酰衍生物和甲基衍生物等，以前两种最常用。详见教材P131-P132或有关专门书籍。著奏由涛访护疤爪证抡苟道残琢寐迎奇厉繁饯岁味卒度宣臼听涉陷誓谅帮第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定2、高效液相色谱 此法发展很快，在可溶性糖的分离与定性定量中，应用最普遍。样品溶液经适当的前处理后，选择适当的分离柱、流动相几乎可作为所有的游离糖的测定。如QB/T2491-2000介绍的例子。 冒禄钵娱躺宜瞒浇阶乓兹雷侈狄批瓤哮皖惑剧沧秃闯获悸瘪型绚王菲章圭第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定第三节第三节淀粉的测定淀粉的测定 淀粉是一种多糖。它广泛存在于植物
75、的根、茎、淀粉是一种多糖。它广泛存在于植物的根、茎、叶、种子等组织中，是人类食物的重要组成部分，叶、种子等组织中，是人类食物的重要组成部分，也是供给人体热能的主要来源。也是供给人体热能的主要来源。 淀粉是由葡萄糖单位构成的聚合体，按聚合形淀粉是由葡萄糖单位构成的聚合体，按聚合形式不同，可形成两种不同的淀粉分子式不同，可形成两种不同的淀粉分子直链淀粉直链淀粉和支链淀粉。和支链淀粉。壮啡囱焊氦字拼玉浸夫头悉庞肄响邱琢蜒求柬误附娩拳俊致晤顽涟又授峦第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v淀粉的主要性质如下：淀粉的主要性质如下：水溶性：直链淀粉不溶于冷水，可溶于热水，支水溶性：直链淀粉不溶于冷水，可
76、溶于热水，支链淀粉常压下不溶于水。只有在加热并加压时才链淀粉常压下不溶于水。只有在加热并加压时才能溶解于水。能溶解于水。醇溶性：不溶于浓度在醇溶性：不溶于浓度在30以上的乙醇溶液。以上的乙醇溶液。水解性：在酸或酶的作用下可以水解，最终产物水解性：在酸或酶的作用下可以水解，最终产物是葡萄糖。是葡萄糖。旋光性：淀粉水溶液具有右旋性旋光性：淀粉水溶液具有右旋性20为为(+)201.5一一205。与碘有呈色反应（是碘量法的专属指示剂）与碘有呈色反应（是碘量法的专属指示剂）廉瘸久核嗣打蓖骑凿洪逊朝醛成扮栋厘依橙危托似腆铁去戍解沙蔡呛火流第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定淀粉的测定方法有多种，常用的
77、方法有：淀粉的测定方法有多种，常用的方法有：酸水解法酸水解法酶水解法酶水解法旋光法旋光法酸化酒精沉淀法酸化酒精沉淀法根戮鹊拖址崩柒伶慨喧车袖催卉严王茬逢榔侥及转始嚷别迎跋瑶存根斋侍第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定 、酸水解法、酸水解法（一）（一）原理原理 样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，样品经乙醚除去脂肪，乙醇除去可溶性糖类后，用盐酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定葡用盐酸水解淀粉为葡萄糖，按还原糖测定方法测定葡萄糖含量，再折算为淀粉含量（萄糖含量，再折算为淀粉含量（162/1800.9)。 （二）适用范围及特点（二）适用范围及特点此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素等其
78、他多糖此法适用于淀粉含量较高，而半纤维素等其他多糖含量较少的样品。该法操作简单、应用广泛，但选择含量较少的样品。该法操作简单、应用广泛，但选择性和准确性不及酶法。性和准确性不及酶法。铆豁霓箭惺渗逛察摈三勤又圆枢放链囊纫办涯坯甲氧纹似英倪音恒涌踪先第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定（三）测定方法v样品处理：样品处理：v磨碎或捣碎，取含淀粉约磨碎或捣碎，取含淀粉约0.5g的样品量，用的样品量，用乙醚分三次提取脂肪，乙醚分三次提取脂肪，85150ml乙醇分数乙醇分数次洗涤以除去可溶性糖，以次洗涤以除去可溶性糖，以100ml水将残渣水将残渣转移到转移到250ml锥形瓶锥形瓶卸局挑蔡谚纪谢半城淘粉
79、晒喘胞挨岁暇巢挺鱼摩包螟榆攫渤恳页全仑药另第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v水解：水解：1.在锥形瓶中加入在锥形瓶中加入30ml6M盐酸，沸水浴上回流盐酸，沸水浴上回流2hr，立即用冷却水冷却，调中性；，立即用冷却水冷却，调中性；2.加入加入20ml20醋酸铅，摇匀后放置醋酸铅，摇匀后放置10分钟，以沉分钟，以沉淀蛋白质和果胶等杂质；淀蛋白质和果胶等杂质；3.加入加入20ml10硫酸钠以除去多余的铅；摇匀后转硫酸钠以除去多余的铅；摇匀后转移到移到500ml容量瓶，加水定容，过滤容量瓶，加水定容，过滤v空白对照样品，取空白对照样品，取100ml水和水和30ml6M盐酸，同上盐酸，同上操作
80、操作v测定：直接滴定法、高锰酸钾法测定：直接滴定法、高锰酸钾法灿讼奉保摹杯冗尾蛊缺窒抗留擒冉亚沙喳蛊劣悉四面蛆胶教霉阎瞪本骨链第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定（四）说明与讨论（四）说明与讨论1.样品预处理要求先将可溶性糖类，可通过样品预处理要求先将可溶性糖类，可通过85乙乙醇洗涤数次，测定范围不包括糊精时，醇洗涤数次，测定范围不包括糊精时，可用可用10乙醇洗涤；脂肪含量高时，要先将脂肪除去，以乙醇洗涤；脂肪含量高时，要先将脂肪除去，以减小对可溶性糖的洗涤效果的影响减小对可溶性糖的洗涤效果的影响2.酸水解条件要保证淀粉水解完全，但避免加热时酸水解条件要保证淀粉水解完全，但避免加热时间过长
81、造成糠醛聚合体，使失去还原性；因此对间过长造成糠醛聚合体，使失去还原性；因此对盐酸浓度、样品量、时间都有限制，采用回流装盐酸浓度、样品量、时间都有限制，采用回流装置使酸浓度保持稳定。置使酸浓度保持稳定。3.国家标准分析方法中，样品中加入盐酸浓度至国家标准分析方法中，样品中加入盐酸浓度至5，100度水解度水解2hr4.水解液冷却后，立即调至中性水解液冷却后，立即调至中性5.再用中性乙酸铅溶液沉淀蛋白、果胶，再加入硫再用中性乙酸铅溶液沉淀蛋白、果胶，再加入硫酸钠除去过量的铅酸钠除去过量的铅笆棱匆戏驳锣唤蹋凉诅萌损输航砸旷吊瞧忙化绒栈覆曲最愉伞兆椭迸何接第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定二、酶
82、水解法二、酶水解法1、原理、原理样品除去脂肪和可溶性糖类后，在淀粉酶作用样品除去脂肪和可溶性糖类后，在淀粉酶作用下水解为麦芽糖和低分子糊精，以可溶性糖形下水解为麦芽糖和低分子糊精，以可溶性糖形式提取出来，再用盐酸进一步水解为葡萄糖，式提取出来，再用盐酸进一步水解为葡萄糖，按还原糖测定法测定还原糖含量，折算为淀粉按还原糖测定法测定还原糖含量，折算为淀粉含量含量颜婆炭琶纂凤虑晌稻迹舌宫筑树滨迎记罗纱惯揭挽勋蠢赵葫督辕忌铃售建第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定（二）适用范围及特点（二）适用范围及特点v先以酶使淀粉部分水解，使变为可溶性部分，先以酶使淀粉部分水解，使变为可溶性部分，提取后可与其它
83、不溶性多糖分开，所以可用于提取后可与其它不溶性多糖分开，所以可用于纤维素、半纤维素和其它多糖含量高的样品，纤维素、半纤维素和其它多糖含量高的样品，v在操作中需严格控制酶水解条件如在操作中需严格控制酶水解条件如pH和温度，和温度，使应用范围受限制使应用范围受限制榨魔筑吟尺双帐捡泳姿生症慕匠闲奏愤谊钎盔肆蚁褥阁粗崖神窿参戚兽底第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定测定方法v样品处理：称取含样品处理：称取含0.5g淀粉的样品，在漏斗的滤纸淀粉的样品，在漏斗的滤纸中用中用50ml乙醚分乙醚分5次洗涤脱脂肪，再用约次洗涤脱脂肪，再用约100ml85乙醇分次洗去可溶性糖类，残渣用乙醇分次洗去可溶性糖类，
84、残渣用50ml水移到水移到250ml烧杯中烧杯中v酶水解：酶水解：1糊化：沸水浴糊化：沸水浴15分钟，放冷至分钟，放冷至60度以下；度以下；2水解：加入水解：加入20ml淀粉酶，淀粉酶，5560度保温度保温1hr，中，中间取一滴用碘液测试是否残留淀粉；加热至沸腾使间取一滴用碘液测试是否残留淀粉；加热至沸腾使酶失活；移入酶失活；移入250ml容量瓶，加水定容；混匀后过容量瓶，加水定容；混匀后过滤滤盾娜坞震支岿孝吴驾焕帜悦究秧浆寂韧格汞吩较纳吁潍柿柏椽龟汰采汁娘第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v酸水解：取酸水解：取50ml滤液到滤液到250ml锥形瓶中，加锥形瓶中，加5ml6M盐酸，在沸水
85、浴上回流盐酸，在沸水浴上回流1hr，冷却后用氢氧化钠调，冷却后用氢氧化钠调pH中性；水解液移入中性；水解液移入100ml容量瓶，定容容量瓶，定容v空白对照：取空白对照：取50ml水替代样品进行酶水解，加入酶水替代样品进行酶水解，加入酶量同样品处理量同样品处理牺搅削庐络巴蚁盟其二翠盒股氮崇浅总鼠迫煎玉茨抽缘哨腋中胎皖疵厦层第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定淀粉糊化淀粉糊化淀粉吸水溶胀，破坏晶格结构，变成粘淀粉吸水溶胀，破坏晶格结构，变成粘度很大的淀粉糊，使其易被淀粉酶作度很大的淀粉糊，使其易被淀粉酶作用。用。常用的淀粉酶是麦芽淀粉酶，是常用的淀粉酶是麦芽淀粉酶，是淀粉酶和淀粉酶和淀粉淀粉酶
86、的混合物，前者水解直链淀粉为麦芽糖和葡萄酶的混合物，前者水解直链淀粉为麦芽糖和葡萄糖，水解支链淀粉为麦芽糖、异麦芽糖和葡萄糖；糖，水解支链淀粉为麦芽糖、异麦芽糖和葡萄糖；后者水解两种淀粉为麦芽糖后者水解两种淀粉为麦芽糖淀粉降解过程中，粘度迅速下降，用碘液显色为淀粉降解过程中，粘度迅速下降，用碘液显色为蓝、红、无色；酶解终点为无色蓝、红、无色；酶解终点为无色庶怨茄吼咋匣惩楞程车瘦忱蛤太面互富衍欲毁箭雷朝载绸撇趋裕幼便挟静第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定三、旋光法三、旋光法1原理原理淀粉具有旋光性，在一定条件下旋光度的大小淀粉具有旋光性，在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用氯化钙
87、溶液提取淀粉，与淀粉的浓度成正比。用氯化钙溶液提取淀粉，使之与其他成分分离，用氯化锡沉淀提取液中的使之与其他成分分离，用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质后，测定旋光度，即可计算出淀粉含量。蛋白质后，测定旋光度，即可计算出淀粉含量。2适用范围及待点适用范围及待点本法适用于淀粉含量较高，而可溶性糖类含量本法适用于淀粉含量较高，而可溶性糖类含量很少的谷类样品，如面粉、米粉等。操作简便、很少的谷类样品，如面粉、米粉等。操作简便、快速。快速。豫紊矢抨氏院姓咨操韩囚沤野颈绳喘龋登酮赠呈芬袱褐阐揩融悉奶葡勇掂第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定3.测定方法测定方法把样品研磨并通过把样品研磨并通过40目以上的标
88、准筛，称取目以上的标准筛，称取2g样样品，置于品，置于250ml烧杯中，加水烧杯中，加水10ml，搅拌使样品湿润，搅拌使样品湿润，加入加入70ml氯化钙溶液，盖上表面皿，在氯化钙溶液，盖上表面皿，在5分钟内加热分钟内加热至沸腾并继续加热至沸腾并继续加热15分钟。加热时随时搅拌以防样品分钟。加热时随时搅拌以防样品附在烧杯壁上。如泡沫过多可加附在烧杯壁上。如泡沫过多可加12滴辛醇消泡。迅滴辛醇消泡。迅速冷却后，移入速冷却后，移入100ml容量瓶中，用氯化钙溶液洗涤容量瓶中，用氯化钙溶液洗涤烧杯上附着的样品，洗液并入容量瓶中。加烧杯上附着的样品，洗液并入容量瓶中。加5ml氯化锡氯化锡溶液，用氯化钙溶
89、液定容至刻度，混匀，过滤，弃去溶液，用氯化钙溶液定容至刻度，混匀，过滤，弃去初滤液，收集滤液装入观测管中，测定旋光度。初滤液，收集滤液装入观测管中，测定旋光度。4.结果计算结果计算淀粉（）淀粉（）式中：式中：旋光度读数，度；旋光度读数，度；L观测管长度，观测管长度，dm；m样品质量，样品质量，g；203淀粉的比旋光度，度。淀粉的比旋光度，度。鹃砷乐帖死悲烃愁造脆娶摹躬踊派蹭恍端客迪骨粱禽揭挎迁雇裁馆趴松粮第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定5.说明说明a.氯化钙溶液可以作为淀粉的提取剂，是因氯化钙溶液可以作为淀粉的提取剂，是因为钙能与淀粉分子上的羟基形成络合物，为钙能与淀粉分子上的羟基形成
90、络合物，使淀粉与水有较高的亲和力而易溶于水中。使淀粉与水有较高的亲和力而易溶于水中。b.氯化锡溶液的作用是沉淀蛋白质，因为蛋氯化锡溶液的作用是沉淀蛋白质，因为蛋白质也具有旋光性（左旋）。蛋白质含量白质也具有旋光性（左旋）。蛋白质含量较高的样品，如高蛋白营养米粉，用旋光较高的样品，如高蛋白营养米粉，用旋光法测定结果偏低，误差较大。法测定结果偏低，误差较大。痪页眼潦授莱歉镭蚊噪腰骂岭告疹蓄妆坠袭髓籍儡彬晓国瓶跑谰绚挺泪娘第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定第四节第四节粗纤维的测定粗纤维的测定v粗纤维是植物性食品的主要成分之一，广泛存粗纤维是植物性食品的主要成分之一，广泛存在于各种植物体内。化学
91、上不是单一组分，是在于各种植物体内。化学上不是单一组分，是混合物。混合物。1.粗纤维粗纤维稀酸、稀碱难溶，人体不能消化利稀酸、稀碱难溶，人体不能消化利用的部分。主要成分是纤维素、半纤维素、木用的部分。主要成分是纤维素、半纤维素、木质素及少量含质素及少量含N物。集中存在于谷类的麸、糠、物。集中存在于谷类的麸、糠、秸杆、果蔬的表皮等处。秸杆、果蔬的表皮等处。顾叫捷辜茫苛徒剿吊土张簇椅朱戎癣爵雇翰非酥含笺玛洲跨走损芥沈巳索第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定纤维素纤维素构成植物细胞壁的主要成分，是葡萄构成植物细胞壁的主要成分，是葡萄糖聚合物，由糖聚合物，由1，4糖苷键连接，人类及大多数糖苷键连接
92、，人类及大多数动物利用它的能力很低。不溶于水，但能吸水。动物利用它的能力很低。不溶于水，但能吸水。v半纤维素半纤维素一种混合多糖，不溶于水而溶于碱、一种混合多糖，不溶于水而溶于碱、稀酸加热比纤维素易水解，水解产物有木糖、阿稀酸加热比纤维素易水解，水解产物有木糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖等。拉伯糖、甘露糖、半乳糖等。v木质素木质素不是碳水化合物，是一种复杂的芳香不是碳水化合物，是一种复杂的芳香族聚合物，是纤维素的伴随物。难以用化学手段族聚合物，是纤维素的伴随物。难以用化学手段或酶法降解，在个别有机溶剂中缓慢溶解。或酶法降解，在个别有机溶剂中缓慢溶解。纺嘴搀跟汤誓怠函鞍邀定稗菲敌趴坦永争腾通滤策本
93、汤孟岩其瞳纠兽外滥第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v膳食纤维膳食纤维(食物纤维食物纤维)它是指食品中不能被它是指食品中不能被人体消化酶所消化的多糖类和木质素的总和。人体消化酶所消化的多糖类和木质素的总和。它包括纤维素、半纤维素、戊聚糖、木质素、它包括纤维素、半纤维素、戊聚糖、木质素、果胶、树胶等。果胶、树胶等。v膳食纤维比粗纤维更能客观、准确地反映食物膳食纤维比粗纤维更能客观、准确地反映食物的可利用率，因此有逐渐取代粗纤维指标的趋的可利用率，因此有逐渐取代粗纤维指标的趋势。势。辰滩斌富液戍雪窑皇侵躯筒望绷报堆艘裂损今警织籍煤孽怨蓟宫埔搂洋闺第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定一、粗
94、纤维的测定一、粗纤维的测定(一）称量法一）称量法1.原理原理在热的稀硫酸作用下，样品中的糖、淀粉、果在热的稀硫酸作用下，样品中的糖、淀粉、果胶等物质经水解而除去，再用热的氢氧化钾处理，胶等物质经水解而除去，再用热的氢氧化钾处理，使蛋白质溶解、脂肪皂化而除去。然后用乙醇和使蛋白质溶解、脂肪皂化而除去。然后用乙醇和乙醚处理以除去单宁、色素及残余的脂肪，所得乙醚处理以除去单宁、色素及残余的脂肪，所得的残渣即为粗纤维，如其中含有无机物质，可经的残渣即为粗纤维，如其中含有无机物质，可经灰化后扣除。灰化后扣除。扰秒忱燎灵匿绷润遂饱帽吮琼颇支界编鞭绪寒采踌福尝完佐拭邮丝腹违旅第五章糖类物质的测定第五章糖类物
95、质的测定2适用范围及特点适用范围及特点该法操作简便、迅速，适用于各类食品，是该法操作简便、迅速，适用于各类食品，是应用最广泛的经典分析法。目前，我国的食品成应用最广泛的经典分析法。目前，我国的食品成分表中分表中“纤维纤维”一项的数据都是用此法测定的。一项的数据都是用此法测定的。由于酸碱处理时纤维成分会发生不同程度的降解，由于酸碱处理时纤维成分会发生不同程度的降解，这是此法的最大缺点。这是此法的最大缺点。喘杭事臼村啡白易妈循鄂钙唤瞻抗跋园背映劝磐蹲愁逮鼠迁鲍却泽奥莱瘪第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定测定方法v预处理预处理：磨碎或捣碎样品，称取相当于：磨碎或捣碎样品，称取相当于5克干燥样品
96、的量，克干燥样品的量，加加1.25%硫酸适量，混匀，用亚麻布过滤，残渣移入硫酸适量，混匀，用亚麻布过滤，残渣移入500ml锥形瓶锥形瓶v酸处理酸处理：加入：加入200ml煮沸的硫酸，微沸回流煮沸的硫酸，微沸回流30分钟，隔分钟，隔5分分钟摇动一次；立即用亚麻布过滤，热水洗涤使不呈酸性钟摇动一次；立即用亚麻布过滤，热水洗涤使不呈酸性v碱处理碱处理：用：用20ml煮沸的煮沸的1.25%的氢氧化钾溶液将残渣移入锥的氢氧化钾溶液将残渣移入锥形瓶，微沸回流形瓶，微沸回流30分钟，立即用亚麻布过滤，以沸水洗涤使分钟，立即用亚麻布过滤，以沸水洗涤使不呈碱性不呈碱性v干燥干燥：用水将残渣洗入烧杯，转移到已经干
97、燥至恒重的垂融：用水将残渣洗入烧杯，转移到已经干燥至恒重的垂融漏斗，抽滤，热水洗涤，乙醇、乙醚洗涤各一次，漏斗，抽滤，热水洗涤，乙醇、乙醚洗涤各一次，105度烘度烘干至恒重干至恒重v灼烧灼烧：如果样品中含有较多无机物质，可用石棉坩埚代替垂：如果样品中含有较多无机物质，可用石棉坩埚代替垂融漏斗过滤，烘干至恒重后，移入融漏斗过滤，烘干至恒重后，移入550度高温炉中灼烧至恒度高温炉中灼烧至恒重，干燥器中冷却后称重，灼烧前后的重量之差即为粗纤维重，干燥器中冷却后称重，灼烧前后的重量之差即为粗纤维的量的量鹅贸掩盈郎垂囚捞镊峦永刮众垫贱找锨富讳郡豌岩刻吗垒羊载蓄啤沟炉阉第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的
98、测定方法说明v是测定粗纤维的标准分析方法v样品中脂肪含量高于1时，需脱脂，否则结果偏高v样品细度、加热回流时间、沸腾状态及过滤时间等都对测定结果产生影响：样品粒度大影响消化，使结果偏高；粒度过小影响过滤；沸腾剧烈使部分粘壁；v200目尼龙筛比亚麻布孔径均匀，使结果更稳定v恒重要求：烘干小于1mg，灰化小于0.5mg秘虏虱冯湃筒勉诚都竭川却桥袒帽亲遗膘昂坊楼较臆津枣舶胁角追腔栗悸第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定膳食纤维的测定v膳食纤维”虽然至今还没有一个权威的定义，但一般是指存在于植物中，不能被人体小肠消化吸收的多糖。“膳食纤维”根据水溶性不同，一般分为“可溶性膳食纤维”和“不溶性膳食纤
99、维”。“可溶性膳食纤维” 包括果胶、树胶和黏胶等；“不溶性膳食纤维”包括纤维素、半纤维素、木质素等v迄今还没有一种简单而准确的测定全部膳食纤维的标准方法vSouthgate的多糖分类定量法测定范围包含了膳食纤维全部成分，使广泛采用的方法寻吉始敏触乏瞳钧瘪炬登梧臂墟唆抑忘梳挤粉汞标缀黍攒拐胖股垒播络付第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定方法提要v样品经58甲醇回流提取，除去低分子糖、色素、脂肪、腊；残渣加水加热，使淀粉糊化，加淀粉酶水解；然后加入4倍乙醇，离心分离，得到的残渣含全部膳食纤维v残渣用热水抽提，提出水溶性膳食纤维（主要是果胶），提取液浓缩，加入乙醇80以上，使沉淀，离心分离；沉淀
100、用0.5M 硫酸回流2.5hr水解，中和后测定水解液中的己糖、戊糖和糖醛酸量v不溶性非纤维素多糖：残渣用0.5M 硫酸回流2.5hr，使不溶性非纤维素多糖水解，冷却后加入一倍乙醇离心分离，中和，测定己糖、戊糖和糖醛酸量钝奸逻薯舒名军髓助绚示卑投哼樊断疹让拄蓝灼雨彻彩旨承员岂前岸傀裳第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v纤维素：残渣加入72硫酸在04度放24hr，使纤维素水解，在冰水浴中加水稀释，用古氏坩埚抽滤，滤液中和后测定己糖、戊糖和糖醛酸量v木质素：坩埚中的残渣用乙醇洗涤，风干，70度干燥过夜，称重；于550度灰化，称重，计算木质素含量v用苯酚硫酸法、苔黑酚比色法、咔唑硫酸法分别测定己
101、糖、戊糖和糖醛酸量渠坝究效炮捕栏澄讹条厕情虹响也妖吓辅挂耻谩纸戳晾灿仓诲柳拦悔拧该第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定第五节第五节果胶物质的测定果胶物质的测定1.概述概述果胶物质果胶物质由半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯由半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成的高分子聚和物，一种糖、葡萄糖醛酸等组成的高分子聚和物，一种植物胶。平均分子量达植物胶。平均分子量达530万。存在于果蔬类万。存在于果蔬类植物组织中，是构成植物细胞的主要成分之一。植物组织中，是构成植物细胞的主要成分之一。果胶物质的三种形态：原果胶、果胶酯酸、果胶物质的三种形态：原果胶、果胶酯酸、果胶酸。果胶酸。2.测定果胶的方法有：称
102、量法、咔唑比色法、测定果胶的方法有：称量法、咔唑比色法、果胶酸钙滴定法、蒸馏滴定法。果胶酸钙滴定法、蒸馏滴定法。捂稠赎鞋锻葬秆骇脂臂珐录快徒载习榷辛畅战笔蔼暗心键歪存搬弘榴毙钢第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定主要成分主要成分 结合物结合物水解酶水解酶水解产物水解产物 酯化程度酯化程度原果胶原果胶聚半乳糖聚半乳糖醛酸醛酸纤维素、纤维素、半纤维素半纤维素原果胶酶、原果胶酶、酸酸果胶酯酸果胶酯酸 水不溶，水不溶，高度甲酯高度甲酯化化果胶酯酸果胶酯酸 聚半乳糖聚半乳糖醛酸醛酸无无果胶酶、果胶酶、酸、碱酸、碱果胶酸果胶酸水溶，羧水溶，羧基不同程基不同程度甲酯化度甲酯化果胶酸果胶酸聚半乳糖聚半乳糖
103、醛酸醛酸无无酶、酸酶、酸半乳糖醛半乳糖醛酸酸水溶，未水溶，未酯化或酯化或1%果胶物质类型特性果胶物质类型特性唯粒薄馆围捆思述际屠春帅蘸数固澄胸膜匀户蝗卸寄宫扰吉或剐柯酬胶兰第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定果胶测定的咔唑比色法v原理：v果胶水解生成半乳糖醛酸，在强酸下与咔唑试剂发生缩合，生成紫红色化合物，其呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比 著邯污罪颠测绿椭痹攫洱根劲烧窖廷耙浩串君渴众性谗妊完诱谍叹顽稚跑第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定咔唑比色法标准曲线制作v去去8支支50ml比色管，各加入比色管，各加入12ml浓硫酸，置于冰水浓硫酸，置于冰水浴中，边冷却边缓慢加入浴中，边冷却边缓慢
104、加入0、10、20、30、40、50、60、70ug/ml的标准溶液的标准溶液2ml，充分混合后，充分混合后,再置于再置于冰水浴中冷却；冰水浴中冷却；v转至沸水浴中准确加热转至沸水浴中准确加热10分钟，用流动水迅速冷却分钟，用流动水迅速冷却到室温，各加入到室温，各加入0.15%咔唑试剂咔唑试剂1ml，充分混合，充分混合，置于室温下置于室温下30分钟，分钟，v以以0号管为空白在号管为空白在530nm测定吸光度，绘制标准曲测定吸光度，绘制标准曲线。线。栅锁噶留放龄必奠皱诊矽此亢薯口胞钥岁椰坦柴切慈宅幅戏免引苑砒塑秘第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定咔唑比色法说明v不同来源的果胶中半乳糖醛酸的
105、含量不同，若把结不同来源的果胶中半乳糖醛酸的含量不同，若把结果换算为果胶含量，可按一定系数换算果换算为果胶含量，可按一定系数换算v糖分残留对显色反应影响大，使结果偏高，故样品糖分残留对显色反应影响大，使结果偏高，故样品处理时要求糖分去除干净处理时要求糖分去除干净v硫酸质量对显色反应影响大，需要用同批试剂硫酸质量对显色反应影响大，需要用同批试剂就袖月震班西沮禁皆伤殃么骡役请鞘尽弟确革佐鬼怔杉宰拳挨呜百旱每旱第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定图塑绘颅纹爹秤笺挛证们赔执秀豹亡淤斋吁袱陪笑铅咆搞杜模纯锡狮枣侈第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定重点重点1.化学法测定还原糖有几种方法？化学法测
106、定还原糖有几种方法？2.直接滴定法、高锰酸钾法的测定原理？直接滴定法、高锰酸钾法的测定原理？3.可溶性糖提取澄清剂的种类、要求？可溶性糖提取澄清剂的种类、要求？4.总糖的测定方法？总糖的测定方法？5.淀粉的测定方法？淀粉的测定方法？6.名词解释：粗纤维、纤维素、半纤维素、木名词解释：粗纤维、纤维素、半纤维素、木质素、膳食纤维素。质素、膳食纤维素。7.粗纤维的测定。粗纤维的测定。8.膳食纤维的测定。膳食纤维的测定。9.果胶的测定。果胶的测定。狞衬南浮洋麦敖畸函掸虏肉量峡盯席额磺忘或姥狙衅甭唾令傈尘九粘条杨第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定碳源检测在发酵工程中地位v微生物发酵动力学研究v发酵
107、动力学动力学主要研究各种环境因素与微生物代谢活动之间的相互作用随时间而变化相互作用随时间而变化的规律。用数学模型定量地描述发酵过程中影响细胞生长、基质利用和产物生成的各种因基质利用和产物生成的各种因素素，是发酵动力学研究的重要方法。v基质消耗速率和产物生长速率及其相互关系，理解比速率比速率的概念。 领敢锗措涡梧识团募潭沂逼转坍鄂饿客舞裳儡陕丢牧总娩块若谩晤蓬贮锐第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定发酵动力学中常用的几个术语发酵动力学中常用的几个术语 v1得率包括生长得率(Yx/s)和产物得率(Yp/s)。指被消耗的物质和所合成产物之间的量的关系。v生长得率：是指每消耗1g(或mo1)基质(
108、一般指碳源)所产生的菌体重(g)，即Yx/s=XS。单位时间内单位体积培养液中所含细胞(或称菌体)干重的变化量。 产物得率：是指每消耗产物得率：是指每消耗1g(1g(或或mo1)mo1)基质所合成的产基质所合成的产物物g g数数( (或或molmol数数) )。这里消耗的基质是指被微生物实。这里消耗的基质是指被微生物实际利用掉的基质数量，即投入的基数减去残留的基际利用掉的基质数量，即投入的基数减去残留的基质量质量(S(S。一。一S)S)攫槐慢汀缨窍基虞丹仕呐恍卒绊重兽徒瓦搽感制诱稽添挣锁急近齐枫佐被第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定v2基质比消耗速率(qs ， g(或mo1)g菌体h)：
109、系指单位菌体（每克菌体）在单位时间（一小时）内消耗营养物质的量。它表示细胞对营养物质利用的速率或效率。v 3产物比生产速率(qp，g(或mo1)g菌体h)：系指每克菌体在一小时内合成产物的量，它表示细胞合成产物的速度或能力，可以作为判断微生物合成代谢产物的效率。基质消耗对细胞的得率Yx/s基质对代谢产物的得率Yp/s岿牺范强询毛缅福背莹渝秸珠澈刃膜沮堵稿茹济疮朔蔑前赎产窟谴比稻炭第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定3 h-21 h3 h-21 h糖消耗很快，糖消耗很快，生物量迅速增加。苏生物量迅速增加。苏云金素在云金素在9 h9 h时开始时开始合成。合成。21 h21 h后葡萄糖后葡萄糖消
110、耗与菌体生长缓慢，消耗与菌体生长缓慢，但苏云金素仍在继续但苏云金素仍在继续合成。合成。PHBPHB伴随菌体伴随菌体生长而合成，生长而合成，24hPHB24hPHB含量为菌体干重的含量为菌体干重的16.016.0。苏云金素与苏云金素与PHBPHB生物合成的代谢关系生物合成的代谢关系墒汪岂锌前我炔忆缓怂焰着赶巍顺恰孰殴秘哄嚼隔夫逼娇凋裙卖吕狮踌膳第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定1.生物量与菌体对葡萄糖生物量与菌体对葡萄糖得率没有差别。得率没有差别。 2. pH值变化的差异很大：值变化的差异很大：添加柠檬酸钠后，菌体代添加柠檬酸钠后，菌体代谢状态发生改变。谢状态发生改变。氰绎授糕胞囱农噶撩事蹭科架携詹稍填皇状湾瓷肄耳韭稻慑岛俭就膜效晤第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定Thank you毙狠摆档风汝齿众煌汐妨弱锋遣虫纪伴迹饮彰搁撮敬咀盼歌耍尼用禄丙凳第五章糖类物质的测定第五章糖类物质的测定
