神经生物学研究技术与方法(行业荟萃)

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1、神经生物学研究技术与方法1严选资料n电生理技术n行为学n脑功能成像技术2严选资料脑立体定位仪又称脑固定装置(stereotaxic apparatus),n它是利用颅骨外面的标志或其它参考点所规定的三度坐标系统,来确定皮层下某些神经结构的位置,以便在非直视暴露下对其进行定向的刺激、破坏、注射药物、引导电位等研究。n动物脑立体定位仪是神经解剖、神经生理、神经药理和神经外科等领域内的重要研究设备,用于对神经结构进行定向的注射、刺激、破坏、引导电位等操作,可用于帕金森氏病动物模型建立,癫痫动物模型建立,脑内肿瘤模型建立,学习记忆,脑内神经干细胞移植,脑缺血等研究。3严选资料1 脑的立体定位技术ste

2、reotaxic technique of brain n定位原理bregma大鼠颅骨表面4严选资料5严选资料n定位图谱6严选资料海马7严选资料nDualManipulatorStereotaxicFramewith18or45EarBars此儀器為神經解剖、神經生理、神經外科等領域的重要研究設備,WPI的立體定位儀可以提供準確、穩定的定位程序,適用於大多數小型動物的實驗8严选资料Stereotaxic Frame n(a)Afteramouseismountedonastereotaxicframeanditsskullisexposed,thebregmaislocalized(arrow

3、head).Antero-posterior (AP) axisisindicatedonleft.(b)Theneedletipismovedontothebregma(arrowhead).(c)Thetipismovedposteriorlyand laterallytoanappropriatestereotaxiccoordinate.Thepositionofthetip(arrow)ismarkedbyamarkerpen.(d)Asmallhole(arrow)ismadeintheskullbyusingan electric drill.(e)Theneedleisbrou

4、ghtdowntoanappropriatecoordinatethroughthehole(arrow).9严选资料10严选资料11严选资料Digital Stereotaxic Frame with 18 or 45Ear Bars n数位12严选资料n定位仪n微量注射器电动颅骨钻13严选资料14严选资料15严选资料nMouseandNeonatalRatAdaptor針對小鼠及幼大鼠頭部構造,提供無創且穩定的固定方式16严选资料17严选资料1、根据体重腹腔注射麻醉药 18严选资料待麻醉后固定在定位仪上 19严选资料用双氧水擦除脑膜,直至露出前囟和后囟并标记。 20严选资料找出需要定位的点

5、,电转打孔。 21严选资料进针给药缝合22严选资料2 单细胞记录技术nSingle-unitrecordingn胞外动作电位是指通过微电极在细胞外记录到的单细胞动作电位,可以使用玻璃或金属微电极Iftheelectrodeisamicroelectrode,withatipsizeof3 to 10 micrometres,theelectrodewilloftenisolatetheactivityofasingleneuron23严选资料记录电极n电极材料:钨、铂铱合金、不锈钢等n尖端形状:尖端钝圆、尖端锐利(角度)n绝缘物质和绝缘方法:Epoxy、Glassn记录电阻(测量频率1000H

6、z):500k2Mn电极尾端n电极个数:单电极、多电极24严选资料单电极尖端25严选资料多电极阵列26严选资料27严选资料microelectrode n玻璃微电极28严选资料麻醉状态下记录实验方法nPlexon放大器n玻璃微电极(1-3 M)29严选资料麻醉状态下记录30严选资料清醒状态下单细胞记录装置31严选资料32严选资料学习和记忆的行为学研究n1经典的条件反射和操作式条件反射n2迷宫学习模型Morriswatermaze水迷宫Eight-armmaze八臂迷宫Y迷宫Ymaze33严选资料学习和记忆的行为学研究n3一次性被动回避跳台实验避暗法-达标训练(Passiveavoidanceresponse,trialstocriterion)34严选资料小鸡一次性厌恶回避反应35严选资料学习和记忆的行为学研究n延迟性与样本不匹配操延迟性与样本不匹配操作任务作任务(delayednonmatchingtosampletask)。n正确的百分率和延迟的时间可作为这一任务的成绩指标。36严选资料其它方法n神神 经经 生生 物物 学学 常常 用用 形形 态态 学学 研研 究究 方方 法法- 免疫组化、各种神经免疫组化、各种神经元染色法,原为杂交等元染色法,原为杂交等n神经细胞培养方法等神经细胞培养方法等37严选资料38严选资料

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