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1、 chymotrypsinchymotrypsin胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶1技术教学胰凝乳蛋白酶的结构胰凝乳蛋白酶的结构 2技术教学 酶酶 氨基酸残基数氨基酸残基数 活性部位的氨基酸残基活性部位的氨基酸残基 核糖核酸镁A 124 His12，His119，Lys41 溶菌镁 129 Asp52，Glu35 胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶 241 His57，Asp102，Ser195 胰蛋白酶 223 His57，Asp102，Ser195 弹性蛋白酶 240 His57，Asp102，Ser195 胃蛋白酶 348 Asp32，Asp215 HIV-1蛋白酶 992 Asp25 木瓜蛋白酶 212
2、 Cys25，His159 枯草杆菌蛋白酶 275 His64，Ser221，Asp32 碳酸酐酶 259 His94-Zn-Lys96 His119 羧肽酶A 307 Arg127，Glu270，Tyr248，Zn2+ 旰乙醇脱氢酶 3742 Ser48，His51，NAD+，Zn2+某些酶活性部位的氨基酸残基某些酶活性部位的氨基酸残基3技术教学二、共价催化二、共价催化一、酸碱催化一、酸碱催化三、金属离子催化三、金属离子催化4技术教学酸碱催化酸碱催化 定义：酸碱催化是通过瞬时的向反应物提定义：酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质子以稳定过渡态，供质子或从反应物接受质子以稳定过
3、渡态，加速反应的一类催化机制。加速反应的一类催化机制。5技术教学酶分子中可作为总酸碱催化的功能基团酶分子中可作为总酸碱催化的功能基团 氨基酸残基氨基酸残基广义酸基团广义酸基团（质子供体）（质子供体）广义碱基团广义碱基团（质子受体）（质子受体）6技术教学胰凝乳蛋白酶通过酸碱催化使肽键断裂胰凝乳蛋白酶通过酸碱催化使肽键断裂 水解水解7技术教学共价催化共价催化定义：在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂定义：在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出电子或汲取电子并作用于底物的缺能分别放出电子或汲取电子并作用于底物的缺电子中心或负电子中心，迅速形成不稳定的共价电子中心或负电子中心，迅速形成不稳定的共价
4、中间复合物，降低反应活化能，使反应加速中间复合物，降低反应活化能，使反应加速 。8技术教学u 需要金属的酶可以分为：金属酶和金属需要金属的酶可以分为：金属酶和金属- -激活酶两类激活酶两类u 金属离子以金属离子以3 3种主要途径参加催化过程种主要途径参加催化过程 （1 1）通过结合底物为反应定向）通过结合底物为反应定向 （2 2）通过可逆地改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应）通过可逆地改变金属离子的氧化态调节氧化还原反应 （3 3）通过静电稳定或屏蔽负电荷）通过静电稳定或屏蔽负电荷金属离子催化金属离子催化9技术教学胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶 酶酶- -底物复合物底物复合物 疏水口袋疏水口袋催化
5、三联体催化三联体 活性部位活性部位 底物（一种多肽）底物（一种多肽）胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 10技术教学SerSer195195-OH-OH的的O O与肽键的羰基与肽键的羰基C C共价结合，共价结合，H H结合于结合于HisHis57 57的的N N上上胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 11技术教学产物产物1 1HisHis提供提供H H给肽键的给肽键的N N形成形成-NH-NH2 2，肽键断裂，释放第一个产物，肽键断裂，释放第一个产物胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 12技术教学加水，加水，His-NHis-N攻击攻击H
6、H2 2O O的的H H，OHOH- -的的O O攻击羰基攻击羰基C C 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 13技术教学His-NHis-N攻击攻击H H2 2O O的的H H，H H2 2O O裂解，裂解，OHOH- -的的O O攻击羰基攻击羰基C C 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 14技术教学His-NHHis-NH提供提供H H给给SerSer的的O O，第二个产物形成，但仍与酶结合，第二个产物形成，但仍与酶结合 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 15技术教学第二个产物释放，酶再生第二个产物释放，酶再生 胰凝乳蛋白酶反应的详细机制胰凝乳蛋白酶反应的详细机制 16技术教学胰凝乳蛋白酶原与胰蛋白酶原的激活过程胰凝乳蛋白酶原与胰蛋白酶原的激活过程 胰凝乳蛋白酶原（无活性）胰凝乳蛋白酶原（无活性）胰蛋白酶原（无活性）胰蛋白酶原（无活性）胰蛋白酶（有活性）胰蛋白酶（有活性）- -胰凝乳蛋白酶（有活性）胰凝乳蛋白酶（有活性）- -胰凝乳蛋白酶（有活性）胰凝乳蛋白酶（有活性）17技术教学
