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1、专题二专题二 微生物的培养与应用微生物的培养与应用课题一课题一 微生物的实验室培养微生物的实验室培养基础知识(一一)培养基培养基1、培养基的分类、培养基的分类 物理性质物理性质 ： 、 、 、 ： 、 、 、 ： 、 、 2 2、培养基的用途：、培养基的用途：液体培养基应用于液体培养基应用于 。固体培养基应用于固体培养基应用于 。半固体培养基则常用于半固体培养基则常用于 。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于成分的种类比例明确，常用于 。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，天然培养基是用化学成分不明的天
2、然物质配制而成，常用于常用于 。 选择培养基：选择培养基： 加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基 。 加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基 。 不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基 。不加含碳有机物的无碳培基不加含碳有机物的无碳培基 。鉴别培养基鉴别培养基加入伊红美蓝鉴别加入伊红美蓝鉴别 ，菌落，菌落 ， 并有并有 。 3 、培养基的配置原则：培养基的配置原则： ：根据微生物的种类、培养的目的：根据微生物的种类、培养的目的选择不同的原料配制培养基。选择不同的原料配制培养基。 ：配制培养基时要注意各营养物质的：配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例浓度和比例pHpH要适宜。要适宜。
3、4 、培养基的营养组成：培养基的营养组成：各种培养基的具体配方不同，但一般都含有各种培养基的具体配方不同，但一般都含有 、 、 、 、 。 不同培养基还要满足不同微生物对不同培养基还要满足不同微生物对 特殊特殊 以及以及 的要求。的要求。 （二）无菌技术：二）无菌技术：实验室常用的灭菌方法：实验室常用的灭菌方法： 、 、 。 1 1、接种环、接种针、试管口等使用、接种环、接种针、试管口等使用 ；2 2、玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械、玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是是 ；3 3、培养基、无菌水等使用、培养基、无菌水等使用 ，所用器械是，所用器械是高压蒸汽灭菌锅高压蒸
4、汽灭菌锅 。实验室常用的消毒方法：实验室常用的消毒方法： 、 、 、 。 实验操作实验操作 本实验采用本实验采用 培养基对大肠杆菌进行培养基对大肠杆菌进行纯化，可分为纯化，可分为 和和 两个阶段进行。两个阶段进行。1 1、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基方法步骤方法步骤 、 、 、 、 。2 2、纯化大肠杆菌、纯化大肠杆菌微生物接种的方法最常用的是微生物接种的方法最常用的是 和和 。稀释涂布平板法分为稀释涂布平板法分为 和和 操作两步操作两步 。 课题延伸课题延伸菌种保存菌种保存 对于频繁使用的菌种采用对于频繁使用的菌种采用 的方法的方法 ，对于需长期保存的菌种，可以采用
5、对于需长期保存的菌种，可以采用 的方的方法。法。根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型，利用选择性培养基和鉴别培养基，结合显微镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的培养基，结合显微镜检以及菌落特征，可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛分离开来。下面是分离筛选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。选的方法步骤，请根据各个步骤的条件，填写空格中的内容。首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后
6、进行灭菌。再将上述微生物的首先配制一系列不同性质的固体培养基，然后进行灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上进行培养。混合液分别接种到各种培养基上进行培养。用无氮培养基可以筛选出用无氮培养基可以筛选出 。用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出用不含有机碳源的选择培养基可以筛选出 。酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入酵母菌的筛选需要在常规培养基另加入 。用加入了较高浓度的用加入了较高浓度的NaClNaCl的选择培养基可以筛选出的选择培养基可以筛选出，或者根据菌落的颜色呈现或者根据菌落的颜色呈现色，将其挑取单独培养。色，将其挑取单独培养。利用伊红美蓝培养基培养混合菌，菌落呈利用伊红美蓝培
7、养基培养混合菌，菌落呈色，并带有金属光泽色，并带有金属光泽的是的是，挑取单个菌落培养。结合显微镜检和进一步用伊红美蓝培养，挑取单个菌落培养。结合显微镜检和进一步用伊红美蓝培养基鉴别来确定。基鉴别来确定。在无氧条件下培养混合菌，在无氧条件下培养混合菌，可以生长，加入一定浓可以生长，加入一定浓度的乳酸，使培养基度的乳酸，使培养基pHpH充分降低，可抑制充分降低，可抑制菌的生长，利用菌落特菌的生长，利用菌落特征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出征，结合显微镜检，选取生长优势的菌落，即可分离出。圆褐固氮菌圆褐固氮菌硝化细菌硝化细菌青霉素青霉素金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄金黄深紫深紫大肠
8、杆菌大肠杆菌乳酸菌和酵母菌乳酸菌和酵母菌酵母酵母乳酸菌乳酸菌考点例析：考点例析：0707年年 32.32.生物选考题（生物选考题（1515分）分）A.A.生物生物选修选修1 1生物技术实践生物技术实践某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。（1 1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了养提供了_和和_。除此之外，。除此之外，
9、培养基还必须含有基本成分是培养基还必须含有基本成分是_和和_。（2 2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。氮源（碳源不作要求）氮源（碳源不作要求）碳源碳源无机盐无机盐水水高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌链接高考链接高考（3 3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于种了湖水样品的平板置于 _中培养，培养中培养，培养的温度设定在的温度设定在37 37 。要使该实验所得结果可靠，还。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种应该同时在另一平板上接种_作为对照进作为对照进行实验。行实验。（4 4）培养）培养2020小时后，观察到平板上有形态和颜色不小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越越_。（5 5）如果提高培养基中）如果提高培养基中NaClNaCl的浓度，可以用于筛选的浓度，可以用于筛选耐耐_细菌，这种培养基被称为细菌，这种培养基被称为_。恒温培养箱恒温培养箱无菌水无菌水多多高高盐（或盐（或NaClNaCl）选择性培养基选择性培养基
