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1、 目的目的(md)(md) 通过观察化学物质、温度变化通过观察化学物质、温度变化(binhu)对离体小肠平滑肌收缩的影响，对离体小肠平滑肌收缩的影响，使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法，加深对平滑肌某些基本特使学生掌握离体小肠平滑肌收缩的记录方法，加深对平滑肌某些基本特性的理解。性的理解。 原理原理(yunl)(yunl) 平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性收缩的特性，平滑肌除具有肌肉的一般生理特性外，还具有自动节律性收缩的特性，并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神并且受肠壁内神经丛与外来植物性神经的支配。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神
2、经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的特性及肠壁神经丛的作用。离体小肠实验不仅在理论上可以证明平滑肌的生理特性，而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。的生理特性，而且还可用来研究各种因素对平滑肌的影响。 第一页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性 方法方法(fngf)(fngf)与步骤与步骤 一、实验一、实验(shyn)(shyn)准备准备 1.1.恒温恒温(hngwn)(hngwn)平滑肌浴槽装置平滑肌浴槽装置 向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入台氏液
3、至浴槽高度的台氏液至浴槽高度的2/3处。外部容器为水处。外部容器为水浴锅加自来水。启开浴锅加自来水。启开电源，恒温工作点定电源，恒温工作点定在在38。 第二页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性2.2.标本标本(biobn)(biobn)制备制备 向兔耳缘静脉注射空气向兔耳缘静脉注射空气(kngq)(kngq)( (或用木棒猛击兔的后脑部或用木棒猛击兔的后脑部) )使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开使其致死，背位固定于手术台上，腹部剪毛后，沿正中线切开皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点皮肤和腹壁，找到胃，以胃幽门与十二指肠交界处为起点, ,快快速沿肠缘剪去肠
4、系膜，然后再剪取速沿肠缘剪去肠系膜，然后再剪取202030 cm30 cm长的十二指肠，长的十二指肠，置于置于44左右的台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入左右的台氏液中轻轻漂洗，可用注射器向肠腔内注入台氏液冲洗肠腔内壁，并置于台氏液冲洗肠腔内壁，并置于4 466台氏液中备用。台氏液中备用。第三页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性3.3.仪器仪器(yq)(yq)连接连接 实验时将肠管剪成实验时将肠管剪成2 23 cm3 cm的肠段，用棉线结扎肠段的肠段，用棉线结扎肠段两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端两端，将一端结扎线连于浴槽内的标本固定钩上，另一端连于张力换能器，适当调
5、节换能器的高度，使其与标本之连于张力换能器，适当调节换能器的高度，使其与标本之间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁间松紧度合适。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦接触，避免摩擦(mc)(mc)。用塑料管将充满气体的球胆或增氧。用塑料管将充满气体的球胆或增氧泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑料管上的螺旋夹，让泵与浴槽底部的通气管相连，调节塑料管上的螺旋夹，让通气管的气泡一个一个的溢出，为台氏液供氧。将张力换通气管的气泡一个一个的溢出，为台氏液供氧。将张力换能器输入端与系统的通道相连，进入生物机能实验系统，能器输入端与系统的通道相连，进入生物机能实验系统，选择对应通道项
6、目为张力。选择对应通道项目为张力。 第四页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性二、实验二、实验(shyn)(shyn)项目项目 1.观察、记录观察、记录(jl)38 台氏液中的肠段节律性收缩曲线。台氏液中的肠段节律性收缩曲线。2.观察、记录观察、记录25台氏液中的肠段节律性收缩台氏液中的肠段节律性收缩(shu su)曲线。曲线。 3.待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在待中央标本槽内的台氏液的温度稳定在38后，加后，加1:10 000肾上腺素肾上腺素12滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变。在观察到明显的作用后，用预先准备好的新鲜用后
7、，用预先准备好的新鲜38台氏液冲洗三次。台氏液冲洗三次。4.待肠段活动恢复正常后，再加待肠段活动恢复正常后，再加1:10 000乙酰胆碱乙酰胆碱12滴于中央标本槽中，观滴于中央标本槽中，观察肠段收缩曲线的改变，作用出现后同上法冲洗肠段。察肠段收缩曲线的改变，作用出现后同上法冲洗肠段。 第五页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性5.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1 molL-1NaOH溶液溶液12滴，观察肠段收缩滴，观察肠段收缩(shu su)曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。曲线的改变。作用出现后同上法冲洗肠段。 6.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1 molL-1HCl溶液溶液
8、(rngy)12滴，观察肠段收缩曲线的滴，观察肠段收缩曲线的改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。改变。待作用出现后同上法冲洗肠段。 7.向中央标本槽内加入向中央标本槽内加入1%CaCl2溶液溶液23滴，观察滴，观察(gunch)肠段收缩曲线的肠段收缩曲线的改变。改变。 第六页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性 注意事项注意事项 1.实验动物先禁食实验动物先禁食24 h，于实验前，于实验前1 h喂食，然后处死喂食，然后处死,取出标本，肠运动取出标本，肠运动(yndng)效果更好。效果更好。 2.标本安装标本安装(nzhung)好后，应在新鲜好后，应在新鲜38台氏液中稳定台氏液中稳定510min，
9、有收，有收缩活动时即可开始实验。缩活动时即可开始实验。3.注意控制温度。加药前，要先准备注意控制温度。加药前，要先准备(zhnbi)好更换用的新鲜好更换用的新鲜38台氏台氏液，每个实验项目结束后，应立即用液，每个实验项目结束后，应立即用38台氏液冲洗，待肠段活动台氏液冲洗，待肠段活动恢复正常后，再进行下一个实验项目。恢复正常后，再进行下一个实验项目。 4.实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，实验项目中所列举的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。但要防止一次性加药过量。 第七页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性结果结果(ji g
10、u)与分与分析析第八页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性一、低温一、低温(dwn)对离体肠肌活动的影响对离体肠肌活动的影响 离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌细离体肠肌收缩减弱。温度降低，肠肌细胞兴奋型降低，代谢相关胞兴奋型降低，代谢相关(xinggun)酶活性降低，酶活性降低，肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。肠肌代谢水平降低，肠肌收缩减弱。第九页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性二、滴加肾上腺素二、滴加肾上腺素 离体肠肌收缩减弱离体肠肌收缩减弱(jinru)(jinru)。肾上腺素可与肠肌细胞。肾上腺素可与肠肌细胞膜上肾上腺素能受体（膜上肾上腺素能受体（、型）结合，一方面可使型）结合，一方
11、面可使CaCa2+2+、K K+ +外流增加，细胞膜电位发生超极化，兴奋性降低；外流增加，细胞膜电位发生超极化，兴奋性降低；另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆内内CaCa2+2+浓度降低，肌张力减弱。浓度降低，肌张力减弱。第十页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性三、滴加乙酰胆碱三、滴加乙酰胆碱 离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞离体肠肌收缩加强。乙酰胆碱可与肠肌细胞膜上膜上M M型受体结合型受体结合(jih)(jih)，使肌膜上，使肌膜上CaCa2+2+通道开放，通道开放， CaCa2+2+内流，肌浆内内流，肌浆内CaCa
12、2+2+浓度升高，肠肌收缩加强。浓度升高，肠肌收缩加强。第十一页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性四、滴加四、滴加NaOH 离体肠肌收缩离体肠肌收缩(shu su)(shu su)加强。加强。H H+ +浓度降低，促进浓度降低，促进CaCa2+2+通道开放，通道开放，CaCa2+2+内流增加；促进肌浆网释放内流增加；促进肌浆网释放CaCa2+2+；促进；促进CaCa2+2+与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收与肌钙蛋白结合，最终导致肠肌收缩加强。缩加强。第十二页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性五、滴加五、滴加HCl 离体肠肌收缩减弱。离体肠肌收缩减弱。H H+ +浓度升高，抑制浓度升高，抑制C
13、aCa2+2+通通道开放，道开放， Ca Ca2+2+内流减少；抑制肌浆网释放内流减少；抑制肌浆网释放CaCa2+2+；抑制抑制CaCa2+2+与肌钙蛋白结合与肌钙蛋白结合(jih)(jih)，最终导致肠肌收缩，最终导致肠肌收缩减弱。减弱。第十三页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性六、滴加六、滴加CaCl2 离体肠肌收缩加强离体肠肌收缩加强(jiqing)(jiqing)。滴加。滴加CaClCaCl2 2后，肠后，肠肌细胞膜内外肌细胞膜内外CaCa2+2+浓度差加大，浓度差加大， Ca Ca2+2+顺浓度差内顺浓度差内流，使肠肌细胞胞浆内流，使肠肌细胞胞浆内CaCa2+2+浓度升高，肠肌活浓度升高，肠肌活动加强。动加强。第十四页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性内容(nirng)总结目的。此相连的线必需垂直，并且不能与浴槽壁接触，避免摩擦。6.向中央标本槽内加入1 molL-1HCl溶液12滴，观察肠段收缩曲线的改变。2.标本安装好后，应在新鲜38台氏液中稳定510min，有收缩活动时即可开始实验。4.实验项目中所列举(lij)的药物剂量为参考剂量，若效果不明显，可以增补剂量，但要防止一次性加药过量。另一方面可促进肌膜和肌浆网膜上钙泵活动加强，使肌浆内Ca2+浓度降低，肌张力减弱第十五页，共十五页。离体小肠平滑肌的生理特性
