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1、综合性实验综合性实验 实验六实验六 产淀粉酶细菌的分离（一）产淀粉酶细菌的分离（一）微生物的分离与培养微生物的分离与培养 河南工业大学微生物学实验室河南工业大学微生物学实验室1、掌掌握握稀稀释释分分离离和和平平板板划划线线获获得得微微生生物纯种的方法。物纯种的方法。2、学会微生物接种技术。、学会微生物接种技术。一、实验目的及要求一、实验目的及要求二、实二、实 验验 原理原理 从从混混杂杂微微生生物物群群体体中中获获得得只只含含某某一一种种或或某某一一株株微微生生物物的的过过程程称称为为微微生生物物的的分分离离纯纯化化。平平板板分分离离法法普普遍遍适适用用于于微微生生物物的的分分离离与与纯纯化化
2、，其其基基本本原原理理是是选选择择适适合合于于待待分分离离微微生生物物的的生生长长条条件件，如如营营养养成成分分、酸酸碱碱度度、温温度度和和氧氧等等要要求求，或或加加入入某某种种抑抑制制剂剂造造成成只只利利于于该该微微生生物物生生长长，而而抑抑制制其其它它微微生生物物生生长长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。 本本实实验验采采用用透透明明圈圈检检验验法法检检测测培培养养物物中中是是否否有有产产淀淀粉粉酶酶微微生物的生长。生物的生长。三、实三、实 验验 器器 材材1、材、材 料：土壤、粮食或者食品。料：土壤、粮食或者食品。2、培养基：、培养基：PDA培养基、
3、营养琼脂培养基。培养基、营养琼脂培养基。3、器器 皿皿：三三角角瓶瓶、移移液液管管、试试管管、培培养养皿皿、玻璃刮铲、酒精灯、接种环等。玻璃刮铲、酒精灯、接种环等。4、仪器：电炉、恒温培养箱。、仪器：电炉、恒温培养箱。 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、微生物的纯种分离、微生物的纯种分离平板稀释分离法平板稀释分离法1、配制所需培养基，无菌水2、培养基、无菌水、玻璃器皿、无菌室的灭菌3、制作菌悬液（样品加至无菌水中震荡）4、菌悬液稀释5、将一定稀释度的菌悬液1ml加至平皿中6、加适量培养基至平皿中并与菌悬液混合7、适温培养8、挑取独立的菌落 225ml无菌水无菌水加加25g样品样品1ml1
4、ml1ml试管中原始装试管中原始装9ml无菌水无菌水10-210-310-41ml四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、微生物的纯种分离、微生物的纯种分离（1）稀稀释释涂涂布布分分离离法法：制制平平板板制制菌菌悬悬液液涂布涂布培养培养获得纯种微生物。获得纯种微生物。（2）平平板板划划线线法法：制制平平板板制制菌菌悬悬液液划划线线培养培养获得纯种微生物。获得纯种微生物。微生物纯种分离微生物纯种分离（一）涂布分离法（一）涂布分离法 微生物纯种分离微生物纯种分离（二）划线分离法（二）划线分离法 微生物纯种分离微生物纯种分离（三）定量稀释分离法（三）定量稀释分离法 四、实验方法和步骤四、实验方法和步
5、骤2、微生物的接种、微生物的接种（1） 斜面接种斜面接种 五五步步曲曲：a. 接接种种环环灭灭菌菌 b. 拔拔棉棉塞塞及及试试管管口口灭菌灭菌 c. 接种接种 d. 塞棉塞塞棉塞 e. 接种环灭菌接种环灭菌（2） 培养皿接种（霉菌形态观察及鉴定用）培养皿接种（霉菌形态观察及鉴定用） 倒平板倒平板 接种（单接种（单/三点接）三点接） 接种环灭菌。接种环灭菌。1、为为什什么么用用稀稀释释法法和和平平板板划划线线法法能能获获得得微微生生物纯种？物纯种？2、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？ 3、要要求求根根据据实实验验结结果果写写一一篇篇科科技技论论文文，字字数数在在2000字左右。字左右。 五、五、 作作 业业 题题
