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1、第一页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌 一、一、细细菌菌(xjn)(xjn)形形态检查态检查法法一一 不染色不染色(rns)标标本本检查检查法法活菌活菌轮轮廓廓(lnku)(lnku)动动 力力第二页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌 单单染色法染色法 复染色复染色(rns)(rns)法法 鉴别鉴别染色染色(rns)(rns)法法 革革兰兰染色染色(rns)(rns) 抗酸染色抗酸染色 荚荚膜染色膜染色 鞭毛染色鞭毛染色 芽胞染色芽胞染色特殊特殊(tsh)(tsh)染色法染色法二二 染色染色(rns)标标本本检查检查法法第三页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检
2、查方法与消毒灭菌原原 理：理：细细胞壁胞壁结结构学构学说说(xu shu)(xu shu)(xu shu)(xu shu)等等电电点学点学说说化学化学结结构学构学说说 革兰染色法革兰染色法Gram Stain由丹麦医生由丹麦医生(yshng)Hans Christian Gram于于18841884年年创立。立。第四页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌涂涂 片片干干 燥燥固固 定定染染 色色水洗、吸干水洗、吸干镜镜 检检一、制一、制备备涂片涂片(t pin)标标本本步步 骤骤第五页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌二、染二、染 色色结结晶紫初染晶紫初染碘液媒染碘
3、液媒染乙醇脱色乙醇脱色复复红红复染复染涂片固定涂片固定第六页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌紫色紫色紫色紫色革革革革兰兰兰兰阳性阳性阳性阳性 G+G+ 菌菌菌菌红红红红色色色色(hngs)(hngs)革革革革兰兰兰兰阴性阴性阴性阴性 G-G- 菌菌菌菌 1 1 鉴别细鉴别细鉴别细鉴别细菌菌菌菌(xjn)(xjn) 2 2 选择药选择药选择药选择药物物物物 3 3 与致病性有关与致病性有关与致病性有关与致病性有关意意 义义结结 果果第七页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌 细细菌学菌学诊诊断断(zhndun)标标本本(biobn)的采集和的采集和运送运送防止防止
4、杂杂菌菌污污染染运送注意保存运送注意保存不同期不同不同期不同标标本本抗菌素使用前抗菌素使用前采集病采集病变变明明显显部位部位标标本必本必须须新新鲜鲜第八页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌病原菌的病原菌的检查检查程序程序药药物敏感物敏感(mngn)试验试验直接直接(zhji)涂片涂片镜检镜检别别离培养离培养生化生化试验试验血清学血清学鉴鉴定定动动物物试验试验明明确确诊诊断断初步初步诊诊断断分子生物学技分子生物学技术术其他其他检测检测技技术术观观察菌落形察菌落形态态染色染色镜检镜检第九页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌原理原理(yunl)双份血清双份血清(xuq
5、ng)标标本，恢复期血清本，恢复期血清(xuqng)中抗体效价中抗体效价比急性期血清比急性期血清(xuqng)中抗体效价升高中抗体效价升高4倍者方有意倍者方有意义义结结果果(ji gu)判断判断血清学的血清学的诊诊断断-抗原检测未知抗体-效价上下- 动态观动态观察察第十页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌种种 类类凝集凝集(nngj)试验试验 - 肥达肥达试验试验(shyn)、外斐、外斐试验试验(shyn)、显显微微镜镜凝集凝集试验试验(shyn)等等中和中和试验试验(shyn) -梅毒梅毒VDRL、RPR试验试验等等沉淀沉淀试验试验 - 抗抗“O试验试验等等补补体体结结合合试
6、验试验 - Q热热柯克斯体抗体柯克斯体抗体检测检测等等第十一页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌杀杀死物体上病原微生物的方法死物体上病原微生物的方法(fngf),并不一定并不一定能能杀杀死含芽胞的死含芽胞的细细菌或非病原微生物菌或非病原微生物 第十二章 消毒(xio d)(xio d)与灭菌消毒消毒(xio d)(xio d)disinfectiondisinfection灭灭菌菌sterilizationsterilization无菌无菌asepsisasepsis防腐防腐antisepsisantisepsis防止或抑制体外防止或抑制体外防止或抑制体外防止或抑制体外细细细细
7、菌生菌生菌生菌生长长长长繁殖繁殖繁殖繁殖不含活菌不含活菌不含活菌不含活菌杀杀杀杀死物体上的所有微生物死物体上的所有微生物死物体上的所有微生物死物体上的所有微生物无菌操作无菌操作第十二页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌抹布抹布(mb)上的上的细细菌菌 菜板上的菜板上的细细菌菌(xjn) 第十三页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌热热力力(rl)灭灭菌法菌法 一、物理消毒一、物理消毒(xio d)(xio d)灭灭菌菌法法燃燃烧烧-最最彻彻底底(chd)的的灭灭菌方法菌方法烧烧灼灼-直接用火焰直接用火焰灭灭菌方法菌方法干烤干烤-加加热热160-180 2小小时时干
8、干热热(dry heat)灭灭菌法菌法杀杀菌机理：菌机理：高温使菌体蛋白凝固高温使菌体蛋白凝固变变性性红红外外线线-热热效效应应只在照射外表只在照射外表产产生生微波微波-热热效效应应具有一定的穿透性具有一定的穿透性第十四页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌湿湿热热(sh r)(moist heat)灭灭菌法菌法加加压压蒸汽蒸汽(zhn q)灭灭菌法菌法最有效的最有效的灭灭菌菌(mi jn)方法方法121煮沸消毒法煮沸消毒法水煮水煮1005分分钟钟(繁殖体繁殖体)-2小小时时(芽胞芽胞) 流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法间间歇蒸汽歇蒸汽灭灭菌法菌法水蒸汽水蒸汽10
9、0 15-30分分钟钟(繁殖体繁殖体)反复屡次流反复屡次流动动蒸汽蒸汽间间歇加歇加热灭热灭菌菌较较低的温度低的温度 6130分分钟钟 杀灭杀灭致病菌致病菌20-30分分钟钟第十五页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌湿湿热热(sh r)灭灭菌与干菌与干热灭热灭菌的比菌的比较较同一温度下，湿同一温度下，湿热热(sh r)比干比干热灭热灭菌效果好菌效果好原原因因(yunyn)1、湿、湿热热中中细细菌菌体蛋白菌菌体蛋白较较易凝固易凝固2、湿、湿热热的穿透力比干的穿透力比干热热大大3、湿、湿热热的蒸汽有潜的蒸汽有潜热热第十六页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌辐辐射射(f
10、sh)杀杀菌法菌法 紫外紫外线线杀杀菌菌(sh jn)机理：机理：波波长长(bchng)200-300nm的紫外的紫外线线具有具有杀杀菌作用菌作用干干扰扰DNA的复制与的复制与转录转录紫外紫外线线穿透力穿透力较较弱弱特点：特点：应应用范用范围围：空气及不耐空气及不耐热热物品的外表消毒物品的外表消毒光复活作用及光复活光复活作用及光复活酶酶第十七页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌杀杀菌菌(sh jn)机理：机理：应应用用(yngyng)范范围围：电电离离辐辐射射包括高速包括高速(o s)电电子、子、X射射线线和和 射射线线产产生游离基生游离基,破坏破坏DNA。一次性医用塑料制品的
11、消毒一次性医用塑料制品的消毒食品的消毒不破坏其食品的消毒不破坏其营营养成分养成分 第十八页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌超声波超声波杀杀菌菌(sh jn)法法 超声波超声波杀杀菌菌(sh jn)机理：机理：频频率高于率高于20kHz/s而不被人耳感而不被人耳感觉觉(gnju)到的声波到的声波过过水水时时的空化作用的空化作用 空穴效空穴效应应 特点：特点：应应用范用范围围：粉碎粉碎细细胞，提取胞，提取细细胞胞组组分分革革兰兰阴性菌阴性菌较为较为敏感敏感第十九页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌滤过滤过(l u)除菌法除菌法用机械性阻用机械性阻挡挡除去除去(ch
12、 q)液体或空气中的液体或空气中的细细菌菌滤滤菌器菌器 含有微含有微细细小孔小孔0.22微米微米,只允只允许许液体液体(yt)或气体通或气体通过过, 而大于孔径的而大于孔径的细细菌等菌等颗颗粒不能通粒不能通过过 适用范适用范围围血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌 第二十页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌滤滤菌菌过过程程(guchng)第二十一页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌低温低温(dwn)与枯燥与枯燥在低温在低温(dwn)状状态态下真空抽去水分下真空抽去水分用途用途(yngt)：保存菌保存菌种种冷冷冻冻真空枯燥法：真空枯
13、燥法：第二十二页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌二、化学消毒二、化学消毒(xio d)(xio d)灭灭菌菌法法杀杀菌菌(sh jn)机理机理使菌体蛋白使菌体蛋白(dnbi)凝固凝固变变性性使使细细胞内胞内酶酶失活，干失活，干扰细扰细菌的正常代菌的正常代谢谢破坏破坏细细菌菌细细胞壁、膜等胞壁、膜等结结构，构，导导致内含致内含 物逸出物逸出第二十三页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌按按杀杀菌能力菌能力(nngl)分分类类可可杀杀死包括死包括(boku)芽胞在内的所有微生物芽胞在内的所有微生物 1、高效高效(o xio)消毒消毒剂剂适用于不耐适用于不耐热热力，但
14、要力，但要进进入体内的物品入体内的物品包括含包括含氯氯消毒消毒剂剂、过过氧化物消毒氧化物消毒剂剂 醛类醛类消毒消毒剂剂、环环氧乙氧乙烷烷等等第二十四页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌2、中效消毒中效消毒剂剂适用于适用于纤维纤维内内窥镜窥镜、喉、喉镜镜、麻醉、麻醉(mzu)器材等器材等包括包括(boku)含碘消毒含碘消毒剂剂、醇、醇类类消毒消毒剂剂等等不能不能杀杀死包括芽胞，可死包括芽胞，可杀杀死繁殖体死繁殖体 包包 括括结结核分枝杆菌核分枝杆菌 、真菌、多数、真菌、多数(dush)病毒病毒第二十五页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌可可杀杀死多数死多数细细菌繁
15、殖体，不能菌繁殖体，不能杀杀死芽胞、死芽胞、 结结核核(jih)分枝杆菌、某些抵抗力分枝杆菌、某些抵抗力强强的真菌和病毒的真菌和病毒3、低效消毒低效消毒剂剂适用于皮肤、粘膜、物体适用于皮肤、粘膜、物体(wt)外表和地面等外表和地面等包括包括(boku)季胺季胺盐类盐类消毒消毒剂剂、氯氯乙定、高乙定、高锰锰酸酸 钾钾等等第二十六页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌龙龙胆紫胆紫干干扰扰氧化、抑制繁殖氧化、抑制繁殖染料染料染料染料新新洁洁而而灭灭蛋白蛋白变变性，性，细细胞膜胞膜损伤损伤表面活性表面活性剂剂过过氧乙酸、碘酒氧乙酸、碘酒氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀氧化氧化剂剂红红汞、硫柳
16、汞汞、硫柳汞氧化、蛋白氧化、蛋白酶酶变变性性重金属重金属盐盐高高锰锰酸甲酸甲氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀氧化氧化剂剂乙醇乙醇蛋白蛋白变变性性醇醇类类石炭酸石炭酸蛋白蛋白变变性，性，细细胞膜胞膜损伤损伤酚酚类类常用种常用种类类作用机制作用机制类别类别常用常用(chn yn)消毒消毒剂剂种种类类第二十七页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌各种各种( zhn)消毒消毒剂剂的的应应用用消毒剂消毒剂消毒剂消毒剂常用浓度常用浓度常用浓度常用浓度 适用范围适用范围适用范围适用范围含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂有效氯量有效氯量有效氯量有效氯量4g/L4g/L4g/L4g/L饮水饮水饮
17、水饮水过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸过氧乙酸0.2%-1%0.2%-1%0.2%-1%0.2%-1%皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气皮肤、物体表面、空气戊二醛戊二醛戊二醛戊二醛2%2%2%2%医疗器械医疗器械医疗器械医疗器械碘酒碘酒碘酒碘酒2.5%2.5%2.5%2.5%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面碘伏碘伏碘伏碘伏2%2%2%2%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面乙醇乙醇乙醇乙醇75%75%75%75%医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤医疗器械、皮肤新洁尔灭新洁尔灭新
18、洁尔灭新洁尔灭0.4%-1.6%0.4%-1.6%0.4%-1.6%0.4%-1.6%皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面皮肤、黏膜、物体表面高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾1-10g/L1-10g/L1-10g/L1-10g/L皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等皮肤、黏膜、食具、蔬菜等第二十八页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌影响消毒影响消毒剂剂作用作用(zuyng)的因素的因素消毒消毒剂剂细细菌菌(xjn) 环环境境(hunjng)种种类类浓浓度度作用作用时间时间菌菌龄龄种种类类有机物有机物温度温度酸酸硷硷度度
19、第二十九页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌1、试试述常用述常用(chn yn)热热力力灭灭菌法的作用机制及适用范菌法的作用机制及适用范围围2、试试分析影响化学消毒分析影响化学消毒剂剂作用效果的因素作用效果的因素3、简简述革述革兰兰染色的原理、步染色的原理、步骤骤、结结果及意果及意义义4、据据细细菌的生物学性状，如何菌的生物学性状，如何对对一未知菌提出微一未知菌提出微 生物学的生物学的诊诊断方案？断方案？预习预习(yx)：微生物的微生物的遗传遗传(ychun)与与变变异异思考思考题题第三十页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌检查方法与消毒灭菌内容(nirng)总结第十一章 细菌(xjn)的检查方法。第十一章 细菌(xjn)的检查方法。复染色法 鉴别染色法 革兰染色。由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年创立。步 骤。二、染 色。红色革兰阴性G-菌。结 果。双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高4倍者方有意义。- 抗原检测未知抗体。- 效价上下。- 动态观察。凝集试验 -。第十二章 消毒与灭菌。湿热灭菌与干热灭菌的比较第三十一页，共三十一页。检查方法与消毒灭菌
