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1、第十九章第十九章 临床自动生化分临床自动生化分析仪的性能与应用析仪的性能与应用 李兴武附院检验科第一节 临床生化自动分析仪的类型一、概述 仪器的发展史、第一台1957年由美国Technicon公司生产(Auto Analyzer),单通道连续流动式,只是模仿手工。60年代后随电子计算机技术迅速发展。从设计构造及速度、功能方面有很大的发展。 2第十九章 生化分析仪试剂自动检测:借助条码技术识别种类及效期等。样本自动识别:量多少,有无溶血、脂血、黄疸、血球、凝块等。自动加样:试剂、样本、稀释液等。自动检测:样本杯、试剂架、反应杯。数据处理:打印报告:自动报警: 3第十九章 生化分析仪分类 按反应装
2、置结构:连续流动式、分立式和离心式。 按同时检测项目与否:单通道、多通道。 按仪器的自动化程度:全自动、半自动。 按仪器复杂程度:小型、中型和大型。 4第十九章 生化分析仪(一)管道式分析仪(P442) 原理:吸样吸试剂混匀(第二试剂)混匀孵育比色计算打印结果。特点:所有反应在同一管道中进行,一个接一个进行,可通过透析器将干扰物除去、速度慢;也有将多个通道并列起来。5第十九章 生化分析仪(二)、分立式分析仪(二)、分立式分析仪 (P443)(1)原理:同一时期的测定在不同反应杯中进行,试剂及样本由不同的加样器自动加样,在一定温度下反应一定时间后反应液依次自动吸入比色杯比色或反应杯依次通过光路进
3、行检测;可有多个加样臂,所以其体积大且速度快。6第十九章 生化分析仪(2) 仪器各部分简介: 标本架:条形:适合于现在自动加样圆形:有整圆形,节段组成的7第十九章 生化分析仪水及热空气等废水等样品盘试剂盘试剂针样品针清洗针反应池反应杯分离式全自动生化分析仪府视图试剂盘8第十九章 生化分析仪9第十九章 生化分析仪比色杯 质地:玻璃、塑料或石英;人工更换:一次性反应比色杯仪器自动更换:一次性反应比色杯自动清洗:反应杯可反复使用10第十九章 生化分析仪加样与采样器:一般采用机械传动带动注射器活塞,阀门有电磁控阀门,玻璃活塞等。控温装置:一般温度有25、30、37,也有连续式温度如2050等可任选;1
4、1第十九章 生化分析仪恒温水(油)浴箱:温度比较稳定,但水需要经常更换和处理,以防影响比色杯表面光度;电热恒温器:采用空气恒温时送热风,温度波动较大,受外界影响大;半导体恒温:硅半导体介导恒温,介于两者之间。反应时间控制: 随意设定12第十九章 生化分析仪检测器:试剂 样品及杯子 吸光度等 清洗系统:干燥系统:与清洗系统共用分析系统:结果、原始数据、是否超出反应线性、酶反应时线性是否合理等打印机: 13第十九章 生化分析仪(三)离心式生化分析仪 (P444)原理:圆盘内的样品和试剂受到离心力的作用而相互混合发生反应,在高速旋转过程中进行比色测定。 14第十九章 生化分析仪特点:又称为成批测定或
5、同步测定,即分析过程中,样品与试剂的混合、反应和检测等每一步几乎同时完成。试剂和样本量:(样品150ul,试剂50350ul),视离心杯的底部面积大小;速度一般,现很少生产此类产品;15第十九章 生化分析仪反应转盘:可用手工换,也可通过自动换盘。无法自动清洗。转速一般在5001000r/min;仪器:美国Baker公司的Encore 、型、IL的Monarch系列、Roche公司的Cobas Fara-型等 16第十九章 生化分析仪(四)干片式分析仪 (P444) 原理:在干化学纸片上加上血清后,背面产生颜色,用反射光度计检测即可定量;特点:是80年代问世的产品,是将含底物的试剂浸入纸片后,经
6、干燥制得,干片由试剂和电极构成,一次使用,成本高。但方便快捷。缺点:结果波动性大。 17第十九章 生化分析仪二、半自动生化分析仪二、半自动生化分析仪 (1) 操作分两部分:手工部分:加样、保温、吸入样本仪器部分:比色、读数、计算、打印结果。 18第十九章 生化分析仪(2)特点:体积小,结构简单,灵活,价廉,适合标本量不大的小型医院。比色快,速率法慢,不受试剂、方法的限制,常规、急诊使用方便。 19第十九章 生化分析仪(3) 注意事项:使用同一比色池,重复性好,但结果受加样和取样的影响。作酶动学时,应注意计时准确性,还应注意温度的波动。 20第十九章 生化分析仪三、全自动生化分析仪 概念:从加样
7、本至出结果的全过程由仪器来完成,受主观因素影响少。功能全,灵活性大,易于操作,有吸光度法、荧光法、光散射法、浊度法、ISE法等。 21第十九章 生化分析仪常规生化、特殊蛋白、药物监测等。随机安排程序,呆单项测定,也可成批测定,可对数据进行统计处理。模块式生化分析仪:采用多个相同的或不同的生化分析仪通过传送带等形式相互连接起来。 22第十九章 生化分析仪第二节 临床生化自动分析仪的性能评价及与合理选用(P446)正确评价十分重要一、自动化程度仪器自动化程度越高,功能越强大,适合样本多、人员少、大型医院;样本少的、检验数量少的小医院等选用半自动或小型全自动生化分析仪。 23第十九章 生化分析仪二、
8、分析效率 指分析的速度,根据仪器每小时测定样本数量及每个样本可测项目的多少;离心式应进行成批测定,如一个一个测定,则其效率较低;但同时应考虑仪器的使用效率,一个大型生化分析仪如样本较少,则仪器的使用效率不高。 24第十九章 生化分析仪三、应用范围: 项目:可测生化项目、还有药物监测、各种特殊蛋白、微量元素等。方法:分光光度法、浊度比色法、离子选择性电极法、荧光法等。波长:双波长法(三波长法),消除背景噪音,排除溶血、脂血、胆红素等干扰。试剂:单试剂、双试剂、三试剂等排除试剂或样本空白等。 25第十九章 生化分析仪四、分析准确度 准确度愈高愈好,取决于加液、温控、波长、记时等的加工精确度及状态,
9、加样量准确性、微量、系统稳定性、机械结构精密度、加样中针的携带污染等。 26第十九章 生化分析仪五、试剂使用灵活性 通常仪器所用试剂的范围也是相当重要,试剂的开放程度越高,使用的灵活性就大,有些仪器与试剂采用捆绑方式,成本高,不利于开展新工作。 27第十九章 生化分析仪第三节 临床生化自动分析仪的方法 要合理使用仪器,就必须首先了解仪器的各项功能 一、分析方法: 28第十九章 生化分析仪(一)平衡法(终点法) ( 1) 一 步 法 : 试 剂 酶 的 底 物(S)就是所测的物质(P448)(2)酶偶联反应;S1S2 EaP1P2 EiP3P4 Ea为辅酶,Ei为指示酶29第十九章 生化分析仪(
10、二)动态法分为可变信号与固定信号 30第十九章 生化分析仪一点与二点不需特殊的仪器;但结果准确性差及可靠性差多点法、回归法及积分法为使用生化分析仪的首选仪器。(三) 固定时间法(二点法)不需对反应过程进行观察,或只需观察前后两点即可。 31第十九章 生化分析仪(四) 空白对照方法样本空白试剂;试剂;样本完全试剂(终止反应后)32第十九章 生化分析仪二、主要实验参数的选择(设置)(一)波长:吸收曲线的低谷为空白波长,吸光度大而平的波长为分析波长;采用光栅或单色光滤光器,光路采用后分光技术,波长更准确。(二)温度:现一般采用37。 33第十九章 生化分析仪(三)、样品量及试剂量:一般按手工法按比例
11、缩减;但可以根据不同仪器的情况自行设计,但同时改变线性及灵敏度。 试剂样本用量的多少是衡量生化分析仪品质的一个重要指标。34第十九章 生化分析仪(四)分析时间确定: (1)、终点法:一般选开始时间(即试剂与样本混匀舜间,这样反应还未开始但又能去除试剂与样本的空白),结束时间一般以反应达终点时的时间,计算A=A末A始 35第十九章 生化分析仪(2) 动态法时间:选定读数的起始点,即迟滞期后开始,结束时间一定要在线性反应期内,计算按:A/min(A末A始)/(TA末TA始)。 36第十九章 生化分析仪(五)线性判断标准(线性限度L):作为反应达终点时吸光度反应的界限,这只是对于终点法实验来说,若为
12、酶促反应的话,很难观察到终点的时间.空白试剂吸光度:配好试剂是否已变质。空白反应吸光度:看试剂在反应温度下的稳定性。 37第十九章 生化分析仪(六)异常吸收率限度:见下面的示意图。 38第十九章 生化分析仪三、仪器室条件及仪器操作 (一)、仪器室条件(1)、电源、电压、UPS、温度(1530)、湿度、防尘等。(2)、操作常规:操作规程及维修保养、专人保管使用等 39第十九章 生化分析仪1、方法学:单试剂、双试剂、与试剂盒。2、加样系统:加样的准确性、微量、系统稳定性、机械结构精密、加样中的携带污染。 40第十九章 生化分析仪3、检测系统:光源灯(卤素灯、钨丝灯、石英灯、氙闪光灯) 单色光器(干涉滤片、光栅单色镜)比色杯光电转换元件(硒光电池、光电管、光电倍增管)其他电器。 41第十九章 生化分析仪4、控制系统:温度、校正系统;5、仪器处理标本能力和适用范围:每小时处理数量6、实用性:与经济条件、技术条件、操作、维修、性能、价格。 42第十九章 生化分析仪谢谢 谢谢!再 见