动物实验的基本技术和方法课件

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1、第十章第十章 动物实验的基本技术和方法动物实验的基本技术和方法动物实验的基本技术和方法优秀课件在在医医学学教教学学、科科研研和和医医疗疗工工作作中中，不不论论是是从从事事基基础础医医学学还还是是临临床床医医学学或或预预防防医医学学，都都需需要要用用实实验验动动物物来来进进行行各各种种实实验验。通通过过对对动动物物实实验验的的观观察察、分分析析，来来研研究究需需要要解解决决的的问问题题，动动物物实实验验方方法法已已成成为为研研究究工作中必不可少的重要手段。工作中必不可少的重要手段。动物实验动物实验动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验动物实验整体实验整体实验:LD50、活存时间、活存率、活存时

2、间、活存率离体实验离体实验:器官灌注、组织切片、细胞培养器官灌注、组织切片、细胞培养急性实验：急性实验：急毒，急毒，12天天亚急性实验：亚急性实验：药效，药效，14周周慢慢性性或或长长期期实实验验：长长毒毒、“三三致致”、转转基基因因 动物动物, 36个月个月动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验前的准备动物实验前的准备一、动物的购入一、动物的购入一、动物的购入一、动物的购入购入或领取实验动物时，实验人员应向供购入或领取实验动物时，实验人员应向供应部门索取所用动物相应等级的由国家主管应部门索取所用动物相应等级的由国家主管部门所颁发的质量合格证书，动物的遗传背部门所颁发的质量合格证书，动物的遗

3、传背景资料、动物微生物检查资料及动物年龄和景资料、动物微生物检查资料及动物年龄和健康等方面的资料。健康等方面的资料。若是购入或领取清洁级以上实验动物，应若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带过滤帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况帽的笼盒运输，并严格检查其密封状况。 动物实验的基本技术和方法优秀课件动物外观健康检查主要内容：动物外观健康检查主要内容：皮毛：有无光泽、出血、干燥；眼：有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等；耳：有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等；四肢：有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎；肛门：有无下痢、血便、脱肛等。动物实验的基

4、本技术和方法优秀课件 二、动物饲养室及饲养器具准备二、动物饲养室及饲养器具准备 饲饲养养室室面面积积应应根根据据所所购购入入动动物物的的数数量量来来确确定定。饲饲养养动动物物的的器器具具等等，应应在在动动物物购购入入前前准准备备好好。垫垫料料、饲饲料料应应按按购购入入动动物物数数量量准准备备。各各笼笼箱箱的的编编号号及及卡卡片片、饲饲喂喂动动物物所所用用器器材材，如如给给饵饵器器、粪粪便便托托盘盘、搬搬运运车车、台台秤秤、饲饲料料桶桶、电电源源插插板板等等也也应应准准备备放放好好。动动物物饲饲养养室室的的环环境境应应根根据据所所计计划划使使用用动动物物的的微微生生物物控控制制级级别别来来进进行

5、行准准备备，属属于于屏屏障障系系统统的的应应调调整整好好送送排排风风系系统统、空空气气净净化化系系统统，控控制制好好温温度度、湿湿度度、风风速速、噪噪声声等等环环境境因因素素。动动物物饲饲养养室室在在启启用用前前，应应对对设设施施、笼笼具及用具等统一进行彻底消毒。具及用具等统一进行彻底消毒。动物实验的基本技术和方法优秀课件编号标记编号标记 目的：目的：为了分组为了分组要求：要求：清晰、耐久、简便、适用清晰、耐久、简便、适用动物实验的基本技术和方法优秀课件颜料标记颜料标记 颜料标记适应于较大颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有用的颜料有5%5%

6、苦味酸苦味酸溶液溶液 ( (黄色黄色) )2%2%硝酸银硝酸银溶液溶液 ( (咖啡色咖啡色) )0.5%0.5%中性品红中性品红溶液溶液 ( (红色红色) )煤焦油煤焦油的酒精溶液的酒精溶液( (黑色黑色) )。编号原则：编号原则：先左后右，从上而下。先左后右，从上而下。动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠和大鼠标号示图小鼠和大鼠标号示图动物实验的基本技术和方法优秀课件烙印烙印用号码烙印钳在兔、豚用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号，然后在烙印部鼠的耳朵烙号，然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将

7、实臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。颈圈上。动物实验的基本技术和方法优秀课件纹身纹身 用刺数钳在局部皮用刺数钳在局部皮肤肤( (兔多在耳朵内侧，猴多兔多在耳朵内侧，猴多在前胸皮肤在前胸皮肤) )刺上号码，再刺上号码，再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号，多用于猴、兔的编刺号，多用于猴、兔的编号。号。动物实验的基本技术和方法优秀课件号牌号牌将不锈钢或铝质号将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上，但应将号牌挂

8、在笼具上，但应防止抓取操作后将动物放防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。错笼具而混淆编号。动物实验的基本技术和方法优秀课件 毛色毛色 利用动物的毛色将其编号，用于利用动物的毛色将其编号，用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。号。剪毛剪毛 用剪刀在狗背上剪出号码，此用剪刀在狗背上剪出号码，此方法简单，字迹清楚、可靠，便于观方法简单，字迹清楚、可靠，便于观察。察。打孔打孔 用打孔器在兔耳上打孔或剪口用打孔器在兔耳上打孔或剪口。动物实验的基本技术和方法优秀课件动物被毛的去除动物被毛的去除为了排除动物被毛对实为了排除动物被毛对实验操作和观察结果的影响，验操作和观察

9、结果的影响，实验中需要去除或剪短动实验中需要去除或剪短动物的被毛。物的被毛。动物实验的基本技术和方法优秀课件剪毛法剪毛法拔毛法拔毛法剃毛法剃毛法脱毛法脱毛法动物实验的基本技术和方法优秀课件脱毛剂脱毛剂1) 8%NaS1) 8%NaS NaS 8g+ NaS 8g+水至水至100ml100ml；也可用硫化钠；也可用硫化钠8 8克、淀粉克、淀粉7 7克、甘油克、甘油4 4克、硼砂克、硼砂1 1克，用自来水加克，用自来水加至至100ml100ml。 常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液上述配制好的溶液5 57ml7ml可用于可用于 1512cm1512cm

10、2 2皮肤皮肤的脱毛。的脱毛。2) 10%NaS2) 10%NaS 硫化钠硫化钠1010克、氧化钙克、氧化钙1515克，自来水克，自来水加至加至100ml100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤脱。常用于狗、猪等较大动物的皮肤脱毛。毛。3) 3) 硫化硷硫化硷 染土布用硫化硷染土布用硫化硷1010克，生石灰克，生石灰1515克，克，加自来水至加自来水至100ml100ml溶解后即可应用。常用于实验溶解后即可应用。常用于实验狗的皮肤脱毛，涂上脱毛剂狗的皮肤脱毛，涂上脱毛剂2 23 3分钟狗毛即可分钟狗毛即可成糊状，迅速用自来水将局部脱毛皮肤冲洗干成糊状，迅速用自来水将局部脱毛皮肤冲洗干净。此方法

11、脱毛干净，脱毛后局部皮肤不充血。净。此方法脱毛干净，脱毛后局部皮肤不充血。动物实验的基本技术和方法优秀课件目的：目的：防止动物挣扎，保持安静防止动物挣扎，保持安静 防止意外损伤，便于操作防止意外损伤，便于操作 麻醉麻醉动物实验的基本技术和方法优秀课件全身麻醉全身麻醉1%1%硫喷妥钠硫喷妥钠: :1515mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip2%2%戊巴比妥戊巴比妥: :4040mg/kgmg/kg，iv/ipiv/ip盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮: :4040mg/kgmg/kg，sc/imsc/im复方氯胺酮复方氯胺酮: :0.010.01ml/kgml/kg，sc/imsc/im动物实验的基本

12、技术和方法优秀课件麻麻 醉醉 剂剂动动 物物给药方法给药方法剂量剂量（mg/kg）常用浓度常用浓度%维维 持持 时时 间间戊巴比戊巴比妥纳妥纳犬、猫、兔静脉1.0324小时，中途加上小时，中途加上1/5量，可维持量，可维持1小时以上，小时以上，麻醉力强，易抑制呼吸。麻醉力强，易抑制呼吸。腹腔、皮下1.41.73大、小鼠、豚鼠腹腔2.02.52鸟类肌肉2.55.02异戊巴异戊巴比妥钠比妥钠犬、猫、兔静脉0.81.0546h肌肉、腹腔0.81.010直肠1.010鼠类腹腔1010氨基甲氨基甲酸乙酯酸乙酯（乌拉（乌拉坦）坦）犬、猫、兔静脉、腹腔2.53.33024小时，应用安全，小时，应用安全，毒性

13、小，主要适用小毒性小，主要适用小动物的麻醉。动物的麻醉。直肠5.030大、小鼠、豚鼠肌肉7.020鸟类肌肉6.32.0蛙类皮下淋巴结2320硫喷妥硫喷妥钠钠犬、猫、兔静脉、腹腔1.32.521530min，麻醉力强，麻醉力强，宜缓慢注射，维持注射剂宜缓慢注射，维持注射剂量按情况掌握量按情况掌握大鼠静脉、腹腔5.0101巴比妥巴比妥钠钠犬静脉11.22046h，麻醉诱导期较长，麻醉诱导期较长，深度不易控制深度不易控制猫腹腔4.05口服4.010兔腹腔4.05鸽腹腔、肌肉6.13鼠类皮下210苯巴比苯巴比妥钠妥钠犬、猫腹腔、静脉2.23.03.546h，麻醉诱导期较长，麻醉诱导期较长，深度不易控制

14、深度不易控制兔腹腔4.36.03.5鸽肌肉6.05动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件局部麻醉局部麻醉1%1%盐酸普鲁卡因，盐酸普鲁卡因，局部注射局部注射2%2%盐酸可卡因，盐酸可卡因，粘膜表面麻醉粘膜表面麻醉动物实验的基本技术和方法优秀课件急救急救原因：原因：麻醉过量、大失血、窒息麻醉过量、大失血、窒息措施：措施：人工呼吸人工呼吸 强心剂：强心剂：0.1%0.1%肾上腺素肾上腺素 呼吸兴奋剂：呼吸兴奋剂：尼可杀米尼可杀米 山梗菜碱山梗菜碱 快速输血、输液快速输血、输液动物实验的基本技术和方法优秀课件动物的抓取与固定方法动物的抓取与固定方法目的：目的：限制动物的活动

15、，持安静状态限制动物的活动，持安静状态 以便正确操作和记录以便正确操作和记录要求：要求：不损伤实验动物不损伤实验动物 不影响观察指标不影响观察指标 实验者不被动物咬伤实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。小心细致、大胆敏捷，切忌粗暴。动物实验的基本技术和方法优秀课件 小鼠的抓取小鼠的抓取动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠的抓取保定：小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒器材：小鼠饲养盒+ +盒盖盒盖1 1套。套。 方法步骤：方法步骤： 1 1、用右手拇指和食指捏、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提住小鼠尾巴中部将小鼠提 起，放在饲养盒盖上。起，

16、放在饲养盒盖上。 2 2、用左手拇指和食指迅速、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后、准确地捏住小鼠的两耳后、 颈背部的皮肤，将小鼠提起。颈背部的皮肤，将小鼠提起。动物实验的基本技术和方法优秀课件 3 3、翻翻转转左左手手掌掌，以以左左手手掌掌心心和和中中指指夹夹 小小鼠鼠背背部部的的皮皮肤肤，使使小小鼠鼠整整个个呈呈一一条条 直线。直线。 4 4、用左手无名指、用左手无名指 压住小鼠背部的压住小鼠背部的 皮肤，小指压住皮肤，小指压住 小鼠的尾巴根部。小鼠的尾巴根部。 5 5、松开捏住小鼠尾、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。巴的右手拇指和食指。 动物实验的基本技术和方法优秀课件大

17、鼠的抓取和固定大鼠的抓取和固定1. 1.戴上防护手套，抓住大鼠的尾中部或根部从戴上防护手套，抓住大鼠的尾中部或根部从笼具中取出后立即置于笼盖或实验台上。笼具中取出后立即置于笼盖或实验台上。2. 2.右手抓住大鼠尾根部，将大鼠置于笼盖或其右手抓住大鼠尾根部，将大鼠置于笼盖或其它粗糙表面上，其它粗糙表面上，轻轻向后它粗糙表面上，其它粗糙表面上，轻轻向后拉尾。拉尾。3. 3.当大鼠向前爬行时，用左手食指和中指夹住当大鼠向前爬行时，用左手食指和中指夹住大鼠颈部，同时拇指和无名指滑向其左右腋大鼠颈部，同时拇指和无名指滑向其左右腋下，分开前肢，拿起动物反转为仰卧位，即下，分开前肢，拿起动物反转为仰卧位，即

18、可进行实验操作。可进行实验操作。 动物实验的基本技术和方法优秀课件豚鼠豚鼠的实验方法的实验方法动物实验的基本技术和方法优秀课件家兔的抓取方法家兔的抓取方法动物实验的基本技术和方法优秀课件 兔的抓取保定：兔的抓取保定： ( (一一) ) 方法方法1 1：步骤：步骤： 1 1、用右手把兔的两耳拿、用右手把兔的两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，在手心并抓住颈后部皮肤，把兔提起。把兔提起。 2 2、然后用左手托住、然后用左手托住兔兔的臀部。的臀部。 动物实验的基本技术和方法优秀课件方法方法2 2：器材：兔保定架器材：兔保定架1 1个。个。步骤：步骤：1 1、打开保定架的上盖，抓取、打开保定架的上盖，抓取并

19、将并将兔放兔放进架架内，迅速关上保定架的上盖。内，迅速关上保定架的上盖。2 2、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡栓，将兔的脖子保定。栓，将兔的脖子保定。3 3、如果兔、如果兔挣扎，可用手扎，可用手在它的背上在它的背上轻轻抚摸，摸，使其安静。使其安静。 动物实验的基本技术和方法优秀课件家兔的兔台固定方法家兔的兔台固定方法动物实验的基本技术和方法优秀课件猫的抓取与固定方法猫的抓取与固定方法动物实验的基本技术和方法优秀课件比格狗照射固定架比格狗照射固定架动物实验的基本技术和方法优秀课件钳式长柄捕狗夹钳式长柄捕狗夹动物实验的基本技术和方法优秀课件驯服动物的固定驯服

20、动物的固定动物实验的基本技术和方法优秀课件 猪固定在木制三角架上猪固定在木制三角架上动物实验的基本技术和方法优秀课件 布制猪固定带布制猪固定带动物实验的基本技术和方法优秀课件猪的悬吊式固定猪的悬吊式固定动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴的抓取猕猴的抓取动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴的抓取猕猴的抓取动物实验的基本技术和方法优秀课件猪的强制性固定猪的强制性固定动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴固定架猕猴固定架动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴固定架猕猴固定架动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴的固定猕猴的固定动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴的固定猕猴的固定动物实验的基本技术和方法优

21、秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴的固定与后肢静脉血的抽取猕猴的固定与后肢静脉血的抽取动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本检查动物实验的基本检查基本检查的目的是保证实验用动基本检查的目的是保证实验用动物均正常。物均正常。一般检查一般检查实验前通过对动物的外实验前通过对动物的外观、活动、食欲、体温、脉博和呼吸观、活动、食欲、体温、脉博和呼吸等生命体征的观察和检查，对实验动等生命体征的观察和检查，对实验动物进行初步筛选。物进行初步筛选。特殊检查特殊检查 实验前对动物进行血象、实验前对动物进行血象、生化及血压、心电图、射线透视等生化及血压、心电图、射线透视等检查。检查。动物实验的基

22、本技术和方法优秀课件各各种种成成年年动动物物的的正正常常体体温温( (直直肠肠温温度度，) )动动物物名名称称 体体温温( () ) 动动物物名名称称 体体温温( () )猿猿、猴猴 38.6 38.6 大大鼠鼠 39.0 39.0 狗狗 39.0 39.0 小小鼠鼠 38.038.0猫猫 38.7 38.7 鸡鸡 41.741.7家家兔兔 39.0 39.0 鸽鸽 42.042.0豚鼠豚鼠 38.6 38.6 猪猪 39.039.0动物实验的基本技术和方法优秀课件家兔体温检查方法家兔体温检查方法动物实验的基本技术和方法优秀课件用家兔进行热原检测用家兔进行热原检测动物实验的基本技术和方法优秀课

23、件气气 温温 与与 家家 兔兔 体体 温温 的的 关关 系系 气气温温() () 家家兔兔体体温温() () 5 5 37.5 37.5 10 10 38.0 38.0 20 20 38.738.7 35 35 40.5 40.5 40 41.6 40 41.6动物实验的基本技术和方法优秀课件实实验验用用动动物物的的体体重重要要求求 动动物物 体体重重(kg)(kg) 狗狗 10101515 猴猴 3 35 5 兔兔 2 22.5 2.5 豚豚鼠鼠 0.450.450.700.70 大大鼠鼠 0.180.180.250.25 小鼠小鼠 0.020.020.030.03动物实验的基本技术和方法优

24、秀课件正正 常常 动动 物物 每每 分分 钟钟 脉脉 搏搏 次次 数数 动动物物 脉脉搏搏次次数数( (次次/ /分分) ) 猪猪 6060 80 80 羊羊 7070 8080 狗狗 8080120120 兔兔 120120150 150 豚豚鼠鼠 230230350350 大大鼠鼠 200200360360 小鼠小鼠 520520780780动物实验的基本技术和方法优秀课件正正常常动动物物每每分分钟钟呼呼吸吸次次数数 动动物物 脉脉搏搏次次数数( (次次/ /分分) ) 猪猪 15(1215(1218) 18) 羊羊 30(2030(2040)40) 狗狗 18(1018(1030)30)

25、 兔兔 60(5060(5080) 80) 豚豚鼠鼠 120(100120(100150)150) 大大鼠鼠 120(100120(100150)150) 小鼠小鼠 150(140150(140160)160)动物实验的基本技术和方法优秀课件实验动物的给药方法实验动物的给药方法为了观察药物对机体功能、代为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响，需要将药物注入实谢、形态的影响，需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同，给药途径和方法类、药物剂型不同，给药途径和方法也多种多样。也多种多样。动物实验的基本技术和方法优秀课件实验动物的给药剂量实验

26、动物的给药剂量D2=D1K2/K1 3 W1/W2 D: D:药物剂量药物剂量(gkg(gkg-1 -1dd-1 -1) )W:W:动物体重动物体重(kg)(kg) K: K:常数常数动物实验的基本技术和方法优秀课件不同种类动物的不同种类动物的K值值名称名称 K K值值 名称名称 K K值值 人人 10.610.6 家兔家兔 10.110.1 猴猴 11.811.8 大鼠大鼠 9.19.1 狗狗 11.211.2 豚鼠豚鼠 9.89.8 猫猫 9.89.8 小鼠小鼠 9.19.1动物实验的基本技术和方法优秀课件 经口给药剂量准确，对动物安全，经口给药剂量准确，对动物安全，是动物实验中常用的给药

27、方法，尤其是动物实验中常用的给药方法，尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理，必须口服肠道不吸收的抗生素。理，必须口服肠道不吸收的抗生素。口服给药口服给药动物实验的基本技术和方法优秀课件大白鼠灌胃方法大白鼠灌胃方法 动物实验的基本技术和方法优秀课件方法步骤：方法步骤： 1 1、将将灌灌胃胃针针连连接接在在注注射射器器上上，吸吸入入一一定定量量的的药药液。液。 2 2、左左手手捉捉持持保保定定大大鼠鼠，右右手手将将灌灌胃胃针头尖尖端端放放进大大鼠鼠口口咽咽部部，顺咽咽后后壁壁轻轻往往下下推推，灌灌胃胃针会会顺着着食食管管滑滑入入大大鼠鼠的的胃胃内内将将注注灌灌胃胃

28、针插插入入约5cm5cm。3 3、用用右右手手食食指指将将针针栓栓慢慢慢慢往往下下压压，将将注注射射器器中中的生理盐水灌入大鼠的胃中。的生理盐水灌入大鼠的胃中。 剂量：剂量：0.010.010.02ml0.02mlg g体重。体重。注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。 动物实验的基本技术和方法优秀课件小白鼠灌胃方法小白鼠灌胃方法动物实验的基本技术和方法优秀课件兔灌胃用张口器及胃管兔灌胃用张口器及胃管动物实验的基本技术和方法优秀课件 步骤：步骤： 1 1、将将兔兔放放进进保保定定架架内内，助助手手用用手手轻轻轻轻压压住兔的背部，避免兔的挣扎。住兔的背部，避免兔

29、的挣扎。 2 2、灌胃者用在手拇指和中指、灌胃者用在手拇指和中指挤压兔两兔两颊，将下将下颌挤开使兔被开使兔被动张口。口。 3 3、右手将开口器从一侧口角插入口腔并、右手将开口器从一侧口角插入口腔并 固定。固定。 4 4、用泡在石蜡油中的胃管，、用泡在石蜡油中的胃管，经开口器的开口器的 孔插入，向前推孔插入，向前推进约15cm15cm，可达胃内。，可达胃内。 动物实验的基本技术和方法优秀课件5 5、在插管时应将胃管另一端泡在水中、在插管时应将胃管另一端泡在水中 确认没有冒气泡，即可用注射器经确认没有冒气泡，即可用注射器经 胃管注入药液。胃管注入药液。 灌胃量：灌胃量： 80-150ml80-15

30、0ml只次。只次。 注注 意意：在灌胃过程中，：在灌胃过程中， 避免误插入气管。避免误插入气管。 动物实验的基本技术和方法优秀课件兔灌胃方法兔灌胃方法动物实验的基本技术和方法优秀课件狗灌胃方法狗灌胃方法动物实验的基本技术和方法优秀课件猪灌胃方法猪灌胃方法动物实验的基本技术和方法优秀课件 注注射射给给药药 注注射射给给药药剂剂量量准准确确, ,作作用用快快, ,是是动动物物实实验验中中常常用用的的给给药药方方法法。给给药药时时应应注注意意针针头头号号码码的的选选择择( (鼠类鼠类-4-4# #, ,狗狗-6-6# #，马，马-9-9# #) )。动物实验的基本技术和方法优秀课件皮下注射皮下注射原

31、理：原理：将药液注入皮下结缔组织，经毛细将药液注入皮下结缔组织，经毛细 血管、淋巴管吸收进入血液循环。血管、淋巴管吸收进入血液循环。器材：器材：5ml5ml注射器注射器1 1支、生理支、生理盐水、水、烧杯、杯、 酒精、碘酒、棉球。酒精、碘酒、棉球。动物实验的基本技术和方法优秀课件皮下注射皮下注射动物实验的基本技术和方法优秀课件 皮下注射皮下注射动物实验的基本技术和方法优秀课件 方法步骤：方法步骤： (1) (1) 注射部位：选大鼠的项背部的皮下。注射部位：选大鼠的项背部的皮下。 (2) (2) 常常规消毒注射部位的皮肤，用注射消毒注射部位的皮肤，用注射针头取一取一锐角角度刺入皮下。角角度刺入皮

32、下。(3) (3) 将将针针头头轻轻轻轻向向左左右右摆摆动动，易易摆摆动动则则表表示示已已刺刺入入皮皮下下，再再轻轻轻轻抽抽吸吸，如如无无回回血血，可可缓慢地将药物注入皮下。缓慢地将药物注入皮下。 注射量：注射量：0.01ml0.01mlg g体重。体重。 动物实验的基本技术和方法优秀课件皮内注射皮内注射动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠腹腔注射方法小鼠腹腔注射方法动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠尾静脉注射方法小鼠尾静脉注射方法动物实验的基本技术和方法优秀课件狗前肢内侧皮下静脉注射方法狗前肢内侧皮下静脉注射方法动物实验的

33、基本技术和方法优秀课件狗后肢静脉注射方法狗后肢静脉注射方法动物实验的基本技术和方法优秀课件各种动物一次给药能耐受的最大容量各种动物一次给药能耐受的最大容量(ml)动物动物 灌胃灌胃 皮内注射皮内注射 皮下注射皮下注射 肌肉注射肌肉注射 腹腔注射腹腔注射 静脉注射静脉注射 小鼠小鼠 0.9 0.1 1.5 0.2 1.0 0.8 大鼠大鼠 5.0 0.1 5.0 0.5 2.0 4.0 兔兔 200 0.2 10 2.0 5.0 10 猫猫 150 0.2 10 2.0 5.0 10 猴猴 300 0.3 50 3.0 10 20 狗狗 500 0.3 100 4.0 _ 100动物实验的基本技

34、术和方法优秀课件样本采集样本采集 及时、准确地采及时、准确地采( (收收) )集实验动物的血集实验动物的血样或排泄样或排泄( (分泌分泌) )物等实验标本，是保证动物等实验标本，是保证动物实验结果是否准确的重要条件。动物实物实验结果是否准确的重要条件。动物实验中一个样本有时可提供验中一个样本有时可提供1010多个数据，采多个数据，采集不当时可严重影响实验结果，如狗或猴集不当时可严重影响实验结果，如狗或猴在实验台上较长时间剧烈挣扎后可使外周在实验台上较长时间剧烈挣扎后可使外周血白细胞明显升高；如抽血不顺利且时间血白细胞明显升高；如抽血不顺利且时间较长，采集的血样中血小板计数可明显降较长，采集的血

35、样中血小板计数可明显降低。低。动物实验的基本技术和方法优秀课件血样的采集血样的采集 根据不同的实验要求及不同种类的实根据不同的实验要求及不同种类的实验动物而采取不同的采血方法。验动物而采取不同的采血方法。心脏心脏胸主动脉胸主动脉股动脉股动脉静脉静脉剪剪( (割、刺割、刺) )尾尾眼眶眼眶断头断头动物实验的基本技术和方法优秀课件鼠尾静脉切割方法鼠尾静脉切割方法动物实验的基本技术和方法优秀课件鼠尾静脉取血方法鼠尾静脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件小白鼠后眼眶静脉丛取血方法小白鼠后眼眶静脉丛取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件大白鼠后眼眶静脉丛取血方法大白鼠后眼眶静脉丛取血方法动物实验

36、的基本技术和方法优秀课件小鼠的采血小鼠的采血 摘除眼球采血法：摘除眼球采血法： 原理：将小鼠的眼球摘除后取血液原理：将小鼠的眼球摘除后取血液的方法。的方法。 器材：眼科弯器材：眼科弯镊、试管。管。 动物实验的基本技术和方法优秀课件方法步骤：方法步骤： (1)(1)左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在实左手抓住小鼠颈部皮肤，轻压在实验台上，取侧卧位验台上，取侧卧位; ; (2)(2)左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后后压，使眼球突出。，使眼球突出。 动物实验的基本技术和方法优秀课件(3)(3)用眼科弯镊夹去眼球，将鼠倒立，用眼科弯镊夹去眼球，将鼠倒立， 用试管接住流出的血液。用

37、试管接住流出的血液。(4)(4)采血完毕立即用纱布压迫止血。采血完毕立即用纱布压迫止血。 采血量：每次采血量：每次0.6-1.0ml/0.6-1.0ml/次。次。 动物实验的基本技术和方法优秀课件小白鼠心内取血方法小白鼠心内取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件大白鼠颈静脉取血方法大白鼠颈静脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件兔耳缘静脉或兔耳中央动脉穿刺兔耳缘静脉或兔耳中央动脉穿刺 方法步骤：方法步骤： (1) (1) 将兔放在保定架内保定。将兔放在保定架内保定。 (2) (2) 酒精消毒并揉搓血管，酒精消毒并揉搓血管，使使兔的耳缘静脉或耳中央动兔的耳缘静脉或耳中央动脉脉充盈。充盈。

38、动物实验的基本技术和方法优秀课件(3) (3) 用左手食指和中指夹住兔的耳缘静脉或用左手食指和中指夹住兔的耳缘静脉或耳中央动脉近心端，拇指和小指夹住耳郭边耳中央动脉近心端，拇指和小指夹住耳郭边缘部分，无名指和缘部分，无名指和小指放在耳郭下作小指放在耳郭下作垫。(4) (4) 右手拿注射器，针尖的斜面朝上，将针右手拿注射器，针尖的斜面朝上，将针头插入血管，放松对静脉近心端的压迫，缓头插入血管，放松对静脉近心端的压迫，缓慢把地药液注射进血管，或将血液抽出来。慢把地药液注射进血管，或将血液抽出来。注射或采血量：注射或采血量：5 5一一10ml10ml。 动物实验的基本技术和方法优秀课件兔耳中央动脉取

39、血方法兔耳中央动脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件兔耳缘静脉取血方法兔耳缘静脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件狗颈静脉取血方法狗颈静脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件狗股动脉取血方法狗股动脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件猕猴后肢静脉取血方法猕猴后肢静脉取血方法动物实验的基本技术和方法优秀课件肝素肝素: :1ml1ml血液内加入血液内加入2020国际单位肝素国际单位肝素(1mg(1mg等于等于120120单位，市售肝素钠注射液单位，市售肝素钠注射液1250012500单位单位/2ml/2ml约约为为50mg /ml)50mg /ml)即可达到抗凝目的，可将肝素配

40、即可达到抗凝目的，可将肝素配制成制成500500单位单位/ml/ml置置44保存，或于试管内加入保存，或于试管内加入100100单位肝素液后于单位肝素液后于8080烤干备用，后者可抗烤干备用，后者可抗凝凝3 35ml5ml血液。血液。草酸盐合剂草酸盐合剂( (草酸胺草酸胺1.2g,1.2g,草酸钾草酸钾0.8g,0.8g,甲醛甲醛1.0ml) 0.1ml1.0ml) 0.1ml、5%5%枸橼酸钠液枸橼酸钠液0.1ml0.1ml、2%2%草酸草酸钾溶液钾溶液0.1ml0.1ml均可使均可使1ml1ml血液抗凝。血液抗凝。2.7%EDTA2.7%EDTA 0.5ml0.5ml可使可使10ml10m

41、l血液抗凝。血液抗凝。抗凝剂的应用抗凝剂的应用动物实验的基本技术和方法优秀课件消化液采集消化液采集( ( ( (一一一一) ) ) )胃液的采集胃液的采集胃液的采集胃液的采集通通通通过过过过刺刺刺刺激激激激，使使使使胃胃胃胃液液液液分分分分泌泌泌泌增增增增加加加加，再再再再用插胃管的办法抽取胃液。用插胃管的办法抽取胃液。用插胃管的办法抽取胃液。用插胃管的办法抽取胃液。( ( ( (二二二二) ) ) )胆汁的采集胆汁的采集胆汁的采集胆汁的采集采集胆汁需要施行手术。采集胆汁需要施行手术。采集胆汁需要施行手术。采集胆汁需要施行手术。( ( ( (三三三三) ) ) )胰液的采集胰液的采集胰液的采集

42、胰液的采集胰液的采集基本同胆汁的采集。胰液的采集基本同胆汁的采集。胰液的采集基本同胆汁的采集。胰液的采集基本同胆汁的采集。 动物实验的基本技术和方法优秀课件 尿液采集尿液采集 (一)代谢笼 动物排便时，可通过笼子底部的大小便分离漏斗，将尿液与粪便分开，达到采集尿液的目的。 (二)压迫膀胱(强制排尿)将动物固定，按压骶骨两侧的腰背部或轻轻压迫膀胱的体表部位，使其排尿。 动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件处死处死安乐死安乐死: :使动物在尽短大时间内没使动物在尽短大时间内没有痛苦没有恐惧地死亡大方法有痛苦没有恐惧地死亡大方法. . 原则：原则：时间短、痛苦少时间短、痛

43、苦少动物实验的基本技术和方法优秀课件处死方法处死方法化学药物：化学药物：二氧化碳，三氯甲烷二氧化碳，三氯甲烷 乙醚，氯化钾，乙醇乙醚，氯化钾，乙醇脱臼断髓：脱臼断髓：颈椎脱臼颈椎脱臼空气栓塞：空气栓塞：兔兔40ml,40ml,狗狗100ml100ml急性失血：急性失血：大动物麻醉大动物麻醉 股动脉放血股动脉放血动物实验的基本技术和方法优秀课件小鼠颈椎脱臼处死法小鼠颈椎脱臼处死法动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验后的管理方法动物实验后的管理方法一、动物实验后的护理一、动物实验后的护理( (一一) )注意饮食卫生注意饮食卫生( (二二) )细心护理，防止意外损

44、伤细心护理，防止意外损伤( (三三) )控制好受试动物的环境控制好受试动物的环境动物实验的基本技术和方法优秀课件 二、动物实验的描述二、动物实验的描述 ( (一一) )标题中实验动物种名的记述标题中实验动物种名的记述 论文题目是该项研究的核心。许多情论文题目是该项研究的核心。许多情况下，应描述实验动物的种（品系）况下，应描述实验动物的种（品系）名。名。 动物实验的基本技术和方法优秀课件 ( (二二) )实验动物的品种(系)应准确描述实验动物的品种或品系名称，避免使用通俗称谓。 ( (三三) )实验动物的来源、遗传背景及微生物学质量动物从何处获得属于遗传学分类（近交系、突变系封闭群、杂交群）中的

45、哪一类，属于微生物学质量分级（普通级、清洁级、SPF级、无菌级）中的哪一级，必须规范叙述。 动物实验的基本技术和方法优秀课件 ( (四四) )动物性别动物性别 动动物物性性别别对对某某些些实实验验结结果果影影响响较较大大，因因此此必必须须描描述动物的性别。述动物的性别。 ( (五五) )动物年龄、体重动物年龄、体重 实验者应向实验动物供应单位索取，询问清楚。实验者应向实验动物供应单位索取，询问清楚。 ( (六六) )动物饲养方式动物饲养方式应对动物饲养方式，如饲料种类、饲料来源、饲应对动物饲养方式，如饲料种类、饲料来源、饲料合格证号、饲喂方式、饮水方式、饲养密度、料合格证号、饲喂方式、饮水方式

46、、饲养密度、笼具与垫料种类、更换次数、清扫频率，甚至使笼具与垫料种类、更换次数、清扫频率，甚至使用哪一种材料的笼盒都应叙述清楚。如若是因实用哪一种材料的笼盒都应叙述清楚。如若是因实验需要自制的饲料，应叙述饲料成分和配制方法验需要自制的饲料，应叙述饲料成分和配制方法等。等。 动物实验的基本技术和方法优秀课件 ( (七七) )实验环境实验环境 实实验验观观察察环环境境（如如温温度度、湿湿度度、光光照照度度、光光照照周周期期、噪噪音音、环环境境洁洁净净度度）、动动物物饲饲养养环环境境的的级级别别以以及及相相应应级级别别的的动动物物实实验验条条件件合合格格证证号号码码与与颁颁布布单单位位等等应应作作出

47、出尽尽可可能能的的描描述述。如如若若是是清清洁洁级级以以上上的条件，还应叙述换气次数。的条件，还应叙述换气次数。 ( (八八) )实验动物和动物实验条件合格证实验动物和动物实验条件合格证 目目前前我我国国实实施施实实验验动动物物合合格格证证制制度度，并并以以法法令令形形式式作作出出规规定定。实实验验者者在在论论文文中中应应记记述述所所使使用用动动物物和和动动物物实实验验条条件件的的合合格格证证号号码码及及颁颁发发合合格格证证的的单单位。位。动物实验的基本技术和方法优秀课件 (九)使用的麻醉剂 动物施行麻醉术时，有些实验应记述所使用的麻醉剂种类、剂量、麻醉方式和给药途径等。 (十)施加实验因素所

48、采用的方式 如“经口灌胃”、“腹腔注射”等。 (十一)处死方法在有些需处死后采集标本的实验中，应标明动物的处死方式。 动物实验的基本技术和方法优秀课件 动物实验后废弃物的无害化处理动物实验后废弃物的无害化处理 一、组织管理一、组织管理在各单位实验动物管理委员会的指导下，所属的动物实验中心（或室）对废物的无害化实行专人领导和专人负责制，并制定相应的规章制度强化动物实验中的废弃物的无害化处理的管理。动物实验的基本技术和方法优秀课件 二、污水的无害化处理二、污水的无害化处理动物实验中的污水来自动物的尿粪液、笼器具洗刷、废弃的消毒液、实验中的废弃的试液等，并且使用量大。 实验室排出的污水应首先集中在贮

49、水池中进行消毒。 如果是做动物感染实验所产生的污水，必须先彻底灭菌后方可排入污水储水池进行消毒。动物实验的基本技术和方法优秀课件三、污物的无害化处理三、污物的无害化处理三、污物的无害化处理三、污物的无害化处理（一一）在在动动物物中中心心领领导导下下，实实行行专专人人管管理理和处理和处理（二）分类收集（二）分类收集1 1污污物物应应分分类类收收集集，实实验验动动物物废废垫垫料料与与实实验废弃品要分开，不得混放。验废弃品要分开，不得混放。2 2实实验验后后收收集集的的污污物物不不得得直直接接向向垃垃圾圾道道内内倾倾倒倒，污污物物要要用用污污物物处处理理容容器器，进进行行盛盛装装。然然后后汇汇总总于

50、于专专用用污污物物袋袋中中进进行行一一次次性封闭处理。性封闭处理。 3 3有机垃圾盛装器应密封有盖，防渗漏、有机垃圾盛装器应密封有盖，防渗漏、防蝇、防鼠、并便于搬运及消毒。防蝇、防鼠、并便于搬运及消毒。 动物实验的基本技术和方法优秀课件（三）无害化处理（三）无害化处理1 1一一次次性性口口罩罩、帽帽子子等等使使用用后后应应装装入入专专用用垃垃圾圾袋袋回回收收焚烧处理。焚烧处理。2 2一一次次性性使使用用的的注注射射器器、针针头头、手手套套等等物物品品使使用用后后经经消消毒毒剂剂浸浸泡泡清清洗洗，毁毁形形后后按按要要求求统统一一进进行行无无害害化化处处理理。绝不可自行处理和随意扔掉。绝不可自行处

51、理和随意扔掉。3 3用用过过的的废废垫垫料料要要装装入入垃垃圾圾袋袋中中或或专专用用的的垫垫料料容容器器内内，注意防蝇、防渗漏，并及时焚烧处理。注意防蝇、防渗漏，并及时焚烧处理。4 4进进行行放放射射性性实实验验所所产产生生的的废废弃弃物物，如如果果属属于于短短半半衰衰期期且且放放射射性性较较低低的的物物品品，放放置置6-106-10个个半半衰衰期期后后可可以以焚焚化化处处理理。其其他他放放射射性性废废弃弃物物，应应进进行行中中、长长期期安安全全包包装后送放射性废物处理站处理。装后送放射性废物处理站处理。动物实验的基本技术和方法优秀课件 四、废弃动物及动物尸体无害化处理四、废弃动物及动物尸体无

52、害化处理四、废弃动物及动物尸体无害化处理四、废弃动物及动物尸体无害化处理 实实实实验验验验结结结结束束束束后后后后，受受受受试试试试动动动动物物物物尚尚尚尚未未未未死死死死亡亡亡亡，应应应应采采采采用用用用安安安安死死死死术术术术处处处处理理理理，并并并并将将将将动动动动物物物物尸尸尸尸体体体体装装装装入入入入专专专专用用用用尸尸尸尸体体体体袋袋袋袋中中中中存存存存放放放放冰冰冰冰柜柜柜柜待待待待统统统统一一一一焚焚焚焚烧烧烧烧。如如如如实实实实验验验验过过过过程程程程中中中中怀怀怀怀疑疑疑疑受受受受试试试试动动动动物物物物是是是是因因因因其其其其它它它它疾疾疾疾病病病病死死死死亡亡亡亡，应应

53、应应及及及及时时时时查查查查明明明明原原原原因因因因。动动动动物物物物尸尸尸尸体体体体经经经经消消消消毒毒毒毒处处处处理理理理后后后后装装装装入入入入尸尸尸尸体体体体袋袋袋袋中中中中，冷冷冷冷冻冻冻冻待待待待焚焚焚焚烧烧烧烧处处处处理理理理。较较较较大大大大受受受受试试试试动动动动物物物物尸尸尸尸体体体体需需需需经经经经过过过过适适适适当当当当肢肢肢肢解解解解后后后后再再再再进进进进行行行行焚焚焚焚烧烧烧烧。焚烧效果应以污物全部化为灰烬为标准。焚烧效果应以污物全部化为灰烬为标准。焚烧效果应以污物全部化为灰烬为标准。焚烧效果应以污物全部化为灰烬为标准。动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件思考题安死术安死术染色法编号标记大原则是什么染色法编号标记大原则是什么? ?实验结束后各种废弃物如何处理实验结束后各种废弃物如何处理? ?动物实验的基本技术和方法优秀课件动物实验的基本技术和方法优秀课件