尿液检验课件

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1、第五章第五章尿尿 液液 检检 验验第二次课 Go第一页,共一百零八页。尿液检验第一节第一节 概概 述述n n 尿液(urine)由肾脏生成,通过输尿管、膀胱及尿道排除体外。尿液是人体日生成与排泄量最多的液体,其生成和排泄依赖于泌尿系统正常的结构与完善的功能,受神经、体液、内分泌系统的有机调节,同时还受全身其它系统功能状态的影响。通过尿液的排泄,可排出体内的代谢废物、异物、毒物等,同时调节水、电解质代谢及酸碱平衡,借以维持内环境的相对恒定。此外,肾脏还分泌一些(yxi)(yxi)生物活性物质,具有重要的生理功能。第二页,共一百零八页。尿液检验n n 一、尿液的生成与排泄 n n(一)肾的结构 。

2、n n 肾单位是肾脏泌尿活动的最基本的功能单位,包括(boku)(boku)肾小体和肾小管,与集合管共同完成泌尿功能。第三页,共一百零八页。尿液检验肾脏组织(zzh)基本结构 肾小球(血管(xugun)球) 肾小体 肾小囊(Bowman囊) 肾单位 曲部 (近曲小管) 近端小管 直部(髓袢降支粗段) 肾小管 细段 髓袢 肾脏 直部(髓袢升支粗段) 远端小管 曲部 (远曲小管) 集合管 皮质段 髓质段 乳头管第四页,共一百零八页。尿液检验肾脏的大体(dt)结构肾脏的大体(dt)结构第五页,共一百零八页。尿液检验胰腺炎血淀粉酶 糖尿病血糖(xutng)肝胆病直接胆红素早孕、葡萄胎绒毛膜促性腺激素尿

3、第六页,共一百零八页。尿液检验n n(二)尿液生成过程n n 尿液的生成包括三个相互联系的环节,包括肾小球的滤过、肾小管的重吸收和肾小管与集合管的分泌(排泄(pixi)(pixi)。n n1肾小球的滤过作用 正常肾小球的基底膜对血浆成分的滤过具有选择性。 第七页,共一百零八页。尿液检验n n影响肾小球滤过的因素有:n n(1)有效滤过压:有效滤过压=肾小球毛细血管压一(血浆胶体渗透压+肾小球囊内压)。n n(2)滤过膜的通透性:肾小球滤过膜有三层结构,即毛细血管壁的内皮层、基膜及 覆盖于外的肾小球囊脏层的上皮细胞,都有大小不同的孔,构成机械性屏障。 n n(3)滤过面积:人体两肾约有200万个

4、肾单位,肾小球毛细血管总面积达1.6m2以上,接近(jijn)(jijn)人体总体表面积。 第八页,共一百零八页。尿液检验n n2. 肾小管与集合管重吸收n nA. 近曲小管: 重吸收葡萄糖、小分子蛋白质、AA、乳酸、肌酸、离子(K、Na、Cl、Ca、P、Mg、HCO3)、大部分水、硫酸盐、磷酸盐、尿素(nio s)(nio s)、尿酸。n n肌酐几乎不被重吸收而排出体外。n nB.远曲小管、集合管:重吸收水第九页,共一百零八页。尿液检验n n3肾小管和集合管的分泌与排泄作用(zuyng)(zuyng) n n肾小管和集合管的泌H+、NH4+作用及Na-K交换作用。n n(三)尿液的排泄 原尿

5、经肾小管和集合管的重吸收、分泌与浓缩稀释后即形成了终尿,流经肾盂、输尿管到达膀胱并储存,通过尿道排出体外。第十页,共一百零八页。尿液检验二、 尿液检验目的 泌尿系统疾病的筛查与鉴别 炎症(ynzhng)、肿瘤、结石、 监测 其他系统疾病的辅助诊断与观察 糖尿病 安全用药的监护中毒与职业病的防护健康体检16第十一页,共一百零八页。尿液检验三、尿液标本三、尿液标本(biobn)(biobn)的收集、保存与检测后处理的收集、保存与检测后处理n n(一一)尿标本收集尿标本收集n n为保证检查为保证检查(jinch)(jinch)结果的准确性,收集标本时结果的准确性,收集标本时注意以下几点:注意以下几点

6、:n n1容器清洁、干燥,密封性能好、具有较容器清洁、干燥,密封性能好、具有较大口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具大口径,便于留取尿液的一次性尿样杯;具有安全、易于启盖的密封容器,以利于标本有安全、易于启盖的密封容器,以利于标本的储运。容器周围应标有病人的姓名、检验的储运。容器周围应标有病人的姓名、检验联号联号(条形码条形码),并留有填写标本留取时间的,并留有填写标本留取时间的空间。空间。第十二页,共一百零八页。尿液检验n n2标本留取的时间与方法 (1)清晨空腹尿 适用于糖尿病的筛查、泌尿系统疾病的诊断、疗效观察等。 (2)餐后2h尿 可用于糖耐量检查。 (3)随机尿 适用于门诊或急诊化验

7、的病人。 (4)定时尿 3h尿 尿细胞排泄率 12h尿 Addis计数 已经淘汰 24h尿 尿化学成分定量测定 (5)导尿或耻骨上膀胱穿刺(chunc)尿尽量不采用,以免发生医源性感染。第十三页,共一百零八页。尿液检验(二)尿标本的保存 冷藏(6h) 28抑菌/固定有形成分 尿化学成分检查糖/蛋白 甲苯(toluene) 520ml/L尿膜 尿有形成分检查 40%甲醛(formalin)510ml/L 结核杆菌等尿菌检查 麝香草酚(thymol) 0.1g/100ml_抑菌 尿激素(j s)检查17-羟/酮等 浓盐酸(hydrochiloric acid) 1ml/L-尿PH=2 卟啉尿 碳酸

8、钠(sodium carbonate) 10g/24h_碱化尿第十四页,共一百零八页。尿液检验(三) 检验后标本处理 1 向下水道排放:10g/L过氧乙酸或漂白粉; 2 设专用容器收集(shuj)消毒交环卫处; 3 容器重复使用: 浸泡水冲洗烘干 70% 乙醇 浸泡 30-50g/L漂白粉 10g/L次氯酸钠液 2小时 5g/L过氧乙酸 30-60分 4 消毒后烧毁 第十五页,共一百零八页。尿液检验第二节 尿液理学(lxu)检查第十六页,共一百零八页。尿液检验尿液理学(lxu)检验 一 尿量 二 颜色/透明度 三 尿比重 四 尿渗透压/尿渗量掌握(zhngw)临床意义第十七页,共一百零八页。尿

9、液检验一、尿液感官检查(一)尿量尿量(urnary volume) 一定时间排除的尿量,主要(zhyo)取决于肾小球的滤过、肾小管的重吸收和浓缩-稀释功能,还受饮食起居习惯、环境等的影响。正常成人尿量 10002000ml/d 临床意义 1 少尿(oliguria) 400ml/d或17ml/h 无尿 (anuria) 2500ml/d 小管浓缩(nn su)功能 溶质性利尿 糖尿病 GS 尿毒症 BUN 尿崩症 多饮性 习惯、精神性、疾病 第二十页,共一百零八页。尿液检验尿液外观尿液外观指尿液的颜色和透明度。正常尿液为淡黄色或桔黄色,清晰透明。 【临床意义】1、血尿(xu nio)血尿(he

10、maturia) 指尿内含一定量RBC 肉眼血尿 1ml/L 洗肉水 镜下血尿 尿沉渣 RBC3个/HP第二十一页,共一百零八页。尿液检验原因 A 泌尿生殖系统炎/石/伤/瘤 B 血液病 血友病、过敏性紫癜 C 其他 2、 血红蛋白(xuhng dnbi)尿(hemoglobinuria) 定义 血浆游离Hb1000mg/LHb尿 外观 新鲜粉红 陈旧棕/酱油/浓茶 特点 镜检 无RBC、潜血(BLD)+ 意义 血管内溶血第二十二页,共一百零八页。尿液检验n n3、 肌红蛋白尿肌红蛋白尿(myoglobinuria)n n 外观外观 新鲜新鲜粉红粉红 陈旧陈旧暗褐色暗褐色n n 特点特点 镜检

11、镜检 无无RBC、潜血(、潜血(BLD)+n n 加加80%硫酸铵溶液硫酸铵溶液溶解溶解n n 意义意义(yy)(yy) 各种肌损伤:各种肌损伤:大面积烧伤大面积烧伤大面积烧伤大面积烧伤/ /缺氧缺血肌病缺氧缺血肌病缺氧缺血肌病缺氧缺血肌病第二十三页,共一百零八页。尿液检验4、脓尿 脓尿(pyuria) 尿中含大量脓/白细胞(200106/L) 肉眼(ruyn) 不同程度的黄白色混浊或含脓丝状悬浮物。 见于泌尿系统化脓性感染、肾结核等。 第二十四页,共一百零八页。尿液检验5、乳糜(rm)尿(chyluria) 乳糜/淋巴液 尿原理 特点 乳糜试验 混尿+乙醚乳糜微粒+苏丹染色 阳性 橘红色脂肪

12、球 尿静置后分三层 第二十五页,共一百零八页。尿液检验病因 丝虫病 结核 肿瘤 胸腹部创伤6、 结晶尿(crystalluria) 定义 尿内含(ni hn)大量的盐类结晶 种类 尿酸盐+热 清 磷酸/碳酸盐+乙酸 清/+气泡 草酸盐+盐酸 清 镜检 见大量盐类结晶第二十六页,共一百零八页。尿液检验(三)气味三)气味 正常尿液略带酸味。受饮食或药物等正常尿液略带酸味。受饮食或药物等因素的影响,长时间放置后由于尿素因素的影响,长时间放置后由于尿素(nio (nio (nio (nio s)s)s)s)分解带有氨臭味。分解带有氨臭味。 第二十七页,共一百零八页。尿液检验二 尿比重测定 定义 尿比重

13、(urinary specifgravity,SG)指在4时尿液与同体积的纯水重量之比,又称尿比密,它表示肾小管的浓缩和稀释能力。 测定方法及评价 1 试带法 简单(jindn),不受GS,造影剂影响 精确度差,对过高/低的SG不敏感,不能作为诊断肾功能变化的指标。第二十八页,共一百零八页。尿液检验2 尿比重计法(uriometer) 由于比重计本身(bnshn)刻度标示误差较大而容易引起系统误差,因而NCCLS建议不再使用比重计法。3、折射计法有手提式或座式两种仪器。标本用量小,可重复测定,尤其适用于少尿患者。结果精确可靠,还可测算总固体量。应用较为普遍。被NCCLS推荐为参考方法。第二十九

14、页,共一百零八页。尿液检验意义意义 1 正常正常 1.0131.035 晨尿晨尿1.0182 SG 缺水、溶质缺水、溶质、急性肾炎、急性肾炎(j xn shn yn)3 SG 肾炎、大量饮水、尿崩症肾炎、大量饮水、尿崩症 第三十页,共一百零八页。尿液检验三、尿液渗透浓度测定 定义 在一定大气压和温度下尿内溶质分 子和离子的个数。 检测方法及评价1 冰点法 2 评价: 尿渗透压比SG更能客观的反映肾脏(shnzng)的浓缩稀释功能.临床意义 正常 6001000mOsm/KgH2O 了解肾小管浓缩稀释功能 第三十一页,共一百零八页。尿液检验n n 四、尿液浓缩稀释试验 n n 1Fishberg

15、(费氏)浓缩稀释试验(concentrationdilution test)n n2昼夜(zhuy)(zhuy)尿比重试验,又称莫氏(mosenthal test)浓缩稀释试验 n n33h尿比重试验又称改良莫氏试验 第三十二页,共一百零八页。尿液检验第三节 尿液常规的化学检查一 尿液酸碱度测定 1 测定方法及评价 黄-酸 指示剂法 尿+溴麝香草酚篮 绿-中 (bromothymol blue,BTB) 蓝-碱 特点 简单(jindn) 黄疸/血尿易干扰 指示剂变色范围(6-7.6)第三十三页,共一百零八页。尿液检验 试纸法 试纸/试带浸入尿中 目/仪器测 特点 简单(jindn),广泛用应;

16、 试带易变潮试带垫片(BTB+甲基红) 滴定法 0.1mol/LNaOH+尿PH滴定至7.4 求尿液可滴定酸 特点 可进行pH值动态监测 操作复杂 PH计法 用电极直接测定 特点 精确度高 ,适用于科研 需要特殊仪器经常效准PH计浓度(nngd)标准/新鲜第三十四页,共一百零八页。尿液检验n n2 2、质量控制、质量控制 试纸要避光、干燥保存,防止被其它化试纸要避光、干燥保存,防止被其它化学物质污染。学物质污染。 标本应及时测定,长期放置会因细菌生长分标本应及时测定,长期放置会因细菌生长分解尿素产生氨,使解尿素产生氨,使pHpH偏高。偏高。 尿液尿液pHpH本身还可作为其它检查项目的质控本身还

17、可作为其它检查项目的质控指标,若指标,若pHpH3 3或或99均会影响其它检测结果,如均会影响其它检测结果,如蛋白、比重等。应按规定进行蛋白、比重等。应按规定进行(jnxng)(jnxng)(jnxng)(jnxng)调整调整。 第三十五页,共一百零八页。尿液检验3、临床意义 正常 尿PH=4.58.0 晨尿=5.56.5 尿可滴定酸= 2040mmol/24h 尿PH减低(jind) 进酸性物高蛋白食酸性药物; 体内产酸增多:饥饿/运动/应激;酸中毒痛风白血病糖尿病等 肾小管排酸增多:低血钾性碱中毒 CO2潴留呼吸性酸中毒第三十六页,共一百零八页。尿液检验尿PH增高 进碱性物过多蔬菜水果碱性

18、药物 体内丢酸增多 肾小管排酸减少肾小管性酸中毒 CO2排出增多呼吸性碱中毒 产碱增多尿路感染细菌分解尿素产氨 指导(zhdo)临床用药 第三十七页,共一百零八页。尿液检验二、尿液蛋白质定性检查二、尿液蛋白质定性检查(jinch)(jinch)n n定义定义: 尿蛋白尿蛋白150mg/24h or 100mg/L,常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿常规化学定性检查呈阳性,称为蛋白尿(proteinuria)。 第三十八页,共一百零八页。尿液检验测定方法及评价(pngji) 试带法 原理:蛋白 + 指示剂 -PH颜色变化蛋白量成正比 评价:A 快速,简便-适于普查 B 清蛋白敏感/球蛋白不敏感

19、本周蛋白漏检 C 尿PH增高假阳性 加热乙酸法 原理:蛋白+热变性/凝固+酸易沉淀 消除磷酸盐干扰量要适当(shdng)标准(biozhn)/合格第三十九页,共一百零八页。尿液检验评价:A 特异性强,干扰因素(yn s)少 B 检出清/球蛋白敏感度低(0.15g/L) C 用作蛋白质定性的确证试验。 磺基水杨酸(磺柳酸)法 原理:带正电蛋白+磺柳酸 沉淀1.某些药物-青霉素/SMZ-CO 及造影剂 2.尿内含(ni hn)高浓度尿/草酸或粘蛋白 评价(pngji):A 简便/灵敏/迅速/敏感度高(0.05g/L) B 与所有的蛋白都能反应29假阳性 第四十页,共一百零八页。尿液检验2 意义 正

20、常 定性(-)蛋白尿 定性(+)生理性 机理 肾血管痉挛毛细血管通透性原因 运动,受寒,紧张,妊娠(rnshn),发热,体位性等。特点 定性(+)27总蛋白(dnbi)定量第四十一页,共一百零八页。尿液检验病理性A 肾小球性蛋白尿 机理 肾小球滤过膜孔径或静电屏障改变 特点 定性(dng xng) +原因 原发或继发肾小球肾炎,(+) 肾病综合症 (+)28第四十二页,共一百零八页。尿液检验B 肾小管性蛋白尿机理 肾小管损害特点 + 原因 肾小管间质性肾炎 C 混合性蛋白尿 机理与特点 小球(xio qi)+小管原因 小球和小管性疾病后期D 溢出性蛋白尿病机 多发性骨髓瘤(BenceJones

21、蛋白) 溶血性疾病(Hb) 29第四十三页,共一百零八页。尿液检验 大面积肌损伤(肌红蛋白)特点 定性(dng xng)(+)(+) E 组织蛋白尿机理 a 肾单位分泌 b 其它器脏产生的原因 提示组织损伤,心肌坏死,肿瘤 F 假性蛋白尿 原因 血液/白带/月经/前列腺液等污染30总蛋白(dnbi)定量第四十四页,共一百零八页。尿液检验三、 尿液糖定性检查1 测定方法及评价 班氏法 原理 : GS +班氏试剂变色 质控 假阳性 评价: 非特异性定性试验 简单/但易受其他还原物的影响 干化学(huxu)试带法 原理: 特异性GS+过氧化物酶蓝/红还原(hun yun)VitC/尿酸/或其他(qt

22、) 糖类等 煮沸1 尿混有强氧化物漂白粉假(+)2 标本久放-细菌分解GS假(-)30质控第四十五页,共一百零八页。尿液检验评价: 特异性强/灵敏度高/简便迅速 薄层层析法 复杂/费时/昂贵2意义(yy) 正常 定性(-) 糖尿 定性(+) 生理性 A 饮食性 B 精神性 C 妊娠(1520%) 定 量第四十六页,共一百零八页。尿液检验 病理性: A 垂体前叶机能生长激素1)内分 B 甲亢泌疾病 C 胰岛素分泌利用葡萄糖 D 肾上腺皮功促糖原异生 E 嗜酪细胞瘤 去甲,肾上腺素 肝糖原降解(jin ji)2)肾性糖尿 小管损害(肾糖阈)其他糖尿 如乳糖等 定 量第四十七页,共一百零八页。尿液检

23、验四、尿中酮体定性(dng xng)检查 1 概念 尿酮体(urine ketone odies,KET)是脂肪代谢中间产物,由乙酰乙酸、羟丁酸和丙酮组成。2 测定方法及评价 Lange法 乙酰乙酸+亚硝酸基铁氰化钠 丙酮 +. Rothera 原理同Lange法 干化学试带法 原理同上 质控 尿要新鲜碱紫红色(hngs)化合物第四十八页,共一百零八页。尿液检验41评价(pngji) 不同试带对酮体的敏感性不同方法方法灵敏度灵敏度(mg/L) 乙酰乙酸乙酰乙酸羟丁酸羟丁酸丙丙 酮酮 Lange50200Rothera80 100干化学试带法 50100 400700第四十九页,共一百零八页。尿

24、液检验3意义(yy) 正常 定性(-) 糖尿病酮症酸中毒 假(-) 肾酮阈值增高肾严重受损 酮血症期羟丁酸 其它 应激-剧烈运动/饥饿/感染/严重腹泻,呕吐/全麻等中毒第五十页,共一百零八页。尿液检验五、 尿液胆红素定性(dng xng)检查 1 体内胆红素代谢 肝门静脉O2肠管(chnggun)衰老RBC无效RBC生成其它:如Mb等血红素胆绿素胆红素单核-吞噬C胆红素-清蛋白复合物(非结合胆红素)非结合胆红素葡萄糖醛酸胆红素(结合胆红素)血管肝C胆管 葡萄糖醛酸胆红素 胆素原 一一 胆红素胆素 粪 胆素原肾尿第五十一页,共一百零八页。尿液检验尿三胆包括:尿胆红素/ 尿胆原/尿胆素2 测定方法

25、及评价(pngji) 尿胆红素(bilirubin)测定 重氮法 结合胆红素+二氯苯胺重氮盐 红色复合物评价:简单尿自动化/灵敏度7-14umol/L Harrison法原理 胆红素+氯化钡胆氯素(绿色)评价:Harrison法-稍繁但灵敏度高3 意义(见尿胆原 )45酸 意 义酸第五十二页,共一百零八页。尿液检验六、 尿胆原(urobilinogen,URO)定性检查1、测定方法及评价 改良Ehrlich法 原理 URO+对二甲氨基苯甲醛樱红色(hngs) 干化学法 原理同上 URO+重氮化合物红色复合物评价: A 干化学法可半定量,不受胆红素的影响B改良Ehrlich法 操作简便但易受干扰

26、46酸第五十三页,共一百零八页。尿液检验2 意义 正常人及三种黄疸(hungdn)的胆红素检查结果 47黄疸黄疸 类型类型血清胆红素血清胆红素(mol/L) 尿检查尿检查 结合型结合型非结合型非结合型结合结合/非结非结合型合型 尿胆原尿胆原 尿胆素尿胆素尿胆尿胆 红素红素 正常人正常人06.8 1.710.2 20% 溶血溶血轻度轻度 明显明显 35% +阻塞阻塞明显明显 轻度轻度 60% + 尿胆 红素(hn s)第五十四页,共一百零八页。尿液检验七、尿血红蛋白定性(dng xng)检查 1 测定方法及评价 化学法 原理 Hb-亚铁血红素+ 变色 质控评价:简单/ 特异性低 /稳定性差 试带

27、法 原理/质控 同上 评价:稳定性比好 灵敏度 150300g/L邻联甲苯胺(bn n) 氨基比林氧化(ynghu)防假(+)尿含有铁/锌/碘化物/细菌产生过氧化物酶42返回 首页第五十五页,共一百零八页。尿液检验 金单克隆抗体法原理 胶体金标记抗人Hb的单克隆抗体质控 尿中Hb过高 稀释 免假(-) 评价:灵敏度高/特异性强/操作快 2 意义 正常 (-) 各种( zhn)原因血管内溶血性疾病 因泌尿系统疾病引起的出血43第五十六页,共一百零八页。尿液检验n n八、尿液亚硝酸盐定性检查八、尿液亚硝酸盐定性检查(jinch)(jinch)(jinch)(jinch)n n1 1、测定方法及评价

28、、测定方法及评价n n干化学法干化学法 尿尿中具有硝酸盐还原酶的细菌增加中具有硝酸盐还原酶的细菌增加时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯砷酸时可将硝酸盐还原为亚硝酸盐,并将氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与重氮化而成重氮盐,以此重氮盐再与-萘胺偶萘胺偶联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正联呈现颜色变化,颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比比。n n评价评价 灵敏度为灵敏度为0.30.30.6mg/L0.6mg/L,可用于仪器检测。,可用于仪器检测。第五十七页,共一百零八页。尿液检验n n湿化学法湿化学法 原理同上原理同上 评价评价 方便方便/ /快速快速NITNIT阳性的三个条件:

29、阳性的三个条件:感染的病原微生物的种感染的病原微生物的种类,类,尿液滞留尿液滞留(zhli)(zhli)(zhli)(zhli)时间时间,硝酸盐的存在。硝酸盐的存在。2 2、质量控制、质量控制: :使用新鲜的晨尿使用新鲜的晨尿. .3 3、临床意义:该指标可作为泌尿系统感染的的、临床意义:该指标可作为泌尿系统感染的的过筛试验,但过筛试验,但NITNIT阴性不能排除感染。阴性不能排除感染。第五十八页,共一百零八页。尿液检验n n第四节第四节 尿液其他蛋白质的检查尿液其他蛋白质的检查n n一、尿中本一、尿中本- -周蛋白周蛋白(dnbi)(dnbi)(dnbi)(dnbi)定性检查定性检查n n1

30、 1、概念、概念 本本- -周蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单周蛋白是一种免疫球蛋白的轻链单体或二聚体,属于不完全抗体球蛋白,分为体或二聚体,属于不完全抗体球蛋白,分为型型和和型。又称凝型。又称凝- -溶蛋白。溶蛋白。第五十九页,共一百零八页。尿液检验2 测定方法及评价 热沉淀-溶解法 原理 尿+热( 40-60凝固 90-100 溶解)评价: 灵敏度不高 BJP300mg/L才检出 ,必需严格控制PH值(PH4.5-5.5)。 对-甲苯磺酸法(TSA) 原理 尿BJP+对-甲苯磺酸 沉淀 评价: 简单(jindn)/灵敏度高(BJP=3mg/L),但特异性差(受清蛋白影响)。38第六十页,共一百

31、零八页。尿液检验 蛋白 (乙酸纤维素膜/ SDS-PAGE)电泳法 原理 尿蛋白+510%SDS复合物(负电) PA蛋白区带 评价: 检出率达97% 乙酸纤维素膜法 可见“M”带 免疫电泳(IFP) 原理 琼脂电泳+特异抗原抗体反应沉淀弧评价: 简单/特异性强 不同抗原含量(hnling)大时,不能全部显示1) 尿 BJP较低时,浓缩(nn su)10-50倍 2 ) 尿Mb/溶菌酶/脂蛋白等免疫电泳43可在至第六十一页,共一百零八页。尿液检验 免疫固定电泳(IFE) 原理电泳+抗原抗体反应(抗血清加于电泳后 区带上) 沉淀于固相物中 评价: 比/更敏感 免疫速率散射浊度(IRN) 原理 BJ

32、P+抗和抗抗血清光散射(强 度与复合物量成正比) 评价: 速度快/灵敏/精确度高 能定量测定和轻链,结果(ji gu)可靠光40第六十二页,共一百零八页。尿液检验3意义 正常 (-) 辅助诊断 多发性骨髓瘤 /=2:1 巨球蛋白血症 80%-轻链 原发性肾淀粉样变 70-89%单克隆蛋白预后观察(gunch): 尿中大量BJP(伴清蛋白)易发肾功能不全 41第六十三页,共一百零八页。尿液检验二、尿液肌红蛋白定性二、尿液肌红蛋白定性(dng xng)(dng xng)检查检查n n1、概念、概念 肌红蛋白(肌红蛋白(myoglobin Mb)是存在于横纹)是存在于横纹肌中的一种肌中的一种(y z

33、hn)(y zhn)色素蛋白质,每个肌红蛋白分色素蛋白质,每个肌红蛋白分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素组成,分子由一条蛋白肽链和一个亚铁血红素组成,分子量子量1.745万,约为万,约为Hb分子量的分子量的1/4,有种属特异,有种属特异性,与氧可逆性结合为肌肉组织供能。性,与氧可逆性结合为肌肉组织供能。第六十四页,共一百零八页。尿液检验n n2、Mb的特性的特性 (1) Mb可自由透过可自由透过(tu u)(tu u)肾小球形成肾小球形成Mb尿;尿; (2)具有类似过氧化物酶的活性;)具有类似过氧化物酶的活性; (3)可被)可被100%硫酸铵沉淀而不被硫酸铵沉淀而不被80%硫酸硫酸铵沉淀,这是

34、铵沉淀,这是Mb区别于区别于Hb的另一个特性。的另一个特性。第六十五页,共一百零八页。尿液检验n n3、测定方法及评价、测定方法及评价(pngji)(pngji) (1)化学法)化学法 此法检查方便,敏感性较高。此法检查方便,敏感性较高。80%硫酸铵沉淀Hb尿液上清液隐血试验(2)分光(fn un)光度法 Hb同Mb的一氧化碳结合物各自吸收光谱完全不同,Hb为568nm;而Mb为78nm,借此可将二者区别开,但不够敏感(30mgL)。此外超滤法、硫酸铵沉淀法、层析法和电泳法等,均不敏感而且影响因素较多,未能在临床推广。 第六十六页,共一百零八页。尿液检验 (3 3)单克隆抗体免疫法)单克隆抗体

35、免疫法)单克隆抗体免疫法)单克隆抗体免疫法 是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行是最为敏感、特异的方法,既可作为确证试验又可进行尿中尿中尿中尿中MbMb定量分析。尤其对急性心肌梗死的定量分析。尤其对急性心肌梗死的定量分析。尤其对急性心肌梗死的定量分析。尤其对急性心肌梗死的MbMb尿检查具尿检查具尿检查具尿检查具有重要临床价值。有重要临床价值。有重要临床价值。有重要临床价值。 n n4 4、参考值、参考值、参考值、参考值 阴性阴性阴性阴性n n5 5、质量控制、质量控制、质量控制、质量控制

36、 (1 1)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉)标本要新鲜,否则肌红蛋白将因变性而被硫酸铵沉淀,影响实验结果。淀,影响实验结果。淀,影响实验结果。淀,影响实验结果。 (2 2)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微)宜将硫酸铵缓慢加入尿中,轻微(qngwi)(qngwi)振荡,防振荡,防振荡,防振荡,防止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。止同时沉淀肌红蛋白引起假阴性。第六十七页,共一百零八页

37、。尿液检验n n6 6、临床意义、临床意义、临床意义、临床意义 肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于:肌红蛋白尿见于: (1 1)大面积外伤)大面积外伤)大面积外伤)大面积外伤 如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组如挤压伤或其它外伤造成的肌肉组织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰织损伤,尤其是发生挤压伤综合征时,可引起急性肾衰竭。竭。竭。竭。 (2 2)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组

38、织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏(phui)(phui)如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全如心肌缺血所致心肌梗死。此外,各种中毒、全身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循身感染、恶性高热和低钾血症导致全身性缺氧与微循环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。环障碍时,也会出现不同程度的肌红蛋白尿。环障碍时,也会出现

39、不同程度的肌红蛋白尿。 (3 3)其它)其它)其它)其它 原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎原发性肌红蛋白尿症和家族性肌病、肌炎综合征综合征综合征综合征( (多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等多发性肌炎、皮肌炎、系统性红斑狼疮等) )、进、进、进、进行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。行性肌营养不良等也可出现肌红蛋白尿。第六十八页,共一百零八页。尿液检验三、尿液清蛋白定量三、尿

40、液清蛋白定量(dngling)(dngling)测定测定 n n概述概述 清蛋白清蛋白(albumin,Alb)是血浆蛋白的主要成是血浆蛋白的主要成分,不容易滤过肾小球,主要由近曲肾小管重分,不容易滤过肾小球,主要由近曲肾小管重吸收。早期的肾小球病变吸收。早期的肾小球病变(bngbin)(bngbin),清蛋白排泄率,清蛋白排泄率即有所增加,该指标的早期变化能敏感地反映即有所增加,该指标的早期变化能敏感地反映肾小球功能的损害。肾小球功能的损害。 第六十九页,共一百零八页。尿液检验n n1 1、测定方法及评价、测定方法及评价 常用的检测方法有免疫分析法和化学定量法常用的检测方法有免疫分析法和化学

41、定量法 (1 1)化学定量法)化学定量法)化学定量法)化学定量法 主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法主要是溴甲酚绿法,该法操作简单,该法操作简单,试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线性范围窄,不利试剂易得,但敏感度及特异性均较差,线性范围窄,不利于检出微量清蛋白。于检出微量清蛋白。 (2 2)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法)放免法和酶免疫法 有成品试剂盒。受实验室条有成品试剂盒。受实验室条件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免疫比浊法件限制,尤其是放免法,有被酶免疫法及免疫比浊法取代的趋势。可根据实验室条件选择应用。取代的趋势。可根据实验室条件选择应用。 (

42、3 3)免疫比浊法)免疫比浊法)免疫比浊法)免疫比浊法 该法操作简便,敏感度及特异性该法操作简便,敏感度及特异性也较高。有商品也较高。有商品(shngpn)(shngpn)试剂盒,可在全自动生化仪上试剂盒,可在全自动生化仪上完成实验。完成实验。此法应注意非特异性浊度及抗原抗体比例此法应注意非特异性浊度及抗原抗体比例的控制。的控制。第七十页,共一百零八页。尿液检验n n2、参考值、参考值 晨尿晨尿 6.55.1mg/L 随机尿随机尿 1.270.78mg/mmolCr 24h尿尿 5.72.6mg/24hn n3、临床意义、临床意义 肾小球发生病变可使清蛋白肾小球发生病变可使清蛋白(dnbi)(

43、dnbi)滤过增加,滤过增加,肾小管受损影响蛋白肾小管受损影响蛋白(dnbi)(dnbi)质重吸收也会出现质重吸收也会出现清蛋白清蛋白(dnbi)(dnbi)排泄率升高。排泄率升高。 第七十一页,共一百零八页。尿液检验 (1)早期肾损害的筛检)早期肾损害的筛检 如用于糖尿病、高血压、重金属及药物中毒性肾病的早期肾损害的筛检。 (2)过敏性紫癜的肾功能监测)过敏性紫癜的肾功能监测 有助于防止(fngzh)(fngzh)并发肾损害。 (3)肾小球肾炎的病情观察)肾小球肾炎的病情观察 (4)其它)其它 如尿路感染、某些特发性水肿等可轻度升高。第七十二页,共一百零八页。尿液检验四、尿总蛋白定量四、尿总

44、蛋白定量(dngling)(dngling)测定测定n n1、测定方法及评价 (1)双缩脲法)双缩脲法 是测定尿蛋白(dnbi)(dnbi)质总量的常规参考方法,本法显色稳定、重复性好,对清蛋白(dnbi)(dnbi)、球蛋白(dnbi)(dnbi)具有相同的敏感性。缺点是灵敏度低。 第七十三页,共一百零八页。尿液检验 (2)染料结合法)染料结合法 这类方法灵敏度高、操作简便快速呈色稳定。n n 考马斯亮蓝法n n 邻苯三酚红钼酸络合法 n n 丽春红S法(干扰因素少)(干扰因素少) (3)比浊法)比浊法 主要有磺基水杨酸-硫酸钠法(SSA)、三氯乙酸法(TCA)和钨酸法。 (4)免疫比浊法或

45、放射免疫法)免疫比浊法或放射免疫法 是最精密准确的方法,不但可以进行蛋白总量的测定(cdng)(cdng),还能进行成分分析。(线性范围(线性范围(fnwi)(fnwi)窄,受水杨酸窄,受水杨酸 类药物和麝香草酚的干扰)类药物和麝香草酚的干扰)(受表面(受表面(biomin)(biomin)活性剂的干扰)活性剂的干扰)第七十四页,共一百零八页。尿液检验 2、参考值、参考值 双缩脲法:双缩脲法: 40150mg/24h尿尿 丽春红丽春红S法:法: 46.518.1mg/L 考马斯亮蓝法:考马斯亮蓝法:58.6134mg/24h尿尿 3、质量控制、质量控制 (1)方法)方法(fngf)(fngf)

46、选择选择 尿蛋白成分很复杂,应根尿蛋白成分很复杂,应根据蛋白成分特点,结合实验方法据蛋白成分特点,结合实验方法(fngf)(fngf)的灵敏度和的灵敏度和线性范围选择测定方法线性范围选择测定方法(fngf)(fngf),最好采用对清蛋白,最好采用对清蛋白球蛋白同样敏感的方法球蛋白同样敏感的方法(fngf)(fngf)。第七十五页,共一百零八页。尿液检验 (2)标本要求)标本要求 应首先离心除去杂质,取上清应首先离心除去杂质,取上清液进行蛋白定性,根据估算量和方法的敏感及线液进行蛋白定性,根据估算量和方法的敏感及线性决定样本加入性决定样本加入(jir)(jir)量(稀释或加大标本用量,见量(稀释

47、或加大标本用量,见P149) (3)尿液浓缩)尿液浓缩 标本经酸沉淀处理后应除净上标本经酸沉淀处理后应除净上清液,谨防丢失蛋白沉淀物。清液,谨防丢失蛋白沉淀物。 (4)消除尿液颜色的干扰)消除尿液颜色的干扰 颜色较深的尿液颜色较深的尿液应作样本空白对照。应作样本空白对照。第七十六页,共一百零八页。尿液检验 4、临床意义、临床意义 同尿蛋白定性试验同尿蛋白定性试验 ,优点是大大提,优点是大大提高了肾脏高了肾脏(shnzng)(shnzng)疾病的阳性检出率。疾病的阳性检出率。蛋白(dnbi) 定性第七十七页,共一百零八页。尿液检验五、五、尿尿2 2微球蛋白(微球蛋白(2 2-MG-MG)定量)定

48、量(dngling)(dngling)测定测定 n n概述概述 2微球蛋白(微球蛋白(微球蛋白(微球蛋白(2-microglobulinmicroglobulin,2-MGMG)是机体有)是机体有)是机体有)是机体有核细胞产生的单链球蛋白,分子量小核细胞产生的单链球蛋白,分子量小核细胞产生的单链球蛋白,分子量小核细胞产生的单链球蛋白,分子量小(11800)(11800),它是,它是,它是,它是人类淋巴细胞表面抗原人类淋巴细胞表面抗原人类淋巴细胞表面抗原人类淋巴细胞表面抗原(HLA)(HLA)的的的的链部分,由链部分,由链部分,由链部分,由100100个氨个氨个氨个氨基酸和一对二硫键组成,不含糖

49、。因电泳时位于基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于基酸和一对二硫键组成,不含糖。因电泳时位于2区区区区带而命名,生物带而命名,生物带而命名,生物带而命名,生物(shngw)(shngw)半衰期约半衰期约半衰期约半衰期约107min107min。2-MG广泛分广泛分广泛分广泛分布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,布于血液、尿液和唾液及乳汁中,可自由通过肾小球,但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿

50、中排除极少。但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。但几乎完全被肾小管重吸收并分化,故尿中排除极少。 第七十八页,共一百零八页。尿液检验n n1、测定方法及评价、测定方法及评价 主要用主要用主要用主要用放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法放免法和酶免疫法测定。这两种方法敏感度和测定。这两种方法敏感度和测定。这两种方法敏感度和测定。这两种方法敏感度和特异性均较高,但受到实验室条件限制。特异性均较高,但受到实验室条件限制。特异性均较高,但受到实验室条件限制。特异性均较高,但受到实验室条件限制。 免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法免疫比浊法具有同样的敏感度及特异性,操作简便、具有同样

51、的敏感度及特异性,操作简便、具有同样的敏感度及特异性,操作简便、具有同样的敏感度及特异性,操作简便、能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分能直接定量而得以快速普及,在普通分光光度计、紫外分光光度计及自动光光度计及自动光光度计及自动光光度计及自动(zdng)(zdng)生化分析仪上均适用,还可以用特种生化分析仪上均适用,还可以用特种生化分析仪上均适用,还可以用特种生化分析仪上均适用,还可以用特种蛋白仪进行检测。蛋白仪进行检测。蛋白仪进行检测。蛋白仪进行检测。 为了便于临床分析,应同时测

52、定尿肌酐,以二者的比为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二者的比为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二者的比为了便于临床分析,应同时测定尿肌酐,以二者的比值代表值代表值代表值代表2-MG-MG排泄率。并进行血排泄率。并进行血排泄率。并进行血排泄率。并进行血2-MG-MG测定。测定。测定。测定。第七十九页,共一百零八页。尿液检验n n2 2、参考值、参考值、参考值、参考值 尿尿尿尿2-MG0.3mg-MG0.3mg24h24h,2-MG-MG排泄率为排泄率为排泄率为排泄率为o.2mgo.2mg(g (g Cr)Cr) 血血血血2-MG0.3mg-MG0.3mgL L n n3 3、质量控制、

53、质量控制、质量控制、质量控制 (1 1)标本处理尿中)标本处理尿中)标本处理尿中)标本处理尿中2-MG-MG较不稳定,酸性尿尤其在较不稳定,酸性尿尤其在较不稳定,酸性尿尤其在较不稳定,酸性尿尤其在pH5.2pH5.2以下极易分解,因此以下极易分解,因此以下极易分解,因此以下极易分解,因此(ync)(ync)标本采集后应立即测定,标本采集后应立即测定,标本采集后应立即测定,标本采集后应立即测定,或将或将或将或将pHpH调至调至调至调至6.56.57.07.0后再冷藏保存。后再冷藏保存。后再冷藏保存。后再冷藏保存。 (2 2)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控)试剂要妥善保管,每批测定应带

54、一份合格的质控)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控)试剂要妥善保管,每批测定应带一份合格的质控样品。样品。样品。样品。 第八十页,共一百零八页。尿液检验n4、临床意义临床意义 (1 1)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标)肾小球滤过功能受损的敏感指标 肾小球病变时,肾小球病变时,肾小球病变时,肾小球病变时,血血血血2-MG-MG升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。升高,较肌酐等其它指标敏感。 (2 2)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管疾病的早期诊断指标)肾小管

55、疾病的早期诊断指标 肾小管炎症、中肾小管炎症、中肾小管炎症、中肾小管炎症、中毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,毒、坏死及肾间质病变,上皮细胞胞饮功能受损,尿尿尿尿2-MG-MG排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾排出率增加;使用庆大霉素、多粘菌素等肾毒性药物后尿毒性药物后尿毒性药物后尿毒性药物后尿2-MG-MG增加,提示应减量或停药。增加,提示应减量或停药。增加,提示应减量或停药。增加,提示应减量或停药。 (3 3)鉴别

56、上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染)鉴别上、下尿路感染 肾盂肾炎时,肾小管受损肾盂肾炎时,肾小管受损肾盂肾炎时,肾小管受损肾盂肾炎时,肾小管受损2- -MGMG增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。增加;下尿路感染则正常。 (4 4)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应)观察肾移植排斥反应(fnyng)(fnyng) 肾移植发生排斥反应时肾移植发生排斥反应时肾移植发生排斥反应时肾移植发生排斥反应时尿尿尿尿2-MG-MG增加。增加。增加。增加。 第八十一页,共一百零八页。尿液检验第五节第五节 尿液酶的检查尿液酶的检查(j

57、inch)(jinch)(jinch)(jinch)第八十二页,共一百零八页。尿液检验一、尿淀粉酶测定一、尿淀粉酶测定(cdng)(cdng)n n淀粉酶(淀粉酶(AMY)的主要来源:)的主要来源: 主要来源于胰主要来源于胰腺(为同工酶腺(为同工酶P)和唾液腺(为同工酶)和唾液腺(为同工酶S),血),血清中清中AMY易从肾脏排出。易从肾脏排出。n n1、测定方法及评价、测定方法及评价 (1)碘)碘-淀粉比色法(淀粉比色法(Somoggi 法)法) 其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级反应。本法应尽量使用反应。本法应尽量使用(shyng)(shyng)同一批号

58、的淀粉底同一批号的淀粉底物;物; 当当 A测定测定1/2A空白空白时,应将标本加大稀释时,应将标本加大稀释倍数后再测定。倍数后再测定。第八十三页,共一百零八页。尿液检验 (2)2-氯氯-4硝基苯酚硝基苯酚-麦芽糖三糖法麦芽糖三糖法 (CNP-G3法)法) 线性:血清线性:血清1300U/L1300U/L;尿液;尿液2500U/L0.15A/min0.15时,应将标本稀释后再测定。时,应将标本稀释后再测定。 (4)免疫抑制法和电泳法)免疫抑制法和电泳法 用于同工酶测定用于同工酶测定第八十四页,共一百零八页。尿液检验n n2、参考值、参考值方法方法参考值(参考值(U/L)血清血清尿液尿液Somog

59、gi 法法(37)800180010012004NP-7G法法(37)1002201201200CNP-G3法法(37)600300第八十五页,共一百零八页。尿液检验n n3、临床意义、临床意义 (1 1)急性胰腺炎)急性胰腺炎)急性胰腺炎)急性胰腺炎 发病发病发病发病3 36h6h,血清,血清,血清,血清AMYAMY活性开始增活性开始增活性开始增活性开始增高,高,高,高,202030h30h达峰值,持续达峰值,持续达峰值,持续达峰值,持续3 35 5天恢复正常;发病天恢复正常;发病天恢复正常;发病天恢复正常;发病121224h24h,尿,尿,尿,尿AMYAMY开始升高,开始升高,开始升高,开

60、始升高,3 31010天后恢复正常。血清天后恢复正常。血清天后恢复正常。血清天后恢复正常。血清AMYAMY同工酶同工酶同工酶同工酶P P型升高。型升高。型升高。型升高。血清血清血清血清AMYAMY主要用于急性胰腺炎主要用于急性胰腺炎主要用于急性胰腺炎主要用于急性胰腺炎的早期诊断,尿的早期诊断,尿的早期诊断,尿的早期诊断,尿AMYAMY主要用于病情观察。主要用于病情观察。主要用于病情观察。主要用于病情观察。 (2 2)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎)慢性胰腺炎 稳定期,各项酶指标正常,急性发稳定期,各项酶指标正常,急性发稳定期,各项酶指标正常,急性发稳定期,各项酶指标正常,急性发作时作时作时

61、作时AMYAMY及其及其及其及其P P型同工酶均升高。型同工酶均升高。型同工酶均升高。型同工酶均升高。 (3 3)其它)其它)其它)其它 胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿胰腺癌、胰腺囊肿AMYAMY活性重度升高。活性重度升高。活性重度升高。活性重度升高。卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时卵巢癌、肺癌、流行性腮腺炎时AMYAMY也升高,但以也升高,但以也升高,但以也升高,但以S S型为主。型为主。型为主。型为主。AMYAMY在肝合成在肝合成在肝合成在肝合成(hchng)(hchng),严重肝病时降低。,严重肝病时降低。,严重肝病时

62、降低。,严重肝病时降低。第八十六页,共一百零八页。尿液检验概念:存在各种组织的溶酶体水解酶 分子量为14万肾小球基膜 意义: 正常 18.5U/L 是肾小管损害最敏感的指标(zhbio)之一 可作为上下尿路感染的鉴别 上NAG 下NAG正常 59二、 尿N-乙酰-D氨基(nj)葡糖苷酶(NAG) 第八十七页,共一百零八页。尿液检验三、其它三、其它(qt)(qt)尿酶尿酶 如尿如尿-GT 尿丙氨酸氨基尿丙氨酸氨基(nj)(nj)肽酶(肽酶(AAP) 尿胰蛋白酶尿胰蛋白酶II(TR)等。)等。第八十八页,共一百零八页。尿液检验第六节第六节 尿液其它尿液其它(qt)(qt)(qt)(qt)化学成分检

63、查化学成分检查第八十九页,共一百零八页。尿液检验一、尿葡萄糖定量一、尿葡萄糖定量(dngling)(dngling)测定测定 n n 尿中排出(pi ch)(pi ch)的糖主要是葡萄糖,也有微量的乳糖、半乳糖、果糖等。当血浆葡萄糖浓度升高,进入尿中的葡萄糖超过肾小管重吸收阈值(888mmolL)或肾小管重吸收葡萄糖值下降时,较多葡萄糖从尿中排出。 第九十页,共一百零八页。尿液检验n n1 1、测定方法及评价、测定方法及评价、测定方法及评价、测定方法及评价(pngji)(pngji) (1 1)己糖激酶法)己糖激酶法)己糖激酶法)己糖激酶法 葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖 + ATP + ATP 葡

64、萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸磷酸磷酸磷酸 + ADP+ ADP葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸磷酸磷酸磷酸 + NADP 6-+ NADP 6-磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸 + NADPH+ NADPH NADPH NADPH生成的速度与葡萄糖浓度成正比,用分光光度生成的速度与葡萄糖浓度成正比,用分光光度生成的速度与葡萄糖浓度成正比,用分光光度生成的速度与葡萄糖浓度成正比,用分光光度计计计计340nm340nm波长测定吸光度,计算出葡萄糖的浓度。此法特波长测定吸光度,计算出葡萄糖的浓度。此法特波长测定吸光度,计算出葡萄糖的浓度。此法特波长测定吸光度,计算出葡萄

65、糖的浓度。此法特异性比葡萄糖氧化酶法高,可应用全自动生化分析仪检测,异性比葡萄糖氧化酶法高,可应用全自动生化分析仪检测,异性比葡萄糖氧化酶法高,可应用全自动生化分析仪检测,异性比葡萄糖氧化酶法高,可应用全自动生化分析仪检测,但成本较高。但成本较高。但成本较高。但成本较高。 G-6-PDG-6-PD己糖激酶己糖激酶HKHK第九十一页,共一百零八页。尿液检验 (2 2)邻甲苯胺法)邻甲苯胺法 葡萄糖葡萄糖 + + 邻甲苯胺邻甲苯胺 葡萄糖基胺葡萄糖基胺 生成席夫生成席夫(schiff)(schiff)碱碱 有色化合物有色化合物 生成的有色化合物,生成的有色化合物, 吸收峰吸收峰630nm630nm

66、。本法是卫生部。本法是卫生部全国全国(qun u)(qun u)临床检验操作规程临床检验操作规程推荐的方法,是一种推荐的方法,是一种传统测定尿液中葡萄糖的较满意的方法,传统测定尿液中葡萄糖的较满意的方法,灵敏度较低,灵敏度较低,不适宜仪器检测,适用于一些较小的医院。不适宜仪器检测,适用于一些较小的医院。强酸强酸 脱水脱水结构重排结构重排第九十二页,共一百零八页。尿液检验 (3)葡萄糖氧化酶法 葡萄糖葡萄糖 + O+ O2 2 + H + H2 2O O 葡萄糖酸葡萄糖酸 + H+ H2 2O O2 2 H H2 2O O2 2 + + 苯酚苯酚 + 4-+ 4-氨基安替比林氨基安替比林 醌亚胺

67、醌亚胺 + H+ H2 2O O 生成的有色生成的有色(yu s)(yu s)化合物(红色醌亚胺)化合物(红色醌亚胺) 在在480 480 550nm550nm处有最大吸收峰。本法不适合尿液葡萄糖测定,处有最大吸收峰。本法不适合尿液葡萄糖测定,因尿液中各种还原性物质,如因尿液中各种还原性物质,如VitCVitC,尿酸含量较高,会,尿酸含量较高,会影响葡萄糖氧化酶反应中产生的过氧化氢,降低呈色反应,影响葡萄糖氧化酶反应中产生的过氧化氢,降低呈色反应,而导致负偏差。而导致负偏差。 GODGOD PODPOD第九十三页,共一百零八页。尿液检验 2 2、质量控制质量控制 (1 1)留尿后立即测定,因尿

68、易引起污染而使尿糖降)留尿后立即测定,因尿易引起污染而使尿糖降低。低。 (2 2)如果尿中葡萄糖含量过高可适当稀释后测定,结果)如果尿中葡萄糖含量过高可适当稀释后测定,结果应乘以稀释倍数。应乘以稀释倍数。 3 3、参考值:、参考值:2.8 mmol2.8 mmold d(0.5g35天,二点酶免法 5-7天(3)滋养层C肿瘤(zhngli)诊断及预后判断:葡萄胎、恶性 葡萄胎、绒毛膜上皮癌、男性睾丸畸胎瘤等, 尿HCG。(4)协助诊断异位妊娠及流产 不全流产 hCG持续阳性 完全流产 hCG由阳性转阴性65第一百零四页,共一百零八页。尿液检验 保胎 HCG不断下降无效; HCG明显上升成功 异

69、位妊娠 约60%尿HCG阳性 注意 用特异性/灵敏度高的方法 (5)其它:脑垂体疾病、甲亢、子宫(zgng)内膜增生、宫颈癌、卵巢囊肿等,HCG也可出现阳性。 66第一百零五页,共一百零八页。尿液检验附附: 混浊混浊(hnzhu)(hnzhu)尿的鉴别尿的鉴别混浊尿加热混浊消失 尿酸盐混浊增加加稀乙酸变清、无气泡 磷酸盐变清、有气泡 碳酸盐无变化 脓尿、菌尿第一百零六页,共一百零八页。尿液检验第一百零七页,共一百零八页。尿液检验内容(nirng)总结第五章尿 液 检 验。由于比重计本身刻度标示误差较大而容易引起系统误差,因而NCCLS建议不再使用比重计法。(2)缺氧、缺血局部组织缺血可使肌肉组织破坏如心肌缺血所致心肌梗死。其缺点是底物难以标准化,反应不呈零级反应。(2)如果尿中葡萄糖含量过高可适当(shdng)稀释后测定,结果应乘以稀释倍数。乳糜尿的程度与病人摄入脂肪量、淋巴管破裂程度和运动强度等有关。加稀乙酸第一百零八页,共一百零八页。尿液检验

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