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1、复习：植物细胞工程通常采用的技术手段有哪些复习：植物细胞工程通常采用的技术手段有哪些？植物细胞工程常植物细胞工程常用的技术手段用的技术手段 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞工程通常采用的技术手段又有哪些？动物细胞工程通常采用的技术手段又有哪些？动物细胞工程常动物细胞工程常用的技术手段用的技术手段 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合动物细胞核移植动物细胞核移植 生产单克隆抗体生产单克隆抗体动物细胞培养技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程是其他动物细胞工程技术的基础技术的基础2.2.1 2.2.1 动物细胞培养动物细胞培养2.2 2.2 动物细胞工程
2、动物细胞工程用培养的人细胞构建的人造皮肤用培养的人细胞构建的人造皮肤大面积烧伤的病人大面积烧伤的病人2.2.1 2.2.1 动物细胞培养动物细胞培养2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程1.1.动物细胞培养的概念动物细胞培养的概念2.2.动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程3.3.动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件4.4.动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用 3.3.动物细胞培养的条件：动物细胞培养的条件：（1 1）无菌无毒的环境：对）无菌无毒的环境：对 和和 进行无菌处进行无菌处理，还可以在培养液中添加一定量的理，还可以在培养液中添加一定量的 。此外，应定期。此外，应定期 。【自
3、主学习自主学习】 阅读教材阅读教材P44-46P44-46内容内容-动物细胞的培养动物细胞的培养1.1.动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成散成_，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞_ _和和_ _。单个细胞单个细胞生长生长增殖增殖动物细胞培养的原理是动物细胞培养的原理是: :细胞增殖细胞增殖2.2.动物细胞培养的过程：动物细胞培养的过程：P45P45图图2 21616培养液培养液所有培养用具所有培养用具抗生素抗生素更换培养液更换培养液3.3.动物细胞培养的条件：动物细胞培养的条件：
4、（2 2）营养：合成培养基中有）营养：合成培养基中有 、 、 、 、 等，等，通常需加入通常需加入 等天然成分。等天然成分。（3 3）温度和）温度和PH PH ：哺乳动物适宜温度为：哺乳动物适宜温度为 ，多数细胞生，多数细胞生存的适宜存的适宜PHPH为为 。（4 4）气体环境：主要是）气体环境：主要是 和和 。_是细胞代是细胞代谢所必需的，谢所必需的， CO2CO2的主要作用是的主要作用是 。【自主学习自主学习】 阅读教材阅读教材P44-46P44-46内容内容-动物细胞的培养动物细胞的培养糖糖促生长因子促生长因子氨基酸氨基酸无机盐无机盐微量元素微量元素动物血清动物血清36.50.57.27.
5、4O2CO2O2维持培养液的维持培养液的PH4.4.举例说出动物细胞培养技术的应用：举例说出动物细胞培养技术的应用：大规模生产有重要价值的生物制品。如：大规模生产有重要价值的生物制品。如： 、 、 等。等。动物细胞是基因工程技术中常用的动物细胞是基因工程技术中常用的 细胞，细胞，因此，因此， 也离不开动物细胞的培养。也离不开动物细胞的培养。培养的动物细胞还可以用于培养的动物细胞还可以用于 ，判断某种物，判断某种物质的毒性。质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于科学家培养正常或各种病变的细胞，用于 、 、 等方面的研究。如：等方面的研究。如： 。【自主学习自主学习】 阅读教材阅读教材P4
6、4-46P44-46内容内容-动物细胞的培养动物细胞的培养病毒疫苗病毒疫苗干扰素干扰素单克隆抗体单克隆抗体受体受体基因工程基因工程检测有毒物质检测有毒物质生理生理病理病理药理药理用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据供理论依据1.1.动物细胞培养的选材有什么要求？取出动物组织后，动物细胞培养的选材有什么要求？取出动物组织后，怎样制备细胞悬液？怎样制备细胞悬液？2.2.动物细胞培养用到什么酶？它的作用什么？动物细胞培养用到什么酶？它的作用什么？3.3.什么是什么是“原代培养原代培养”和和“传代培养传代培养”？为什么要进行？为什么
7、要进行“传代培养传代培养”4.4.什么是什么是“细胞贴壁细胞贴壁”和和“接触抑制接触抑制”5.5.动物细胞能无限制的传代下去吗？动物细胞能无限制的传代下去吗？6.6.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为几代以内的目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为几代以内的细胞？为什么？细胞？为什么？7.7.通过动物细胞培养能获得动物个体吗？为什么？通过动物细胞培养能获得动物个体吗？为什么？探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程阅读教材阅读教材P44-46内容内容-动物细胞培养的过程，思考以动物细胞培养的过程，思考以下问题？下问题？转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液
8、中进行液中进行传代培养传代培养探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程1.1.动物细胞培养的选材有动物细胞培养的选材有什么要求？取出动物组织什么要求？取出动物组织后，怎样制备细胞悬液？后，怎样制备细胞悬液？（1 1）取动物胚胎或幼年动物）取动物胚胎或幼年动物的器官、组织，因为这些组的器官、组织，因为这些组织或器官上的细胞增殖能力织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。强，有丝分裂旺盛。（2 2）细胞悬液细胞悬液取材取材剪碎剪碎组织块组织块加培养液加培养液制作制作胰蛋白酶胰蛋白酶处理处理探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养
9、转入培养转入培养液中进行液中进行传代培养传代培养2.2.动物细胞培养用到什么动物细胞培养用到什么酶？它的作用什么？酶？它的作用什么？胰蛋白酶；胰蛋白酶；将组织分散成单个细将组织分散成单个细胞，使细胞与培养液胞，使细胞与培养液充分接触充分接触细胞悬液细胞悬液取材取材剪碎剪碎组织块组织块加培养液加培养液制作制作胰蛋白酶胰蛋白酶处理处理P44旁栏思考题旁栏思考题探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程3.3.什么是什么是“原代培养原代培养”和和“传代培养传代培养”？为什么要？为什么要进行进行“传代培养传代培养”？转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液中进行液中进
10、行传代培养传代培养为什么要为什么要进行传代进行传代培养？培养？原代原代培养：将动物组培养：将动物组织消化后的初次培养织消化后的初次培养传代传代培养：贴满瓶壁的培养：贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理，细胞用胰蛋白酶处理，然后分瓶继续培养然后分瓶继续培养探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程4.4.什么是什么是“细胞贴壁细胞贴壁”和和“接触抑制接触抑制”？转入培养液中进行原代培养转入培养液中进行传代培养悬液中分散的细胞很快悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞表面相互接触时，细胞就会停止分
11、裂增殖，这就会停止分裂增殖，这种现象称为种现象称为细胞的接触细胞的接触抑制。抑制。要求培养瓶或培养皿的内表面要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附光滑、无毒、易于贴附探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程5.5.动物细胞能无限制的动物细胞能无限制的传代下去吗？传代下去吗？转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液中进行液中进行传代培养传代培养细胞在传至细胞在传至10105050代左代左右时，增殖会逐渐缓慢，右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可部分细胞的细胞核型可能发生变化能发生变化，当继续传，当继续传代培
12、养时，代培养时，少部分细胞少部分细胞会克服细胞寿命的自然会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性极限，获得不死性 探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程6.6.目前使用的或冷冻保存目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为几代以的正常细胞通常为几代以内的细胞？为什么？内的细胞？为什么？转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液中进行液中进行传代培养传代培养目前使用的或冷冻目前使用的或冷冻保存的正常细胞通保存的正常细胞通常为常为1010代以内，以代以内，以保持细胞正常的二保持细胞正常的二倍体核型。倍体核型。探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程7. 7. 通
13、过动物细胞培养能通过动物细胞培养能获得动物个体吗？为什么获得动物个体吗？为什么？转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液中进行液中进行传代培养传代培养动物细胞培养不能动物细胞培养不能获得动物个体，因获得动物个体，因为动物细胞的全能为动物细胞的全能性受到限制性受到限制探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养转入培养转入培养液中进行液中进行传代培养传代培养归纳总结：根据以上的探究并结合教材归纳总结：根据以上的探究并结合教材44-4544-45页动物细胞页动物细胞培养过程，构建动物细胞培养流程图。培养过程，构建动物细
14、胞培养流程图。探究一探究一 动物细胞培养的过程动物细胞培养的过程归纳总结：根据以上的探究并结合教材归纳总结：根据以上的探究并结合教材44-4544-45页动物细胞页动物细胞培养过程，构建动物细胞培养流程图。培养过程，构建动物细胞培养流程图。动物动物动物动物胚胎胚胎胚胎胚胎或或或或幼龄幼龄幼龄幼龄动物的动物的动物的动物的组织、器官组织、器官组织、器官组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞单个细胞单个细胞加培养液加培养液细胞细胞细胞细胞 悬液悬液悬液悬液原代原代原代原代培养培养培养培养传代培养传代培养传代培养传代培养细胞贴壁细胞贴壁接触抑制接触抑制 细胞株细胞株细胞株细胞株（10501
15、05010501050代）代）代）代） 细胞系细胞系细胞系细胞系（50505050代后）代后）代后）代后）遗传物质遗传物质发生改变发生改变不死细胞（癌变）不死细胞（癌变）不死细胞（癌变）不死细胞（癌变）探究二探究二 动物细胞培养的条件动物细胞培养的条件思考：人体细胞生活的直接环境是什么？动物细胞培养时思考：人体细胞生活的直接环境是什么？动物细胞培养时需要满足什么条件？需要满足什么条件？ 内环境内环境 （细胞外液）；（细胞外液）；无菌、无毒的环境；营养；适宜无菌、无毒的环境；营养；适宜的温度和的温度和PH；适宜的气体环境；适宜的气体环境阅读教材，思考：阅读教材，思考：1.怎么保证被培养的细胞处于
16、无菌、无毒的环境中？怎么保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境中？2.为什么培养动物细胞时通常要在培养基中加入动物血为什么培养动物细胞时通常要在培养基中加入动物血清？清？3.动物细胞培养所需的气体主要有哪些？主要作用分别动物细胞培养所需的气体主要有哪些？主要作用分别是什么？是什么？探究三探究三 动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用动物细胞培养技术的应用体现在哪些方面？动物细胞培养技术的应用体现在哪些方面？1.1.生产生物制品生产生物制品2.2.应用于基因工程应用于基因工程3.3.检测有毒物质，判断某种物质的毒性。检测有毒物质，判断某种物质的毒性。4.4.培养各种细胞，用于生理、病理、药理
17、等方面的研究。培养各种细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。 有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体结构或数目的变异染色体结构或数目的变异，根据，根据变异细胞占全部培养细胞变异细胞占全部培养细胞的百分数的百分数，可判断化学物质的毒性强弱。，可判断化学物质的毒性强弱。思考：如何用动物细胞培养技术来检测有毒物质的毒性思考：如何用动物细胞培养技术来检测有毒物质的毒性？细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体或组织植物体或组织培养结果培养结果获得细胞获得细胞或细胞分泌蛋白或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株
18、等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目小结：小结： 植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较1 1、（、（20132013浙江）实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）浙江）实验小鼠皮肤细胞培养（非克隆培养）的基本过程如图所示。下列叙述错误的是的基本过程如图所示。下列叙述错误的是 ( ) ( )A A甲过程需要对实验小鼠进行消毒甲过程需要对实验小鼠进行
19、消毒 B B乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C C丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型 D D丁过程得到的细胞具有异质性丁过程得到的细胞具有异质性C C当堂检测：当堂检测：2 2、(2010(2010年浙江年浙江) )下列关于动物细胞培养的叙述下列关于动物细胞培养的叙述, ,正确的正确的是是( ( ) )A.A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞胞B.B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C.C.二倍体细胞的传代培
20、养次数通常是无限的二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D.D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养恶性细胞系的细胞可进行传代培养当堂检测：当堂检测：D D3 3、（、（20132013大纲卷）关于动物细胞培养和植物组织大纲卷）关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（培养的叙述，错误的是（ ） A.A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶蛋白酶 C.C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖
21、胞可离体培养增殖 D.D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒用于植物脱除病毒 B B当堂检测：当堂检测：4.(20094.(2009年浙江理综年浙江理综) )用动、植物成体的体细胞进行离体用动、植物成体的体细胞进行离体培养培养, ,下列叙述正确的是下列叙述正确的是( () )A.A.都需要用都需要用COCO2 2培养箱培养箱B.B.都需要用液体培养基都需要用液体培养基C.C.都要在无菌条件下进行都要在无菌条件下进行D.D.都可体现细胞的全能性都可体现细胞的全能性当堂检测：当堂检测：C C当堂检测：当堂检测：5.5.答案：答案：(1)(1)动物胚胎或幼年动物的器官组织动物胚胎或幼年动物的器官组织 因为这因为这些组织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛些组织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛 (2)(2)剪碎剪碎 胰蛋白胰蛋白 使每个细胞能与培养液接触使每个细胞能与培养液接触(3)(3)葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 原代培养原代培养 (4)(4)胰蛋白酶胰蛋白酶 细胞悬浮液细胞悬浮液 传代培养传代培养
