人类疾病动物模型行业使用

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1、人类疾病动物模型概述免疫缺陷动物肿瘤动物模型系统疾病动物模型临床专科疾病动物模型中医证候动物模型 人类疾病动物模型1实用内容2实用内容 一、人类疾病动物模型的定义和意义一、人类疾病动物模型的定义和意义 1 1定义定义 人人类类疾疾病病动动物物模模型型(animal (animal model model of of human human diseases)diseases)是是指指医医学学研研究究中中建建立立的的具具有有人人类类疾疾病病表表现现的的动动物物实实验验对对象象和和相相关关材材料料。应应用用动动物物模模型型是是现现代代医医学学认认识识生生命命科科学学客客观观规规律律的的实实验验方方

2、法法和和手手段段。通通过过动动物物模模型型的的研研究究，进进而而有有意意识识地地改改变变那那些些自自然然条条件件下下不不可可能能或或不不容容易易排排除除的的因因素素，更更能能准准确确地地观观察察模模型型的的实实验验结结果果，并并将将研研究究结结果果推推及及于于人人类类疾疾病病，从从而而更更有有效效地地认认识识人人类类疾病的发生、发展规律并研究防治措施。疾病的发生、发展规律并研究防治措施。第一节 人类疾病动物模型概述3实用内容 人人类类疾疾病病动动物物模模型型的的研研究究，本本质质上上是是比比较较医医学学的的应应用用科科学学。研研究究人人员员可可利利用用各各种种动动物物的的生生物物特特征征和和疾

3、疾病病特特点点与与人人类类疾疾病病进进行行比比较较研研究究。长长期期以以来来，生生物物医医学学研研究究的的进进展展常常常常依依赖赖于于使使用用动动物物作作为为实实验验假假说说和和临临床床假假说说的的基基础础。人人类类各各种种疾疾病病的的发发生生发发展展是是十十分分复复杂杂的的，疾疾病病的的发发病病机机制制和和预预防防、治治疗疗机机制制是是不不可可能能也也不不允允许许在在人人体体上上试试验验研研究究的的，但但可可以以通通过过应应用用动动物物复复制制出出人人类类疾疾病病的的动动物物模模型型，对对其其生生命命现现象象进进行行研研究究，进进而而推推论论到到人人类类，以以便便探探索索人人类类生生命命的的

4、奥奥秘秘，控控制制人人类类的的疾疾病和衰老，延长人类的寿命。病和衰老，延长人类的寿命。4实用内容 2 2应用动物模型的意义应用动物模型的意义 应用动物模型的意义主要表现在如下几个方面：应用动物模型的意义主要表现在如下几个方面： (1) (1) 避免人体实验造成的危害避免人体实验造成的危害 动动物物可可以以作作为为人人类类的的替替难难者者，可可在在人人为为设设计计的的特特定定实实验验条条件件下下反反复复实实验验研研究究。使使用用动动物物模模型型除除了了能能克克服服在在人人类类研研究究中中经经常常遇遇到到的的伦伦理理和和社社会会道道德德限限制制外外，还还能能采采用用某某些些不不能能应应用用于于人人

5、类类研研究究的的方方法法和和途途径径，甚甚至至为为了了实实验验目目的的需需要要还还可可以以损损伤伤动动物物组组织织、器官以至处死。器官以至处死。 (2) (2) 应用动物模型可研究平时不易见到的疾病应用动物模型可研究平时不易见到的疾病 平平时时临临床床很很难难见见到到放放射射病病、毒毒气气中中毒毒、烈烈性性传传染染病病、战战伤伤等等疾疾病病，根根据据实实验验要要求求能能复复制制该该疾疾病病的的动动物模型，供研究使用。物模型，供研究使用。5实用内容 (3) (3) 可可提提供供发发病病率率低低，潜潜伏伏期期和和病病程程长长的的疾疾病病的的动物模型动物模型 有有些些疾疾病病如如免免疫疫性性、代代谢

6、谢性性、内内分分泌泌和和血血液液等等疾疾病病在在临临床床上上发发病病率率低低，人人们们可可选选用用动动物物种种群群中中发发病病率率高高的的类类似似于于人人的的疾疾病病作作为为动动物物模模型型，也也可可通通过过不不同同方方法法复复制制这这些些疾疾病病的的动动物物模模型型从从事事研研究究工工作作。还还有有些些疾疾病病如如肿肿瘤瘤、慢慢性性气气管管炎炎、动动脉脉粥粥样样硬硬化化、遗遗传传病病、肺肺心心病病、类类风风湿湿等等疾疾病病发发生生发发展展速速度度缓缓慢慢，潜潜伏伏期期长长，病病程程也也长长，短短的的几几年年，长长的的十十几几年年甚甚至至几几十十年年，有有的的疾疾病病要要隔隔代代或或者者几几代

7、代才才能能显显性性发发病病。大大多多动动物物由由于于生生命命周周期期比比较较短短，在在短短时时间间内内进进行行一一代代或或几几代代的的观观察察就就显显得得十十分分容容易易应应用用动动物物模模型型来来研究就克服了以上不足。研究就克服了以上不足。 6实用内容 (4) (4) 克服复杂因素，增加方法学上的可比性克服复杂因素，增加方法学上的可比性 临临床床上上许许多多疾疾病病是是十十分分复复杂杂的的：病病人人并并非非患患有有一一种种疾疾病病，有有的的几几种种疾疾病病同同时时并并存存，即即使使某某单单一一疾疾病病，由由于于病病人人的的年年龄龄、性性别别、体体质质、遗遗传传以以及及社社会会因因素素对对其其

8、疾疾病病发发生生发发展展都都会会有有影影响响，产产生生不不同同的的效效果果。而而用用动动物物复复制制的的疾疾病病模模型型，就就可可以以选选择择相相同同品品种种、品品系系、性性别别、年年龄龄、体体重重、健健康康状状态态以以及及在在相相同同的的环环境境因因素素内内进进行行观观察察研研究究，这这样样对对该该疾疾病病及及其其发发展展过过程程的的研研究究就就可可以以排排除除其其他他影影响响因因素素，使使得得到到的的结结果果更更加加准准确确，也也可可单单一一变变换换某某一一因因素素，使使实实验验研研究究的结果更加深入，增加了因素的可比性。的结果更加深入，增加了因素的可比性。7实用内容 (5) (5) 样品

9、收集方便，实验结果易分析样品收集方便，实验结果易分析 动动物物模模型型作作为为研研究究人人类类疾疾病病的的“ “代代替替品品” ”，便便于于实实验验操操作作人人员员按按时时采采集集所所需需各各种种样样品品，及及时时或或分分批批处处死死动动物物收收集集样样本本，以以便便更更好好地地了了解解疾疾病病过过程程，完完成成实验目的，这点在临床是不易办到的。实验目的，这点在临床是不易办到的。 (6) (6) 有利于更全面地认识疾病的本质有利于更全面地认识疾病的本质 有有些些病病原原体体不不仅仅引引起起人人类类发发生生疾疾病病，也也可可引引起起动动物物感感染染，其其临临床床表表现现各各有有特特点点，通通过过

10、对对人人畜畜共共患患病病的的比比较较，可可观观察察到到同同一一病病原原体体在在不不同同的的机机体体引引起起的的损害，更有利于全面地认识疾病的本质。损害，更有利于全面地认识疾病的本质。综综上上所所述述，动动物物模模型型在在医医学学科科学学研研究究中中做做出出了了巨巨大大的贡献。的贡献。8实用内容 二、人类疾病动物模型的设计原则二、人类疾病动物模型的设计原则 成成功功的的动动物物模模型型常常常常依依赖赖于于最最初初周周密密的的设设计计，动动物模型设计一般应遵循下原则。物模型设计一般应遵循下原则。 1 1相似性相似性 动动物物模模型型应应尽尽可可能能近近似似人人类类疾疾病病，最最好好能能找找到到与与

11、人人类类疾疾病病相相同同的的动动物物自自发发性性疾疾病病。如如大大鼠鼠自自发发性性高高血血压压就就是是研研究究人人类类原原发发性性高高血血压压的的理理想想动动物物模模型型；小小型型猪猪自自发发性性冠冠状状动动脉脉粥粥样样硬硬化化就就是是研研究究人人类类冠冠心心病病的的良良好好动动物物模模型型：自自发发性性狗狗类类风风湿湿性性关关节节炎炎与与人人类类幼幼年年型型类类风风湿湿性性关关节节炎炎十十分分相相似似，同同样样是是理理想想的的动动物物模模型型。与与人人类类疾疾病病完完全全相相同同的的动动物物自自发发性性疾疾病病不不易易多多得得，往往往往需需要要研研究究人人员员加加以以复复制制，为为了了尽尽量

12、量做做到到与与人人类类疾疾病病相相似似，首首先先要要在在动动物物选选择择上上加加以以注注意意；其其次次是是复复制制动动物物模模型型实实验验方方法法上上不不断断探探索索改改进进；另外在观察指标等方面都应加以周密的设计。另外在观察指标等方面都应加以周密的设计。 9实用内容 2. 2. 重复性重复性 理理想想的的动动物物模模型型应应该该是是可可重重复复的的，甚甚至至是是可可以以标标准准化化的的。例例如如用用一一次次定定量量放放血血法法可可百百分分之之百百造造成成出出血血性性休休克克，百百分分之之百百死死亡亡，这这就就符符合合可可重重复复性性和和达达到到了了标标准准化化要要求求。又又如如用用狗狗做做心

13、心肌肌梗梗死死模模型型照照理理很很合合适适，因因为为它它的的冠冠状状动动脉脉循循环环与与人人相相似似，而而且且在在实实验验动动物物中中它它最最适适宜宜做做暴暴露露心心脏脏的的剖剖胸胸手手术术，但但狗狗结结扎扎冠冠状状动动脉脉的的后后果果差差异异太太大大，不不同同狗狗同同一一动动脉脉同同一一部部位位的的结结扎扎，其其后后果果很很不不一一致致，无无法法预预测测，无无法法标标准准化化。相相反反，大大小小白白鼠鼠、地地鼠鼠和和豚豚鼠鼠结结扎扎冠冠脉脉的的后后果就比较稳定一致，可以预测，因而可以标准化。果就比较稳定一致，可以预测，因而可以标准化。10实用内容 3 3可靠性可靠性 复复制制的的动动物物模模

14、型型应应力力求求可可靠靠地地反反映映人人类类疾疾病病，即即可可特特异异地地、可可靠靠地地反反映映该该种种疾疾病病代代谢谢、结结构构变变化化，同同时时应应具具备备该该种种疾疾病病的的主主要要症症状状和和体体征征，并并经经过过一一系系列列检检测测( (如如心心电电图图、临临床床生生理理、生生化化指指标标检检验验、病病理理切切片片等等) )得得以以证证实实。如如果果易易自自发发地地出出现现某某些些相相应应病病变变的的动动物物，就就不不应应选选用用；易易产产生生与与复复制制疾疾病病相相混混淆淆的的疾疾病病或或临临床床症症状状者者也也不不宜宜选选用用。例例如如铝铝中中毒毒，选选用用大大鼠鼠复复制制动动物

15、物模模型型时时，大大鼠鼠本本身身易易患患进进行行性性肾肾病病，容容易易与与铅铅中中毒毒所所致致的的肾肾病病相相混混淆淆，选选用用蒙蒙古古沙沙鼠鼠就就比比选选用用大大鼠鼠可可靠靠性性好好，因因为为蒙蒙古古沙沙鼠鼠只只有有铅铅中中毒毒才才会使其出现肾病变。会使其出现肾病变。11实用内容 4 4适用性和可控性适用性和可控性 设设计计复复制制人人类类疾疾病病动动物物模模型型，应应尽尽量量考考虑虑今今后后的的临临床床应应用用和和易易于于控控制制其其疾疾病病发发展展过过程程，以以便便于于开开展展研研究究工工作作。例例如如雌雌激激素素能能中中止止大大鼠鼠和和小小鼠鼠的的早早期期妊妊娠娠，但但不不能能中中止止

16、人人的的妊妊娠娠，因因此此选选用用雌雌激激素素复复制制大大鼠鼠和和小小鼠鼠的的中中止止早早期期妊妊娠娠动动物物模模型型是是不不适适用用的的；用用大大鼠鼠和和小小鼠鼠筛筛选选带带有有雌雌激激素素活活性性的的避避孕孕药药物物时时也也会会带带来来错错误误的的结结论论。又又如如选选用用大大鼠鼠和和小小鼠鼠复复制制实实验验性性腹腹膜膜炎炎也也不不适适用用，因因为为他他们们对对革革兰兰阴阴性性菌菌具具有有较较高高的抵抗力，不易形成腹膜炎。的抵抗力，不易形成腹膜炎。 有有些些动动物物对对某某致致病病因因子子特特别别敏敏感感，极极易易死死亡亡，不不好控制也不适宜复制动物模。好控制也不适宜复制动物模。12实用内

17、容 5 5易行性和经济性易行性和经济性 复复制制动动物物模模型型的的设设计计，应应尽尽量量做做到到方方法法容容易易执执行行和和合合乎乎经经济济原原则则。除除了了动动物物选选择择上上要要考考虑虑易易行行性性和和经经济济性性原原则则外外，在在选选择择模模型型复复制制方方法法和和指指标标的的检检测测观察上也要注意这一原则。观察上也要注意这一原则。 13实用内容 三、动物模型的分类三、动物模型的分类 人人类类疾疾病病动动物物模模型型经经过过近近3030年年的的开开发发研研究究，现现已已累累积积20002000多多个个动动物物模模型型在在医医学学发发展展中中占占有有极极其其重重要要的的地地位位。为为了了

18、能能更更好好地地应应用用、开开发发和和研研究究动动物物模模型型，人人们们将将其其进进行行了了分分类类，如如按按动动物物模模型型产产生生原原因因进进行行分分类类，按按医医学学系系统统范范围围分分类类，按按模模型型种种类类分分类类和和按按中中医医证证候候动动物物模模型型分分类类。现现将将各各种种分分类类方方法法分分述述如如下：下： 14实用内容 （一）按产生原因分类（一）按产生原因分类 1 1诱诱发发性性动动物物模模型型(experimental (experimental animal animal model)model)又又称称为为实实验验性性动动物物模模型型。是是指指研研究究者者通通过过使

19、使用用物物理理的的、化化学学的的、生生物物的的和和复复合合的的致致病病因因素素作作用用于于动动物物，造造成成动动物物组组织织、器器官官或或全全身身一一定定的的损损害害，出出现现某某些些类类似似人人类类疾疾病病时时的的功功能能、代代谢谢或或形形态态结结构构方方面面的的病病变变，即为人工诱发出特定的疾病动物模型。即为人工诱发出特定的疾病动物模型。15实用内容 (1) (1) 物理因素诱发动物模型物理因素诱发动物模型 常常见见的的物物理理因因素素如如机机械械损损伤伤、放放射射线线损损伤伤、气气压压、手手术术等等许许多多因因素素。使使用用物物理理方方法法复复制制的的动动物物模模型型如如外外科科手手术术

20、方方法法复复制制大大鼠鼠急急性性肝肝衰衰竭竭动动物物模模型型，放放射射线线复复制制大大鼠鼠萎萎缩缩性性胃胃炎炎动动物物模模型型，手手术术方方法法复复制制大大鼠鼠肺肺水水肿肿动动物物模模型型，以以及及放放射射线线复复制制的的大大鼠鼠、小小鼠鼠、狗狗的的放放射射病病模模型型等等。采采用用物物理理因因素素复复制制动动物物模模型型比比较直观、简便，是较常见的方法。较直观、简便，是较常见的方法。16实用内容 (2) (2) 化学因素诱发动物模型化学因素诱发动物模型 常常见见的的化化学学因因素素如如化化学学药药致致癌癌、化化学学毒毒物物中中毒毒、强强酸酸强强碱碱烧烧伤伤、某某种种有有机机成成分分的的增增加

21、加或或减减少少导导致致营营养养性性疾疾病病等等。应应用用化化学学物物质质复复制制动动物物模模型型，如如应应用用羟羟基基乙乙胺胺复复制制大大鼠鼠急急性性十十二二指指肠肠溃溃疡疡动动物物模模型型、应应用用D-D-氨氨基基半半乳乳糖糖复复制制大大鼠鼠肝肝硬硬化化动动物物模模型型、以以乙乙基基亚亚硝硝基基脲脲复复制制大大鼠鼠神神经经系系统统肿肿瘤瘤动动物物模模型型、以以缺缺碘碘饲饲料料复复制制大大鼠鼠缺缺碘碘性性甲甲状状腺腺肿肿动动物物模模型型和和应应用用胆胆固固醇醇、胆胆盐盐、甲甲基基巯巯氧氧嘧嘧啶啶及及动动物物脂脂肪肪油油复复制制鸡鸡、兔兔、大大鼠鼠的的动动脉脉粥粥样样硬硬化化症症动动物物模模型型

22、。不不同同品品种种、品品系系的的动动物物对对化化学学药药物物耐耐受受量量不不同同，在在应应用用时时应应引引起起注注意意。有有些些化化学学药药物物代代谢谢易易造造成成许许多多组组织织、器器官官损损伤伤，有有可可能能影影响响实实验验观观察察，应应在在预预实实验验中中摸摸索索好好稳稳定定的的实验条件。实验条件。17实用内容 (3) (3) 生物因素诱发动物模型生物因素诱发动物模型 常常见见的的生生物物因因素素如如细细菌菌、病病毒毒、寄寄生生虫虫、生生物物毒毒素素等等。在在人人类类疾疾病病中中，由由生生物物因因素素导导致致发发生生的的人人畜畜共共患患病病( (传传染染性性或或非非传传染染性性) )占占

23、很很大大的的比比例例。传传染染病病、寄寄生生虫虫病病、微微生生物物学学和和免免疫疫学学等等研研究究经经常常使使用用生生物物因因素素复复制制动动物物模模型型。如如以以柯柯萨萨奇奇B B族族病病毒毒复复制制小小鼠鼠、大大鼠鼠、猪猪等等心心肌肌炎炎动动物物模模型型；以以福福氏氏型型痢痢疾疾杆杆菌菌或或志志贺贺杆杆菌菌复复制制猴猴的的细细菌菌性性痢痢疾疾动动物物模模型型；以以锥锥虫虫病病原原体体感感染染小小鼠鼠，复复制制锥锥虫虫病病小小鼠鼠动动物物模模型型；以以钩钩端端螺螺旋旋体体感感染染豚豚鼠鼠，复复制制由由钩钩端端螺螺旋旋体体引引起起的的肺肺出出血动物模型。血动物模型。18实用内容 (4) (4)

24、 复合因素诱发动物模型复合因素诱发动物模型 以以上上3 3种种诱诱发发动动物物模模型型的的因因素素都都是是单单一一的的，有有些些疾疾病病模模型型应应用用单单一一因因素素诱诱发发难难以以达达到到实实验验的的要要求求，必必须须使使用用多多种种复复合合因因素素诱诱导导才才能能复复制制成成功功，这这些些动动物物模模型型的的复复制制往往往往需需要要时时间间较较长长，方方法法比比较较繁繁琐琐，但但其其与与人人类类疾疾病病比比较较相相似似。如如复复制制大大鼠鼠或或豚豚鼠鼠慢慢性性支支气气管管炎炎动动物物模模型型可可使使用用细细菌菌加加寒寒冷冷方方法法或或香香烟烟加加寒寒冷冷，也也可可使使用用细细菌菌加加二二

25、氧氧化化硫硫等等方方法法来来复复制制；以以四四氯氯化化碳碳(40(40棉棉籽籽油油溶溶液液) )、胆胆固固醇醇、乙乙醇醇等等因因素素复复制制大大鼠鼠肝肝硬硬化化动动物物模模型型；以以二二甲甲基基偶偶氮氮苯苯胺胺和和6060CoCo射线方法复制大鼠肝癌动物模型。射线方法复制大鼠肝癌动物模型。19实用内容 2 2自发性动物模型自发性动物模型(spontaneous animal model) (spontaneous animal model) 指指实实验验动动物物未未经经任任何何人人工工处处置置，在在自自然然条条件件下下自自发发产产生生或或由由于于基基因因突突变变的的异异常常表表现现通通过过遗遗

26、传传育育种种手手段段保保留留下下来来的的动动物物模模型型。自自发发性性动动物物模模型型以以肿肿瘤瘤和和遗遗传传疾疾病病居居多多，可可分分为为代代谢谢性性疾疾病病、分分子子性性疾疾病病和和特种蛋白合成异常性疾病等。特种蛋白合成异常性疾病等。 应应用用自自发发性性动动物物模模型型的的最最大大优优点点是是其其完完全全在在自自然然条条件件下下发发生生的的疾疾病病，排排除除了了人人为为的的因因素素，疾疾病病的的发发生生、发发展展与与人人类类相相应应的的疾疾病病很很相相似似，其其应应用用价价值值很很高高，如如自自发发性性高高血血压压大大鼠鼠、肥肥胖胖症症小小鼠鼠、脑脑中中风风大大鼠等。鼠等。20实用内容

27、其其问问题题是是许许多多这这类类动动物物模模型型来来源源比比较较困困难难，种种类类有有限限。动动物物自自发发性性肿肿瘤瘤模模型型因因实实验验动动物物品品种种、品品系系不同，其肿瘤所发生的类型和发病机制也有差异。不同，其肿瘤所发生的类型和发病机制也有差异。 由由于于诱诱发发性性动动物物模模型型和和自自发发性性动动物物模模型型有有一一定定差差异异，加加之之有有些些人人类类疾疾病病至至今今尚尚不不能能用用人人工工的的方方法法在在动动物物身身上上诱诱发发出出来来，因因此此近近十十几几年年来来医医学学界界对对自自发发性性动动物物模模型型的的应应用用和和开开发发十十分分重重视视。许许多多学学者者通通过过对

28、对不不同同种种动动物物的的疾疾病病进进行行大大量量普普查查，以以发发现现自自发发性性疾疾病病的的动动物物，然然后后通通过过遗遗传传育育种种将将自自发发性性疾疾病病保保持持下下去去，并并培培育育成成具具有有该该病病表表现现症症状状和和特特定定遗遗传传性性状状的基因突变动物，供实验研究应用。的基因突变动物，供实验研究应用。21实用内容 3 3抗疾病型动物模型抗疾病型动物模型(negative animal model)(negative animal model) 是是指指特特定定的的疾疾病病不不会会在在某某种种动动物物身身上上发发生生，从从而而可可以以用用来来探探讨讨为为何何这这种种动动物物对对

29、该该疾疾病病有有天天然然的的抵抵抗抗力力。如如哺哺乳乳动动物物均均易易感感染染血血吸吸虫虫病病，而而居居于于洞洞庭庭湖湖流流域域的的东东方方田田鼠鼠却却不不能能复复制制血血吸吸虫虫病病，因因此此将将之之用用于血吸虫病的发病机制和抗病机制的研究。于血吸虫病的发病机制和抗病机制的研究。 22实用内容 4. 4. 生物医学动物模型生物医学动物模型(biomedical animal model)(biomedical animal model) 指指利利用用健健康康动动物物生生物物学学特特征征来来提提供供人人类类疾疾病病相相似似表表现现的的疾疾病病模模型型。如如沙沙鼠鼠缺缺乏乏完完整整的的基基底底动

30、动脉脉环环，左左右右大大脑脑供供血血相相对对独独立立，是是研研究究中中风风的的理理想想动动物物模模型型；鹿鹿的的正正常常红红细细胞胞是是镰镰刀刀形形的的，多多年年来来被被供供作作镰镰刀刀形形红红细细胞胞贫贫血血研研究究；兔兔胸胸腔腔的的特特殊殊结结构构用用于于胸胸外外手手术术研研究究比比较较方方便便；但但这这类类动动物物模模型型与与人人类类疾疾病病存存在着一定的差异，研究人员应加以分析比较。在着一定的差异，研究人员应加以分析比较。23实用内容 ( (二二) ) 按系统范围分类按系统范围分类 1 1疾疾病病的的基基本本病病理理过过程程动动物物模模型型(animal (animal model m

31、odel of of fundamently pathologic processes of disease)fundamently pathologic processes of disease) 指指各各种种疾疾病病共共同同性性的的一一些些病病理理变变化化过过程程模模型型。致致病病因因素素在在一一定定条条件件下下作作用用于于动动物物，使使动动物物组组织织、器器官官或或全全身身造造成成一一定定病病理理损损伤伤，出出现现功功能能、代代谢谢和和形形态态结结构构的的某某些些变变化化，其其中中有有的的变变化化是是许许多多疾疾病病都都可可能能共共有有的的，不不是是某某种种疾疾病病所所特特有有的的变变化

32、化，如如发发热热、缺缺氧氧、水水肿肿、休休克克、弥弥散散性性血血管管内内凝凝血血、电电解解质质紊紊乱乱、酸酸碱碱平平衡衡失失调等，均可称为疾病的基本病理过程。调等，均可称为疾病的基本病理过程。24实用内容 2 2各各系系统统疾疾病病动动物物模模型型(animal (animal model model of of different different system disease)system disease) 指指与与人人类类各各系系统统疾疾病病相相应应的的人人类类疾疾病病动动物物模模型型。各各系系统统疾疾病病模模型型分分为为消消化化系系统统疾疾病病动动物物模模型型，呼呼吸吸、心心血血管管

33、、泌泌尿尿、神神经经、血血液液与与造造血血、内内分分泌泌、骨骨骼骼等等系系统统的的动动物物模模型型，还还包包括括按按科科分分类类，如如传传染染病病、妇妇科科病病、儿儿科科病病、皮皮肤肤科科病病、五五官官科科病病、外外科科病病、寄寄生生虫虫病病、地地方方病病、维维生生素素缺缺乏乏病病、物物理理损损伤伤疾疾病病和职业病等动物模型。和职业病等动物模型。25实用内容 ( (三三) ) 按模型种类分类按模型种类分类 疾疾病病模模型型的的种种类类包包括括整整体体动动物物、离离体体器器官官和和组组织织、细细胞胞株株和和数数学学模模型型。整整体体动动物物模模型型是是常常用用的的疾疾病病模模型，也是研究人类疾病

34、常用的手段。型，也是研究人类疾病常用的手段。26实用内容 ( (四四) ) 按中医药体系分类按中医药体系分类 祖祖国国传传统统医医学学源源远远流流长长数数千千年年，自自19601960年年有有人人复复制制小小鼠鼠阳阳虚虚动动物物模模型型至至今今已已有有3030多多年年，在在此此期期间间中中医医药药动动物物模模型型迅迅猛猛发发展展，已已形形成成独独特特的的较较完完整整的的体体系系，以以其其独独特特的的理理论论体体系系“ “辨辨证证论论治治” ”；独独特特的的评评价价标标准准，证证、病病、症症；独独特特的的处处置置措措施施，中中药药、针针灸灸、养养生生；独独特特的的观观察察指指标标，舌舌、脉脉、汗

35、汗、神神、色色；独独特特的的认认识识特特色色，审审证证求求因因，形形成成中中医医药药动动物物模模型型体体系系，进进入入了了人人类类疾疾病病动动物物模模型型的的大大家家族族，成成为为一一支支不可缺少的生力军。不可缺少的生力军。27实用内容 四、影响动物模型质量的因素四、影响动物模型质量的因素 1 1致模因素对动物模型复制的影响致模因素对动物模型复制的影响 选选择择好好致致模模因因素素是是复复制制动动物物模模型型的的第第一一步步。应应明明确确研研究究目目的的，清清楚楚相相应应人人类类疾疾病病的的发发生生、临临床床症症状状和和发发病病机机制制，熟熟悉悉致致病病因因素素对对动动物物所所产产生生的的临临

36、床床症症状和发病情况，致病因素的剂量。状和发病情况，致病因素的剂量。 28实用内容 2 2动物因素对动物模型复制的影响动物因素对动物模型复制的影响 复复制制动动物物模模型型的的动动物物种种类类繁繁多多，如如实实验验动动物物、家家养养动动物物和和野野生生动动物物。野野生生动动物物属属自自然然生生态态类类型型，其其微微生生物物感感染染复复杂杂，遗遗传传背背景景不不清清楚楚，来来源源困困难难，很很难难饲饲养养，因因此此不不便便使使用用；家家养养动动物物饲饲养养方方便便，来来源源容容易易，但但微微生生物物控控制制不不严严，遗遗传传背背景景不不清清楚楚也也不不提提倡使用；应尽可能使用标准化实验动物。倡使

37、用；应尽可能使用标准化实验动物。 此此外外，动动物物种种类类、品品系系、年年龄龄和和体体重重、性性别别、生生理理状状态态和和健健康康因因素素等等均均对对动动物物模模型型质质量量有有不不同同程程度度的影响。的影响。29实用内容 3 3实验技术因素对动物模型复制的影响实验技术因素对动物模型复制的影响 (2) (2) 实验季节实验季节 动动物物体体对对外外界界的的反反应应情情况况，同同样样受受春春、夏夏、秋秋、冬冬不不同同季季节节的的影影响响，不不同同实实验验季季节节，动动物物的的机机体体反反应应性性在在某某些些方方面面有有一一定定的的改改变变，这这种种影影响响在在进进行行跨跨季节的动物模型实验时应

38、引起重视。季节的动物模型实验时应引起重视。 (2) (2) 昼夜不同时间的影响昼夜不同时间的影响 实实验验动动物物的的体体温温、血血糖糖、基基础础代代谢谢率率、内内分分泌泌激激素素的的分分泌泌等等随随着着昼昼夜夜的的不不同同发发生生节节律律性性的的变变化化。在在复复制制动动物物模模型型进进行行实实验验研研究究时时，应应注注意意实实验验中中某某种种处理的时间顺序对结果的影响。处理的时间顺序对结果的影响。30实用内容 (3) (3) 麻醉深度的影响麻醉深度的影响 在在复复制制动动物物模模型型时时往往往往需需要要将将动动物物麻麻醉醉后后才才能能进进行行各各种种手手术术，实实施施某某些些致致模模因因素

39、素。不不同同麻麻醉醉药药物物和和不不同同麻麻醉醉剂剂量量有有不不同同的的药药理理作作用用和和不不良良反反应应，如如麻麻醉醉过过深深动动物物处处于于深深度度抑抑制制状状态态，甚甚至至濒濒死死状状态态，动动物物各各种种反反应应受受到到抑抑制制，结结果果的的可可靠靠性性受受影影响响；麻麻醉醉过过浅浅，在在动动物物身身上上进进行行手手术术或或实实施施某某些些致致模模因因素素，将将造造成成动动物物强强烈烈的的疼疼痛痛刺刺激激，引引起起动动物物全全身身特特别别是是呼呼吸吸、循循环环、消消化化等等功功能能发发生生改改变变，同同样样会会影影响响造造模的准确性。模的准确性。31实用内容 (4) (4) 手术技巧

40、的影响手术技巧的影响 在在实实验验手手术术造造模模时时，首首先先要要选选择择好好最最佳佳的的手手术术路路线线，以以免免过过大大、过过繁繁的的手手术术给给机机体体带带来来影影响响。手手术术技技术术熟熟练练与与否否也也是是影影响响因因素素，技技术术熟熟练练可可以以减减少少对对动物的刺激、创伤和出血，将提高造模的成功率。动物的刺激、创伤和出血，将提高造模的成功率。 (5) (5) 实验给药的影响实验给药的影响 在在造造模模过过程程中中给给药药是是常常规规工工作作，但但对对造造模模也也是是影影响因素，如给药的途径、剂量、熟练程度等影响。响因素，如给药的途径、剂量、熟练程度等影响。 (6) (6) 对照

41、组对造模的影响对照组对造模的影响 在在复复制制动动物物模模型型时时常常常常因因忽忽视视或或错错误误应应用用对对照照的的问问题题，而而造造成成动动物物模模型型的的失失败败或或误误导导错错误误结结论论，应应根据不同要求设置好对照组。根据不同要求设置好对照组。32实用内容 4 4环境因素和营养因素对复制动物模型的影响环境因素和营养因素对复制动物模型的影响 营营养养因因素素对对复复制制动动物物模模型型，特特别别是是长长期期实实验验，影影响响显显著著，应应予予以以重重视视。如如采采用用国国家家标标准准饲饲料料则则问问题题就就会会解解决决。造造模模过过程程中中应应注注意意给给水水量量充充分分和和给给予予符

42、符合卫生标准的饮水。合卫生标准的饮水。 环环境境因因素素是是影影响响造造模模及及其其实实验验结结果果的的重重要要因因素素，居居住住条条件件、饲饲料料、营营养养、光光照照、噪噪声声、氨氨浓浓度度、温温度、湿度、气流速度等任何一项都不容忽视。度、湿度、气流速度等任何一项都不容忽视。33实用内容第二节 免疫缺陷动物 一、概述一、概述 免免疫疫缺缺陷陷动动物物是是指指由由于于先先天天性性遗遗传传突突变变或或用用人人工工方方法法造造成成一一种种或或多多种种免免疫疫系系统统组组成成成成分分缺缺陷陷的的动动物物。19621962年年，苏苏格格兰兰医医师师IssacsonIssacson等等首首先先发发现现无

43、无胸胸腺腺裸裸小小鼠鼠。19691969年年，丹丹麦麦学学者者RygaardRygaard首首次次成成功功地地将将人人类类恶恶性性肿肿瘤瘤移移植植于于裸裸小小鼠鼠体体内内，在在裸裸小小鼠鼠体体内内肿肿瘤瘤存存活活并并生生长长，开开创创了了免免疫疫缺缺陷陷动动物物研研究究和和应应用用的的新新局局面面。从从此此，免免疫疫缺缺陷陷动动物物逐逐渐渐广广泛泛应应用用于于医医学学生生物物学学研研究究，成成为为肿肿瘤瘤学学、免免疫疫学学、细细胞胞生生物物学学和和遗遗传传学学研研究究等等的的重要模型动物，受到越来越密切的关注。重要模型动物，受到越来越密切的关注。 34实用内容 二、免疫缺陷动物的分类二、免疫缺

44、陷动物的分类 目目前前，世世界界各各国国相相继继培培育育出出一一系系列列免免疫疫缺缺陷陷动动物物，从从啮啮齿齿类类扩扩展展到到马马和和牛牛等等大大型型哺哺乳乳类类动动物物，从从单单一一的的T T淋淋巴巴细细胞胞免免疫疫缺缺陷陷到到几几种种免免疫疫细细胞胞联联合合缺缺陷陷，如如T T和和NKNK细细胞胞，T T和和B B细细胞胞以以及及T T、B B和和NKNK细细胞胞联联合合免免疫疫缺缺陷陷动动物物；从从自自发发突突变变的的先先天天性性免免疫疫缺缺陷陷到到后后天天获获得得性性免免疫疫缺缺陷陷。本本节节着着重重介介绍绍先先天天性性免免疫疫缺缺陷陷小小鼠和大鼠。鼠和大鼠。35实用内容 三、常用免疫

45、缺陷动物的生物学特征三、常用免疫缺陷动物的生物学特征 ( (一一) ) 裸小鼠裸小鼠 指指先先天天性性无无胸胸腺腺、无无毛毛的的裸裸体体小小鼠鼠，常常简简称称裸裸小小鼠鼠。导导致致这这种种异异常常状状态态的的裸裸基基因因(nu)(nu)是是一一个个隐隐性性突突变变基基因因，位位于于1111号号染染色色体体上上。目目前前裸裸基基因因已已经经回回交交到到不不同同的的小小鼠鼠品品系系中中，即即将将其其导导人人不不同同的的遗遗传传背背景景。带带有有裸裸基基因因的的小小鼠鼠品品系系包包括括NIH-nuNIH-nu、BALB/c-nuBALB/c-nu、C C3 3H-nuH-nu和和C C5757BL/

46、6-nuBL/6-nu等等。各各个个品品系系裸裸小小鼠鼠因因其其遗遗传传背背景景不不同同，所所表表现现的的细细胞胞免免疫疫反反应应和和实实验验检检查查指指标标也也不尽相同。不尽相同。 36实用内容 带带有有纯纯合合裸裸基基因因的的小小鼠鼠具具有有两两个个主主要要的的缺缺陷陷特特征征：毛毛发发生生长长发发育育异异常常；表表现现为为全全身身形形似似无无毛毛。呈呈裸裸体体外外表表；无无胸胸腺腺，仅仅有有胸胸腺腺残残迹迹或或仅仅有有异异常常的的胸胸腺腺上上皮皮，这这种种上上皮皮不不能能使使T T细细胞胞正正常常分分化化，缺缺乏乏成成熟熟T T细细胞胞的的辅辅助助、抑抑制制及及杀杀伤伤功功能能，因因而而

47、细细胞胞免免疫疫力力低低下下，不不能能执执行行正正常常T T细细胞胞功功能能。此此外外，B B细细胞胞功功能能基基本本正正常常，成成年年裸裸小小鼠鼠（6 68 8周周龄龄）较较普普通通鼠鼠有有较较高高水水平平的的NKNK细细胞胞活活性性，但但幼幼鼠鼠（3 34 4周周龄龄）的的NKNK细细胞胞活活性性低低下下。裸裸小小鼠鼠粒粒细细胞胞数数比比普普通通小小鼠鼠低低。裸裸小小鼠鼠问问世世五五十十多多年年来来，已已广广泛泛应应用用于于肿肿瘤瘤学学、微微生生物物学学、免免疫疫学学、寄寄生生虫虫学学、毒毒理理学学等等基基础础医医学学和和临临床床医学的研究中。医学的研究中。37实用内容 ( (二二) )

48、裸大鼠裸大鼠 裸裸大大鼠鼠(nude (nude rat)rat)在在19531953年年由由英英国国RowettRowett首首先先发发现现，基基因因符符号号为为rnurnu，纯纯合合子子裸裸大大鼠鼠(rnu(rnurnu)rnu)具具有有与与裸裸小小鼠鼠基基本本相相似似的的特特征征，无无胸胸腺腺，缺缺乏乏功功能能性性T T淋淋巴巴细细胞胞，B B细细胞胞功功能能基基本本正正常常，NKNK细细胞胞活活力力增增强强，抵抵抗抗力力差差，易易患患呼呼吸吸道道疾疾病病，繁繁殖殖方方法法与与裸裸小小鼠鼠相相同同，但但躯躯干干部部仍仍有有稀稀少少被被毛毛而而并并非非像像裸裸小小鼠鼠那那样样完完全全无无毛

49、毛，头头部部及及四四肢肢更更多多。裸裸大大鼠鼠同同样样能能接接受受人人类类正正常常组组织织和和肿肿瘤瘤的的异异种种移移植植，但但因因其其体体型型大大，用用一一只只裸裸大大鼠鼠可可为为常常规规血血液液学学和和血血清清生生物物化化学学分分析析实实验验提提供供足足够够的的血血样样，也也可可为为各各种种研研究究提提供供足足够够的的瘤瘤组组织织，同同时时裸裸大大鼠鼠易易于于进进行行外外科科手手术术，为为各各种种部部位位肿肿瘤瘤移移植和肿瘤供血研究提供了方便。植和肿瘤供血研究提供了方便。 38实用内容 ( (三三) ) 性连锁免疫缺陷小鼠性连锁免疫缺陷小鼠 （X-linked X-linked immun

50、e immune deficiency deficiency mousemouse，XIDXID）起起源源于于CBA/NCBA/N品品系系，又又称称CBA/NCBA/N小小鼠鼠，其其B B细细胞胞功功能能缺缺陷陷，基基因因符符号号xidxid，位位于于X X性性染染色色体体上上。纯纯合合子子雌雌鼠鼠(xid/xid)(xid/xid)和和杂杂合合子子雄雄鼠鼠(xid/Y)(xid/Y)对对非非胸胸腺腺依依赖赖性性 型型抗抗原原没没有有体体液液免免疫疫反反应应，血血清清中中IgMIgM和和IgGIgG含含量量较较低低，对对B B细细胞胞分分裂裂素素(B-cell (B-cell mitogens

51、mitogens）缺缺乏乏反反应应，分分泌泌IgMIgM和和IgGIgG亚亚类类的的B B细细胞胞数数量量减减少少，其其T T细细胞胞功功能能正正常常。如如果果移移植植正正常常鼠鼠的的骨骨髓髓到到xidxid宿宿主主，B B细细胞胞缺缺损损可可得得到到恢恢复复。相相反反，把把xidxid鼠鼠的的骨骨髓髓移移植植给给放放射射线线照照射射的的同同系系正正常常宿宿主主，受受体体动动物物仍仍然然表表现现为为不不正正常常的的表表型型。该该模模型型是是研研究究B B淋淋巴巴细细胞胞的的发发生生、功功能能与与异异质质性性理理想想的的动动物物，其其病病理理与与人人类类BrutonBruton丙丙种种球球蛋蛋白

52、白缺缺乏乏症症和和Wzeskott-AidschWzeskott-Aidsch综合征相似。综合征相似。39实用内容 ( (四四) Beige) Beige小鼠小鼠 为为NKNK细细胞胞活活性性缺缺陷陷的的突突变变系系小小鼠鼠，bgbg是是隐隐性性突突变变基基因因，位位于于1313号号染染色色体体上上。纯纯合合鼠鼠(bg/bg)(bg/bg)被被毛毛完完整整，但但毛毛色色变变浅浅，耳耳郭郭和和尾尾尖尖色色素素减减少少，出出生生时时眼眼睛睛颜颜色色很很 淡淡 。 表表 型型 特特 征征 与与 人人 的的 齐齐 - -希希 氏氏 综综 合合 征征 (Chediak-(Chediak-Higashi

53、Higashi syndrome)syndrome)相相似似。其其内内源源性性NKNK细细胞胞功功能能缺缺乏乏，是是由由于于细细胞胞溶溶解解作作用用的的后后识识别别过过程程受受损损伤伤所所致致。纯纯合合bgbg基基因因同同时时还还损损伤伤细细胞胞毒毒T T细细胞胞功功能能，降降低低粒粒细细胞胞趋趋化化性性和和杀杀菌菌活活性性，延延迟迟巨巨噬噬细细胞胞调调节节的的抗抗肿肿瘤瘤杀杀伤伤作作用用的的发发生生，还还影影响响溶溶酶酶体体的的发发生生过过程程，导导致致溶溶酶酶体体膜膜缺缺损损，使使有有关关细细胞胞中中的的溶溶酶酶体体增增大大，溶溶酶酶体体功功能能缺缺陷陷。由由于于溶溶酶酶体体功功能能缺缺陷

54、陷，bgbg对对化化脓脓性性细细菌菌感感染染非非常常敏敏感感，对对各各种种病病原原因因子子也也都都较较敏敏感感，所所以以要要在在SPFSPF或或无无菌菌环环境中才能较好地生存。境中才能较好地生存。40实用内容 ( (五五) ) 严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠 (severe (severe combined combined immunodeficient immunodeficient micemice，SCIDSCID小小鼠鼠) )，19831983年年美美国国学学者者BosmaBosma发发现现于于C.B-17C.B-17近近交交系系，位位于于1616号号染染色色体体scids

55、cid的的单单个个隐隐性性突突变变基基因因所所致致。纯纯合合scidscid基基因因导导致致控控制制淋淋巴巴细细胞胞抗抗原原受受体体基基因因VDJVDJ编编码码顺顺序序的的重重组组酶酶活活性性异异常常，使使VDJVDJ区区域域重重排排，裂裂端端不不能能正正常常连连接接，重重排排后后抗抗原原受受体体基基因因出出现现缺缺失失和和异异常常，进进而而造造成成T T、B B细细胞胞自自身身不不能能分分化化成成特特异异性性功功能能淋淋巴巴细细胞胞。C.B-17C.B-17与与BALB/cAnlcrBALB/cAnlcr是是同同源源近近交交系系，该该品品系系小小鼠鼠除除了了携携带带的的来来自自C C5757

56、BL/kaBL/ka的的免免疫疫球球蛋蛋白白重重链链Igh-Igh-1b1b等等位位基基因因与与BALB/cAnlcrBALB/cAnlcr不不同同外外，两两品品系系小小鼠鼠的的其其余余基基因因完完全全相相同同，故故C.B-17C.B-17的的突突变变系系SCIDSCID小小鼠鼠(C.B-17scid/scid)(C.B-17scid/scid)与与BALB/cAnlcrBALB/cAnlcr的的遗遗传传背背景景基基本本相相同，其同，其H-2H-2抗原均为抗原均为H-2dH-2d。 41实用内容 此此外外，目目前前已已有有C C3 3H-scidH-scid等等其其他他品品系系小小鼠鼠遗遗传传

57、背背景景的的SCIDSCID小小鼠鼠出出现现。SCIDSCID小小鼠鼠外外观观与与普普通通小小鼠鼠无无异异，体体重重发发育育正正常常，但但胸胸腺腺、脾脾、淋淋巴巴结结的的重重量量一一般般均均不不及及正正常常的的3030，组组织织学学上上表表现现为为淋淋巴巴细细胞胞显显著著缺缺乏乏。其其胸胸腺腺多多为为脂脂肪肪组组织织包包围围，没没有有皮皮质质结结构构，仅仅残残存存髓髓质质，主主要要由由类类上上皮皮细细胞胞和和成成纤纤维维细细胞胞构构成成，边边缘缘偶偶见见灶灶状状淋淋巴巴细细胞胞群群。脾脾白白髓髓不不明明显显，红红髓髓正正常常，脾脾小小体体无无淋淋巴巴细细胞胞聚聚集集，主主要要由由网网状状细细胞

58、胞构构成成。淋淋巴巴结结无无明明显显皮皮质质区区，副副皮皮质质区区缺缺失失，呈呈淋淋巴巴细细胞胞脱脱空空状状，由由网网状状细细胞胞所所占占据据。小小肠肠黏黏膜膜下下和和支支气气管管淋淋巴巴集集结结较较少少见见，结结构构内内无无淋淋巴巴细细胞胞聚聚集集。其其骨骨髓髓结结构构正正常常。其其外外周周血血白白细细胞胞较较少少，淋淋巴巴细细胞胞占占白白细细胞总数的胞总数的101020，而正常小鼠应占约，而正常小鼠应占约7070。42实用内容 SCIDSCID小小鼠鼠的的所所有有T T和和B B淋淋巴巴细细胞胞功功能能测测试试均均为为阴阴性性，对对外外源源性性抗抗原原无无细细胞胞免免疫疫及及抗抗体体反反应

59、应，体体内内缺缺乏乏携携带带前前B B细细胞胞、B B细细胞胞和和T T细细胞胞表表面面标标志志的的细细胞胞。但但是是，其其非非淋淋巴巴性性造造血血细细胞胞分分化化不不受受突突变变基基因因的的影影响响，巨巨噬噬细细胞胞、粒粒细细胞胞、巨巨核核细细胞胞、红红细细胞胞等等呈呈正正常常状状态态。自自然然杀杀伤伤(NK)(NK)细细胞胞及及淋淋巴巴因因子子激激活活(LAK)(LAK)细细胞胞也也呈呈正正常常状状态态。值值得得注注意意的的是是少少数数SCIDSCID小小鼠鼠可可出出现现极极小小程程度度的的免免疫疫功功能能恢恢复复，此此即即为为SCIDSCID小小鼠鼠的的渗渗漏漏现现象象。其其渗渗漏漏特特

60、征征不不遗遗传传，但但与与小小鼠鼠年年龄龄、品品系系、饲饲养养环环境境有有关关。在在SPFSPF环环境境下下，SCIDSCID小小鼠鼠寿寿命命可可达达1 1年年，两两性均能生育，但胎仔数只有性均能生育，但胎仔数只有3 35 5个。个。43实用内容 ( (六六) Motheaten) Motheaten小鼠小鼠 突突变变基基因因(me)(me)位位于于第第6 6对对染染色色体体上上，出出生生后后2h2h内内即即可可出出现现皮皮肤肤脓脓肿肿，有有严严重重联联合合免免疫疫缺缺陷陷，表表现现为为对对胸胸腺腺依依赖赖和和不不依依赖赖抗抗原原均均无无反反应应，对对T T、B B细细胞胞分分裂裂素素的的增增

61、殖殖反反应应严严重重受受损损，细细胞胞毒毒和和NKNK细细胞胞活活性性减减低低。纯纯合合型型(me/me)(me/me)还还伴伴有有自自身身免免疫疫的的倾倾向向，免免疫疫复复合合物物可可沉沉积积在在肾肾、肺肺、皮皮肤肤。该该系系小小鼠鼠对对判判别别生生命命早早期期免免疫疫功功能能缺缺陷陷和和某某种种自自身身免免疫疫性性疾疾病病发发生生都都是是有有用用的模型。的模型。44实用内容 ( (七七) ) 人工培育的先天性联合免疫缺陷型小鼠人工培育的先天性联合免疫缺陷型小鼠 国国外外将将分分布布于于3 3种种小小鼠鼠的的3 3个个隐隐性性突突变变基基因因即即NKNK细细胞胞缺缺陷陷的的beigebeig

62、e基基因因、T T细细胞胞缺缺陷陷的的nunu基基因因以以及及B B细细胞胞缺缺陷陷的的xidxid基基因因经经过过杂杂交交、筛筛选选并并导导入入，育育成成了了T T、B B、NKNK细胞三联免疫缺陷的细胞三联免疫缺陷的beige-nude-xidbeige-nude-xid小鼠。小鼠。45实用内容 ( (八八) ) 显性半肢畸形小鼠显性半肢畸形小鼠 (dominant (dominant hemimelia hemimelia mice)mice)其其基基因因符符号号为为DhDh，是是显显性性突突变变基基因因，位位于于1 1号号染染色色体体上上，现现有有品品系系为为B B6 6C C6 6-

63、 -DhDh。纯纯合合子子（ Dh/+Dh/+）缺缺乏乏脾脾脏脏，其其泌泌尿尿系系统统、生生殖殖系系统统、消消化化道道和和骨骨骼骼有有一一定定程程度度的的畸畸形形。畸畸形形发发生生于于早早期期胚胚胎胎的的脏脏壁壁中中胚胚层层。由由于于缺缺脾脾，在在一一定定程程度度上上损损伤伤了了体体液液免免疫疫反反应应。这这种种小小鼠鼠无无需需特特殊殊饲饲养养条条件件。如如果果将将nunu基基因因和和DhDh基基因因结结合合在在一一起起，即即可可培培育出无胸腺和无脾脏的育出无胸腺和无脾脏的La-satLa-sat小鼠。小鼠。 46实用内容47实用内容48实用内容第三节 肿瘤动物模型 肿瘤动物模型(animal

64、 models of tumor)在肿瘤病因学、发病机制及防治等方面的研究上具有重要意义。本节介绍诱发性动物肿瘤模型和动物自发性肿瘤及可移植瘤株。49实用内容 一、诱发性肿瘤动物模型一、诱发性肿瘤动物模型 (animal (animal model model of of induced induced tumor)tumor)指指使使用用致致癌癌因因素素(carcinogens)(carcinogens)在在实实验验条条件件下下诱诱发发动动物物发发生生肿肿瘤瘤的的动动物物模模型型，它它是是进进行行实实验验肿肿瘤瘤学学研研究究的的常常用用方方法法。常常用用于于验验证证可可疑疑致致癌癌因因素素的

65、的作作用用，也也越越来来越越多多地地应应用用于于肿肿瘤瘤发发生生机机理理的的研研究究及及防防治治效效果果的的观观察察上上，在在肿肿瘤瘤病病因因学学、遗遗传传学学、生生物物学学等等方方面面的的研研究究中中有有重重要要地地位位。由由于于诱诱发发因因素素和和条条件件可可人人为为控控制制，诱诱发发率率远远高高于自然发病率，故在肿瘤实验研究中优于自发瘤。于自然发病率，故在肿瘤实验研究中优于自发瘤。 用用于于诱诱发发实实验验性性肿肿瘤瘤的的动动物物种种类类很很多多，它它们们因因种种族族不不同同而而对对相相同同致致癌癌因因素素有有不不同同的的反反应应性性。常常用用的的动动物物以以哺哺乳乳动动物物为为主主，其

66、其中中啮啮齿齿类类动动物物的的使使用用最最多多，应用最广，包括各种大鼠、小鼠、豚鼠等。应用最广，包括各种大鼠、小鼠、豚鼠等。50实用内容 诱诱发发性性肿肿瘤瘤模模型型的的原原理理是是利利用用外外源源性性致致癌癌因因素素引引起起细细胞胞遗遗传传特特性性异异常常而而呈呈现现出出异异常常生生长长和和高高增增殖殖活活性性，形形成成肿肿瘤瘤。致致癌癌因因素素主主要要有有化化学学性性、物物理理性性及及生生 物物 性性 致致 癌癌 物物 ， 而而 化化 学学 性性 致致 癌癌 物物 (chemical (chemical carcinogens)carcinogens)最最常常见见，已已确确知知的的多多达达

67、一一千千余余种种，用用于于诱诱发发实实验验性性肿肿瘤瘤的的种种类类亦亦很很多多，如如苯苯并并芘芘、甲甲基基胆胆蒽蒽、联联苯苯胺胺、亚亚硝硝胺胺类类、黄黄曲曲霉霉毒毒素素类类。各各种种致致癌癌物物的的致致癌癌强强度度、致致癌癌谱谱等等特特性性相相差差较较大大，同同一一种种致致癌癌物物经经不不同同途途径径给给药药所所致致肿肿瘤瘤部部位位或或类类型型可可有有很很大大差差异异。有有些些化化学学性性致致癌癌物物具具有有明明显显的的亲亲器器官官或或组组织织特特性性。因因此此，实实验验工工作作中中应应根根据据需需要要选选用用适适当当致致癌癌物和致癌途径，并确定其他影响因素或实验条件。物和致癌途径，并确定其他

68、影响因素或实验条件。51实用内容 ( (一一) ) 诱发方法诱发方法 诱诱发发性性动动物物肿肿瘤瘤的的诱诱发发方方式式包包括括原原位位诱诱发发和和异异位位诱诱发发。原原位位诱诱发发是是指指将将致致癌癌物物直直接接与与动动物物靶靶组组织织或或靶靶器器官官接接触触而而诱诱发发该该组组织织或或器器官官发发生生肿肿瘤瘤，接接触触方方法法可可通通过过涂涂抹抹、灌灌注注、喂喂养养或或埋埋置置等等；异异位位诱诱发发是是将将与与致致癌癌物物接接触触后后的的动动物物组组织织或或器器官官埋埋置置于于该该动动物物或或另另一一正正常常动动物物皮皮下下而而产产生生的的该该组组织织或或器器官官的的肿肿瘤瘤。异位诱发肿瘤具

69、有易于观察和取材的优点。异位诱发肿瘤具有易于观察和取材的优点。52实用内容 放放射射性性物物质质致致瘤瘤方方法法主主要要是是用用放放射射线线照照射射或或局局部部注射同位素。注射同位素。 能能诱诱发发动动物物肿肿瘤瘤的的病病毒毒亦亦很很多多，例例如如用用小小鼠鼠白白血血病病病病毒毒(murine (murine leuko leuko virusvirus，MLV)MLV)、鸡鸡白白血血病病病病毒毒(fowl (fowl leukosis leukosis virusvirus，FLV)FLV)和和猫猫白白血血病病病病毒毒(feline (feline leukosis leukosis vir

70、us virus ，FeLV)FeLV)分分别别诱诱发发小小鼠鼠、鸡鸡和和猫猫白白血血病病；RousRous鸡鸡肉肉瘤瘤病病毒毒可可诱诱发发田田鼠鼠、鸡鸡、鸭鸭、鹌鹌鹑鹑、猴猴和和蛇蛇等等动动物物发发生生肉肉瘤瘤；猫猫肉肉瘤瘤病病毒毒(feline (feline sarcoma sarcoma virusvirus，FSV)FSV)可可使使大大鼠鼠、猫猫、犬犬和和猴猴发发生生肉肉瘤瘤；人人腺腺病病毒毒能诱发小鼠、田鼠发生肉瘤和淋巴瘤。能诱发小鼠、田鼠发生肉瘤和淋巴瘤。53实用内容 在在进进行行诱诱发发动动物物肿肿瘤瘤的的实实验验中中，应应尽尽量量简简便便可可行行，有有较较好好的的重重复复性性

71、，并并利利于于与与人人肿肿瘤瘤比比较较研研究究；选选择择对对所所用用致致癌癌物物敏敏感感的的方方法法和和种种系系动动物物。致致癌癌物物的的剂剂量量应应能能保保证证动动物物存存活活率率较较高高、诱诱发发期期较较短短而而又又可可诱诱发较高频率的肿瘤。发较高频率的肿瘤。 常常用用的的给给药药基基本本方方法法和和途途径径有有口口服服、注注入入、埋埋藏藏和涂抹等方式。和涂抹等方式。 1 1涂抹法涂抹法 将将致致癌癌物物涂涂抹抹于于动动物物背背侧侧及及耳耳部部皮皮肤肤，主主要要用用于于诱诱发发皮皮肤肤肿肿瘤瘤( (如如乳乳头头状状瘤瘤、鳞鳞癌癌等等) )。常常用用的的致致癌癌物有煤焦油、物有煤焦油、3 3

72、，4-4-苯并芘及苯并芘及20-20-甲基胆蒽等。甲基胆蒽等。54实用内容 2 2经口给药法经口给药法 本本法法是是将将化化学学致致癌癌物物溶溶于于饮饮水水或或以以某某种种方方式式混混合合于于动动物物食食物物中中自自然然喂喂养养或或灌灌喂喂动动物物而而使使之之发发生生肿肿瘤瘤。食管癌、胃癌、大肠癌等肿瘤常用此方法。食管癌、胃癌、大肠癌等肿瘤常用此方法。 3 3注射法注射法 注注射射法法是是将将化化学学致致癌癌物物制制成成溶溶液液或或悬悬浮浮物物，经经皮皮下下、肌肌肉肉、静静脉脉或或体体腔腔等等途途径径注注入入体体内内而而诱诱发发肿肿瘤瘤。本法亦常用，其中皮下和静脉注射又最常用。本法亦常用，其中

73、皮下和静脉注射又最常用。 4 4气管灌注法气管灌注法 常常用用于于诱诱发发肺肺癌癌。将将颗颗粒粒性性致致癌癌物物制制成成悬悬浮浮液液直直接接注注入入或或用用导导液液管管注注入入动动物物气气管管内内。多多使使用用金金仓仓鼠鼠和大鼠为实验动物。和大鼠为实验动物。55实用内容 5 5穿线法穿线法 适适用用于于将将多多环环芳芳烃烃类类致致癌癌物物直直接接置置于于某某特特定定部部位位或或器器官官，如如宫宫颈颈、食食管管和和腺腺胃胃等等。方方法法是是将将一一定定量量的的致致癌癌物物放放置置于于无无菌菌试试管管内内，加加热热使使致致癌癌物物升升华华，吸吸附附于于预预制制的的线线结结上上；将将含含有有致致癌癌

74、物物的的线线结结穿穿人人靶靶器官或靶组织而诱发肿瘤。器官或靶组织而诱发肿瘤。 6 6埋藏法埋藏法 将将致致癌癌物物包包埋埋于于皮皮下下或或其其他他组组织织内内，或或将将经经致致癌癌物物作作用用过过的的器器官官、组组织织移移植植于于同同种种或或同同种种系系动动物物皮皮下进行肿瘤的诱发实验。下进行肿瘤的诱发实验。56实用内容 ( (二二) ) 常见肿瘤的动物模型常见肿瘤的动物模型 1 1肺癌肺癌(carcinoma of the lung)(carcinoma of the lung) 诱发模型较多，方法也很成熟。常用方法有：诱发模型较多，方法也很成熟。常用方法有： (1) (1) 二二乙乙基基亚

75、亚硝硝胺胺(DEN)(DEN)诱诱发发小小鼠鼠肺肺癌癌模模型型：采采用用小小白白鼠鼠每每周周皮皮下下注注射射l%DENl%DEN水水溶溶液液一一次次( (剂剂量量为为56mg/kg56mg/kg体体重重，总总剂剂量量为为868mg)868mg)。观观察察时时间间100100天天左左右右。此此模模型型诱诱发发率率约约4040。若若将将DENDEN总总剂剂量量增增到到1176mg1176mg时，半年诱发率可达时，半年诱发率可达9090以上。以上。57实用内容 (2) (2) 乌拉坦诱发肺多发性肿瘤模型乌拉坦诱发肺多发性肿瘤模型 采采用用A A系系小小鼠鼠(1(11.51.5月月龄龄) )，每每次次

76、每每只只腹腹腔腔注注射射1010乌乌拉拉坦坦生生理理盐盐水水液液0.10.10.3ml0.3ml，间间隔隔3 35 5天天，共共注注射射2 23 3个个月月，每每只只动动物物用用量量共共约约100mg100mg。观观察察3 3个个月月，诱发率可达诱发率可达100100。 (3) (3) 气管内灌注致癌物诱发肺癌模型气管内灌注致癌物诱发肺癌模型 向向气气管管内内注注入入苯苯并并芘芘、硫硫酸酸铵铵气气溶溶胶胶或或甲甲基基胆胆蒽蒽等等物物质质。常常用用的的有有：猴猴气气管管内内灌灌注注3,4-3,4-苯苯并并芘芘与与氧氧化化铁铁的的混混合合液液，每每周周1 1次次，共共1010次次，可可诱诱发发肺肺

77、鳞鳞状状细细胞癌。胞癌。大鼠吸入硫酸铵气溶剂可诱发肺腺癌。大鼠吸入硫酸铵气溶剂可诱发肺腺癌。58实用内容 2 2鼻咽癌鼻咽癌(nasopharyngeal(nasopharyngealcarcinoma)carcinoma) (1) (1) 二甲基胆蒽二甲基胆蒽(DMC)(DMC)诱发大鼠鼻咽癌模型诱发大鼠鼻咽癌模型 将将结结晶晶DMCDMC置置于于锥锥形形塑塑料料管管中中( (可可用用直直径径2 23mm3mm硬硬质质塑塑料料管管在在酒酒精精灯灯上上拉拉制制) )，使使塑塑料料管管尖尖端端进进入入并并长长期期留留置置鼻鼻咽咽腔腔。MCMC循循小小孔孔缓缓慢慢溢溢出出，至至半半年年以以上上，取

78、材。诱发率可达取材。诱发率可达6060以上。以上。 (2) (2) 二乙基亚硝胺二乙基亚硝胺(DEN)(DEN)滴鼻法诱发大鼠鼻咽癌滴鼻法诱发大鼠鼻咽癌 用用磨磨平平针针尖尖的的8 8号号针针头头从从前前鼻鼻插插入入大大白白鼠鼠( (体体重重120g120g左左右右) )鼻鼻咽咽腔腔，经经注注射射器器灌灌注注1 1吐吐温温8080新新配配的的33.333.3DENDEN混悬液混悬液0.02m10.02m1，每周，每周1 1次，共次，共15152020次。次。59实用内容 3 3食管癌食管癌(carcinoma of the esophagus)(carcinoma of the esophag

79、us) (1) (1) 甲基苄基亚硝胺甲基苄基亚硝胺(MBNA)(MBNA)诱发大鼠食管癌模型诱发大鼠食管癌模型 将将MBNAMBNA溶溶于于饮饮水水中中，并并掺掺人人饲饲料料，喂喂养养WistarWistar大大鼠鼠( (体体重重100g100g以以上上) )，使使之之每每日日摄摄入入量量达达0.750.751.5mg/kg1.5mg/kg体体重重，经经3 3个个月月左左右右可可诱诱发发食食管管癌癌。亦亦可可用用0.20.2或或0.0050.005MBNAMBNA水水溶溶液液给给大大鼠鼠经经口口灌灌喂喂，每每天天1 1次次(1mg/kg(1mg/kg体体重重) )，经，经1111个月可使诱发

80、率达个月可使诱发率达5353。 (2) (2) 二烃黄樟素二烃黄樟素(Dihydrosaforle)(Dihydrosaforle)诱发大鼠食管癌模型诱发大鼠食管癌模型 将将二二烃烃黄黄樟樟素素加加入入大大鼠鼠饲饲料料( (浓浓度度2500250010000mg/kg)10000mg/kg)喂养大鼠，诱发率达喂养大鼠，诱发率达20207575。60实用内容 4 4胃癌胃癌(carcinoma of the stomach)(carcinoma of the stomach) (1) (1) 甲基胆蒽甲基胆蒽(MC)(MC)诱发小鼠胃癌模型诱发小鼠胃癌模型 用用细细线线打打结结后后，使使MCMC

81、加加温温液液化化并并渗渗人人线线结结中中；小小鼠鼠( (体体重重20g20g左左右右) )腺腺胃胃粘粘膜膜面面穿穿挂挂含含MCMC的的线线结结。埋埋线线后后4 48 8个个周周可可成成功功地地诱诱发发胃胃癌癌。MCMC的的浓浓度度为为0.50.50.1g 20-0.1g 20-甲基胆蒽浸入甲基胆蒽浸入10102020根线。根线。 (2)(2)不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌模型不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌模型 用用0.25mg/kg0.25mg/kg体体重重的的不不对对称称亚亚硝硝胺胺，经经7 78 8个个月月可可诱发昆明种小鼠前胃癌。诱发昆明种小鼠前胃癌。 61实用内容 (3) (3) 甲基亚硝基醋酸尿

82、素诱发大鼠胃癌模型甲基亚硝基醋酸尿素诱发大鼠胃癌模型 在在SDSD大大鼠鼠饮饮水水中中按按2mg/kg2mg/kg体体重重加加入入甲甲基基亚亚硝硝基基醋醋酸酸尿尿素素，每每周周5 5次次饮饮用用，经经520520天天可可使使100100大大鼠鼠发发生生腺胃癌。腺胃癌。 (4) (4) 金黄仓鼠胃癌模型金黄仓鼠胃癌模型 雄雄 性性 金金 黄黄 仓仓 鼠鼠 口口 服服 甲甲 基基 硝硝 基基 亚亚 硝硝 基基 胍胍(MNNG)(MNNG)（83ug/m183ug/m1）4 4个个月月，约约1 1年年后后30304040的的仓仓鼠鼠发发生生胃胃腺腺癌癌并并出出现现局局部部转转移移。亦亦可可用用浓浓度

83、度为为91ug/ml91ug/ml的的乙乙基基硝硝基基亚亚硝硝基基胍胍(ENNG)(ENNG)口口服服喂喂养养雄雄性性金黄仓鼠金黄仓鼠1212个个月，可诱发胃腺癌和十二指肠腺癌。月，可诱发胃腺癌和十二指肠腺癌。 此此外外，用用MNNGMNNG（125ug/ml125ug/ml水水溶溶液液）经经口口给给药药，亦可使亦可使A/JmsA/Jms、RP/JmsRP/Jms等系小鼠诱发胃癌。等系小鼠诱发胃癌。62实用内容 (5) (5) 甲基苄基亚硝胺甲基苄基亚硝胺(MBNA)(MBNA)诱发小鼠前胃癌模型诱发小鼠前胃癌模型 选选用用A A系系、昆昆明明种种或或615615系系小小鼠鼠，以以每每天天0.

84、250.25或或1mg/kg1mg/kg体体重重的的剂剂量量用用40.0740.07MBNAMBNA水水溶溶液液灌灌胃胃，每每天天1 1次次。第第7 78 8个个月月可可诱诱发发出出8585100100的的前前胃胃鳞鳞状细胞癌。状细胞癌。 (6) (6) 肌氨酸乙酯和亚硝酸钠诱发鸡胃癌模型肌氨酸乙酯和亚硝酸钠诱发鸡胃癌模型 采采用用6 6月月龄龄林林县县家家鸡鸡，喂喂以以肌肌氨氨酸酸乙乙酯酯及及亚亚硝硝酸酸钠钠，诱发家鸡腺胃腺癌。诱发家鸡腺胃腺癌。63实用内容 5. 5. 大肠癌大肠癌(carcinoma of the large intestine)(carcinoma of the lar

85、ge intestine) (1) (1) 二甲基苄肼（二甲基苄肼（DMHDMH）诱发大肠癌模型）诱发大肠癌模型 将将DMHDMH先先配配成成浓浓度度为为100ml100ml中中含含400mg400mg的的溶溶液液，加加入入EDTA27mgEDTA27mg，用用0.1mol/LNaOH0.1mol/LNaOH将将pHpH值值调调整整至至6.56.5。用用上上述述DMHDMH经经皮皮下下注注射射给给4 4周周龄龄雄雄性性WistarWistar大大鼠鼠，每每次次剂剂量量21mg/kg21mg/kg体体重重，每每周周1 1次次，连连续续2121周周；最最后后一一次次给给药后药后l l4 4周处死动

86、物。周处死动物。 (2) (2) 甲基硝基亚硝基胍甲基硝基亚硝基胍(MNNG)(MNNG)诱发大鼠大肠癌模型诱发大鼠大肠癌模型用用MNNGMNNG在在WistarWistar大鼠采用直肠灌人法诱发大肠癌。大鼠采用直肠灌人法诱发大肠癌。64实用内容 6 6肝癌肝癌(carcinoma of the liver)(carcinoma of the liver) (1) (1) 二乙基亚硝胺二乙基亚硝胺(DEN)(DEN)诱发大白鼠肝癌模型诱发大白鼠肝癌模型 0.250.25DENDEN水水溶溶液液灌灌胃胃( (按按10mg/kg10mg/kg体体重重) )，每每周周剩剩余余6d6d用用0.0250

87、.025DENDEN水水溶溶液液让让其其自自由由饮饮用用。共共约约4 4个个月月即即可可诱诱发发出出肝肝癌癌，5 56 6个个月月诱诱癌癌率率达达8080以以上上。亦可用亦可用0.0050.005DENDEN的饮水喂养的饮水喂养8 8个月诱发。个月诱发。 (2) 4-(2) 4-二甲基氨基偶氮苯二甲基氨基偶氮苯(DAB)(DAB)诱发大鼠肝癌模型诱发大鼠肝癌模型 使使用用含含有有0.060.06DABDAB的的饲饲料料喂喂养养大大鼠鼠，同同时时控控制制饲饲料料中中维维生生素素B B2 2含含量量( (不不超超过过1.51.52mg/kg2mg/kg体体重重) )。经经4 46 6个月可诱发成功

88、。个月可诱发成功。65实用内容 (3) 2- (3) 2-乙酰氨基芴乙酰氨基芴(2AAF)(2AAF)诱发动物肝癌诱发动物肝癌 给给成成年年大大鼠鼠含含0.030.032AAF2AAF标标准准饲饲料料，每每日日每每只只2 23mg2AAF3mg2AAF，经经3 34 4个个月月即即可可诱诱发发成成功功。此此方方法法也也可用于诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔等动物肝癌。可用于诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔等动物肝癌。 (4) (4) 亚胺基偶氮甲苯亚胺基偶氮甲苯(OAAT)(OAAT)诱发小鼠肝癌诱发小鼠肝癌 用用1 1OAATOAAT苯苯溶溶液液涂涂于于动动物物两两肩肩胛胛间间皮皮肤肤上上，隔隔日日1 1次

89、次，每每次次2 23 3滴滴，一一般般涂涂100100次次。7 7个个月月以以上上诱诱发发肝肝肿肿瘤瘤率率5555。亦亦可可用用2.5mgOAAT2.5mgOAAT溶溶于于葵葵花花籽籽油油中中，皮下注射皮下注射C C3 3H H小鼠，每小鼠，每1010天一次。天一次。 (5) (5) 黄曲霉素诱发大鼠肝癌黄曲霉素诱发大鼠肝癌 在在 大大 鼠鼠 饲饲 料料 中中 加加 入入 黄黄 曲曲 霉霉 素素 ， 含含 0.0110.0110.015mg/kg0.015mg/kg，喂养，喂养6 6个月，诱发率达个月，诱发率达8080。66实用内容 (6) (6) 二甲氨诱发肝癌模型二甲氨诱发肝癌模型 将将二

90、二甲甲氨氨用用食食用用菜菜油油配配制制成成3 3的的溶溶液液，按按98g98g精精白白碎碎米米加加2ml 2ml 3%3%二二甲甲氨氨溶溶液液的的比比例例配配制制饲饲料料( (相相当当于于每每克克碎碎米米含含0.06mg0.06mg二二甲甲氨氨) )，喂喂养养雄雄性性大大白白鼠鼠( (体体重重150150200g)4200g)46 6周周，停停药药1 1周周( (以以精精白白碎碎米米代代替替) )，后后改改用用基基础础饲饲料料加加0.120.12二二甲甲氨氨继继续续喂喂养养12121313周周，即可诱发出肝癌。即可诱发出肝癌。 (7) (7) 黄曲霉素黄曲霉素B B2 2诱发麻鸭肝癌模型诱发麻

91、鸭肝癌模型 采采用用半半月月龄龄雏雏鸭鸭，自自由由食食取取肝肝癌癌高高发发区区启启东东霉霉玉玉米米配配合合饲饲料料( (内内含含黄黄曲曲霉霉素素B B1 1) )，同同时时饮饮高高发发区区浅浅井井水，直至动物自然死亡，可见麻鸭发生肝细胞癌。水，直至动物自然死亡，可见麻鸭发生肝细胞癌。67实用内容 7 7脑肿瘤脑肿瘤(brain tumor)(brain tumor) (1) (1) 乙基亚硝基脲乙基亚硝基脲(ENU)(ENU)诱发大鼠胶质瘤诱发大鼠胶质瘤 用用0.50.51 1ENUENU按按60mg/kg60mg/kg体体重重给给药药于于WistarWistar大大鼠鼠。给给药药途途径径有有

92、两两种种，即即经经孕孕鼠鼠胎胎盘盘给给药药致致其其子子代代鼠鼠成成瘤瘤和和经经新新生生幼幼鼠鼠皮皮下下给给药药致致瘤瘤。前前者者是是选选用用正正常常妊妊娠娠的的健健康康WistarWistar大大鼠鼠( (体体重重340g340g左左右右) )，在在妊妊娠娠晚晚期期( (距距预预产产期期前前7 7天天) )经经尾尾静静脉脉一一次次性性缓缓慢慢注注射射1 1ENUENU溶溶液液；后后者者是是选选用用3 3日日龄龄健健康康WistarWistar大大鼠鼠( (体体重重约约4g)4g)，于于肩肩胛胛部部或或腰腰骶骶部部一一次次性性皮皮下下注注射射0.50.5ENUENU溶溶液液。观观察察1212个个

93、月月，诱诱发发出出脑脑、脊脊髓髓胶胶质质瘤瘤。用用此此方方法法诱诱发发的的胶胶质质瘤瘤在在组组织织学学上上以以混混合合性性少少突突星星形形细细胞瘤为主，偶伴发肾纤维肉瘤和肺癌。胞瘤为主，偶伴发肾纤维肉瘤和肺癌。68实用内容 (2) (2) 甲基胆蒽甲基胆蒽(MC)(MC)诱发脑肿瘤诱发脑肿瘤 藏藏旭旭等等用用2020MCMC的的胆胆固固醇醇小小块块埋埋入入A A系系、C C3 3HAHA系系或或昆昆明明种种小小鼠鼠大大脑脑顶顶部部皮皮层层内内，诱诱发发出出大大脑脑胶胶质质瘤和纤维肉瘤。瘤和纤维肉瘤。 8. 8. 宫颈癌宫颈癌(cervical carcinoma)(cervical carci

94、noma) 用用穿穿线线法法将将附附有有0.1mgMC0.1mgMC的的棉棉纱纱线线结结穿穿入入雌雌性性小小白白鼠鼠的的宫宫颈颈部部，并并固固定定缝缝线线。观观察察半半年年左左右右处处死死动动物，取宫颈组织。物，取宫颈组织。69实用内容 二、动物自发性肿瘤及移植瘤株二、动物自发性肿瘤及移植瘤株 人人类类肿肿瘤瘤在在实实验验动动物物中中几几乎乎都都能能找找到到相相似似的的肿肿瘤瘤性性疾疾病病。利利用用高高发发病病率率品品系系动动物物研研究究自自发发性性肿肿瘤瘤性性疾疾病病，更更能能接接近近人人群群发发病病情情况况，对对研研究究人人体体肿肿瘤瘤的的防治有重要意义。防治有重要意义。 70实用内容 动

95、动物物自自发发性性肿肿瘤瘤(spontaneous (spontaneous tumors tumors in in animals)animals)是是指指实实验验动动物物未未经经任任何何有有意意识识的的人人工工处处置置，在在自自然然情情况况下下所所发发生生的的肿肿瘤瘤。动动物物自自发发瘤瘤发发生生于于近近交交系系动动物物，随随实实验验动动物物种种属属、品品系系的的不不同同，肿肿瘤瘤发发生生类类型型和和发发病病率率有有很很大大差差异异。其其中中，小小鼠鼠的的各各种种自自发发性性肿肿瘤瘤在在肿肿瘤瘤发发生生、发发展展的的研研究究中中具具有有重重要要意意义义。自自发发性性肿肿瘤瘤模模型型与与诱诱

96、发发性性肿肿瘤瘤模模型型具具有有一一定定差差异异( (如如对对药药物物的的敏敏感感性性是是不不同同的的) )，但但大大部部分分自自发发性性肿肿瘤瘤动动物物模模型型是是通通过过人人为为定定向向培培养养而而成成的的，毕毕竟竟不不同同于于人人类类自自然然发发病病情情况况，因因此此自自发发瘤瘤模模型型和和诱诱发发瘤瘤模模型型之之间间优优缺点是相对的。缺点是相对的。 目前研究自发瘤的动物主要为哺乳类和鸟类。目前研究自发瘤的动物主要为哺乳类和鸟类。71实用内容 ( (一一) ) 动物移植瘤瘤株动物移植瘤瘤株 肿肿瘤瘤移移植植实实验验在在肿肿瘤瘤研研究究中中具具有有重重要要作作用用。动动物物自自发发瘤瘤可可

97、移移植植性性肿肿瘤瘤就就是是将将动动物物自自发发性性肿肿瘤瘤移移植植到到同同系系、同同种种或或异异种种动动物物体体内内生生长长并并经经传传代代后后组组织织学学类类型型稳稳定定，生生长长特特性性( (包包括括接接种种成成活活率率、生生长长速速度度、自自动动消消退退率率、宿宿主主寿寿命命与与宿宿主主反反应应等等) )已已趋趋稳稳定定；其其侵侵袭袭和和转转移移的的生生物物学学特特性性，以以及及对对化化疗疗药药物物的的敏敏感感程程度度均均已已确确定定；能能在在同同种种或或异异种种动动物物体体内内继继续续传传代代，形成可移植性肿瘤即瘤株。形成可移植性肿瘤即瘤株。72实用内容 移移植植瘤瘤株株的的稳稳定定

98、性性至至关关重重要要。为为了了达达到到可可靠靠的的稳稳定定性性，通通常常需需连连续续传传代代15152020代代。但但即即使使已已建建立立的的瘤瘤株株再再传传代代后后，其其生生物物学学特特性性亦亦可可发发生生一一定定程程度度的的改改变变，如如形形态态学学上上的的改改变变、恶恶性性程程度度以以及及转转移移特特性性的变化等。的变化等。 移移植植瘤瘤的的建建立立方方法法一一般般是是选选择择自自发发瘤瘤或或诱诱发发瘤瘤组组织织块块，无无菌菌条条件件下下放放人人组组织织培培养养皿皿内内，按按1 1（3 35 5）的的比比例例加加入入灭灭菌菌生生理理盐盐水水，制制成成瘤瘤细细胞胞悬悬液液。取取浓浓度度约约

99、为为10106 610107 7/ml/ml的的细细胞胞悬悬液液0.2ml0.2ml接接种种于于同同系系雌雌性性小小鼠鼠皮皮下下。如如此此传传代代，使使其其移移植植成成功功率率、生生物物学学特性等趋于稳定。亦可采用组织块接种法。特性等趋于稳定。亦可采用组织块接种法。 腹腹水水瘤瘤的的移移植植方方法法为为直直接接将将抽抽取取的的含含瘤瘤细细胞胞的的腹腹水水(0.1(0.10.2ml0.2ml）接种于动物腹腔。）接种于动物腹腔。73实用内容 ( (二二) ) 常用动物自发瘤移植瘤株常用动物自发瘤移植瘤株 1 1小鼠可移植性乳腺癌小鼠可移植性乳腺癌 黄黄华华漳漳等等于于19731973年年采采用用T

100、ATA2 2系系小小鼠鼠自自发发乳乳腺腺癌癌，接接种种同同系系雌雌性性小小鼠鼠皮皮下下，建建立立移移植植瘤瘤成成功功。孙孙文文义义等等亦亦建建立立了了TATA2 2系系小小鼠鼠自自发发B B型型乳乳腺腺癌癌瘤瘤株株MA-737MA-737，该该移移植植瘤瘤具具有有肺肺转转移移和和侵侵袭袭腹腹腔腔特特性性。此此后后又又相相继继在在615615系系小小鼠鼠自自发发B B型型乳乳腺腺癌癌建建立立瘤瘤株株( (如如郑郑升升等等建建立立的的Ca615Ca615，张张鸿鸿翔翔等等建建立立的的MC-615MC-615，刘刘金金友友等等建建立立的的Ca759Ca759和和Ca763Ca763，刘刘世世叶叶等等

101、建建立立的的Ma782/5SMa782/5S，张张众众等等建建立立的的B B0 0和和B B9 9。中中国国医医学学科科学学院院建建立立的的MAC887MAC887和和MAC-891MAC-891，还还建建立立了了为为数数不不多多的的小小鼠鼠自自发发型型乳乳腺腺癌癌可可移移植植性性瘤瘤株株( (如如钱钱振振超超等等建建立立的的Ca761Ca761及及中中国国医医学科学院建立的学科学院建立的MAC-8712MAC-8712等等) )。74实用内容 魏魏泓泓等等于于19891989年年用用BALB/cBALB/c雌雌性性小小鼠鼠自自发发乳乳腺腺梭梭形形细细胞胞癌癌，建建立立了了可可移移植植性性乳乳

102、腺腺梭梭形形细细胞胞癌癌株株SCC-SCC-891891，生生物物学学特特性性稳稳定定，不不出出现现肿肿瘤瘤自自然然消消退退现现象象；对对抗抗癌癌药药的的敏敏感感性性广广泛泛。这这一一特特殊殊类类型型的的乳乳腺腺肿肿瘤瘤瘤瘤株株的的建建立立为为实实验验肿肿瘤瘤药药及及抗抗癌癌药药筛筛选选提提供供了了有有用用的的研研究究工工具具，同同时时由由于于使使用用了了应应用用最最广广泛泛的的近近交交系系BALB/cBALB/c小鼠而方便了该瘤株的研究和使用。小鼠而方便了该瘤株的研究和使用。 除除上上述述品品系系的的小小鼠鼠外外，沈沈德德钧钧等等于于19901990年年用用1212月月龄龄NIHNIH雌雌性

103、性种种小小鼠鼠自自发发B B型型乳乳腺腺癌癌在在同同系系小小鼠鼠皮皮下下移移植，传代建立了植，传代建立了ZMB-902ZMB-902瘤株。瘤株。75实用内容 2 2小鼠可移植性肺腺癌小鼠可移植性肺腺癌 吴吴德德全全等等于于19761976年年用用1818月月龄龄雄雄性性615615系系小小鼠鼠自自发发肺肺乳乳头头状状腺腺癌癌组组织织采采取取埋埋块块法法在在同同系系成成年年小小鼠鼠皮皮下下移移植植及及传传代代，建建立立P615P615瘤瘤株株。该该瘤瘤株株可可在在CFWX615CFWX615系系小小鼠鼠皮皮下下移移植植，成成功功率率达达100100，腹腹腔腔内内移移植植成成功功率率达达10010

104、0。钱钱振振超超等等于于19781978年年也也建建立立了了615615近近交交系系小小鼠鼠肺肺腺腺癌癌瘤瘤株株HP615HP615，马马克克韶韶等等采采用用615615系系雄雄性性小小鼠鼠与与昆昆明明种种雌雌性性小小鼠鼠培培养养出出的的T T739739近近交交系系小小鼠鼠自自发发乳乳头头型型肺肺腺腺癌癌建建立立移移植植瘤瘤株株LA-795LA-795，具具有有高高侵侵袭袭性性转转移移率。率。 76实用内容 3 3小鼠可移植性肝癌小鼠可移植性肝癌 小小鼠鼠肝肝癌癌瘤瘤株株的的建建立立可可通通过过动动物物自自发发瘤瘤或或化化学学诱诱发发瘤瘤。钱钱振振超超等等用用1010月月龄龄第第5l5l代代

105、经经产产雌雌615615系系小小鼠鼠自自发发性性肝肝细细胞胞癌癌，在在同同系系小小鼠鼠建建立立了了H615H615瘤瘤株株；强强家家模模等等用用二二乙乙基基亚亚硝硝胺胺(DENA)(DENA)喂喂WistarWistar大大鼠鼠诱诱发发肝肝细细胞胞癌癌，移移植植到到经经免免疫疫抑抑制制WistarWistar幼幼大大鼠鼠腹腹腔腔内内并并传传代代。亦亦可可皮皮下下或或肝肝内内移移植植，建建株株各各代代宿宿主主血血清清甲甲胎胎蛋蛋白白(a-fetoprotein(a-fetoprotein，AFP)AFP)均阳性。均阳性。77实用内容 4 4小鼠可移植性宫颈癌小鼠可移植性宫颈癌 小小鼠鼠宫宫颈颈癌

106、癌瘤瘤株株多多用用诱诱发发瘤瘤移移植植建建立立。杨杨滋滋等等于于19581958年年采采用用含含20-20-甲甲基基胆胆蒽蒽的的线线结结穿穿入入KMKM幼幼鼠鼠宫宫颈颈诱诱发发出出鳞鳞状状细细胞胞癌癌后后，接接种种KMKM雌雌小小鼠鼠皮皮下下移移植植及及传传代代，建建立立小小鼠鼠宫宫颈颈未未分分化化癌癌瘤瘤株株U14U14，移移植植成成功功率率达达96.796.7。薛薛克克勋勋等等于于19861986年年用用U14U14瘤瘤株株复复苏苏后后移移植植于于615615雌雌小小鼠鼠皮皮下下并并传传代代，仍仍保保持持原原生生物物学学特特性性，移移植率达植率达100100。 5 5小鼠可移植性食管癌小鼠

107、可移植性食管癌 国国内内建建立立的的小小鼠鼠可可移移植植性性食食管管癌癌瘤瘤株株较较少少，主主要要是是丁丁瑞瑞等等建建立立的的SGA-73SGA-73食食管管鳞鳞癌癌瘤瘤株株。该该瘤瘤株株是是由由甲甲基基胆胆蒽蒽异异位位诱诱发发津津白白1 1系系小小鼠鼠食食管管鳞鳞癌癌在在同同系系小小鼠鼠皮下移植，传代而建立，已传皮下移植，传代而建立，已传4040代以上。代以上。78实用内容 6 6小鼠可移植性胃肿瘤小鼠可移植性胃肿瘤 2020世世纪纪7070年年代代国国内内先先后后建建立立了了几几个个胃胃肿肿瘤瘤瘤瘤株株。林林柄柄水水等等用用甲甲基基亚亚硝硝基基脲脲灌灌胃胃法法诱诱发发津津白白1 1系系小小

108、鼠鼠前前胃胃鳞鳞状状细细胞胞癌癌，在在同同系系小小鼠鼠皮皮下下移移植植、传传代代，建建立立GS-741GS-741瘤瘤株株。李李宝宝贵贵等等利利用用甲甲基基苄苄基基亚亚硝硝胺胺灌灌喂喂615615系系小小鼠鼠胃胃鳞鳞癌癌，同同系系小小鼠鼠皮皮下下移移植植后后传传代代，建建立立FCFC瘤瘤株株。之之后后，林林炳炳水水等等又又用用甲甲基基胆胆蒽蒽原原位位挂挂线线法法在在津津白白2 2系系小小鼠鼠诱诱发发胃胃纤纤维维肉肉瘤瘤并并建建株株S-784S-784。该该瘤瘤株株传传百百多多代代，生生物物学学特特性性稳稳定定。FCFC瘤瘤株株还还具具有有侵侵袭袭肌肌组织能力和很高的肺转移率（组织能力和很高的肺

109、转移率（86869090) )。79实用内容 7 7小鼠可移植性脑胶质母细胞瘤小鼠可移植性脑胶质母细胞瘤 早早在在19571957年年，中中央央卫卫生生研研究究院院( (现现中中国国医医学学科科学学院院) )病病理理室室就就采采用用20-20-甲甲基基胆胆蒽蒽溶溶于于胆胆固固醇醇中中，埋埋置置于于KMKM小小鼠鼠大大脑脑皮皮层层诱诱法法的的未未分分化化神神经经胶胶质质瘤瘤( (即即胶胶质质母母细细胞胞瘤瘤) )在在同同系系小小鼠鼠皮皮下下移移植植及及传传代代建建立立B22B22瘤瘤株株。移移植植成成功功率率达达100100，已已传传数数百百代代，平平均均生生存存时时间间为为2 24 4周周。陈

110、陈炳炳恒恒等等于于19641964年年用用上上述述相相似似方方法法也也建建立立KMKM小小鼠鼠可可移移植植性性胶胶质质母母细细胞胞瘤瘤株株G422G422，可可在在同同系系小小鼠鼠皮皮下下、肌肌肉肉、脑脑内内移移植植( (成成功功率率均均为为100100) )，已已传传350350余余代代，无无自自发发消消退退。尚尚未未见见采采用用动动物物自自发发脑脑瘤瘤建株的报道。建株的报道。80实用内容 8. 8. 动物可移植性肉瘤动物可移植性肉瘤 刘刘家家勇勇等等于于19781978年年TATA1 1系系小小鼠鼠自自发发性性纤纤维维肉肉瘤瘤同同系系雄雄小小鼠鼠皮皮下下移移植植并并传传代代，建建立立小小鼠

111、鼠可可移移植植性性纤纤维维肉肉瘤瘤瘤瘤株株，移移植植成成功功率率100100，已已传传8686代代。李李殿殿俊俊等等用用3 3，4-4-苯苯并并芘芘诱诱发发的的WKAWKA大大鼠鼠皮皮下下纤纤维维肉肉瘤瘤移移植植于于经经免免疫疫抑抑制制的的同同系系大大鼠鼠皮皮下下，建建立立WBT-2WBT-2大大鼠鼠可可移移植植性性纤纤维维肉肉瘤瘤瘤瘤株株，移移植植成成功功率率达达100100（包包括括肌肌肉肉、腹腹腔腔移移植植），无无自自然然消消退退现现象象。以以此此瘤瘤株株经经WKAWKA大大鼠鼠静静脉脉接接种种，多多次次连连续续移移植植，又又建建立立了了可可移移植植性性肺肺转转移移肉肉瘤瘤瘤瘤株株WBT

112、-2MWBT-2M，其其肺肺转转移移率率可可达达100100。此此后后于于19811981年年国国内内又又建建立立615615系系小小鼠鼠纤纤维维肉肉瘤瘤瘤瘤株株FSCFSC。它它是是由由甲甲基基胆胆蒽蒽碘碘油油皮皮下下注注射射诱诱发发的的纤纤维维肉肉瘤瘤经经移移植传代而建立的。植传代而建立的。81实用内容 滑滑膜膜肉肉瘤瘤是是动动物物的的一一种种少少见见肿肿瘤瘤，钱钱振振超超等等利利用用615615系系小小鼠鼠自自发发性性滑滑膜膜肉肉瘤瘤在在同同系系小小鼠鼠皮皮下下移移植植和和传传代，建立代，建立ZM755ZM755瘤株，并已传瘤株，并已传200200多代。多代。 除除大大鼠鼠和和小小鼠鼠外

113、外的的其其他他动动物物可可移移植植性性肉肉瘤瘤报报道道很很少少。章章魁魁华华等等于于19821982年年应应用用二二甲甲基基苯苯并并蒽蒽丙丙酮酮液液在在叙叙利利亚亚金金黄黄地地鼠鼠采采取取涂涂抹抹颊颊囊囊粘粘膜膜的的方方法法诱诱发发颊颊肉肉瘤瘤（组组织织起起源源不不明明），并并在在同同种种封封闭闭群群小小鼠鼠颊颊粘粘膜膜下下、皮皮下下或或腹腹腔腔内内移移植植或或传传代代，成成功功率率均均为为100100。移移植植后后具具有有侵侵袭袭周周围围组组织织能能力力和和肺肺及及淋淋巴巴结结转转移移性性( (转移率分别为转移率分别为9 9和和1212) )。82实用内容 9 9小鼠可移植性淋巴造血系肿瘤小

114、鼠可移植性淋巴造血系肿瘤 国国内内已已建建立立的的动动物物淋淋巴巴造造血血系系肿肿瘤瘤( (主主要要包包括括恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤和和白白血血病病) )可可移移植植瘤瘤株株几几乎乎均均建建立立于于小小鼠鼠，其其中中恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤瘤瘤株株有有杨杨简简等等建建立立的的L L1 1及及其其腹腹水水瘤瘤、钱钱振振超超等等建建立立的的L L797797及及其其腹腹水水瘤瘤、孙孙慧慧等等建建立立的的L-L-TATA2 2等等，白白血血病病瘤瘤株株有有陈陈妙妙兰兰等等建建立立的的LL、李李敏敏民民建建立立的的L L615615等等。值值得得一一提提的的是是，由由于于人人的的恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤的的分分类

115、类方方法法进进展展较较快快，动动物物淋淋巴巴瘤瘤的的一一些些名名称称显显得得陈旧、混乱，亟待统一。陈旧、混乱，亟待统一。 83实用内容第四节 系统疾病动物模型 一、消化系统疾病动物模型一、消化系统疾病动物模型 ( (一一) ) 肝、胆、胰腺疾病动物模型肝、胆、胰腺疾病动物模型 1 1 肝肝 纤纤 维维 化化 动动 物物 模模 型型 (animal (animal model model of of liver liver fibrosis)fibrosis) 任任何何可可引引起起肝肝损损伤伤的的因因素素长长期期、反反复复作作用用于于肝肝脏脏，均均可可产产生生肝肝细细胞胞变变性性、坏坏死死，继继

116、而而肝肝细细胞胞再再生生和和纤纤维维组组织织增增生生，导导致致肝肝纤纤维维化化，严严重重时时发发展展为为肝肝硬硬化化、肝肝癌癌等等。基基于于此此原原理理建建立立了了许许多多肝肝纤纤维维化化模模型型、化化学学性性损损伤伤模模型型、免免疫疫性性模模型型、生生物物学学模模型型、乙乙醇醇性性模模型型和和营养性模型。营养性模型。84实用内容 (1) (1) 免疫性肝纤维化模型免疫性肝纤维化模型 免免疫疫性性肝肝纤纤维维化化的的产产生生机机制制是是由由型型变变态态反反应应引引起起的的，白白蛋蛋白白和和血血清清的的大大分分子子物物质质，作作为为异异种种抗抗原原进进入入大大鼠鼠体体内内后后，刺刺激激其其产产生

117、生相相应应的的抗抗体体，当当抗抗原原再再次次进进入入机机体体后后抗抗原原抗抗体体结结合合，形形成成抗抗原原- -抗抗体体免免疫疫复复合合物物(IC)(IC)，ICIC可可激激活活( (或或结结合合) )补补体体，由由于于抗抗原原的的反反复复、长长期期刺刺激激，过过量量的的免免疫疫复复合合物物来来不不及及被被清清除除，沉沉积积于于肝肝脏脏的的血血管管壁壁内内外外，引引起起血血管管炎炎和和血血管管周周围围炎炎，造造成成肝肝损损伤伤，形形成成广广泛泛的的进进行行性性慢慢性性炎炎症症病病变变。如如此此反反复复导导致致肝肝细细胞胞变变性性、坏坏死死，肝肝细细胞胞再再生生，纤纤维维增增生生等等变变化化，最

118、后发展为肝纤维化、肝硬化。最后发展为肝纤维化、肝硬化。85实用内容 动动物物选选用用雄雄性性WistarWistar大大鼠鼠，体体重重130g130g左左右右。取取猪猪血血清清0.5ml0.5ml，腹腹腔腔内内注注射射。每每周周2 2次次，共共8 8次次( (猪猪血血清清的的制制备备：取取新新鲜鲜猪猪血血，离离心心制制血血清清，滤滤过过除除菌菌，分分装装放放低低温温冰冰箱箱备备用用) )。大大鼠鼠于于第第3 3周周出出现现较较多多的的肝肝细细胞胞变变性性、坏坏死死，第第4 4周周增增生生的的胶胶原原纤纤维维形形成成纤纤维维束束，呈呈侵侵袭袭性性生生长长，从从中中央央静静脉脉到到门门管管区区之之

119、间间相相互互伸伸延延，发发生生肝肝纤纤维维化化。该该模模型型的的特特点点：肝肝纤纤维维化化出出现现得得早早，出出现现率率高高达达86.786.7；对对动动物物整整体体损损伤伤轻轻微微，动动物物毛毛发发光光泽泽、生生长长、发发育育情情况况与与正正常常无无区区别别；肝肝纤纤维维化化组组织织中中大大量量胶胶原原增增生生，故故、型型前前胶胶原原的的mRNAmRNA增多。增多。86实用内容 临临床床上上，慢慢性性活活动动性性肝肝炎炎患患者者循循环环免免疫疫复复合合物物多多为为阳阳性性，故故猪猪血血清清模模型型可可用用于于慢慢性性肝肝炎炎所所致致肝肝纤纤维维化化的的研研究究，对对于于研研究究免免疫疫复复合

120、合物物的的形形成成、沉沉积积和和清清除除及及对对于于防防治治免免疫疫损损伤伤性性肝肝纤纤维维化化有有效效药药物物的的筛筛选选，具有理论和实际意义。具有理论和实际意义。87实用内容 (2) (2) 化学损伤性肝纤维化动物模型化学损伤性肝纤维化动物模型 雄雄性性WistarWistar大大鼠鼠，体体重重130g130g左左右右，用用硫硫代代乙乙酰酰胺胺腹腹腔腔内内注注射射，第第一一次次20mg/100g20mg/100g体体重重，从从第第二二次次起起12mg/100g12mg/100g体体重重，每每周周注注射射2 2次次，共共8 8周周。硫硫代代乙乙酰酰胺胺腹腹腔腔内内注注射射第第3 3周周，在在

121、肝肝小小叶叶间间中中间间带带出出现现大大片片的的肝肝细细胞胞变变性性坏坏死死和和炎炎细细胞胞浸浸润润，变变性性、坏坏死死的的细细胞胞数数和和严严重重程程度度明明显显超超过过猪猪血血清清模模型型，炎炎细细胞胞浸浸润润也也超超过过猪猪血血模模型型。6 6周周后后出出现现增增生生的的纤纤维维束束，纤纤维维增增生生明明显显晚晚于于和和少少于于猪猪血血清清肝肝纤纤维维化化模模型型。化化学学损损伤伤性性肝肝纤纤维维化化模模型型中中肝肝细细胞胞变变性性坏坏死死，比比免免疫疫性性肝肝纤纤维维化化模模型型严严重重且且炎炎症症细细胞胞浸浸润润明明显显，在在其其大大鼠鼠肝肝纤纤维维组组织织中中有有I I型型胶胶原原

122、的的mRNAmRNA增增多多，转转化化生生长长因因子子 1 1排排明明显增多。显增多。88实用内容 (3) (3) 四氯化碳肝硬化动物模型四氯化碳肝硬化动物模型 WistarWistar或或SDSD大大鼠鼠，体体重重180180200g200g，皮皮下下注注射射40405050四四氯氯化化碳碳油油溶溶液液(0.3ml/100g(0.3ml/100g体体重重) )，每每周周2 2次次，第第2 2周周始始，隔隔日日以以20203030乙乙醇醇1ml1ml灌灌胃胃( (或或作作为为唯唯一一饮饮料料) )，饲饲以以单单纯纯玉玉米米面面( (混混以以0.50.5胆胆固固醇醇) )，共共1010周周。实实

123、验验中中大大鼠鼠成成活活率率60608080。四四氯氯化化碳碳所所致致高高胆胆固固醇醇饮饮食食大大鼠鼠肝肝硬硬化化是是目目前前国国内内外外常常采采用用的的动动物物模模型型，该该模模型型可可靠靠且且复复制制时时间间短短，肝肝纤纤维维化化进进展展稳稳定定，适适合合于于肝肝硬硬化化发发生生发发展展过过程程的动态研究。的动态研究。89实用内容 2 2胆石症动物模型胆石症动物模型(animal model of cholelithiasis)(animal model of cholelithiasis) 我我国国人人群群中中胆胆结结石石疾疾病病，特特别别是是原原发发性性胆胆管管结结石石发发病病率率高高

124、，手手术术后后复复发发又又非非常常普普遍遍，最最后后常常因因反反复复感感染染发发生生胆胆汁汁性性肝肝硬硬化化而而死死亡亡。因因此此是是医医学学领领域域中中极极为为重重要要的的课课题题之之一一。近近年年来来对对胆胆结结石石病病的的研研究究和和诊诊断断水水平平有有了了很很大大的的提提高高和和发发展展，但但临临床床上上开开展展胆胆石石症症的的治治疗疗研研究究仍仍然然存存在在着着一一定定的的局局限限性性，因因此此临临床床研研究究不不易易获获取取符符合合研研究究需需要要的的，系系统统性性和和可可比比性性的的病病理理标标本本。而而胆胆结结石石动动物物模模型型的的建建立立为为临临床床研研究究胆胆石石症症开开

125、辟辟了了一一条条新新的的研研究究途途径径。自自从从19521952年年DamDam及及ChristensenChristensen以以仓仓鼠鼠成成功功地地复复制制成成胆胆固固醇醇结结石石的的实实验验动动物物模模型型以以来来，各各国国学学者者广广泛泛地地开开展展了了这这方方面面的的研究。研究。90实用内容 动动物物可可用用叙叙利利亚亚仓仓鼠鼠、健健康康成成年年家家兔兔、大大鼠鼠、家家犬或猴等，具体方法有：犬或猴等，具体方法有： (1) (1) 食食饵饵法法：选选用用叙叙利利亚亚仓仓鼠鼠，505060g60g左左右右，基基本本食食饵饵的的特特点点为为高高糖糖，不不含含不不饱饱和和脂脂肪肪酸酸。食食

126、饵饵配配制制方方法法：蔗蔗糖糖7474，酪酪蛋蛋白白2l2l，食食盐盐4.44.4，胆胆碱碱0.10.1，浓浓缩缩鱼鱼肝肝油油0.50.5。按按每每只只仓仓鼠鼠每每日日5 59g9g，分分两两次次喂喂养养，同同时时每每周周喂喂青青菜菜、麦麦芽芽1 12 2次次，以以补补充充维维生生素素等等，维维持持动动物物生生命命。141421d21d仓仓鼠鼠胆胆囊囊内内形形成成明明显显结结石石，22d22d后后成成石石率率高高达达100100。选选用用雌雌性性豚豚鼠鼠，体体重重250250300g300g。成成石石饲饲料料的的配配制制：在在基基础础食食物物中中加加入入酪酪蛋蛋白白1 1，蔗蔗糖糖1.51.5

127、，猪猪油油1 1，纤纤维维素素1 1，胆胆酸酸0.020.02，胆胆固固醇醇0.050.05。2 2个个月月后后在在9090的的豚豚鼠鼠胆胆囊囊中中可可产产生生以以胆胆色色素素为为主主的的结结石石，其其成成分和结构与人类的胆色素结石相似。分和结构与人类的胆色素结石相似。91实用内容 选选用用成成年年家家犬犬，成成石石饲饲料料成成分分：5050蔗蔗糖糖、1010酪酪蛋蛋白白、2020玉玉米米淀淀粉粉、5 5动动物物油油、1 1胆胆固固醇醇，辅辅以以矿矿物物质质和和维维生生素素，特特点点为为高高蛋蛋白白、高高碳碳水水化化合合物物，其其中中胆胆固固醇醇为为关关键键成成分分。1212周周后后结结石石成

128、成石石率率达达100100，结石为胆色素结石。，结石为胆色素结石。 本本模模型型适适用用于于饮饮食食与与结结石石生生成成关关系系及及代代谢谢和和防防治治研研究究，以以及及胆胆石石生生成成过过程程中中胆胆色色素素、胆胆汁汁酸酸和和糖糖蛋蛋白三者间的相互关系的研究。白三者间的相互关系的研究。92实用内容 (2) (2) 感染成石法感染成石法 健健康康成成年年家家兔兔，大大鼠鼠或或家家犬犬，采采用用无无菌菌条条件件下下剖剖腹腹术术，显显露露十十二二指指肠肠，从从十十二二指指肠肠乳乳头头逆逆行行插插入入一一塑塑料料管管进进入入胆胆囊囊，从从中中注注入入蛔蛔虫虫卵卵或或大大肠肠杆杆菌菌悬悬液液。蛔蛔虫虫

129、卵卵悬悬液液浓浓度度为为每每毫毫升升含含3 3万万1515万万个个蛔蛔虫虫卵卵。7 7个个月月后后胆胆囊囊呈呈慢慢性性炎炎症症，囊囊内内结结石石形形成成。此此模模型型除除用用于于防防治治研研究究外外，还还可可进进行行有有关关胆胆系系感感染染的的功功能能代代谢变化的分析与观察研究。谢变化的分析与观察研究。 93实用内容 (3) (3) 狭窄成石法狭窄成石法 可选用健康成年家兔、家犬或猴，家兔诱发率高。可选用健康成年家兔、家犬或猴，家兔诱发率高。 胆胆囊囊结结扎扎法法：健健康康成成年年家家兔兔，无无菌菌条条件件下下剖剖腹腹手手术术，分分清清胆胆管管与与肝肝管管，用用银银夹夹适适当当地地夹夹住住胆胆

130、囊囊颈颈部部以产生部分梗阻。以产生部分梗阻。6 6个月后胆囊中有明显结石形成。个月后胆囊中有明显结石形成。 胆胆总总管管结结扎扎法法：家家兔兔剖剖腹腹后后显显露露胆胆总总管管，在在十十二二指指肠肠上上缘缘处处预预先先经经双双鲸鲸蜡蜡基基-26-26烷烷磷磷酸酸钠钠(dicetyl (dicetyl sodium sodium phosphate)phosphate)浸浸渍渍外外敷敷纤纤维维素素粘粘胶胶(cellophane)(cellophane)的的细细带带松松松松结结扎扎一一道道。4 4个个月月后后出出现现胆胆总总管管狭狭窄窄或或完完全全梗梗阻阻，70708080出出现现胆胆囊囊结结石石，

131、这这种种结结石石质质软软，色色深深，有有的的属属于于纯纯胆胆色色素素结结石石，但但大大多多为为含含胆胆色色素素与与胆胆固固醇醇的的混混合合结结石石，此此实实验验模模型型可可用用于于进进行行胆胆色色素素混混合合结石的发病学与防治研究。结石的发病学与防治研究。94实用内容 (4) (4) 切除迷走神经干成石法切除迷走神经干成石法 健康成年家兔或狗，性别不拘。健康成年家兔或狗，性别不拘。 采采用用无无菌菌手手术术探探明明家家兔兔胆胆道道及及胆胆囊囊正正常常，然然后后显显露露胃胃、贲贲门门及及食食管管，将将食食管管悬悬吊吊，显显露露两两侧侧迷迷走走神神经经干干，从从食食管管下下端端切切除除两两侧侧迷迷

132、走走神神经经干干各各1.51.52.0cm2.0cm。手手术术结结束束后后，在在腹腹腔腔内内注注入入5050葡葡萄萄糖糖20ml20ml，术术后后继继续续禁禁食食161620h20h。术术后后家家兔兔胆胆汁汁成成分分明明显显改改变，变，4 45 5周有胆固醇结石形成。周有胆固醇结石形成。95实用内容 将将狗狗麻麻醉醉后后行行无无菌菌剖剖腹腹术术。在在隔隔下下右右侧侧肾肾上上腺腺上上方方找找出出右右侧侧内内脏脏大大神神经经，用用止止血血钳钳小小心心分分离离，直直达达交交感感神神经经节节，在在神神经经干干的的局局部部撒撒无无菌菌的的浮浮石石粉粉(pumice (pumice powder powd

133、er ，一一种种对对神神经经组组织织有有刺刺激激作作用用的的物物质质) )，将将放放药药粉粉的的局局部部与与腹腹腔腔内内脏脏分分隔隔，再再沿沿胃胃的的贲贲门门上上至至食食管管，切切断断两两侧侧的的迷迷走走神神经经干干，随随后后缝缝合合腹腹膜膜，术术后后2 2个个月月剖剖腹腹检检查查，可可见见多多数数动动物物呈呈现现慢慢性性或或亚亚急急性性胆胆囊囊炎炎的的变变化化，组组织织学学检检查查显显示示胆胆囊囊粘粘膜膜下下水水肿肿，有有淋淋巴巴细细胞胞和和浆浆细细胞胞浸浸润润和和不不同同程程度度的的结结缔缔组组织织增增生生，约约有有半半数数个个体体的的胆胆囊囊内内可可找找到到大大小小不不一一、单单个个或或

134、多多个个胆胆色色素素结结石石。此此模模型型可可用用于于探探讨讨中中西西药药物物治治疗疗措措施施，或或对对胆胆石石形形成成和和胆胆道道功功能能的的影影响响及及其其机制的研究。机制的研究。96实用内容 3. 3. 胆胆 管管 囊囊 肿肿 动动 物物 模模 型型 (animal (animal model model of of bile bile ductcyst)ductcyst) 胆管囊肿的基本发病环节有：胆管囊肿的基本发病环节有： 病病变变处处部部分分或或全全部部管管壁壁薄薄弱弱，可可能能因因胚胚胎胎发发育育的的异异常常或或感感染染，外外伤伤或或胰胰管管系系结结构构异异常常所所致致胰胰液液逆

135、逆流而引起，或者是新生期病变部发育不全；流而引起，或者是新生期病变部发育不全； 在在存存在在或或不不存存在在病病变变部部位位远远侧侧胆胆道道梗梗阻阻情情况况下下，肝肝胆胆汁汁分分泌泌与与胆胆囊囊胆胆汁汁排排泄泄所所致致胆胆道道内内压压的的增增高高。胆道梗阻亦可因不同的先天性或获得性病因而引起。胆道梗阻亦可因不同的先天性或获得性病因而引起。 采采用用绵绵羊羊或或山山羊羊( (出出生生后后14d14d内内) )，雌雌雄雄不不拘拘，具具体体方法为：方法为：97实用内容 (1) (1) 胆总管远端结扎术胆总管远端结扎术 戊戊巴巴比比妥妥钠钠(1.5(1.54mg/kg4mg/kg体体重重) )腹腹腔腔

136、内内注注射射麻麻醉醉，显显露露肝肝门门部部，在在胆胆总总管管与与近近侧侧小小肠肠段段汇汇接接点点的的上上方方( (一一般般距距幽幽门门约约4 45cm)5cm)，用用1 1号号丝丝线线将将胆胆总总管管全全周周缝缝扎，造成胆总管完全梗阻，关腹。扎，造成胆总管完全梗阻，关腹。 (2) (2) 胆总管置管胆囊结扎术胆总管置管胆囊结扎术 麻麻醉醉、手手术术显显露露方方法法同同前前。用用1 1号号丝丝线线近近肝肝总总管管处处全全周周缝缝扎扎胆胆囊囊管管，再再将将胆胆总总管管前前壁壁纵纵行行切切开开，在在胆胆总总管管内内置置人人一一硅硅胶胶管管，内内径径0.1cm0.1cm，长长约约3.0cm3.0cm，

137、在在硅硅胶胶管管两两端端约约0.5cm0.5cm处处，分分别别用用1 1号号丝丝线线全全周周缝缝扎扎肝肝总总管管和和胆胆总总管管，使使置置入入之之硅硅胶胶管管固固定定在在胆胆管管内内，造造成胆总管不全性梗阻。成胆总管不全性梗阻。98实用内容 对对初初生生体体弱弱动动物物，需需要要输输液液，可可在在关关腹腹前前腹腹腔腔内置人热生理盐水；内置人热生理盐水； 术后麻醉清醒前注意保温，防止肺部感染；术后麻醉清醒前注意保温，防止肺部感染； 注注意意勿勿进进食食过过早早，以以免免导导致致扩扩张张，视视动动物物状状况况，可以喂水、糖或奶粉，可以喂水、糖或奶粉，2 23d3d后再辅以青饲料。后再辅以青饲料。

138、术术后后胆胆道道造造影影或或直直接接观观察察见见胆胆管管节节段段性性扩扩张张，宽宽度度达达邻邻近近胆胆管管3 3倍倍或或3 3倍倍以以上上，或或直直接接见见胆胆囊囊憩憩室室，即为复制成功。即为复制成功。 注意事项99实用内容 该模型可应用于该模型可应用于 为胆管囊肿病发病学研究从实验上提供依据；为胆管囊肿病发病学研究从实验上提供依据； 研研究究远远侧侧胆胆道道梗梗阻阻后后梗梗阻阻性性黄黄疽疽的的近近期期发发展展与与后果，以及分析其死亡原因；后果，以及分析其死亡原因； 不不全全梗梗阻阻可可使使动动物物在在较较长长时时期期内内成成活活，这这种种较较长长期期存存活活的的胆胆汁汁淤淤滞滞的的胆胆道道扩

139、扩张张模模型型，可可以以于于探探索索胆胆石石成成因因之之间间的的关关系系及及结结石石生生成成的的规规律律，也也可可对对扩扩张胆道上皮增殖和诱发肿瘤的可能性进行观察。张胆道上皮增殖和诱发肿瘤的可能性进行观察。100实用内容 4. 4. 急急性性胰胰腺腺炎炎动动物物模模型型(animal (animal model model of of acute acute pancreatitis)pancreatitis) 理理想想的的急急性性胰胰腺腺炎炎(acute (acute pancreatltlspancreatltls，AP)AP)动动物物模模型型是是研研究究APAP发发病病机机制制和和药药物

140、物防防治治的的前前提提。目目前前制制备备APAP模模型型的的方方法法很很多多，现现有有的的一一些些模模型型中中，有有食食物物(CDED)(CDED)诱诱导导法法、十十二二指指肠肠闭闭袢袢法法、总总胆胆管管结结扎扎法法或或静静脉脉滴滴注注大大剂剂量量铃铃蟾蟾肽肽法法等等，由由于于不不能能控控制制胰胰腺腺的的病病变变程程度度，均均不不适适合合于于评评价价药药物物的的最最大大治治疗疗效效应应。下下面面介介绍绍两两种种稳稳定定、可可靠靠，能能反反映映胰胰腺腺病病变变依依次次加加重的急性胰腺炎系列模型。重的急性胰腺炎系列模型。101实用内容 (1) (1) 牛胆酸钠诱导大鼠急性胰腺炎系列模型牛胆酸钠诱导

141、大鼠急性胰腺炎系列模型 WistarWistar大大鼠鼠，重重180180260g260g；NaTc(SigmaNaTc(Sigma公公司司产产) )实实验验前前用用生生理理盐盐水水配配制制成成1.01.0，2.02.0，3.53.5备备用用。实实 验验 前前 禁禁 食食 12h12h， 允允 许许 饮饮 水水 ， 3 3 戊戊 巴巴 比比 妥妥 钠钠(40mg/kg(40mg/kg体体重重) )腹腹腔腔注注射射麻麻醉醉。剖剖腹腹后后经经十十二二指指肠肠用用4 4号号头头皮皮针针头头插插入入胰胰管管开开口口，向向内内逆逆行行注注入入NaTcNaTc溶溶液液(0.1ml/100g(0.1ml/1

142、00g体体重重) )。1.01.0和和2.02.0NaTcNaTc诱诱导导APAP后后12h12h，血血清清淀淀粉粉酶酶依依次次升升高高，组组织织水水肿肿和和炎炎症症细细胞胞渗渗出出逐逐渐渐加加重重，病病理理学学上上属属轻轻度度和和重重度度水水肿肿型型急急性性胰胰腺炎。腺炎。102实用内容 3.53.5NaTcNaTc诱诱导导APAP后后，除除血血淀淀粉粉酶酶水水平平持持续续升升高高外外，胰胰腺腺组组织织水水肿肿，炎炎症症细细胞胞浸浸润润进进一一步步加加重重，并并出出现现典典型型胰胰腺腺细细胞胞坏坏死死和和出出血血，病病理理学学上上已已属属坏坏死死型型胰胰腺腺炎炎；电电镜镜显显示示细细胞胞的的

143、超超微微结结构构也也证证实实上上述述形形态态改改变变。随随着着NaTcNaTc诱诱导导浓浓度度的的提提高高，胰胰腺腺损损伤伤依依次次加加重重。本本模模型型适适合合评评价价药药物物对对水水肿肿型型和和( (或或) )坏坏死死型型胰腺炎的最大防治效应，故具有一定的实用价值。胰腺炎的最大防治效应，故具有一定的实用价值。103实用内容 (2) (2) 犬急性坏死型胰腺炎模型犬急性坏死型胰腺炎模型 成成年年杂杂种种狗狗，101015kg15kg，雌雌雄雄不不拘拘。实实验验前前禁禁食食12h12h，不不禁禁水水，麻麻醉醉后后经经上上腹腹正正中中切切口口人人腹腹，寻寻及及十十二二指指肠肠，于于胰胰管管开开口

144、口附附近近切切开开十十二二指指肠肠壁壁，置置一一细细塑塑料料管管于于主主胰胰管管内内，然然后后向向内内注注入入胰胰蛋蛋白白酶酶和和狗狗自自身身胆胆汁汁混混合合液液2 23ml(0.3ml/kg3ml(0.3ml/kg体体重重，配配方方为为1ml1ml胆胆汁汁+4ml+4ml胰胰酶酶溶溶液液，内内含含4mg4mg胰胰蛋蛋白白酶酶) )，滞滞留留5min5min后后拔拔去去塑塑料料管管，荷荷包包缝缝合合十十二二指指肠肠壁壁，关关腹腹。本本实实验验采采用用胰胰管管内内加加压压注注射射自自身身胆胆汁汁和和胰胰蛋蛋白白酶酶混混合合物物，术术后后1h1h即即见见血血清清淀淀粉粉酶酶明明显显升升高高，持持续

145、续24h24h，6h6h达达峰峰值值；胰胰腺腺大大体体和和镜镜下下病病理理改改变变呈呈典典型型的的坏坏死死、出出血血及及炎炎症症细细胞胞浸浸润润，表表明明此此方方法法可可成成功功诱诱发发犬犬急急性性坏坏死死性性胰腺炎模型。胰腺炎模型。104实用内容 5 5慢慢性性胰胰腺腺炎炎动动物物模模型型(animal (animal model model of of chronic chronic pancreatitis)pancreatitis) 是是由由于于连连续续炎炎症症造造成成胰胰腺腺功功能能不不可可逆逆性性损损害害。尽尽管管对对该该病病的的研研究究已已经经取取得得很很大大进进展展，但但是是它

146、它的的发发病病机机制制及及与与其其相相关关的的诊诊断断和和治治疗疗仍仍有有许许多多问问题题有有待待解解决。许多学者在努力寻求适当的动物模型。决。许多学者在努力寻求适当的动物模型。 成成年年杂杂种种猫猫，在在隔隔夜夜禁禁食食后后，全全麻麻(30mg/kg(30mg/kg体体重重异异戊戊巴巴比比妥妥钠钠腹腹腔腔内内注注射射) )下下施施行行剖剖腹腹手手术术，将将尼尼龙龙导导管管插插入入主主胰胰管管，缝缝合合固固定定后后，烧烧灼灼闭闭合合导导管管外外露露端端，造造成成主主胰胰管管完完全全梗梗阻阻或或先先将将一一根根尼尼龙龙导导管管插插入入主主胰胰管管内内，缓缓慢慢注注入入9494乙乙醇醇1.5ml1

147、.5ml，然然后后截截下下1cm1cm长长的的导导管管留留置置在在主主胰胰管管内内，最最后后用用2626号号细细针针头头均均匀匀点状注射点状注射94%94%乙醇乙醇1.5ml1.5ml于胰腺实质内。于胰腺实质内。105实用内容 6 6周周后后胰胰腺腺小小叶叶变变成成圆圆形形，被被向向心心性性纤纤维维包包绕绕，小小叶叶实实质质内内及及其其周周围围组组织织均均有有炎炎性性细细胞胞浸浸润润，叶叶间间胰胰管管明明显显扩扩张张，管管腔腔内内偶偶见见多多形形核核粒粒细细胞胞。1111周周后后胰胰腺腺结结构构发发生生严严重重紊紊乱乱。2626周周后后，胰胰腺腺小小叶叶数数目目减减少少，间间质质纤纤维维组组织

148、织明明显显增增生生，单单核核细细胞胞浸浸润润。6 6周周后后出出现现典典型型的的慢慢性性胰胰腺腺炎炎，2626周周后后慢慢性性胰胰腺腺炎炎的的发发生生率为率为100100。106实用内容 ( (二二) ) 胃肠疾病动物模型胃肠疾病动物模型 1 1动动物物胃胃粘粘膜膜肠肠上上皮皮化化生生模模型型(animal (animal model model of of intestinal metaplasia)intestinal metaplasia) (1) (1) 烷基硝基亚硝基胍类诱发胃粘膜肠化生模型烷基硝基亚硝基胍类诱发胃粘膜肠化生模型 随随着着烷烷基基碳碳原原子子数数的的增增加加，致致癌癌

149、性性依依次次减减弱弱，但但诱诱发发肠肠化化生生的的能能力力依依次次增增强强。其其中中丙丙基基硝硝基基亚亚硝硝基基弧弧(PNNG)(PNNG)是是目目前前诱诱发发动动物物胃胃粘粘膜膜肠肠化化生生较较为为理理想想的的药药物物。实实验验动动物物一一般般选选用用4 46 6周周龄龄，体体重重100100200g200g的的雄雄性性大大鼠鼠，饮饮水水中中加加药药，饮饮水水瓶瓶涂涂成成黑黑色色或或以以锡锡箔箔纸纸包包裹裹，以以免免致致癌癌物物遇遇光光分分解解。药药物物先先用用去去离离子子水水或或蒸蒸馏馏水水配配制制成成浓浓度度为为1g/L1g/L的的储储存存液液，4 4保保存存，每每天天用用前前再再稀稀释

150、释成成所所需需浓浓度度的的溶溶液液，让让动动物物自自由由饮饮用。所用剂量为用。所用剂量为505083ug/ml83ug/ml，投药时间，投药时间16162020周。周。107实用内容 (2) X (2) X线胃局部照射诱发胃粘膜肠化生模型线胃局部照射诱发胃粘膜肠化生模型 选选用用5 58 8周周龄龄的的WistarWistar或或JCL/SDJCL/SD大大鼠鼠。大大鼠鼠麻麻醉醉后后置置于于X X线线光光束束下下，动动物物体体用用0.6cm0.6cm厚厚的的铅铅皮皮加加以以保保护护，铅铅皮皮中中央央正正对对胃胃区区处处留留有有直直径径为为1.8cm1.8cm的的小小孔孔，经经此此孔孔进进行行X

151、 X线线照照射射。照照射射剂剂量量每每次次5Gy5Gy，每每日日1 1次次，共共6 6次。次。 (3) (3) X X线线照照射射和和N-N-甲甲基基-N-N-硝硝基基亚亚硝硝基基胍胍(MNNG)(MNNG)联联合诱发鼠胃粘膜肠化生模型合诱发鼠胃粘膜肠化生模型 5 5周周龄龄SDSD雄雄性性大大鼠鼠，先先用用X X线线照照射射，每每次次0.5Gy0.5Gy，每每日日1 1次次，共共6 6次次，8 8周周后后投投给给50ug/ml50ug/ml的的MNNGMNNG溶溶液液自自由由饮饮用用4 4个个月月，观观察察至至第第1515个个月月时时，其其肠肠化化生生发发生生率可达率可达100100。108

152、实用内容 (4) PNNG (4) PNNG诱发犬胃粘膜肠化生模型诱发犬胃粘膜肠化生模型 选选用用3 3周周岁岁，体体重重11kg11kg左左右右的的BeagleBeagle犬犬自自由由饮饮用用150ug/ml 150ug/ml PNNGPNNG溶溶液液4040周周，后后改改为为自自来来水水。第第128128周周左左右右可可出出现现典典型型的的肠肠化化生生，无无论论胃胃镜镜或或显显微微镜镜下下观观察，均与人类胃粘膜肠化生相类似。察，均与人类胃粘膜肠化生相类似。 109实用内容 (5) (5) 带蒂胃壁瓣肠移植大鼠胃粘膜肠化生模型带蒂胃壁瓣肠移植大鼠胃粘膜肠化生模型 选选用用体体重重180180

153、200gWistar200gWistar大大鼠鼠，常常规规麻麻醉醉后后打打开开腹腹 腔腔 ， 于于 大大 鼠鼠 腺腺 胃胃 前前 壁壁 正正 中中 部部 取取 一一 大大 小小 约约1.5cm1.5cm1cm1cm梭梭形形胃胃壁壁瓣瓣，保保留留胃胃小小弯弯侧侧血血管管2 24 4条条，0/70/7号号线线缝缝合合胃胃壁壁。分分别别在在十十二二指指肠肠中中部部、空空肠肠末末端端及及中中结结肠肠纵纵形形切切开开肠肠管管，切切口口长长约约1.5cm1.5cm，0.050.05洗洗必必泰泰纱纱条条清清洁洁伤伤口口，将将梭梭形形胃胃壁壁瓣瓣粘粘膜膜面面向向着着肠肠腔腔进进行行侧侧侧侧吻吻合合，0/70/

154、7号号线线连连续续缝缝合合，腹腹膜膜腔腔内内放放入入0.90.9NaClNaCl溶溶液液5ml5ml，常常规规关关闭闭腹腹腔腔。术术后后第第3 3个个月月时时，移移植植至至空空肠肠和和结结肠肠的的胃胃壁壁瓣瓣粘粘膜膜即即显显示示有有肠肠化化生生，术术后后6 6个个月月后后，移移植植到到肠肠道道各各段段的的胃胃壁壁瓣瓣粘粘膜膜均均可可见见广泛的肠化生。广泛的肠化生。 110实用内容 实验动物的肠化生模型可用于实验动物的肠化生模型可用于 研究胃粘膜肠化生发生的原因及组织来源；研究胃粘膜肠化生发生的原因及组织来源； 探讨胃粘膜肠化生与胃癌发生的关系；探讨胃粘膜肠化生与胃癌发生的关系； 胃粘膜肠化生逆

155、转治疗药物的筛选和疗效观察。胃粘膜肠化生逆转治疗药物的筛选和疗效观察。111实用内容 2 2幽幽门门螺螺杆杆菌菌感感染染动动物物模模型型(animal (animal model model of of he he licobaeter pylori infection)licobaeter pylori infection) (1) Hp (1) Hp感染悉生小猎狗模型感染悉生小猎狗模型 给给予予10106 610109 9cfucfu的的HpHp菌菌液液经经口口感感染染悉悉生生猎猎狗狗，组组织织学学检检查查胃胃粘粘膜膜可可见见局局灶灶性性或或弥弥漫漫性性淋淋巴巴细细胞胞浸浸润润和和淋淋巴巴

156、滤滤泡泡形形成成，并并伴伴有有轻轻至至中中度度中中性性粒粒细细胞胞和和嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞的的浸浸润润，与与人人的的胃胃炎炎相相似似，中中性性粒粒细细胞胞是是持持续续存存在在的的，而而在在悉悉生生小小猪猪则则是是短短暂暂存存在在。人人和和猪猪的的HpHp感感染染通通常常局局限限在在胃胃内内，而而在在小小狗狗除除胃胃以以外外，在在胃胃肠肠道道其其他他部部位位如如咽咽部部、食食管管、十十二二指指肠肠、空空肠肠、结肠也检出结肠也检出HpHp。112实用内容 (2) Hp (2) Hp感染家猪模型感染家猪模型 实实验验猪猪在在实实验验前前经经检检查查无无HpHp存存在在。经经西西咪咪替替丁丁抑抑酸

157、酸 处处 理理 后后 给给 予予 HpHp口口 服服 感感 染染 ， 每每 天天 3 3次次 ， 每每 次次3ml(1.53ml(1.5 10108 8 cfu/m1)cfu/m1)共共4d4d，可可在在胃胃窦窦和和胃胃体体检检测测到到HpHp，并产生与人类组织学相同的慢性活动性胃炎。，并产生与人类组织学相同的慢性活动性胃炎。 (3) Hp(3) Hp感染小鼠模型感染小鼠模型 10109 9cfucfu的的HpHp菌菌液液经经口口感感染染无无特特异异病病原原CD1CD1小小鼠鼠、BALB/cBALB/c小小鼠鼠和和普普通通级级CD1CD1小小鼠鼠，1 1周周后后及及其其后后的的4 48 8周周

158、内内，小小鼠鼠体体内内可可查查到到程程度度不不同同的的感感染染，其其胃胃粘粘膜膜的的病病理理变变化化与与人人感感染染HpHp的的变变化化相相似似，主主要要表表现现为为胃胃腺腺体体消消失失，上上皮皮细细胞胞脱脱落落，溃溃疡疡形形成成及及粘粘膜膜固固有有层层炎炎性性细细胞胞浸浸润润。此此模模型型可可用用于于观观察察HpHp感感染染的的病病理理过过程及细菌疫苗应用的研究。程及细菌疫苗应用的研究。113实用内容 3 3 消消 化化 性性 溃溃 疡疡 动动 物物 模模 型型 (animal (animal model model of of peptlculcer)peptlculcer) (1) (1

159、) 应激性大鼠溃疡模型应激性大鼠溃疡模型 大大鼠鼠禁禁食食24h24h，将将动动物物固固定定于于特特制制木木板板上上，垂垂直直浸浸入入(23(23 0.5)0.5)水水浴浴中中，水水深深平平剑剑突突，24h24h后后取取出出，脱脱颈颈处处死死，打打开开腹腹腔腔，结结扎扎胃胃贲贲门门和和幽幽门门，胃胃内内注注入入1 1甲甲醛醛溶溶液液8ml8ml，将将胃胃取取出出浸浸入入甲甲醛醛溶溶液液中中，30min30min后后沿沿胃胃大大弯弯剖剖开开，测测量量每每个个溃溃疡疡长长径径，计计算算全全胃胃溃溃疡疡长长径径之之和和为为溃溃疡疡指指数数。此此模模型型方方法法简简便便，成成功功率率高高，可可用用于于

160、应应激激性性溃溃疡疡发发生生机机制制和和粘粘膜膜保保护护药药物物的的研究。研究。114实用内容 (2) (2) 组胺性大鼠溃疡模型组胺性大鼠溃疡模型 大大鼠鼠禁禁食食24h24h，腹腹部部皮皮下下注注射射磷磷酸酸组组胺胺50mg/kg50mg/kg，1h1h后后再再重重复复注注射射一一次次，2h2h后后处处死死动动物物，按按前前述述方方法法固固定定胃胃和和记记录录溃溃疡疡指指数数。此此方方法法可可同同时时诱诱发发食食管管、胃胃、十十二二指指肠肠等等发发生生溃溃疡疡。可可用用于于溃溃疡疡发发生生机机制制及及治疗药物的研究。治疗药物的研究。 (3) (3) 水杨酸性大鼠胃溃疡模型水杨酸性大鼠胃溃疡

161、模型 大大鼠鼠禁禁食食24h24h，灌灌胃胃给给水水杨杨酸酸100mg/kg100mg/kg体体重重，4h4h后后脱脱颈颈处处死死，按按前前述述方方法法固固定定胃胃，在在普普通通放放大大镜镜下下计计数数腺腺胃胃出出现现的的溃溃疡疡点点数数目目，以以出出血血点点个个数数作作为为观观察察指标。指标。 (4) (4) 利血平性小鼠溃疡模型利血平性小鼠溃疡模型 小小鼠鼠腹腹部部皮皮下下注注射射利利血血平平5mg/kg5mg/kg体体重重，继继续续禁禁食食18h18h，脱脱颈颈处处死死，解解剖剖取取胃胃，固固定定标标本本，用用解解剖剖显显微微镜计数胃溃疡个数。镜计数胃溃疡个数。115实用内容 4. 4.

162、 溃溃疡疡性性结结肠肠炎炎动动物物模模型型 (animal (animal model model of of ulcerative colitis)ulcerative colitis) (1) (1) 大鼠乙酸溃疡性结肠炎模型大鼠乙酸溃疡性结肠炎模型 乙乙酸酸属属有有机机酸酸，与与肠肠粘粘膜膜接接触触可可直直接接导导致致炎炎症症损损伤伤。选选用用雄雄性性SDSD大大鼠鼠，体体重重300300350g350g，试试验验前前禁禁食食16h16h，戊戊巴巴比比妥妥钠钠腹腹腔腔麻麻醉醉。用用导导管管经经肛肛门门插插入入结结肠肠内内8cm8cm，注注入入8 8乙乙酸酸2ml2ml，20s20s后后立

163、立即即注注入入5ml5ml生生理理盐盐水水冲冲洗洗。其其病病理理特特点点为为结结肠肠粘粘膜膜弥弥漫漫性性充充血血水水肿肿，炎炎性性细细胞胞浸浸润润，出出现现糜糜烂烂，严严重重者者可可见见溃溃疡疡形形成成。但但早早期期仅仅见见单单纯纯急急性性炎炎症症，病病变变进进展展及及愈愈合合均均迅迅速速。与与人人类类溃溃疡疡性性结结肠肠炎炎病病变变进进展展与与愈愈合合交交替替的的特特点点不不同同，该该模模型型炎炎性性介介质质代代谢谢与与人人类类溃溃疡疡性性结结肠肠炎炎相相似似。其其优优点点为为制制模模简简便便、重重复复性性好好、经经济济实实用用，但不能反映人类溃疡性结肠炎免疫学变化。但不能反映人类溃疡性结肠

164、炎免疫学变化。116实用内容 (2) (2) 聚糖硫酸钠诱发小鼠急慢性溃疡性结肠炎聚糖硫酸钠诱发小鼠急慢性溃疡性结肠炎 选选无无特特定定病病原原菌菌CBA/J(H-2CBA/J(H-2k k) )或或BALB/c(H-2BALB/c(H-2d d) )雄雄性性小小鼠鼠，8 89 9周周龄龄。饮饮水水中中给给予予5 51010葡葡聚聚糖糖硫硫酸酸钠钠(DSS)(DSS)饮饮用用8 89d9d，即即可可看看到到结结肠肠粘粘膜膜炎炎细细胞胞浸浸润润、多多发发性性糜糜烂烂、隐隐窝窝脓脓肿肿等等急急性性炎炎症症表表现现。慢慢性性溃溃疡疡性性结结肠肠炎炎模模型型可可先先给给予予5 5DDSDDS饮饮用用7

165、d7d，再再饮饮用用自自来来水水10d10d，如如此此3 35 5个个循循环环，结结肠肠粘粘膜膜不不仅仅有有糜糜烂烂、炎炎细细胞胞浸浸润润，且且有有淋淋巴巴滤滤泡泡形形成成及及粘粘膜膜再再生生改改变变，部部分分粘粘膜膜出出现现异异型型增增生生，此此模模型型病病理理改改变变类类似似于于人人类类溃溃疡疡性性结结肠肠炎炎模模型型，不不仅仅可可用用于于发发病病机机制制、治治疗疗药药物研究，而且适用于与结肠癌相关的研究。物研究，而且适用于与结肠癌相关的研究。117实用内容 (3) (3) 免疫学方法诱发大鼠溃疡性结肠炎模型免疫学方法诱发大鼠溃疡性结肠炎模型 选选用用WistarWistar大大鼠鼠，体体

166、重重120120130g130g。取取一一只只健健康康大大鼠鼠的的结结肠肠内内容容物物，划划线线于于伊伊红红- -美美蓝蓝平平板板，3737培培养养24h24h，取取典典型型菌菌落落扩扩增增并并做做数数值值鉴鉴定定，确确定定为为大大肠肠杆杆菌菌后后，冰冰箱箱保保存存备备用用。免免疫疫前前取取菌菌种种扩扩增增，用用福福尔尔马马 林林 杀杀 死死 细细 菌菌 ， 生生 理理 盐盐 水水 洗洗 两两 次次 并并 调调 浓浓 度度 为为1.21.2 10108 8/ml/ml。免免疫疫动动物物分分别别于于第第1 1，1010，1717，24d24d共共接接受受4 4次次免免疫疫。第第1 1次次于于后后

167、足足跖跖处处注注射射细细菌菌悬悬液液0.2m10.2m1；第第2 2、3 3次次分分别别于于腹腹部部和和背背部部皮皮下下多多点点注注射射0.4ml0.4ml和和0.6ml0.6ml；第第4 4次次腹腹腔腔内内注注射射1.2ml1.2ml。结结肠肠病病理理改改变变可可见见粘粘膜膜水水肿肿、炎炎细细胞胞浸浸润润及及血血管管炎炎改改变变。粘粘膜膜内内可可见见多多处处隐隐窝窝脓脓肿肿及及溃溃疡疡形形成成，同同时时可可看看到到细细胞胞免免疫疫功功能下降和免疫复合物增加。能下降和免疫复合物增加。118实用内容 二、呼吸系统疾病动物模型二、呼吸系统疾病动物模型 ( (一一) ) 慢慢性性支支气气管管炎炎动动

168、物物模模型型(animal (animal model model of of chronic bronchitis)chronic bronchitis) 常用简便方法是给动物吸入二氧化硫或烟雾。常用简便方法是给动物吸入二氧化硫或烟雾。 1 1二氧化硫吸入刺激法二氧化硫吸入刺激法 分分别别选选小小鼠鼠吸吸入入二二氧氧化化硫硫2 2，每每天天10s10s，60d60d，第第141418d18d出出现现支支气气管管病病变变，27d27d后后出出现现重重型型气气管管炎炎病病变变；吸吸入入二二氧氧化化硫硫1 1，每每天天20s20s，25d25d，第第20d20d出出现现慢慢性性支支气气管管炎炎病病

169、变变；大大鼠鼠吸吸入入二二氧氧化化硫硫23ml/10L23ml/10L空空气气，每每日日30min30min，第第56d56d出出现现慢慢性性支支气气管管炎炎病病变变；吸吸入入二二氧氧化化硫硫3ml/L3ml/L空空气气，每每日日5min5min，每每周周6 6次次，454551d51d，第第363645d45d出出 现现 慢慢 性性 支支 气气 管管 痉痉 挛挛 ； 猴猴 吸吸 入入 二二 氧氧 化化 硫硫 5 58m1/10L8m1/10L空空气气，每每日日2h2h，每每周周5 5次次，65d65d，在在5050天天时时腺腺体显著增生，出现慢性支气管炎病变。体显著增生，出现慢性支气管炎病变

170、。119实用内容 2 2烟雾吸入法实验动物选择大鼠。烟雾吸入法实验动物选择大鼠。 (1) (1) 强烟雾吸入法强烟雾吸入法 锯锯末末200g200g，烟烟叶叶20g20g，干干辣辣椒椒6g6g，硫硫磺磺1g1g，混混合合后后在在27m27m3 3(1m(1m 3m3m 9m)9m)的的烟烟室室内内点点燃燃，形形成成浓浓烟烟雾雾，浓浓度约为度约为200mg/m200mg/m3 3，每天吸入，每天吸入1h1h，共，共44d44d。 (2) (2) 弱烟雾刺激弱烟雾刺激 锯锯末末、烟烟叶叶各各20g20g，烟烟叶叶捣捣碎碎后后与与锯锯末末混混合合制制成成长长30cm30cm、直直径径3cm3cm的的

171、烟烟卷卷，点点燃燃后后产产生生弱弱的的烟烟雾雾，每每支支烟烟卷卷可可在在2h2h点点完完。将将烟烟雾雾引引入入0.65m0.65m 0.80m0.80m l.25ml.25m的的已放置大鼠的烟室，每天已放置大鼠的烟室，每天2h2h。120实用内容 (3) (3) 香烟烟雾刺激香烟烟雾刺激 小小鼠鼠于于10000ml10000ml卡卡口口瓶瓶中中，瓶瓶盖盖留留有有直直径径1.5cm1.5cm通通气气孔孔，下下口口连连接接一一个个三三通通管管，另另两两端端分分别别连连接接50ml50ml注注射射器器及及点点燃燃的的香香烟烟，用用注注射射器器通通过过三三通通管管连连续续吸吸注注香香烟烟烟烟雾雾，每每

172、次次400ml(400ml(瓶瓶中中烟烟雾雾浓浓度度约约为为4 4) )烟烟熏熏30min30min。前前10d10d上上、下下午午各各烟烟熏熏一一次次，后后10d10d每每天天下下午午烟烟熏熏一一次次，连连续续3030次次，全全程程20d20d。小小鼠鼠、大大鼠鼠及及豚豚鼠鼠慢慢性性支支气气管管炎炎病病变变中中，以以杯杯状状细细胞胞增增多多、柱柱状状上上皮皮增增生生及及慢慢性性炎炎症症细细胞胞浸浸润润最最为为常常见见。尽尽管管这这些些病病变变程程度度可可能能不不尽尽一一致致，但但它它们们的的综综合合出出现现，特特别别是是在在支支气气管管及及末末梢梢细细支支气气管管见见到到这这些些改改变变，就

173、就可可以以作作为慢性支气管炎的形态学诊断指标。为慢性支气管炎的形态学诊断指标。121实用内容 ( (二二) ) 肺肺气气肿肿动动物物模模型型(animal (animal model model of of pulmonary pulmonary emphysema)emphysema) 常常用用方方法法是是给给予予蛋蛋白白水水解解酶酶类类。根根据据给给药药途途径径可可分为两类：分为两类： 1 1雾化吸入法雾化吸入法 家家兔兔1.81.82.0kg2.0kg，或或大大鼠鼠180180200g200g，随随机机分分为为对对照照组组和和实实验验组组。配配制制50ml250ml2猪猪胰胰弹弹性性蛋蛋

174、白白酶酶或或5 5木木瓜瓜蛋蛋白白酶酶。经经超超声声雾雾化化器器将将酶酶液液雾雾化化后后( (直直径径5um5um以以下下颗颗粒粒占占9090以以上上，50ml50ml约约4h4h雾雾化化完完) )经经管管道道送送入入自自制制雾雾化化箱箱。实实验验组组动动物物经经雾雾化化吸吸入入箱箱的的开开口口处处吸吸入入酶酶的的气气雾雾剂剂。每每次次吸吸入入约约4h(4h(至至酶酶液液雾雾化化完完) )，每每周周吸吸入入1 1次次，共共3 3次次。末末次次吸吸入入后后1 1个个月月，即即可可作作为为肺肺气气肿肿动动物物模模型型进进行行实实验验观观察察。对对照照组组动动物物可可吸吸入入生生理盐溶液气雾剂。理盐

175、溶液气雾剂。 122实用内容 2 2气管内滴入法气管内滴入法 大大鼠鼠180180200g200g，随随机机分分为为对对照照组组和和实实验验组组。配配制制3 3猪猪胰胰弹弹性性蛋蛋白白酶酶或或木木瓜瓜蛋蛋白白酶酶。给给大大鼠鼠腹腹腔腔注注射射20mg/kg20mg/kg体体重重戊戊巴巴比比妥妥钠钠，并并加加用用乙乙醚醚。分分离离暴暴露露气气管管，用用4 4号号细细针针穿穿刺刺两两软软骨骨环环间间，向向气气管管内内快快速速推推注注酶酶液液（0.1ml/100g0.1ml/100g体体重重) )，推推完完后后立立即即拔拔出出针针头头，使使大大鼠鼠保保持持直直立立位位，左左、右右来来回回旋旋转转1

176、12min2min，使使酶酶液液尽尽可可能能均均匀匀地地达达到到两两侧侧肺肺的的深深部部；依依同同法法给给对对照照动动物物气气管管内内注注入入相相应应量量的的生生理理盐盐水水。滴滴注注酶酶液液后后2 2个个月月可可作作为为肺肺气气肿肿动动物物模模型型。肺肺组组织织病病理理检检查查见见，肺肺泡泡隔隔数数量量明明显显减减少少，所所存存留留肺肺泡泡隔隔变变窄窄，部部分分肺肺泡泡隔隔断断裂裂、消消失失，若若干干肺肺泡泡融融合合形形成成大大圆圆囊囊，甚甚至至肺肺泡泡管管扩扩张张，可可作作为为肺肺气气肿肿的的形形态态学学诊诊断断指指标标。目目前前多多用气道内直接注射蛋白酶类复制肺气肿动物模型。用气道内直接

177、注射蛋白酶类复制肺气肿动物模型。123实用内容 ( (三三 ) ) 肺肺 动动 脉脉 高高 压压 动动 物物 模模 型型 (animal (animal model model of of pulmonary hypertension)pulmonary hypertension) 慢慢性性肺肺疾疾病病引引起起的的持持续续性性肺肺动动脉脉高高压压的的机机制制十十分分复复杂杂，目目前前尚尚未未完完全全了了解解。因因为为缺缺氧氧是是各各种种肺肺动动脉脉高压发生的最主要因素，本文主要介绍缺氧模型。高压发生的最主要因素，本文主要介绍缺氧模型。124实用内容 (1) (1) 直直接接向向放放动动物物的的

178、舱舱内内注注入入混混合合气气体体，并并监监测测舱舱内内气气体体浓浓度度变变化化情情况况。雄雄性性WistarWistar大大鼠鼠，体体重重150150250g250g，每每次次15152020只只，置置于于密密闭闭舱舱内内。具具体体步步骤骤为为：先先向向舱舱内内注注入入氮氮气气，使使舱舱内内氧氧浓浓度度下下降降至至1010左左右右，然然后后，以以2L/min2L/min的的流流速速向向舱舱内内注注入入低低氧氧气气体体( (氧氧浓浓度度1010，用用氮氮平平衡衡) )。舱舱内内气气体体用用小小风风扇扇不不断断混混匀匀。舱舱的的上上部部有有一一小小孔孔接接三三通通管管，由由此此抽抽取取舱舱内内气气

179、体体，用用于于监监测测舱舱内内氧氧和和二二氧氧化化碳碳浓浓度度，使使其其分分别别控控制制在在(10(10 1.01.0) )和和小小于于3 3范范围围。舱舱内内的的二二氧氧化化碳碳和和水水蒸蒸气气分分别别用用钠钠石石灰灰和和氯氯化化钙钙吸吸收收。密密闭闭舱舱壁壁下下部部留留有有小小缝缝隙隙与与舱舱外外相相通通，可可供供舱舱内内外外气气体体缓缓慢慢进进出出，使使舱舱内内气气体体与与大大气气压压始始终终保保持持平平衡衡。实实验验动动物物随随机机分分为为对对照照组组、慢慢性性常常压压缺缺氧氧组组( (吸吸人人氧氧浓浓度度1010，吸吸入入二二氧氧化化碳碳浓浓度小于度小于3.03.0，每天，每天8h8

180、h，共，共4 4周周) )。125实用内容 (2) (2) 采采用用氮氮气气降降低低舱舱内内氧氧浓浓度度，用用氧氧分分析析仪仪和和二二氧氧化化碳碳分分析析仪仪监监测测并并反反馈馈调调节节，使使舱舱内内氧氧气气和和二二氧氧化化碳碳浓浓度度保保持持在在实实验验条条件件要要求求的的范范围围内内。实实验验用用大大鼠鼠体体重重200200250g250g，每每次次8 81010只只，置置于于体体积积220L220L的的长长方方形形有有机机玻玻璃璃舱舱内内，缺缺氧氧时时先先开开通通氮氮气气瓶瓶，向向舱舱内内注注入入氮氮气气，使使舱舱内内氧氧浓浓度度下下降降，舱舱内内气气体体用用小小风风扇扇不不断断混混匀匀

181、，用用一一恒恒速速泵泵将将混混匀匀的的舱舱内内气气体体输输入入舱舱外外的的氧氧分分析析仪仪，持持续续监监测测舱舱内内氧氧浓浓度度，氧氧气气分分析析仪仪及及电电磁磁控控制制线线路路可可反反馈馈地地控控制制氮氮气气瓶瓶的的电电磁磁阀阀门门，使使舱舱内内氧氧浓浓度度控控制制在在调调定定点点 0.50.5范范围围，舱舱内内的的二二氧氧化化碳碳和和水水蒸蒸气气分分别别用用钠钠石石灰灰和和氯氯化化钙钙吸吸收收。密密闭闭舱舱壁壁下下部部留留有有小小缝缝隙隙与与舱舱外外相相通通，可可供供舱舱内内外外气气体体缓缓慢慢进进出出，使使舱舱内内气气体体与与大大气气压压始始终终保保持持平平衡衡。每每次次缺缺氧氧开开始始

182、时时氧氧浓浓度度从从2323降降至至l0l0的的时时间间约约为为30min30min。缺氧期间舱内二氧化碳浓度始终小于缺氧期间舱内二氧化碳浓度始终小于3 3。126实用内容 2 2减压缺氧模型减压缺氧模型 WistarWistar大大鼠鼠置置于于低低氧氧舱舱中中，按按每每只只大大鼠鼠放放钠钠石石灰灰5g5g， 然然 后后 抽抽 气气 减减 压压 ， 3kPa/min3kPa/min渐渐 至至 515154kPa/min54kPa/min（1kPa1kPa7.5mmHg7.5mmHg）为为止止，氧氧含含量量为为101010.510.5，每每天天如如此此低低氧氧持持续续6h6h，共共2 24 4周

183、周。最最后后一一次次缺缺氧氧实实验验完完成成后后次次日日，用用1010乌乌拉拉坦坦(1m1/100g(1m1/100g体体重重) )腹腹腔腔麻麻醉醉。测测右右心心室室压压力力和和肺肺动动脉脉压压力力：分分离离大大鼠鼠右右侧侧颈颈外外静静脉脉，将将塑塑料料导导管管( (外外径径0.9mm0.9mm，内内径径0.6mm)0.6mm)一一端端连连接接压压力力传传感感器器，一一端端从从颈颈外外静静脉脉插插入入，用用RM-6200RM-6200四四导导生生理理记记录录仪仪观观察察压压力力波波形形，以以辨辨别别导管顶端是否在右心室及肺动脉位置。导管顶端是否在右心室及肺动脉位置。127实用内容 测测定定并并

184、记记录录右右心心室室平平均均压压力力和和平平均均动动脉脉压压力力。测测毕毕结结扎扎右右侧侧颈颈外外静静脉脉，并并立立即即分分离离左左侧侧颈颈总总动动脉脉，将将塑塑料料导导管管( (外外径径1mm1mm，内内径径0.6mm)0.6mm)一一端端与与注注射射针针头头连连接接，针针头头尾尾端端接接三三通通管管开开关关，后后者者接接注注射射器器，便便于于用用肝肝素素生生理理盐盐水水冲冲洗洗导导管管以以防防凝凝血血，另另一一端端从从颈颈总总动动脉脉插插入入，转转动动三三通通阀阀门门，使使导导管管与与注注射射器器相相通通，当当有有回回血血时时，关关闭闭三三通通阀阀门门。将将大大鼠鼠置置密密闭闭舱舱内内，仓

185、仓内内气气体体浓浓度度条条件件同同前前。30min30min后后，抽抽取取导导管管部部分分的的血血液液弃弃掉掉。用用注注射射器器抽抽取取动动脉脉血血做做血血气气分分析析。将将大大鼠鼠从从舱舱内内取取出出，立立即即剪剪开开动动物物胸胸腔腔，取取出出心心、肺肺备备病理标本。病理标本。128实用内容 3 3野百合碱皮下注射复制大鼠肺动脉高压模型野百合碱皮下注射复制大鼠肺动脉高压模型 雄雄性性WistarWistar大大鼠鼠，随随机机分分为为实实验验组组和和对对照照组组。将将野野百百合合碱碱结结晶晶（SingmaSingma公公司司产产品品）配配成成2 2溶溶液液，实实验验组组以以50mg/kg50m

186、g/kg体体重重，一一次次性性肩肩胛胛区区皮皮下下注注射射；对对照照组组以以生生理理盐盐水水替替代代野野百百合合碱碱作作皮皮下下注注射射。于于注注射射后后第第1212，1616，24d24d分分批批处处死死动动物物。测测定定右右心心室室和和肺肺动动脉脉压压力力，以以及及进进行行心心肺肺病病理理检检查查。确确定定肺肺动动脉脉高高压压的的指指标标包包括括功功能能和和形形态态学学两两方方面面，其其中中最最直直接接的的证证据据是是肺肺动动胎胎压压力力升升高高。因因为为常常压压缺缺氧氧肺肺动动脉脉高高压压模模型型更更类类似似于于平平原原肺肺心心病病的的发发病病情情况况，故故目目前前多多使使用用常常压压缺

187、缺氧氧肺肺动动脉脉高高压压模模型型，该该模模型型可可供供从从事事这这方方面面的的发发病病机机理理、病病理理、实验性治疗和疗效原理等研究应用。实验性治疗和疗效原理等研究应用。129实用内容 ( (四四) )支支气气管管哮哮喘喘动动物物模模型型(animal (animal model model of of bronchial bronchial asthma)asthma) 目目前前用用作作制制备备哮哮喘喘模模型型的的动动物物很很多多，下下面面介介绍绍几几种常用的动物模型。种常用的动物模型。 1. 1. 卵白蛋白激发豚鼠哮喘动物模型卵白蛋白激发豚鼠哮喘动物模型 过过敏敏原原卵卵白白蛋蛋白白注注

188、入入豚豚鼠鼠体体内内，其其可可溶溶性性抗抗原原成成分分刺刺激激机机体体产产生生特特异异性性免免疫疫素素(IgE(IgE抗抗体体) )，使使机机体体处处于于致致敏敏状状态态。当当豚豚鼠鼠三三次次接接触触到到此此抗抗原原时时，由由IgEIgE介介导导发发生生抗抗原原抗抗体体反反应应，使使细细胞胞脱脱颗颗粒粒，释释放放出出活活性性化化学学物物质质如如组组胺胺、嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞趋趋化化因因子子等等，作作用用于支气管引起气道高反应导致哮喘。于支气管引起气道高反应导致哮喘。130实用内容 健健康康雄雄性性豚豚鼠鼠体体重重300300500g500g，腹腹腔腔注注射射1010卵卵白白蛋蛋白白生生理理

189、盐盐水水溶溶液液10ml10ml，使使豚豚鼠鼠处处于于致致敏敏状状态态，2 2周周后后以以1010卵卵白白蛋蛋白白生生理理盐盐水水溶溶液液雾雾化化吸吸人人10min10min，诱诱发发豚豚鼠鼠哮哮喘喘发发作作。亦亦可可选选用用200200300g300g的的豚豚鼠鼠雌雌雄雄不不限限，于于第第1 1和和第第8 8天天，将将0.50.5卵卵白白蛋蛋白白( (溶溶于于生生理理盐盐水水)10ml)10ml加加至至超超声声雾雾化化吸吸人人器器，给给豚豚鼠鼠用用简简易易面面罩罩雾雾化化吸吸入入10min10min，第第161620d20d将将致致敏敏的的豚豚鼠鼠置置于于密密闭闭的的容容器器内内用用l l卵

190、卵白白蛋蛋白白气气雾雾激激发发，使使动动物物暴暴露露在在卵卵白白蛋蛋白白气气雾雾中中101030min30min，直直至至出出现现哮哮喘喘样样发发作作为为止止：啄啄鼠鼠可可出出现现气气喘喘表表现现，咳咳嗽嗽，烦烦躁躁，口口唇唇和和四四肢肢紫紫绀绀，呼呼吸吸费费力力，挣挣扎扎，呼呼吸吸频频率率明明显显增增快快。用用 导导生生理理记记录录仪仪可可描描记记其其呼呼吸吸曲曲线线，出出现现呼呼吸吸频频率率加加快快和和呼呼吸吸加加深深。病病理理检检查查可可发发现现毛毛细细血血管管扩扩张张，嗜嗜酸酸性粒细胞浸润，腺体分泌活动亢进。性粒细胞浸润，腺体分泌活动亢进。131实用内容 卵卵白白蛋蛋白白激激发发豚豚鼠

191、鼠哮哮喘喘发发作作是是目目前前国国内内外外常常用用的的方方法法，其其方方法法简简单单，可可复复制制性性强强，且且豚豚鼠鼠是是最最好好的的显显示示气气道道高高反反应应性性的的特特征征动动物物，其其哮哮喘喘发发作作与与人人的的表表现现相相似似。本本模模型型主主要要用用于于哮哮喘喘发发病病机机制制的的研研究究和和治疗观察。治疗观察。132实用内容 2 2血小板活性因子血小板活性因子(PAF)(PAF)激发豚鼠哮喘模型激发豚鼠哮喘模型 PAFPAF是是目目前前已已知知的的惟惟一一能能引引起起气气道道高高反反应应性性炎炎症症介介质质。目目前前大大多多数数学学者者认认为为PAFPAF引引发发哮哮喘喘发发作

192、作的的原原因因可可能能是是FAFFAF通通过过嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞的的活活化化趋趋化化、脱脱颗颗粒粒、释释放放嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞蛋蛋白白X X、嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞阳阳离离子子蛋蛋白白(ECP)(ECP)和和碱碱性性蛋蛋白白等等细细胞胞毒毒性性物物质质引引起起气气道道上上皮皮细细胞胞损损伤伤和和脱脱落落。另另外外，激激活活的的嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞本本身身又又合合成成和和释释放放PAFPAF，使使这这一一过过程程加加剧剧，最最终终引引起起气道高反应性。气道高反应性。133实用内容 选选用用300300500g500g成成年年雄雄性性豚豚鼠鼠，在在激激发发实实验验当当天天，采采用

193、用含含0.250.25小小牛牛血血清清白白蛋蛋白白的的生生理理盐盐水水，将将PAFPAF稀稀释释成成500ug/ml500ug/ml，按按1500ug/kg1500ug/kg体体重重的的剂剂量量雾雾化化吸吸入入，可引起豚鼠哮喘发作。可引起豚鼠哮喘发作。 血血小小板板活活性性因因子子激激发发豚豚鼠鼠哮哮喘喘发发作作不不需需要要致致敏敏过过程程，直直接接利利用用其其特特性性而而引引发发气气道道的的高高反反应应性性。本本模模型主要用于哮喘病因学和发病机制的研究。型主要用于哮喘病因学和发病机制的研究。134实用内容 3 3狗过敏性哮喘模型狗过敏性哮喘模型 多多数数狗狗( (约约占占70708080)

194、)有有犬犬蛔蛔虫虫感感染染，体体内内产产生生高高滴滴度度抗抗体体IgEIgE，而而这这些些抗抗体体与与猪猪蛔蛔虫虫抗抗原原发发生生交交叉叉反反应应，产产生生速速发发型型变变态态反反应应。因因而而，模模型型制制作作时时首首先先要要挑挑选选有有犬犬蛔蛔虫虫感感染染的的狗狗，即即皮皮肤肤过过敏敏试试验验阳阳性的狗才能保证模型复制成功。性的狗才能保证模型复制成功。 方法为：方法为： 猪猪蛔蛔虫虫抗抗原原制制备备：将将收收集集到到的的猪猪蛔蛔虫虫用用生生理理盐盐水水清清洗洗数数次次后后，将将其其制制成成匀匀浆浆，测测量量其其容容量量，以以其其二二倍倍量量乙乙醚醚脱脱脂脂，离离心心1500r/min150

195、0r/min，15min15min。弃弃去去上上层脂质，下层即猪蛔虫抗原。层脂质，下层即猪蛔虫抗原。135实用内容 用用猪猪蛔蛔虫虫抗抗原原对对狗狗做做皮皮肤肤过过敏敏试试验验：选选用用101016kg16kg重重的的狗狗，两两性性均均可可，先先将将0.50.5伊伊文文思思蓝蓝生生理理盐盐水水溶溶液液5ml/5ml/只只给给狗狗作作静静脉脉注注射射，然然后后立立即即在在狗狗腹腹壁壁皮皮内内注注射射0.50.5猪猪蛔蛔虫虫抗抗原原0.1ml0.1ml，30min30min后后观观察察反反应应结结果果，如如皮丘形成蓝斑，直径为皮丘形成蓝斑，直径为1 12cm2cm即皮肤过敏试验阳性。即皮肤过敏试验

196、阳性。 用用过过敏敏试试验验阳阳性性的的狗狗做做激激发发实实验验。方方法法：将将狗狗以以戊戊巴巴比比妥妥钠钠30mg/kg30mg/kg体体重重静静脉脉麻麻醉醉后后，用用 导导生生理理记记录录仪仪描描记记呼呼吸吸曲曲线线，用用1 1猪猪蛔蛔虫虫抗抗原原超超声声雾雾化化吸吸入入，吸吸入后呼吸频率增加，可出现喘气、呼吸困难表现。入后呼吸频率增加，可出现喘气、呼吸困难表现。 用用狗狗制制作作此此模模型型具具有有特特异异性性，而而且且此此模模型型较较小小，动动物物哮哮喘喘模模型型便便于于观观察察呼呼吸吸动动力力学学变变化化，本本模模型型用用于于哮哮喘喘病病理理生生理理和和药药物物治治疗疗研研究究，但但

197、应应注注意意麻麻醉醉深深度度对对哮哮喘激发的影响。喘激发的影响。136实用内容 4 4卵白蛋白激发大鼠哮喘动物模型卵白蛋白激发大鼠哮喘动物模型 当当过过敏敏原原卵卵白白蛋蛋白白注注入入大大鼠鼠体体内内，其其可可溶溶性性抗抗原原成成分分刺刺激激机机体体嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞产产生生特特异异性性免免疫疫素素(IgE(IgE抗抗体体) )，附附着着于于肥肥大大细细胞胞和和嗜嗜碱碱性性粒粒细细胞胞表表面面，使使大大鼠鼠处处于于致致敏敏状状态态。当当大大鼠鼠再再次次接接触触到到此此抗抗原原时时。每每一一个个抗抗原原分分子子和和致致敏敏肥肥大大细细胞胞、嗜嗜碱碱性性粒粒细细胞胞的的IgEIgE发发生生抗

198、抗原原抗抗体体反反应应，使使细细胞胞脱脱颗颗粒粒，释释放放活活性性物物质质，作用于支气管引起气道高反应性。作用于支气管引起气道高反应性。137实用内容 选选用用雄雄性性SDSD大大鼠鼠，4 46 6周周龄龄，体体重重120120180g180g，腹腹腔腔注注射射抗抗原原液液1m11m1含含卵卵白白蛋蛋白白100mg100mg，灭灭活活百百日日咳咳杆菌疫苗杆菌疫苗5 510109 9个和氢氧化铝干粉个和氢氧化铝干粉100mg100mg致敏。致敏。2 2周周后后用用超超声声雾雾化化器器向向自自制制雾雾化化箱箱内内喷喷雾雾1 1卵卵白白蛋蛋白白，使使动动物物吸吸人人20min20min激激发发。发发

199、现现呼呼吸吸急急促促，严严重重者者呼呼吸吸减减慢慢或或节节律律不不齐齐，轻轻度度紫紫绀绀，四四肢肢瘫瘫软软，行行动动迟迟滞滞或或俯俯伏伏不不动动，反反应应迟迟钝钝，连连续续激激发发后后大大鼠鼠体体重重减减轻轻，毛色失去光泽，反应迟钝。毛色失去光泽，反应迟钝。 本本模模型型适适用用于于特特异异性性抗抗原原抗抗体体反反应应的的研研究究，有有速速发和迟发双相反应。发和迟发双相反应。 138实用内容 ( (五五) ) 肺肺水水肿肿动动物物模模型型(animal (animal model model of of pulmonary pulmonary edema)edema) 引引起起肺肺水水肿肿的的

200、原原因因虽虽然然各各种种各各样样，但但大大多多数数是是由由于于肺肺毛毛细细血血管管壁壁通通透透性性增增加加或或毛毛细细血血管管内内血血压压升升高高所所致致。肺肺水水肿肿动动物物模模型型的的复复制制，常常采采用用注注射射一一定定的的化化学学物物质质( (如如硝硝酸酸银银、氯氯化化铵铵) )或或吸吸人人一一定定量量的的化化学学毒气毒气( (如氯气、双光气如氯气、双光气) )等方法。等方法。 1 1氯氯气气吸吸入入 小小鼠鼠体体重重25g25g左左右右，用用1g1g重重铬铬酸酸钾钾加加5ml5ml浓浓氯氯化化氢氢，使使瓶瓶中中生生成成薄薄薄薄一一层层云云雾雾状状气气体体后后，将动物投于瓶中，小鼠吸入

201、氯气而致肺水肿。将动物投于瓶中，小鼠吸入氯气而致肺水肿。 2 2一一氧氧化化氮氮吸吸入入 狗狗181823kg23kg，兔兔2.5kg2.5kg，大大鼠鼠200200300g300g，豚豚鼠鼠400400500g500g，分分别别吸吸入入含含有有1.351.35( (狗狗) )、0.730.73( (兔兔) )、0.80.80.90.9( (大大鼠鼠) )、0.90.91.11.1( (豚鼠豚鼠) )浓度的一氧化氮。浓度的一氧化氮。139实用内容 3 3双双光光气气吸吸入入 将将12mg/L12mg/L双双光光气气滴滴在在滤滤纸纸上上，干干后后放放人人密密闭闭容容器器内内，将将小小鼠鼠置置于于

202、容容器器内内15min15min，即即可可形成肺水肿，全部操作应在通风柜进行。形成肺水肿，全部操作应在通风柜进行。 4 4氯氯化化铵铵中中毒毒 动动物物选选大大鼠鼠、小小鼠鼠、豚豚鼠鼠，分分别别于于 腹腹 腔腔 注注 射射 氯氯 化化 铵铵 0.6ml/100g0.6ml/100g体体 重重 ( (大大 鼠鼠 ) )、0.15m1/10g0.15m1/10g体体重重( (小小鼠鼠) )和和0.50.50.7m1/kg0.7m1/kg体体重重( (豚豚鼠鼠) )，使其药液浓度分别达使其药液浓度分别达6 6，3 3，6 6。 5 5生生理理盐盐水水注注射射 健健康康家家兔兔或或狗狗，静静脉脉快快速

203、速输输入入大大量量生生理理盐盐水水，按按每每分分40m1/kg40m1/kg体体重重注注入入动动物物全全血血量量1 11.51.5倍时即可发生肺水肿。倍时即可发生肺水肿。140实用内容 ( (六六) ) 急急性性呼呼吸吸窘窘迫迫综综合合征征动动物物模模型型(animal (animal model model of acute respiratory distresss yndrome)of acute respiratory distresss yndrome) 急急性性呼呼吸吸窘窘迫迫综综合合征征(ARDS)(ARDS)是是一一种种以以进进行行性性呼呼吸吸困困难难与与顽顽固固性性低低氧氧血血症症为为特特征征的的急急性性呼呼吸吸衰衰竭竭。ARDSARDS的的诊诊断断标标准准为为：急急性性起起病病，呼呼吸吸频频数数(28(28次次/min)/min)或或 呼呼 吸吸 窘窘 迫迫 ； 动动 脉脉 血血 氧氧 分分 压压 / /吸吸 氧氧 浓浓 度度(PaO(PaO2 2/FiO/FiO2 2)26.7kPa)26.7kPa；X X线线胸胸片片示示双双肺肺浸浸润润影影；肺肺动动脉脉楔楔压压(PAWP)2.4kPa(PAWP)2.4kPa或或无无左左心心房房高高压压的的临临床床证证据。据。141实用内容THANKS谢谢聆听142实用内容