血清钙、磷、镁和微量元素检验PPT演示课件

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1、1.第一节第一节 概述概述n钙、磷、镁代谢和调节钙、磷、镁代谢和调节n生理功能生理功能 n微量元素与疾病微量元素与疾病2.n钙、磷、镁钙、磷、镁 钙、磷在体内的含量仅次于氧、碳、氢、氮而居钙、磷在体内的含量仅次于氧、碳、氢、氮而居第五、六位,镁含量约居第十一位。第五、六位,镁含量约居第十一位。 n微量元素(微量元素(trace elements)指含量占体重指含量占体重0.01%0.01%以下元素。以下元素。 3.一、一、钙、磷、镁代谢和调节钙、磷、镁代谢和调节(一)钙代谢(一)钙代谢1 1钙的含量、分布和血钙钙的含量、分布和血钙 n含量含量:约约1 11.25kg1.25kg,正常人血钙水平

2、为正常人血钙水平为2.252.252.75mmol/L2.75mmol/L n分布:分布:99%99%的钙分布在骨组织,其余分布于体液和其它组织中。的钙分布在骨组织,其余分布于体液和其它组织中。n血钙血钙 可扩散钙:可扩散钙: 非扩散钙:非扩散钙:占血浆总钙占血浆总钙60%60%,能透过毛细血管能透过毛细血管壁壁与血浆蛋白结合,占与血浆蛋白结合,占血浆总钙血浆总钙40%40%,不能透,不能透过毛细血管壁过毛细血管壁血浆中直血浆中直接发挥生接发挥生理作用的理作用的钙钙离子钙离子钙可溶性不解离的钙盐可溶性不解离的钙盐4.p临床上常测定血清总钙血清总钙量以观察血清离子钙的变化情况,方法简便。p目前已

3、可应用离子选择电极离子选择电极等方法直接测定血清中离子钙的浓度,其正常参考值为1.13-1.32 mmol /L5.2 2钙的吸收和排泄钙的吸收和排泄 部位:部位:在在pHpH较低的小肠上段进行的,以十二指肠上部吸收能力最强。较低的小肠上段进行的,以十二指肠上部吸收能力最强。 影响食物中钙吸收的因素:影响食物中钙吸收的因素:n吸收吸收: 活性维生素活性维生素D D3 3- -主动吸收 肠道肠道pHpH值值- -偏酸时促进吸收 食物成分食物成分- -食物中草酸和植酸可以和钙形成 不溶性盐,影响吸收 年龄年龄-随年龄增长而降低 钙磷比例钙磷比例-2:1吸收最佳6.n排泄:排泄:肠道肠道:食物中未吸

4、收的钙和肠道分泌的钙,:食物中未吸收的钙和肠道分泌的钙,占人体每日摄入钙总量的占人体每日摄入钙总量的80%80%。 肾脏:肾脏:经肾排泄的钙占体内总排钙量的经肾排泄的钙占体内总排钙量的20%20%,但尿中钙的排泄量随血液中钙浓度的变化而但尿中钙的排泄量随血液中钙浓度的变化而增减,在调节体内钙平衡方面发挥主要作用。增减,在调节体内钙平衡方面发挥主要作用。 途途经经7.(二)磷代谢(二)磷代谢1 1磷的含量、分布和血磷磷的含量、分布和血磷 n含量含量:正常成人含磷正常成人含磷600g600g左右。每左右。每kgkg无脂肪的组织约含磷无脂肪的组织约含磷12g12g。 n分布:分布:体内磷的体内磷的8

5、6%86%分布于骨,其余分布于全身各组织及体液中。分布于骨,其余分布于全身各组织及体液中。n血磷血磷:指血浆中无机磷酸盐所含的磷,正常人仅有指血浆中无机磷酸盐所含的磷,正常人仅有0.60.61.61.6mmolmmol/L/L,儿童稍高。,儿童稍高。 血磷浓度没有血钙稳定,它不但随年龄的增长而变化,血磷浓度没有血钙稳定,它不但随年龄的增长而变化,在同一天也会有较大的生理变化。在同一天也会有较大的生理变化。 8.2 2磷的吸收和排泄磷的吸收和排泄 部位:部位:主要在小肠上段,磷的吸收较钙容易。主要在小肠上段,磷的吸收较钙容易。 n吸收吸收:影响食物中磷吸收的因素:影响食物中磷吸收的因素:食物中有

6、过多的钙、镁离子存在时食物中有过多的钙、镁离子存在时 n排泄:排泄: 主要是通过肾脏排泄,排泄量与血液中磷酸盐主要是通过肾脏排泄,排泄量与血液中磷酸盐浓度呈正比。对磷排泄的调节是通过肾小管的重吸浓度呈正比。对磷排泄的调节是通过肾小管的重吸收来完成的。收来完成的。 9.钙盐和磷酸盐是人体含量最高的无机盐钙盐和磷酸盐是人体含量最高的无机盐分布分布钙(1.52.2%)磷磷(0.81.2%)骨和牙骨和牙齿99%85%软组织1%15%细胞外液胞外液0.2%0.1%总量(量(g)7001400400800人人体体内内钙钙和和磷磷的的分分布布10.(三)镁的代谢(三)镁的代谢 n含量含量: : 血浆中的镁浓

7、度约血浆中的镁浓度约0.670.671.23mmol/L1.23mmol/L约占体重的约占体重的0.03%0.03%正常成人含镁约正常成人含镁约202028g.28g.n分布:分布: 约约60%60%以磷酸镁及碳酸镁的形式存在于骨组织中,骨骼肌以磷酸镁及碳酸镁的形式存在于骨组织中,骨骼肌中含镁约占体内总镁量的中含镁约占体内总镁量的20%20%30%30%,其余约,其余约10%10%分布在其它组分布在其它组织中;从体液中镁的分布看,细胞内液的镁的含量约占总量织中;从体液中镁的分布看,细胞内液的镁的含量约占总量的的39%39%,是细胞内仅次于钾的主要阳离子是细胞内仅次于钾的主要阳离子。仅有约。仅有

8、约1%1%的镁存在的镁存在于细胞外液中。于细胞外液中。 11.部位:部位:小肠上段吸收,吸收率只有小肠上段吸收,吸收率只有303040%40%。 n吸收吸收:天然食物中很丰富,很少发生镁缺乏。天然食物中很丰富,很少发生镁缺乏。n排泄:排泄: 肾是体内镁的主要排泄途径,也是血浆镁水平肾是体内镁的主要排泄途径,也是血浆镁水平调节的主要器官。调节的主要器官。 12.(四)钙、磷代谢的调节(四)钙、磷代谢的调节主要通过神经体液进行调节主要通过神经体液进行调节 1 1甲状旁腺素(甲状旁腺素(PTHPTH): : 2 2降钙素(降钙素(TCTC):):多肽类激素多肽类激素 3 31 1,25-(OH)25

9、-(OH)2 2-D-D3 3 : : PTHPTH的靶组织是的靶组织是肾脏、骨和小肠肾脏、骨和小肠 是维生素是维生素D D在体内的活性形式,是维生素在体内的活性形式,是维生素D D在肝在肝肾经羟化作用转变而成的。它的靶器官是肾经羟化作用转变而成的。它的靶器官是小肠、骨小肠、骨和肾。和肾。 13.甲状旁腺激素甲状旁腺激素( parathyroidhormone, PTH)升钙降磷升钙降磷p由甲状旁腺的主细胞合成并分泌的一由甲状旁腺的主细胞合成并分泌的一种单链多肽种单链多肽。pPTH的合成与分泌受细胞外液的合成与分泌受细胞外液Ca2+浓浓度的调节度的调节,血钙降低刺激,血钙降低刺激PTH的分泌。

10、的分泌。pPTH是维持血钙正常水平的最重要的是维持血钙正常水平的最重要的调节因素调节因素,有升高血钙、降低血磷和有升高血钙、降低血磷和酸化血液等作用酸化血液等作用。14.p机制:机制:骨:骨:总的作用是促进溶骨,提高血钙总的作用是促进溶骨,提高血钙。使。使 间质细胞转化为破骨细胞,抑制破骨间质细胞转化为破骨细胞,抑制破骨 细胞向成骨细胞转化。细胞向成骨细胞转化。肾:肾:促进促进肾小管肾小管对钙的重吸收对钙的重吸收,抑制对磷,抑制对磷 的重吸收。的重吸收。肠:肠:促进活性维生素促进活性维生素D的形成的形成,间接促进,间接促进 小肠对钙磷的吸收小肠对钙磷的吸收。15.降钙素(降钙素( calcit

11、onin, CT)降钙降磷降钙降磷p由甲状腺滤泡旁细胞合成、分泌的由甲状腺滤泡旁细胞合成、分泌的32肽激素肽激素。与。与PTH作用拮抗。作用拮抗。骨:促进成骨。使间质细胞转化为成骨细胞,骨:促进成骨。使间质细胞转化为成骨细胞, 抑制破骨细胞的生成。抑制破骨细胞的生成。肾:抑制肾小管肾:抑制肾小管对钙磷的重吸收对钙磷的重吸收肠:抑制肠:抑制小肠对钙的吸收小肠对钙的吸收p机制:机制:p血钙升高能刺激降钙素的分泌血钙升高能刺激降钙素的分泌16.1,25 (OH)2 - D3 (活性维生素(活性维生素D )升钙升磷升钙升磷p在肝和肾的作用下,维生素在肝和肾的作用下,维生素D3转变成转变成1,25 (O

12、H)2 - D3 p机制:机制:肠:肠:促进小肠对钙磷的吸收和转运的双重作用促进小肠对钙磷的吸收和转运的双重作用肾:肾:促进促进肾小管肾小管对钙磷的重吸收对钙磷的重吸收骨:具有溶骨、成骨双重作用,骨:具有溶骨、成骨双重作用,有利于骨的更有利于骨的更 新与生长新与生长17.在正常人体内,通过上述三种物质的相互制在正常人体内,通过上述三种物质的相互制约,相互协调,以适应环境的变化,保持血约,相互协调,以适应环境的变化,保持血钙、血磷浓度的相对恒定。钙、血磷浓度的相对恒定。血钙血钙PTH1,25 (OH)2 - D3 血钙血钙降钙素降钙素18.u 依赖于依赖于三种三种激素的调节激素的调节 :升高,:

13、升高,:显著升高,:显著升高,:降低:降低激素激素1,25-(OH)1,25-(OH)2 2-D-D3 3PTHPTHCTCT成骨溶骨肠钙吸收(生理剂量)肾排钙肾排磷血钙血钙血磷血磷19.(五)钙、磷、镁的生理功能(五)钙、磷、镁的生理功能1 1CaCa2+2+的作用的作用: : 作为凝血因子之一作为凝血因子之一增强心肌收缩,降低神经肌肉兴奋性。增强心肌收缩,降低神经肌肉兴奋性。降低毛细血管的通透性,减少渗出。降低毛细血管的通透性,减少渗出。是许多酶(脂肪酶,是许多酶(脂肪酶,ATPATP酶等)的激活剂,也是酶等)的激活剂,也是其它一些酶(维生素其它一些酶(维生素D D3 3-1-1-羟化酶)

14、的抑制剂。羟化酶)的抑制剂。激素的激素的“第二信使第二信使”. .调节细胞内代谢调节细胞内代谢20.2 2磷的作用磷的作用: : 参与体内核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白等重要生物分参与体内核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白等重要生物分子的组成。子的组成。在物质代谢中参与高能磷酸化合物的合成及多种磷酸在物质代谢中参与高能磷酸化合物的合成及多种磷酸化的中间产物的生成。化的中间产物的生成。某些重要酶的共价修饰调节作用是通过其蛋白质的磷某些重要酶的共价修饰调节作用是通过其蛋白质的磷酸化和脱磷酸化的方式进行的酸化和脱磷酸化的方式进行的血中磷酸盐(血中磷酸盐(HPOHPO4 42-2-/H/H2 2POPO4 4-

15、-)是血液缓冲体系的重要组)是血液缓冲体系的重要组成成分成成分21.镁是参与正常生命活动及代谢过程必需的元素。镁是参与正常生命活动及代谢过程必需的元素。 1 1作为酶的辅助因子作为酶的辅助因子 2 2对神经肌肉兴奋性的作用对神经肌肉兴奋性的作用 3 3镁的作用镁的作用: : 22. 主要元素 含量0.1g/kg体重 C、H、O、N、S、P、 Ca、K、 Na、Cl、Mg等微量元素 含量0.1g/kg体重体内化学元素组成和分类 人体约含有50多种元素。必需的必需的 Fe、Cu、Zn、Mn、Co、Ni、Se、I、F等等14种种无害的无害的 Si、As、Rb、B、Al等等有害的有害的 Bi、Hg、P

16、b、Be等等二、二、 微量元素与疾病微量元素与疾病23.(一)必需微量元素的共同特征(一)必需微量元素的共同特征1 1、多数为金属元素、多数为金属元素2 2、多数在元素周期表中居于前部位置、多数在元素周期表中居于前部位置 3 3、且有高度生物活性及催化生物化学反应的能力、且有高度生物活性及催化生物化学反应的能力 4 4、各种微量元素间有相互影响、拮抗或协同作用、各种微量元素间有相互影响、拮抗或协同作用 24.(二)必需微量元素的含量、分布及生理功用(二)必需微量元素的含量、分布及生理功用微量元素微量元素体内含量体内含量主要分布主要分布每日需要量每日需要量铁铁3 3- -5g5g红细胞、肝、脾红

17、细胞、肝、脾1 1- -1.5mg1.5mg锌锌2 2- -2.5g2.5g骨、肌肉、皮肤、男性生殖道骨、肌肉、皮肤、男性生殖道1010- -15mg15mg铜铜100100- -200mg200mg血液、骨、肌肉、肝、肾、心、脑血液、骨、肌肉、肝、肾、心、脑0.05-2mg0.05-2mg锰锰1212- -20mg20mg肝、肾、骨、松果体、垂体、乳腺肝、肾、骨、松果体、垂体、乳腺2.52.5- -7mg7mg钴钴1.11.1- -1.5mg1.5mg肝、心、肾、骨、脾、胰、小肠肝、心、肾、骨、脾、胰、小肠150150- -450g450g铬铬6mg6mg肝、心、脾肝、心、脾1010- -6

18、0g60g钼钼10mg10mg肝、肺、骨、皮肤肝、肺、骨、皮肤5050- -100g100g镍镍10mg10mg皮肤、骨、肝、肌肉、淋巴结、毛发、汗腺皮肤、骨、肝、肌肉、淋巴结、毛发、汗腺0.30.3- -0.6mg0.6mg硒硒1414- -21mg21mg肝、脾、牙釉、指(趾)甲、心、红细胞肝、脾、牙釉、指(趾)甲、心、红细胞6060- -300g300g碘碘2525- -36mg36mg甲状腺、胃粘膜、唾液腺、脉络膜、乳腺甲状腺、胃粘膜、唾液腺、脉络膜、乳腺100100- -300g300g钒钒25mg25mg牙、骨牙、骨3g3g锡锡17mg17mg肝、脾肝、脾3mg3mg氟氟2.6g2

19、.6g骨、牙、甲状腺、皮肤骨、牙、甲状腺、皮肤0.50.5- -1mg1mg硅硅18g18g皮肤、肌腱、骨骺、血管壁、淋巴结、结缔组织皮肤、肌腱、骨骺、血管壁、淋巴结、结缔组织3mg3mgu含量、分布含量、分布25.u生理功用生理功用酶需要微量元素参加组成其活性中心或激活其活性酶需要微量元素参加组成其活性中心或激活其活性构成体内重要的载体及电子传递系统构成体内重要的载体及电子传递系统参与激素和维生素的合成,影响内分泌系统参与激素和维生素的合成,影响内分泌系统26.(四)必须微量元素与疾病的关系(四)必须微量元素与疾病的关系 当必需微量元素缺乏或过多,或者有害微量元素接触、当必需微量元素缺乏或过

20、多,或者有害微量元素接触、吸收、贮积过多或干扰了必需的微量元素的生理功能和营吸收、贮积过多或干扰了必需的微量元素的生理功能和营养作用,都会引起一定的生理及生物化学过程紊乱而发生养作用,都会引起一定的生理及生物化学过程紊乱而发生疾病。反之,当各种代谢过程失常,病变也会对微量元素疾病。反之,当各种代谢过程失常,病变也会对微量元素的吸收、运输、利用、贮存和排泄等各个环节产生影响。的吸收、运输、利用、贮存和排泄等各个环节产生影响。27.微量元素的功能与缺乏症微量元素的功能与缺乏症微量元素微量元素功能功能缺乏症缺乏症铁铁造血原料,构成细胞色素类造血原料,构成细胞色素类缺铁性贫血缺铁性贫血锌锌细细胞胞分分

21、裂裂,核核酸酸代代谢谢,生生长长,辅辅助助因因子子伊朗乡村病,肠原性肢端皮炎伊朗乡村病,肠原性肢端皮炎铜铜Hb合成,结缔组织代谢合成,结缔组织代谢贫血,毛发异常,脑功能障碍贫血,毛发异常,脑功能障碍铬铬构成葡萄糖耐量因子构成葡萄糖耐量因子耐糖能力耐糖能力,糖尿病,动脉硬化,糖尿病,动脉硬化碘碘构成构成T3、T4,促进生长、发育,促进生长、发育地方性甲状腺肿,呆小病地方性甲状腺肿,呆小病钴钴构成维生素构成维生素B12,造血,造血恶性贫血,甲基丙二酸尿症恶性贫血,甲基丙二酸尿症硒硒抗氧化抗氧化克山病,大骨节病克山病,大骨节病锰锰多种酶的激活剂多种酶的激活剂生生长长发发育育迟迟缓缓,中中枢枢神神经经

22、系系异异常常氟氟骨、牙齿形成骨、牙齿形成龋齿龋齿28.1.促进机体的生长发育 铁、铜、锌、锰、钴、碘等,作为酶和激素的重要组成成分。2.对神经系统结构和功能的影响铁、铜、锌、锰、钴、碘等缺乏时可导致神经系统结构和功能的异常,智力低下。3.对内分泌系统的影响 铜、铁、锌、锰、铬等元素的缺乏或过量可引起内分泌功能失常。4.对免疫系统的影响 铁、铜、锌等缺乏时可降低机体的免疫力。5.对心血管疾病及创伤的影响 适量的锌、锰、铬、硒等元素有利于心血管的结构和功能。如食物中的锌/镉比与高血压的发生和预后密切相关。(三)微量元素对人体各种生命活动的影响(三)微量元素对人体各种生命活动的影响多种微量元素还能影

23、响核酸和蛋白质的生物合成, 故有利于创伤的愈合和疾病的恢复。29.1、微量元素的缺乏症与过多症、微量元素的缺乏症与过多症缺铁性贫血缺铁性贫血地方性甲状腺肿,呆小病地方性甲状腺肿,呆小病克山病,大骨节病克山病,大骨节病龋齿龋齿血色沉着病血色沉着病WilsonWilson2、微量元素与地方病:地方性甲状腺肿、微量元素与地方病:地方性甲状腺肿 3、微量元素与职业病:接触砷过多引起砷性皮肤癌、微量元素与职业病:接触砷过多引起砷性皮肤癌 30.第二节第二节 钙、磷、镁和微量元素测定钙、磷、镁和微量元素测定n血清钙、磷、镁的测定血清钙、磷、镁的测定 n尿液钙、镁、磷的测定尿液钙、镁、磷的测定n铁、铜和锌测

24、定铁、铜和锌测定31.一、血钙测定一、血钙测定测定方法测定方法 物理法物理法火焰光度法火焰光度法离子选择电极法离子选择电极法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法同位素稀释质谱法同位素稀释质谱法化学法化学法滴定法(氧化还原滴定、络合滴定)滴定法(氧化还原滴定、络合滴定)比色法(邻甲酚酞络合法、比色法(邻甲酚酞络合法、甲基麝香甲基麝香草酚蓝法草酚蓝法)酶法酶法32.p方法:方法:离子选择性电极法离子选择性电极法 离子钙测定离子钙测定 p参考范围:参考范围:1.101.101.34mmol/L1.34mmol/L 在评价钙的生物学活性方面,以测定在评价钙的生物学活性方面,以测定离子钙为佳。但从反映机

25、体钙的总体代谢离子钙为佳。但从反映机体钙的总体代谢状况来说,总钙测定更为客观,两者不能状况来说,总钙测定更为客观,两者不能完全相互替代。完全相互替代。迅速、简便、敏感性高,重复性好迅速、简便、敏感性高,重复性好 影响因素:影响因素:标本标本pHpH值的改变,添加剂,标本类型。值的改变,添加剂,标本类型。 33.注意事项注意事项测定离子钙最好用血清标本。当急需测定结果时,可用肝素化全血。血浆肝素浓度达到30 Uml 时,能使离子钙浓度降低3 5 ,肝素综浓度应控制在15U/ml。血标本应密封储存,防止其中二氧化碳丢失致使其pH 值增加,而钙离子浓度下降。标本置4 可稳定6h ,储存时间过长,血内

26、乳酸积聚,一方面乳酸根阴离子与大约相等的钙离子螯合使离子钙浓度下降;另一方面氢离子可使白蛋白释放出钙离子,从而增加钙离子浓度。碱性试剂暴露于空气中易吸收二氧化碳,使试剂pH 值下降。34.总钙测定总钙测定 p方法:方法:方法:方法:滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法、酶法等吸收分光光度法、同位素稀释质谱法、酶法等 p参考范围:参考范围:参考范围:参考范围:2.032.032.54mmol/L2.54mmol/Lp国际临床化学联合会(国际临床化学联合会(国际临床化学联合会(国际临床化学联合会(IFCCIFCCIFCCIFCC)

27、推荐:)推荐:)推荐:)推荐:决定性方法:同位素稀释质谱法(决定性方法:同位素稀释质谱法(ID-MSID-MS) 参考方法:参考方法: 原子吸收分光光度法(原子吸收分光光度法(AASAAS) 常规方法:常规方法: 邻甲酚酞络合酮法(邻甲酚酞络合酮法(O-CPCO-CPC) 35.原原理理 血血清清中中的的钙钙离离子子在在碱碱性性溶溶液液中中与与麝麝香香草草酚酚蓝蓝 ( MTB) 结结 合合 , 生生 成成 一一 种种 蓝蓝 色色 的的 络络 合合 物物(612nm)。加加入入适适当当的的8-羟羟基基喹喹啉啉,可可消消除除镁镁离离子子对对测测定定的的干干扰扰,与与同同样样处处理理的的钙钙标标准准

28、液液进进行行比较,可求出血清总钙的含量。比较,可求出血清总钙的含量。u 甲基麝香草酚蓝法甲基麝香草酚蓝法(MTB)评评价价 显显色色稳稳定定,线线性性范范围围大大,溶溶血血、黄黄疸疸无无干干扰扰,灵灵敏敏度度高高。操操作作简简单单,适适合合手手工工操操作作,也也适适用于自动化分析仪。用于自动化分析仪。36.u 邻甲酚酞络合酮法(邻甲酚酞络合酮法(O-CPC) 原原理理 邻邻甲甲酚酚酞酞络络合合酮酮 ( (o-cresolphthaleino-cresolphthalein complexonecomplexone, , O-CPC)O-CPC)是是一一种种金金属属络络合合染染料料,也也是是酸酸

29、碱碱指指示示剂剂。在在碱碱性性环环境境中中,能能与与钙钙和和镁镁螯螯合合生生成成紫紫红红色色的的络络合合物物,在在575nm575nm附附近近有有特特征征吸吸收收。同同时时和和钙钙标标准准液液比比较较即即可可测测出出血血钙钙含含量量。在在测测定定时时,加入加入8-8-羟基喹啉羟基喹啉消除镁离子的干扰。消除镁离子的干扰。评评价价操操作作简简单单、快快捷捷、用用血血量量少少,其其测测定定结结果果与与参参考考方方法法很很接接近近,适适用用于于全全自自动动分分析析。灵灵敏敏度度很很高高,试试剂剂配配制制最最好好选选用用重重蒸蒸馏馏水水,测测定定器器皿皿要要洁洁净净,最最好好用用一一次次性性塑塑料料试试

30、管。管。37. 人体内的磷元素尚不能直接人体内的磷元素尚不能直接测定。在临床化学实验室进行的测定。在临床化学实验室进行的无机磷测定实际上只是直接分析无机磷测定实际上只是直接分析磷酸盐阴离子(磷酸盐阴离子(H2PO4-,HPO42-) 常用的方法有:磷钼酸法、常用的方法有:磷钼酸法、染料法、酶法。染料法、酶法。二、血磷测定二、血磷测定38.u 磷钼酸法磷钼酸法直接紫外测定法直接紫外测定法 原原理理 无无机机磷磷与与硫硫酸酸、钼钼酸酸铵铵反反应应生生成成磷磷酸酸钼钼酸酸络络合合物物,在在340nm处处有有最最大大吸吸收收峰峰。其其吸吸光光度度与与样本中无机磷的浓度成正比。样本中无机磷的浓度成正比。

31、评评价价 本本法法快快速速、简简便便,准准确确度度、精精密密度度高高。重重复性好,复性好,线性范围宽线性范围宽。39.u 磷钼酸还原法磷钼酸还原法 原原理理 血血清清中中的的无无机机磷磷与与钼钼酸酸盐盐生生成成磷磷钼钼酸酸化化合合物物,再再用用还还原原剂剂(硫硫酸酸亚亚铁铁)将将其其还还原原成成蓝蓝色色的的钼蓝,钼蓝,620nm进行比色分析。进行比色分析。是测定血磷的常规方法。是测定血磷的常规方法。 评评价价 特特异异性性较较高高,线线性性范范围围较较宽宽,可可用用于于自自动动分分析析仪仪。但但此此法法灵灵敏敏度度低低,呈呈色色易易受受还还原原剂剂的的影影响响。参考范围参考范围 0.971.6

32、2mmol/L。40.u 酶法酶法 是是一一个个偶偶联联反反应应,参参与与反反应应的的酶酶有有糖糖原原磷磷酸酸化化酶酶、葡葡萄萄糖糖磷磷酸酸变变位位酶酶及及葡葡萄萄糖糖6-磷磷酸酸脱脱氢氢酶酶,反反应应中中使使NADP+还还原原成成NADPH,在在340nm测测定定其其吸吸光光度度。该该方方法法不不受受有有机机磷磷酸酸酯酯的的干干扰扰,可可用用于常规标本的自动分析于常规标本的自动分析 。 孔孔雀雀绿绿直直接接显显色色测测定定法法,虽虽非非常常敏敏感感,但但影影响响因因素素多多,显显色色不不稳稳定定,重重复复性性也也较较差差,不不能能用用于于常常规检验。规检验。u 染料法染料法41.A340nm

33、42.三、血镁测定三、血镁测定测定方法测定方法 物理法物理法原子吸收分光光度法(参考方法)原子吸收分光光度法(参考方法)同位素稀释质谱法(决定性方法)同位素稀释质谱法(决定性方法)离子选择电极法(离子镁测定)离子选择电极法(离子镁测定)化学法化学法(传统方法)(传统方法)钙镁试剂比色法钙镁试剂比色法达旦黄达旦黄比色法比色法甲基麝香草酚比色法甲基麝香草酚比色法(常规方法)(常规方法)(EGTA)酶法酶法 新进展,将成为新的自动化方法新进展,将成为新的自动化方法参考范围参考范围 0.671.04mmol/L。43.44.二、尿液钙、镁、磷的测定二、尿液钙、镁、磷的测定 尿液中钙、镁、磷浓度的波动范

34、围很大,影响因素较多,一般测定时尿液中钙、镁、磷浓度的波动范围很大,影响因素较多,一般测定时不取随机尿,而采取不取随机尿,而采取2424小时混合尿测定。小时混合尿测定。 (一)尿液钙的测定(一)尿液钙的测定一般采用邻甲酚酞络合酮法或甲基麝香草酚蓝法一般采用邻甲酚酞络合酮法或甲基麝香草酚蓝法 (二)尿液镁的测定(二)尿液镁的测定测定血清镁的方法均可用于尿镁的测定测定血清镁的方法均可用于尿镁的测定 以上标本需酸化,从而溶解钙盐、镁盐或以上标本需酸化,从而溶解钙盐、镁盐或磷酸盐磷酸盐 。(三)尿液磷的测定(三)尿液磷的测定尿磷测定方法与血磷相同,应取尿磷测定方法与血磷相同,应取2424小时混合尿小时

35、混合尿 45.四、铁的测定四、铁的测定 血清中铁的含量很低,均与运铁蛋白结合而运输。血清中铁的含量很低,均与运铁蛋白结合而运输。血液中所有的运铁蛋白全部结合所需的铁量称为血液中所有的运铁蛋白全部结合所需的铁量称为总铁结合力总铁结合力铁饱和度铁饱和度 血清铁测定血清铁测定血清总铁结合力测定血清总铁结合力测定血清总铁结合力血清总铁结合力 (total iron-bindingcapacity ,TIBC)46.血清铁的测定血清铁的测定 测定方法测定方法 电化学法电化学法分光光度法(首选方法)分光光度法(首选方法)亚铁嗪比色法亚铁嗪比色法双联吡啶比色法双联吡啶比色法菲洛嗪比色法菲洛嗪比色法发色剂:发

36、色剂:亚铁嗪亚铁嗪、双联吡啶双联吡啶等等47. 总铁结合力的测定总铁结合力的测定 在血清样品中加足量的铁标准液使运铁铁在血清样品中加足量的铁标准液使运铁铁蛋白被铁饱和。过量的铁用蛋白被铁饱和。过量的铁用MgCO3除除去去,离心取上清液,按测血清铁的方法求出铁离心取上清液,按测血清铁的方法求出铁的含量,即为的含量,即为TIBC。测定方法测定方法 碳酸镁吸附法碳酸镁吸附法直接测定法直接测定法美国原装美国原装IBCT试剂盒试剂盒48.铜的测定铜的测定n标本:标本:血清、尿、头发、软组织等血清、尿、头发、软组织等 n测定方法:测定方法:1.1.原子吸收光光度法原子吸收光光度法 2.2.血清铜比色法。血清铜比色法。 血清铜血清铜: : 男男111122mol/L22mol/L 女女12.512.524.3mol/L24.3mol/L 尿尿 铜铜: 0.24: 0.240.47mol/24h0.47mol/24h【参考范围参考范围】49.(三)锌的测定(三)锌的测定n标本:标本:血浆、尿、唾液和头发标本血浆、尿、唾液和头发标本 n测定方法:测定方法:1.1.原子吸收光光度法原子吸收光光度法 2 .2 .吡啶偶氮萘酚比色法吡啶偶氮萘酚比色法 【参考范围参考范围】血清锌血清锌8.48.423mol/L23mol/L 尿尿 锌锌 2.32.319.9mol/24h19.9mol/24h50.

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