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1、1 1 绪论1生物化学研究的对象和内容是什么?解答 :生物化学主要研究: 1生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能;2生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化;3生物遗传信息的储存、传递和表达;4生物体新陈代谢的调节与控制。2你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。提示 :生物化学是生命科学的基础学科,注意从不同的角度,去理解并运用生物化学的知识。3说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。解答 :生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6 种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质,即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单键
2、、共价双键和共价三键,碳还可与氮、 氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4 个共价键的性质, 使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基NH2 、羟基 OH 、羰基CO 、羧基 COOH 、巯基 SH 、磷酸基 PO4 等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。生物大分子在结构上也有着共同的规律性。生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状,其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20 种基本氨基酸。氨基
3、酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性N 端 C 端 , 蛋白质主链骨架呈“肽单位”重复;核酸的构件是核苷酸, 核苷酸通过3, 5 - 磷酸二酯键相连,核酸链也具有方向性(5、 3 ), 核酸的主链骨架呈“磷酸- 核糖或脱氧核糖 ”重复;构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱,其非极性烃长链也是一种重复结构;构成多糖的构件是单糖,单糖间通过糖苷键相连,淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。2 蛋白质化学1用于测定蛋白质多肽链N 端、 C 端的常用方法有哪些?基本原理是什么?解答 : 1 N-末端测定法:常采用2, 4二硝基氟苯法、Edman 降解法、 丹磺酰氯法。精选学习资料 - - - -
4、 - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 32 页2 2,4二硝基氟苯(DNFB 或 FDNB) 法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与2,4二硝基氟苯 2,4DNFB 反应Sanger反应, 生成 DNP多肽或DNP 蛋白质。 由于 DNFB与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNP多肽经酸水解后,只有N末端氨基酸为黄色 DNP氨基酸衍生物,其余的都是游离氨基酸。 丹磺酰氯 (DNS) 法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯DNSCl反应生成 DNS多肽或DNS蛋白质。 由于 DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定,因此DNS多肽经酸水解后,只有N末
5、端氨基酸为强烈的荧光物质DNS氨基酸,其余的都是游离氨基酸。 苯异硫氰酸脂PITC 或 Edman 降解法:多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯 PITC反应 Edman 反应,生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时,N末端的PTC氨基酸发生环化, 生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来,除去 N末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。 氨肽酶法: 氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶,能从多肽链的N 端逐个地向里切。根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量,按反应时间和残基释放量作动力学曲线,就能知道该蛋白质的N 端残基序列。2 C末端测定法:常采用肼解法、复原法、羧肽
6、酶法。肼解法:蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解,反应中除C 端氨基酸以游离形式存在外,其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。 复原法: 肽链 C 端氨基酸可用硼氢化锂复原成相应的 氨基醇。 肽链完全水解后,代表原来 C末端氨基酸的 氨基醇,可用层析法加以鉴别。 羧肽酶法:是一类肽链外切酶,专一的从肽链的C末端开始逐个降解,释放出游离的氨基酸。 被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量摩尔数与反应时间的关系,便可以知道该肽链的C末端氨基酸序列。2测得一种血红蛋白含铁0.426%,计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含亮氨酸 1.65%和异亮氨酸2.48%,问其最低相
7、对分子质量是多少?精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 32 页3 3指出下面pH 条件下,各蛋白质在电场中向哪个方向移动,即正极,负极,还是保持原点?1胃蛋白酶 ,在 pH;2血清清蛋白 ,在 pH;3 - 脂蛋白,在 pH 和 pH;解答 : 1胃蛋白酶环境,带负电荷,向正极移动;2血清清蛋白环境,带负电荷,向正极移动;3 - 脂蛋白环境,带正电荷,向负极移动; - 脂蛋白环境,带负电荷,向正极移动。4何谓蛋白质的变性与沉淀?二者在本质上有何区别?解答 :蛋白质变性的概念:天然蛋白质受物理或化学因素的影响后,使其失去原有的
8、生物活性,并伴随着物理化学性质的改变,这种作用称为蛋白质的变性。变性的本质:分子中各种次级键断裂,使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态,一级结构不破坏。蛋白质变性后的表现:?生物学活性消失;?理化性质改变:溶解度下降,黏度增加,紫外吸收增加,侧链反应增强,对酶的作用敏感,易被水解。蛋白质由于带有电荷和水膜,因此在水溶液中形成稳定的胶体。如果在蛋白质溶液中加入适当的试剂, 破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷,则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理:破坏蛋白质的水化膜,中和外表的净电荷。蛋白质的沉淀可以分为两类:1可逆的沉淀:蛋白质的结构未发生显著的变化,除去引起沉淀的因素
9、,蛋白质仍能溶于原来的溶剂中,并保持天然性质。如盐析或低温下的乙醇或丙酮短时间作用蛋白质。2不可逆沉淀:蛋白质分子内部结构发生重大改变,蛋白质变性而沉淀,不再能溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀,与重金属或某些酸类的反应都属于此类。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 32 页4 蛋白质变性后,有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在,并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀,而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。5以下试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr ,异硫氰酸苯酯,丹磺酰氯,脲,6mol/L HCl - 巯基乙醇,水合茚三
10、酮,过甲酸,胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,其中哪一个最适合完成以下各项任务?1测定小肽的氨基酸序列。2鉴定肽的氨基末端残基。3不含二硫键的蛋白质的可逆变性。假设有二硫键存在时还需加什么试剂?4在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。5在甲硫氨酸残基羧基侧水解肽键。6在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。解答 : 1异硫氰酸苯酯; 2丹黄酰氯;3脲;- 巯基乙醇复原二硫键; 4胰凝乳蛋白酶; 5 CNBr; 6胰蛋白酶。6由以下信息求八肽的序列。1酸水解得Ala, Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val。2 Sanger试剂处理得DNP- Ala 。3胰蛋白酶处理得Ala, Arg, Thr 和 Leu
11、,Met,Phe,2Val。当以 Sanger 试剂处理时分别得到DNP -Ala 和 DNP- Val。4溴化氰处理得Ala ,Arg,高丝氨酸内酯,Thr,2Val,和Leu,Phe,当用 Sanger试剂处理时,分别得DNP- Ala 和 DNP- Leu。解答 :由 2推出 N 末端为Ala ;由 3推出 Val 位于 N 端第四, Arg 为第三,而Thr 为第二;溴化氰裂解,得出N 端第六位是Met,由于第七位是Leu,所以 Phe 为第八;由 4 ,第五为Val。所以八肽为:Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。7一个 螺旋片段含有180 个氨基酸残基,
12、该片段中有多少圈螺旋?计算该 -螺旋片段的轴长。解答 :180/3.6=50 圈, 50 0.54=27nm,该片段中含有50 圈螺旋,其轴长为27nm。8当一种四肽与FDNB 反应后,用水解得到DNP-Val 及其他 3 种氨基酸;当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段;其中一片用LiBH4 下标 复原后再进行酸水解,水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫红 色产物的氨基酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的?解答 : 1四肽与FDNB 反应后,用水解得到DNP-Val ,证明 N 端为 Val。2 LiBH4复原后再水解,水解液中有氨基乙醇,证明肽的C 端为 G
13、ly。3水解液中有在浓H2SO4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸,说明此氨基酸为 Trp。说明 C 端为 GlyTrp精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 32 页5 4根据胰蛋白酶的专一性,得知N 端片段为ValArgLys,以 1 、 2 、 3结果可知道四肽的顺序:NVal ArgLys TrpGly C。9概述测定蛋白质一级结构的基本步骤。解答 : 1测定蛋白质中氨基酸组成。2蛋白质的N 端和 C 端的测定。3应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂,各自得到一系列大小不同的肽段。4别离提纯
14、所产生的肽,并测定出它们的序列。5从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列顺序。如果蛋白质含有一条以上的肽链,则需先拆开成单个肽链再按上述原则确定其一级结构。如是含二硫键的蛋白质,也必须在测定其氨基酸排列顺序前,拆开二硫键, 使肽链分开,并确定二硫键的位置。拆开二硫键可用过甲酸氧化,使胱氨酸部分氧化成两个半胱氨磺酸。3 核酸1电泳别离四种核苷酸时,通常将缓冲液调到什么pH?此时它们是向哪极移动?移动的快慢顺序如何? 将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时,应将溶液调到什么pH? 如果用逐渐降低pH 的洗脱液对阴离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱别离,其洗脱顺序如何?为什么?解答 :
15、电泳别离 4 种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH 时,这 4 种单核苷酸之 间 所 带 负 电 荷 差 异 较 大 , 它 们 都 向 正 极 移 动 , 但 移 动 的 速 度 不 同 , 依 次 为 :UMPGMPAMPCMP; 应取,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然时核苷酸带有更多的负电荷,但pH 过高对别离不利。当不考虑树脂的非极性吸附时, 根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMPAMP GMP UMP ,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3 倍。静电吸附与非极性吸附共同作用
16、的结果使洗脱顺序为:CMP AMP UMP GMP 。2为什么DNA 不易被碱水解,而RNA 容易被碱水解? 解答 :因为 RNA 的核糖上有2 -OH 基,在碱作用下形成2 ,3 -环磷酸酯, 继续水解产生2 -核苷酸和3 -核苷酸。 DNA 的脱氧核糖上无2 -OH 基,不能形成碱水解的中间产物,故对碱有一定抗性。3 一个双螺旋DNA 分子中有一条链的成分, 请推测这一条链上的T 和C 的情况。 互补链的 A ,G ,T 和C的情况。解答 : T + C = 1 0.24 = ;, , 。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,
17、共 32 页6 4对双链 DNA 而言,假设一条链中,则互补链中和整个DNA 分子中 (A+G)/(T+C)分别等于多少?假设一条链中,则互补链中和整个DNA 分子中 (A + T)/(G + C) 分别等于多少?解答 : 设 DNA 的两条链分别为和 则: A= T,T= A,G= C,C= G,因为: (A+ G)/T+ C = (T+ C)/A+ G,所以互补链中A+ G/T+ C;在整个 DNA 分子中,因为A = T , G = C,所以, A + G = T + C , A + G /T + C= 1; 假设同 1,则 A+ T= T+ A,G+ C= C+ G,所以, A+ T/
18、G+ C=A+ T/G+ C= 0.7 ;在整个 DNA 分子中, A+ T+ A+ T/G+C+ G+C= 2A+ T/2G+C5T7 噬菌体 DNA( 双链 B-DNA) 的相对分子质量为2.5 107,计算 DNA 链的长度 (设核苷酸对的平均相对分子质量为640)。解答 :0.34 2.5 107/640 = 1.3 104nm = 13 m。6如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA 含量为 6.4 109个碱基对。试计算人体 DNA 的总长度是多少?是太阳地球之间距离(2.2 109 km) 的多少倍?已知双链DNA每 1000 个核苷酸重1 10-18g,求人体 DNA 的总
19、质量。解答 :每个体细胞的DNA 的总长度为:6.4 109 0.34nm = 2.176 109 nm = ,人体内所有体细胞的DNA 的总长度为: 1014 = 2.1761011km,这个长度与太阳地球之间距离2.2 109 km相比为: 2.176 1011/2.2 109 = 99 倍,每个核苷酸重1 10-18g/1000 = 10-21g,所以,总 DNA 6.4 1023 10-21 = 6.4 102 = 640g。7 有一个 X 噬菌体突变体的DNA 长度是 15m , 而正常 X 噬菌体 DNA 的长度为 17 m,计算突变体DNA 中丧失掉多少碱基对?解答 : 17 1
20、5103/0.34 = 5.88 103bp 8概述超螺旋DNA 的生物学意义。解答 : 超螺旋 DNA 比松弛型DNA 更紧密,使DNA 分子的体积更小,得以包装在细胞内;超螺旋会影响双螺旋分子的解旋能力,从而影响到DNA 与其他分子之间的相互作用;超螺旋有利于DNA 的转录、复制及表达调控。9为什么自然界的超螺旋DNA 多为负超螺旋?解答 :环状DNA自身双螺旋的过度旋转或旋转不足都会导致超螺旋,这是因为超螺旋将使分子能够释放由于自身旋转带来的应力。双螺旋过度旋转导致正超螺旋,而旋转不足将导致负超螺旋。 虽然两种超螺旋都能释放应力,但是负超螺旋时,如果发生DNA解链即氢链断开,部分双螺旋分
21、开就能进一步释放应力,而 DNA转录和复制需要解链。因此自然界环状 DNA采取负超螺旋,这可以通过拓扑异构酶的操作实现。10真核生物基因组和原核生物基因组各有哪些特点? 解答 : 不同点 : 真核生物DNA含量高,碱基对总数可达10 11,且与组蛋白稳定结精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 32 页7 合形成染色体,具有多个复制起点。原核生物DNA含量低,不含组蛋白,称为类核体,只有一个复制起点。 真核生物有多个呈线形的染色体;原核生物只有一条环形染色体。 真核生物 DNA中含有大量重复序列,原核生物细胞中无重复序列。真核生
22、物中为蛋白质编码的大多数基因都含有内含子( 有断裂基因 );原核生物中不含内含子。真核生物的RNA是细胞核内合成的,它必须运输穿过核膜到细胞质才能翻译,这样严格的空间间隔在原核生物内是不存在的。原核生物功能上密切相关的基因相互靠近,形成一个转录单位,称操纵子,真核生物不存在操纵子。病毒基因组中普遍存在重叠基因,但近年发现这种情况在真核生物也不少见。相同点: 都是由相同种类的核苷酸构成的的双螺旋结构,均是遗传信息的载体,均含有多个基因。11如何看待RNA 功能的多样性?它的核心作用是什么? 解答 :RNA的功能主要有: 控制蛋白质合成;作用于 RNA转录后加工与修饰; 参与细胞功能的调节; 生物
23、催化与其他细胞持家功能;遗传信息的加工;可能是生物进化时比蛋白质和DNA更早出现的生物大分子。其核心作用是既可以作为信息分子又可以作为功能分子发挥作用。12什么是DNA 变性? DNA 变性后理化性质有何变化?解答 :DNA双链转化成单链的过程称变性。引起 DNA变性的因素很多,如高温、 超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂如尿素,酰胺) 等都能引起变性。DNA变性后的理化性质变化主要有:天然 DNA分子的双螺旋结构解链变成单链的无规则线团,生物学活性丧失;天然的线型DNA分子直径与长度之比可达110,其水溶液具有很大的黏度。变性后,发生了螺旋-线团转变, 黏度显著降低;在氯化铯溶液中进
24、行密度梯度离心,变性后的 DNA浮力密度大大增加,故沉降系数S 增加;DNA变性后,碱基的有序堆积被破坏,碱基被暴露出来,因此,紫外吸收值明显增加,产生所谓增色效应。DNA分子具旋光性,旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性,因此旋光性很强,其a = 150。当 DNA分子变性时,比旋光值就大大下降。13哪些因素影响Tm值的大小?解答 :影响 Tm的因素主要有:G-C对含量。 G-C对含 3 个氢键, A-T 对含 2 个氢键,故 G-C对相对含量愈高,Tm亦越高图3-29 。在 0.15mol/L NaCl,0.015mol/L柠檬酸钠溶液(1 SSC)中,经验公式为: G+C % =
25、Tm- 69.3 2.44 。溶液的离子强度。离子强度较低的介质中,Tm较低。在纯水中,DNA在室温下即可变性。分子生物学研究工作中需核酸变性时,常采用离子强度较低的溶液。溶液的pH 。高 pH 下,碱基广泛去质子而丧失形成氢键的有力,pH大于 11.3 时, DNA完全变性。 pH低于 5.0 时, DNA易脱嘌呤,对单链DNA进行电泳时,常在凝胶中加入NaOH以维持变性关态。变性剂。甲酰胺、尿素、甲醛等可破坏氢键,阻碍碱堆积,使Tm下降。对单链DNA进行电泳时,常使用上述变性剂。14哪些因素影响DNA 复性的速度?精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - -
26、- - - -第 7 页,共 32 页8 解答 :影响复性速度的因素主要有:复性的温度,复性时单链随机碰撞,不能形成碱基配对或只形成局部碱基配对时,在较高的温度下两链重又别离,经过多次试探性碰撞才能形成正确的互补区。所以,核酸复性时温度不宜过低,Tm-25 是较合适的复性温度。单链片段的浓度,单链片段浓度越高,随机碰撞的频率越高,复性速度越快。单链片段的长度,单链片段越大,扩散速度越慢,链间错配的概率也越高。因面复性速度也越慢,即DNA的核苷酸对数越多,复性的速度越慢,假设以C0为单链的初始浓度,t为复性的时间,复性达一半时的C0t值称C0t1/2,该数值越小,复性的速度越快。单链片段的复杂度
27、,在片段大小相似的情况下,片段内重复序列的重复次数越多,或者说复杂度越小,越容易形成互补区,复性的速度就越快。真核生物DNA的重复序列就是复生动力学的研究发现的,DNA的复杂度越小,复性速度越快。15概述分子杂交的概念和应用领域。解答 :在退火条件下,不同来源的DNA互补区形成双链,或DNA单链和RNA单链的互补区形成DNA-RNA 杂合双链的过程称分子杂交。通常对天然或人工合成的DNA或 RNA片段进行放射性同位素或荧光标记,做成探针,经杂交后,检测放射性同位素或荧光物质的位置,寻找与探针有互补关系的DNA或 RNA 。直接用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交,因未改变核酸所在的位置,称原位杂
28、交技术。将核酸直接点在膜上,再与探针杂交称点杂交,使用狭缝点样器时, 称狭缝印迹杂交。该技术主要用于分析基因拷贝数和转录水平的变化,亦可用于检测病原微生物和生物制品中的核酸污染状况。杂交技术较广泛的应用是将样品DNA切割成大小不等的片段,经凝胶电泳别离后,用杂交技术寻找与探针互补的DNA片段。 由于凝胶机械强度差,不适合于杂交过程中较高温度和较长时间的处理,Southern 提出一种方法,将电泳别离的DNA片段从凝胶转移到适当的膜如硝酸纤维素膜或尼龙膜上,在进行杂交操作,称Southern 印迹法,或Southern杂交技术。随后,Alwine 等提出将电泳别离后的变性RNA吸印到适当的膜上再
29、进行分子杂交的技术,被戏称为 Northern印迹法,或Northern杂交。分子杂交广泛用于测定基因拷贝数、基因定位、确定生物的遗传进化关系等。 Southern 杂交和 Northern杂交还可用于研究基因变异,基因重排,DNA多态性分析和疾病诊断。 杂交技术和PCR技术的结合, 使检出含量极少的DNA成为可能。 促进了杂交技术在分子生物学和医学领域的广泛应用。DNA芯片技术也是以核酸的分子杂交为基础的。16概述核酸序列测定的方法和应用领域。解答 :DNA的序列测定目前多采用Sanger 提出的链终止法,和 Gilbert提出的化学法。其中链终止法经不断改良,使用日益广泛。链终止法测序的技
30、术基础主要有:用凝胶电泳别离 DNA单链片段时, 小片段移动, 大片段移动慢, 用适当的方法可别离分子大小仅差一个核苷酸的DNA片段。用合适的聚合酶可以在试管内合成单链DNA模板的互补链。反应体系中除单链模板外,还应包括合适的引物,4 种脱氧核苷三磷酸和假设干种适量的无机离子。如果在 4 个试管中分别进行合成反应,每个试管的反应体系能在一种核苷酸处随机中断精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 32 页9 链的合成, 就可以得到4 套分子大小不等的片段,如新合成的片段序列为-CCATCGTTGA- ,在A处随机中断链的合成,可得
31、到 -CCA和-CCATCGTA 两种片段, 在 G处中断合成可得到-CCATCG和-CCATCGTTG 两种片段。在C和 T 处中断又可以得到相应的2 套片段。用同位素或荧光物质标记这4 套新合成的链, 在凝胶中置于4 个泳道中电泳, 检测这 4 套片段的位置, 即可直接读出核苷酸的序列。在特定碱基处中断新链合成最有效的方法,是在上述4 个试管中按一定比例分别加入一种相应的2,3 - 双脱氧核苷三磷酸ddNTP ,由于 ddNTP的 3 位无 -OH,不可能形成磷酸二酯键,故合成自然中断。如上述在A 处中断的试管内,既有dATP ,又有少量的 ddATP ,新合成的 -CCA链中的 A如果是
32、 ddAMP, 则链的合成中断,如果是dAMP ,则链仍可延伸。因此,链中有几个A,就能得到几种大小不等的以A为末端的片段。如果用放射性同位素标记新合成的链,则 4 个试管中新合成的链在凝胶的4 个泳道电泳后, 经放射自显影可检测带子的位置,由带子的位置可以直接读出核苷酸的序列。采用T7 测序酶时,一次可读出 400 多个核苷酸的序列。 近年采用 4 种射波长不同的荧光物质分别标记4 种不同的双脱氧核苷酸, 终止反应后4 管反应物可在同一泳道电泳,用激光扫描收集电泳信号,经电脑处理可将序列直接打印出来。采用毛细管电泳法测序时,这种技术一次可测定700 个左右核苷酸的序列, 一台仪器可以有几十根
33、毛细管同时进行测序,且电泳时间大大缩短,自动测序技术的进步加快了核酸测序的步伐,现已完成了包括人类在内的几十个物种的基因组测序。RNA序列测定最早采用的是类似蛋白质序列测定的片段重叠法,Holley用此法测定酵母丙氨酸tRNA 序列耗时达数年之久。随后发展了与DNA测序类似的直读法,但仍不如DNA测序容易,因此,常将RNA反转录成互补DNA cDNA ,测定 cDNA序列后推断RNA的序列,目前 16S rRNA 1 542 b 的全序列测定,23S rRNA 2 904 b 的全序列测定,噬菌体MS2 RNA 3 569 b 的全序列测定均已完成。4 糖类的结构与功能1书写-D- 吡喃葡萄糖
34、, L- (- )葡萄糖,- D- (+)吡喃葡萄糖的结构式,并说明D、L;+、-;、各符号代表的意义。解答 :书写单糖的结构常用D、 L;d 或 (+) 、l或 (-) ;、表示。 D-、L- 是人为规定的单糖的构型。是以D-、L- 甘油醛为参照物, 以距醛基最远的不对称碳原子为准, 羟基在左面的为L 构型 , 羟基在右的为D构型。单糖由于具有不对称碳原子, 可使平面偏振光的偏振面发生一定角度的旋转,这种性质称为旋光性。其旋转角度称为旋光度, 偏振面向左旋转称为左旋 ,向右则称为右旋。d 或(+) 表示单糖的右旋光性,l或 (-) 表示单糖的左旋光性。2写出以下糖的结构式:- D- 葡萄糖
35、- 1- 磷酸, 2- 脱氧 - D-呋喃核糖,- D- 呋喃精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 32 页10 果糖, D- 甘油醛 - 3- 磷酸,蔗糖,葡萄糖醛酸。解答 :略。3已知某双糖能使本尼地(Benedict)试剂中的Cu2+氧化成Cu2O 的砖红色沉淀 ,用- 葡糖糖苷酶可将其水解为两分子- D- 吡喃葡糖糖 ,将此双糖甲基化后再水解将得到2,3,4,6- 四氧甲基 - D- 吡喃葡糖糖和1,2,3,6- 四氧甲基 - D- 吡喃葡糖糖 ,试写出此双糖的名称和结构式。解答 : 蔗糖双糖能使本尼地(Benedic
36、t) 试剂中的Cu2+氧化成 Cu2O 的砖红色沉淀,说明该双糖具复原性,含有半缩醛羟基。用葡糖苷酶可将其水解为两分子- D- 吡喃葡糖 , 说明该双糖是由 - 糖苷键构成的。 将此双糖甲基化后再水解将得到2,3,4,6- 四氧甲基 - D-吡喃葡糖糖和 1,2,3,6- 四氧甲基 - D-吡喃葡糖 , 糖基上只有自由羟基才能被甲基化,说明- 葡糖 (14) 葡糖构成的为纤维二糖。4根据以下单糖和单糖衍生物的结构:CH2OHCCCOHOHHHHOCHOCH2OHCCCOHOHOHHHHCHOCHOCH2OHHCCCOHHHCHOCHOCH2OHHNHCOCH3HOHCCCOHHHCHOCHOC
37、H2OHHOHHOH(A) (B) (C) (D) (1)写出其构型 (D 或 L)和名称; (2)指出它们能否复原本尼地试剂;(3) 指出哪些能发生成苷反应。解答 :(1)构型是以D-,L- 甘油醛为参照物, 以距醛基最远的不对称碳原子为准, 羟基在左面的为L 构型 , 羟基在右的为D构型。 A、B、C为 D构型, D为 L 构型。(2) B、C、D 均有醛基具复原性,可复原本尼地试剂。A 为酮糖,无复原性。(3) 单糖的半缩醛上羟基与非糖物质( 醇、酚等 ) 的羟基形成的缩醛结构称为糖苷, B,C,D均能发生成苷反应。5透明质酸是细胞基质的主要成分,是一种黏性的多糖,分子量可达100?00
38、0,由两单糖衍生物的重复单位构成,请指出该重复单位中两组分的结构名称和糖苷键的结构类型。解答 :透明质酸的两个重复单位是由D葡萄糖醛酸和N- 乙酰氨基葡萄糖通过-1,3糖苷键连接而成。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 32 页11 6纤维素和淀粉都是由1 4 糖苷键连接的D葡萄糖聚合物,相对分子质量也相当,但它们在物理性质上有很大的不同,请问是什么结构特点造成它们在物理性质上的如此差异? 解释它们各自性质的生物学优点。解答 :淀粉是葡萄糖聚合物,既有1,4 糖苷键,也有1,6 糖苷键,为多分支结构。直链淀粉分子的空间构象
39、是卷曲成螺旋形的, 每一回转为6 个葡萄糖基 , 淀粉在水溶液中混悬时就形成这种螺旋圈。支链淀粉分子中除有-(1,4)糖苷键的糖链外, 还有-(1,6)糖苷键连接的分支处, 每一分支平均约含2030 个葡萄糖基 ,各分支也都是卷曲成螺旋。螺旋构象是碘显色反应的必要条件。碘分子进入淀粉螺旋圈内,糖游离羟基成为电子供体,碘分子成为电子受体,形成淀粉碘络合物,呈现颜色。其颜色与糖链的长度有关。当链长小于6 个葡萄糖基时, 不能形成一个螺旋圈, 因而不能呈色。当平均长度为20 个葡萄糖基时呈红色 , 红糊精、无色糊精也因而得名。大于60 个葡萄糖基的直链淀粉呈蓝色。支链淀粉相对分子质量虽大,但分支单位
40、的长度只有 20 30 个葡萄糖基 , 故与碘反应呈紫红色。纤维素虽然也是由D-吡喃葡萄糖基构成,但它是以-(1,4)糖苷键连接的一种没有分支的线性分子,它不卷曲成螺旋。纤维素分子的链与链间,能以众多氢键像麻绳样拧在一起,构成坚硬的不溶于水的纤维状高分子也称纤维素微晶束,构成植物的细胞壁。人和哺乳动物体内没有纤维素酶(cellulase),因此不能将纤维素水解成葡萄糖。虽然纤维素不能作为人类的营养物, 但人类食品中必须含纤维素。因为它可以促进胃肠蠕动、促进消化和排便。7说明以下糖所含单糖的种类、糖苷键的类型及有无复原性? 1纤维二糖2麦芽糖3龙胆二糖4海藻糖5蔗糖6乳糖解答 :1纤维二糖含葡萄
41、糖,1,4 糖苷键,有复原性。2麦芽糖含葡萄糖,1,4 糖苷键,有复原性。3龙胆二糖含葡萄糖,1,6 糖苷键,有复原性。4海藻糖含葡萄糖,1,1 糖苷键,无复原性。5蔗糖含葡萄糖和果糖,1, 2糖苷键,无复原性。6乳糖含葡萄糖和半乳糖,1,4 糖苷键,有复原性。8人的红细胞质膜上结合着一个寡糖链,对细胞的识别起重要作用。被称为抗原决定基团。根据不同的抗原组合,人的血型主要分为A 型、 B 型、 AB 型和 O 型 4 类。不同血型的血液互相混合将发生凝血,危及生命。1,41,2AcGlcGalFuc1,3N红细胞精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - -
42、 - -第 11 页,共 32 页12 已知 4 种血型的差异仅在X位组成成分的不同。请指出不同血型A型、 B型、 AB型、O型 X位的糖基名称。解答 :A型 X位是N- 乙酰氨基 - -D- 半乳糖;B型 X位是 -D- 半乳糖;AB型 X位蒹有 A型和 B型的糖;O型 X位是空的。9请写出以下结构式:(1) L岩藻糖 (2)D半乳糖(3) N乙酰氨基D 葡萄糖 (4) N乙酰氨基D半乳糖胺解答 :略。10随着分子生物学的飞速发展,生命的奥秘正在逐渐被揭示。大量的研究已说明,各种错综复杂的生命现象的产生和疾病的形成过程均与糖蛋白的糖链有关。请阅读相关资料,列举你感兴趣的糖的生物学功能。解答
43、:略。5 脂类化合物和生物膜1简述脂质的结构特点和生物学作用。解答 :(1)脂质的结构特点:脂质是生物体内一大类不溶于水而易溶于非极性有机溶剂的有机化合物, 大多数脂质的化学本质是脂肪酸和醇形成的酯及其衍生物。脂肪酸多为4碳以上的长链一元羧酸,醇成分包括甘油、鞘氨醇、高级一元醇和固醇。脂质的元素组成主要为碳、氢、氧,此外还有氮、磷、硫等。(2)脂质的生物学作用:脂质具有许多重要的生物功能。脂肪是生物体贮存能量的主要形式,脂肪酸是生物体的重要代谢燃料,生物体外表的脂质有防止机械损伤和防止热量散发的作用。 磷脂、糖脂、固醇等是构成生物膜的重要物质,它们作为细胞外表的组成成分与细胞的识别、 物种的特
44、异性以及组织免疫性等有密切的关系。有些脂质 如萜类化合物和固醇等还具有重要生物活性,具有维生素、 激素等生物功能。脂质在生物体中还常以共价键或通过次级键与其他生物分子结合形成各种复合物,如糖脂、脂蛋白等重要的生物大分子物质。2概述脂肪酸的结构和性质。解答 :(1)脂肪酸的结构:脂肪酸分子为一条长的烃链“ 尾 ” 和一个末端羧基“ 头” 组成的羧酸。烃链以线性为主,分枝或环状的为数甚少。根据烃链是否饱和,可将脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。(2)脂肪酸的性质:精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 32 页13 脂肪酸的物理
45、性质取决于脂肪酸烃链的长度和不饱和程度。烃链越长,非极性越强,溶解度也就越低。脂肪酸的熔点也受脂肪酸烃链的长度和不饱和程度的影响。脂肪酸中的双键极易被强氧化剂,如 H2O2、 超氧阴离子自由基 2O_ 、 羟自由基OH 等所氧化, 因此含不饱和脂肪酸丰富的生物膜容易发生脂质过氧化作用,从而继发引起膜蛋白氧化,严重影响膜的结构和功能。脂肪酸盐属于极性脂质,具有亲水基电离的羧基和疏水基长的烃链,是典型的两亲性化合物,属于离子型去污剂。必需脂肪酸中的亚油酸和亚麻酸可直接从植物食物中获得,花生四烯酸则可由亚油酸在体内转变而来。它们是前列腺素、血栓噁烷和白三烯等生物活性物质的前体。3概述磷脂、糖脂和固醇
46、类的结构、性质和生物学作用解答 :. 磷脂包括甘油磷脂和鞘磷脂两类,它们主要参与细胞膜系统的组成,少量存在于其他部位。(1)甘油磷脂的结构:甘油磷脂是由sn-甘油 -3-磷酸衍生而来,分子中甘油的两个醇羟基与脂肪酸成酯,第三个醇羟基与磷酸成酯或磷酸再与其他含羟基的物质(如胆碱、乙醇胺、丝氨酸等醇类衍生物)结合成酯。(2)甘油磷脂的理化性质:物理性质:甘油磷脂脂双分子层结构在水中处于热力学的稳定状态,构成生物膜的结构基本特征之一化学性质: a. 水解作用:在弱碱溶液中,甘油磷脂水解产生脂肪酸的金属盐。如果用强碱水解,甘油磷脂水解生成脂肪酸盐、醇XOH和磷酸甘油。b. 氧化作用:与三酰甘油相似,
47、甘油磷脂中所含的不饱和脂肪酸在空气中能被氧化生成过氧化物,最终形成黑色过氧化物的聚合物。c. 酶解作用:甘油磷脂可被各种磷脂酶PLA 专一水解。(3)鞘磷脂即鞘氨醇磷脂,在高等动物的脑髓鞘和红细胞膜中特别丰富,也存在于许多植物种子中。鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸和磷脂酰胆碱少数磷脂酰乙醇胺组成。. 糖脂是指糖基通过其半缩醛羟基以糖苷键与脂质连接的化合物。糖脂可分为鞘糖脂、甘油糖脂以及由固醇衍生的糖脂,其中鞘糖脂和甘油糖脂是膜脂的主要成分。(1)鞘糖脂是神经酰胺的1 位羟基被糖基化形成的糖苷化合物。依据糖基是否含有唾液酸或硫酸基成分,鞘糖脂又可分为中性鞘糖脂和酸性鞘糖脂。中性鞘糖脂:又称脑苷脂,是由神
48、经酰胺的C1 上的羟基与一单糖分子半乳糖、葡萄糖等以糖苷键结合而成,不含唾液酸成分。中性鞘糖脂一般为白色粉状物,不溶于水、乙醚,溶于热乙醇、热丙酮、吡啶及苯等,性质稳定,不被皂化。它们不仅是血型抗原,而精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 32 页14 且与组织和器官的特异性,细胞之间的识别有关。酸性鞘糖脂:糖基部分含有唾液酸或硫酸基的鞘糖脂称为酸性鞘糖脂。糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂常称神经节苷脂,是最复杂的一类甘油鞘脂,由神经酰胺与结构复杂的寡糖结合而成,是大脑灰质细胞膜的组分之一,也存在于脾、肾及其他器官中。(2)甘油糖
49、脂是糖基二酰甘油,它是二酰甘油分子sn-3 位上的羟基与糖基以糖苷键连接而成。甘油糖脂主要存在于植物和微生物中。植物的叶绿体和微生物的质膜含有大量的甘油糖脂。它可能在神经髓鞘形成中起作用。. 固醇类也称甾类,所有固醇类化合物都是以环戊烷多氢菲为核心结构,因羟基的构型不同,可有及 两型。胆固醇 (也称胆甾醇 )是一种重要的甾醇类物质,一种环戊烷多氢菲的衍生物。是动物组织中含量最丰富的固醇类化合物,有游离型和酯型两种形式。存在于一切动物细胞中,以脑、神经组织及肾上腺中含量特别丰富,其次为肝、肾、脾和皮肤及脂肪组织。4生物膜由哪些脂质化合物组成的?各有何理化性质?解答 :组成生物膜的脂质主要包括磷脂
50、、固醇及糖脂。1磷脂:甘油磷脂,是生物膜的主要成分。是由sn-甘油 -3-磷酸分子中甘油的两个醇羟基与脂肪酸成酯,第三个醇羟基与磷酸成酯或磷酸再与其他含羟基的物质(如胆碱、乙醇胺、丝氨酸等醇类衍生物)结合成酯。物理性质:纯的甘油磷脂是白色蜡状固体,大多溶于含少量水的非极性溶剂中。用氯仿甲醇混合溶剂很容易将甘油磷脂从组织中提取出来。这类化合物又称为两性脂质或称极性脂质,具有极性头和非极性尾两个部分。化学性质: a.?水解作用: 在弱碱溶液中, 甘油磷脂水解产生脂肪酸的金属盐。强碱水解,生成脂肪酸盐、醇X OH和磷酸甘油。b.?氧化作用:甘油磷脂中所含的不饱和脂肪酸在空气中能被氧化生成过氧化物,最
51、终形成黑色过氧化物的聚合物。c.?酶解作用:甘油磷脂可被各种磷脂酶PLA 专一水解。鞘磷脂 SM :鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸和磷脂酰胆碱少数为磷脂酰乙醇胺组成。鞘磷脂为白色晶体,性质稳定,不溶于丙酮和乙醚,而溶于热乙醇中,具两性解离性质。2固醇:高等植物的固醇主要为谷甾醇和豆甾醇。动物细胞膜的固醇最多的是胆固醇。胆固醇分子的一端有一极性头部基团羟基因而亲水,分子的另一端具有羟链及固醇的环状结构而疏水。因此固醇与磷脂类化合物相似也属于两性分子。物理性质: 胆固醇为白色斜方晶体,无味、 无臭, 熔点为, 高度真空条件下能被蒸馏。胆固醇不溶于水,易溶于乙醚、氯仿、苯、丙酮、热乙醇、醋酸乙酯及胆汁酸盐溶
52、液中。介电常数高,不导电。化学性质:胆固醇C3上的羟基易与高级脂肪酸(如软脂酸、硬脂酸及油酸等)结合形成精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 14 页,共 32 页15 胆固醇酯。 胆固醇的双键可与氢、溴、碘等发生加成反应。胆固醇可被氧化成一系列衍生物。胆固醇易与毛地黄糖苷结合而沉淀,这一特性可以用于胆固醇的定量测定。胆固醇的氯仿溶液与醋酸酐和浓硫酸反应,产生蓝绿色(LiebermannBurchard 反应 )。3糖脂:是指糖基通过其半缩醛羟基以糖苷键与脂质连接的化合物。鞘糖脂和甘油糖脂是膜脂的主要成分。鞘糖脂: 依据糖基是否含有唾液酸
53、或硫酸基成分,鞘糖脂又可分为中性鞘糖脂和酸性鞘糖脂。中性鞘糖脂,是非极性的。鞘糖脂的疏水尾部伸入膜的脂双层,极性糖基露在细胞外表, 它们不仅是血型抗原,而且与组织和器官的特异性,细胞之间的识别有关。中性鞘糖脂一般为白色粉状物,不溶于水、乙醚溶于热乙醇、热丙酮、吡啶及苯等,性质稳定,不被皂化。 酸性鞘糖脂, 糖基部分含有唾液酸或硫酸基的鞘糖脂。糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂常称神经节苷脂,不溶于乙醚、丙酮,微溶于乙醇,易溶于氯仿和乙醇的混合液。甘油糖脂:是糖基二酰甘油,它是二酰甘油分子sn-3 位上的羟基与糖基以糖苷键连接而成。 甘油糖脂主要存在于植物和微生物中。植物的叶绿体和微生物的质膜含有大量的
54、甘油糖脂。在哺乳动物组织中也检测出了半乳糖基甘油酯,可能在神经髓鞘形成中起作用。5何为必需脂肪酸?哺乳动物体内所需的必需脂肪酸都有哪些?解答 :哺乳动物体内能够自身合成饱和及单不饱和脂肪酸,但不能合成机体必需的亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸等多不饱和脂肪酸。我们将这些机体生长必需的而自身不能合成,必须由膳食提供的脂肪酸称为必需脂肪酸。6何为生物膜?主要组成是什么?各有何作用?解答 :任何细胞都以一层薄膜将其内容物与环境分开,这层薄膜称为细胞的质膜。此外大多数细胞中还有许多内膜系统,它们组成具有各种特定功能的亚细胞结构和细胞器如细胞核、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基体、过氧化酶体等,在植物细胞中还有
55、叶绿体。所有这些膜虽然组分和功能不同,但在电镜下却表现出大体相同的形态、厚度69nm 的 3 片层结构。这样细胞的外周膜和内膜系统称为“生物膜”。(1) 膜脂:其中磷脂、糖脂、固醇等脂质物质都属于两性分子。当磷脂分散于水相时,分子的疏水尾部倾向于聚集在一起,避开水相, 而亲水头部暴露在水相,形成具有双分子层结构的封闭囊泡,通称为脂质体。 脂质体的形成将细胞内外环境分开。膜脂不但是构成生物膜的重要物质。而且与细胞识别、种的特异性、组织免疫性等有密切的关系。(2) 膜蛋白:对物质代谢酶蛋白、物质传送、细胞运动、信息的接受与传递、支持与保护均有重要意义。7一些药物必须在进入活细胞后才能发挥药效,但它
56、们中大多是带电荷或有极性的,因此不能靠被动扩散跨膜。人们发现利用脂质体运输某些药物进入细胞是很有效的方法,试解释脂质体是如何发挥作用的。解答 :脂质体是脂双层膜组成的封闭的、内部有空间的囊泡。离子和极性水溶性分子包括精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页,共 32 页16 许多药物被包裹在脂质体的水溶性的内部空间,负载有药物的脂质体可以通过血液运输,然后与细胞的质膜相融合将药物释放入细胞内部。6 酶1作为生物催化剂,酶最重要的特点是什么?解答 :作为生物催化剂,酶最重要的特点是具有很高的催化效率以及高度专一性。2酶分为哪几大类?每
57、一大类酶催化的化学反应的特点是什么?请指出以下几种酶分别属于哪一大类酶:磷酸葡糖异构酶phosphoglucose isomerase碱性磷酸酶alkaline phosphatase肌酸激酶 creatine kinase甘油醛 3磷酸脱氢酶glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase琥珀酰 CoA 合成酶 succinyl-CoA synthetase 柠檬酸合酶citrate synthase葡萄糖氧化酶glucose oxidase谷丙转氨酶glutamic-pyruvic transaminase 蔗糖酶 invertase T4 RNA 连接酶
58、T4 RNA ligase 解答 :前两个问题参考本章第3 节内容。异构酶类;水解酶类;转移酶类;氧化复原酶类中的脱氢酶;合成酶类;裂合酶类;氧化复原酶类中的氧化酶;转移酶类;水解酶类;合成酶类又称连接酶类。3什么是诱导契合学说,该学说如何解释酶的专一性?解答 :“ 诱导契合 ” 学说认为酶分子的结构并非与底物分子正好互补,而是具有一定的柔性,当酶分子与底物分子靠近时,酶受底物分子诱导,其构象发生有利于与底物结合的变化,酶与底物在此基础上互补契合进行反应。根据诱导契合学说,经过诱导之后, 酶与底物在结精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第
59、16 页,共 32 页17 构上的互补性是酶催化底物反应的前提条件,酶只能与对应的化合物契合,从而排斥了那些形状、大小等不适合的化合物,因此酶对底物具有严格的选择性,即酶具有高度专一性。4阐述酶活性部位的概念、组成与特点。解答 :参考本章第5 节内容。5经过多年的探索,你终于从一噬热菌中纯化得到一种蛋白水解酶,可用作洗衣粉的添加剂。 接下来, 你用定点诱变的方法研究了组成该酶的某些氨基酸残基对酶活性的影响作用:1你将第65 位的精氨酸突变为谷氨酸,发现该酶的底物专一性发生了较大的改变,试解释原因;2你将第108 位的丝氨酸突变为丙氨酸,发现酶活力完全失去,试解释原因;3你认为第 65 位的精氨
60、酸与第108 位的丝氨酸在酶的空间结构中是否相互靠近,为什么?解答 : 1第 65 位的氨基酸残基可能位于酶活性部位中的底物结合部位,对酶的专一性有较大影响, 当该氨基酸残基由精氨酸突变为谷氨酸后,其带电性质发生了改变,不再具有与原底物之间的互补性,导致酶的专一性发生改变。2第 108 位的丝氨酸残基应位于酶活性部位的催化部位,是决定酶是否有活力的关键氨基酸, 通常它通过侧链上的羟基起到共价催化的功能,当该残基突变为丙氨酸后,侧链羟基被氢取代,不能再起原有的共价催化作用,因此酶活力完全失去。3第 65 位的精氨酸与第108 位的丝氨酸在酶的空间结构中应相互靠近,因为这两个氨基酸残基都位于酶的活
61、性部位,根据酶活性部位的特点,参与组成酶活性部位的氨基酸残基在酶的空间结构中是相互靠近的。6酶具有高催化效率的分子机理是什么?解答 :酶具有高催化效率的分子机理是:酶分子的活性部位结合底物形成酶底物复合物,在酶的帮助作用下包括共价作用与非共价作用,底物进入特定的过渡态,由于形成此过渡态所需要的活化能远小于非酶促反应所需要的活化能,因而反应能够顺利进行,形成产物并释放出游离的酶,使其能够参与其余底物的反应。7利用底物形变和诱导契合的原理,解释酶催化底物反应时,酶与底物的相互作用。解答 :当酶与底物互相接近时,在底物的诱导作用下,酶的构象发生有利于底物结合的变化, 与此同时, 酶中某些基团或离子可
62、以使底物分子中围绕其敏感键发生形变。酶与底物同时发生变化的结果是酶与底物形成一个互相契合的复合物,并进一步转换成过渡态形式,在过渡态形式中,酶活性部位的构象与底物过渡态构象十分吻合,从而降低活化能,增加底物的反应速率。8简述酶促反应酸碱催化与共价催化的分子机理。解答 : 在酶促反应酸碱催化中,酶活性部位的一些功能基团可以作为广义酸给出质子例精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 17 页,共 32 页18 如谷氨酸残基不带电荷的侧链羧基、赖氨酸残基带正电荷的侧链氨基等,底物结合质子,形成特定的过渡态,由于形成该过渡态所需活化能相比于非酶促反
63、应更低,因此反应速率加快;另外一些功能基团可以作为广义碱从底物接受质子例如谷氨酸残基带负电荷的侧链羧基、赖氨酸残基不带电荷的侧链氨基等,底物失去质子后,形成过渡态所需的活化能比非酶促反应低,因此反应速率加快。在酶促反应共价催化中,酶活性部位的一些功能基团作为亲核试剂作用于底物的缺电子中心, 或者作为亲电试剂作用于底物的负电中心,导致酶底物共价复合物的形成,该共价复合物随后被第二种底物在水解反应中通常是水分子攻击,形成产物与游离酶。由于该共价复合物形成与分解的反应所需活化能均比非酶促反应低,因此反应速率被加快。9解释中间络合物学说和稳态理论,并推导修正后的米氏方程。解答 :参考本章第6 节内容。
64、10乙醇脱氢酶催化如下反应:NADNADHH乙醇乙醛1已知反应体系中NADH 在 340nm 有吸收峰, 其他物质在该波长处的吸光度均接近于零,请设计一种测定酶活力的方法。2如何确定在实验中测得的酶促反应速率是真正的初速率?3在实验中使用了一种抑制剂,下表中是在分别存在与不存在抑制剂I 的情况下测定的对应不同底物浓度的酶促反应速率,请利用表中的数据计算其各自对应的Km与 Vmax值,并判断抑制剂的类型。S/(mmol/L) v/ ( mol L-1min-1) I = 0 I = 10 mmol/L 20 15 10 5 解答 : 1选择合适的底物浓度NAD+与乙醇与缓冲体系,取一定体积的底物
65、溶液如1ml加入石英比色杯,加入适量酶,迅速混合后,放入紫外/可见光分光光度计的样品室内,测定反应体系在340 nm 吸光度随时间的变化曲线。利用 NADH 的摩尔吸光系数 可从相关文献查到,或用已知浓度的NADH溶液自行测定 ,计算出单位时间内NADH 的增精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 18 页,共 32 页19 加量,用于表示酶活力。2如果在选取的测量时间范围内,反应体系在340 nm 吸光度随时间的变化曲线接近一条直线的形状,则说明反应速率在此时间段内保持不变,可用来代表反应初速率。3用 Lineweaver-Burk 双倒
66、数作图法,结果如下:Km与 Vmax值抑制剂浓度I = 0 I = 10 mmol/L Km/(mmol L-1) 1.643 Vmax/( mol L-1min-1) 抑制剂的类型:竞争性可逆抑制剂。11对于一个符合米氏方程的酶,当S=3Km,I=2 KI时 I 为非竞争性抑制剂 ,则/Vmax的数值是多少此处Vmax指I=0 时对应的最大反应速率?解答 :利用非竞争性抑制剂的动力学方程计算:mmaxSSVK其中 = 1+I/ Ki = 3,则mmmmaxmax333 (3)12VKVKK所以,/Vmax。12试通过一种反竞争性抑制剂的动力学分析解释其抑制常数KI在数值上是否可能等于该抑制剂
67、的IC50IC50 即酶的活力被抑制一半时的抑制剂浓度,假设酶浓度与底物浓度均固定不变 。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 19 页,共 32 页20 解答 : 令 v0为不存在抑制剂时的酶促反应速率,vi是存在反竞争性抑制剂时的反应速率,则当 I=IC50 时,酶活力被抑制一半,vi=v0/2。由于mmax 0SSVKmmax SSiVKI I 1K因此mmmax max SS2S2SVVKKKm = ( -2)S 如果 KI在数值上等于IC50 ,则 = 2 , -2 = 0 ,Km = 0 ,而实际上, Km并不为零。因此KI在
68、数值上不可能等于IC50。13在生物体内存在很多通过改变酶的结构从而调节其活性的方法,请列举这些方法并分别举例说明。解答 : 1别构调控:寡聚酶分子与底物或非底物效应物可逆地非共价结合后发生构象的改变, 进而改变酶活性状态,从而使酶活性受到调节。例如天冬氨酸转氨甲酰酶的部分催化肽链结合底物后,使酶的整体构象发生改变,提高了其他催化肽链与底物的亲和性,CTP可以与该酶的调节肽链结合,导致酶构象发生改变,降低了催化肽链与底物的亲和性,使酶活力降低,起别构抑制剂的作用。2酶原的激活:在蛋白水解酶的专一作用下,没有活性的酶原通过其一级结构的改变,导致其构象发生改变,形成酶的活性部位,变成有活性的酶,这
69、是一种使酶获得活性的不可逆调节方法。例如在小肠内, 无催化活性的胰凝乳蛋白酶原在胰蛋白酶的作用下,特定肽键被断裂,由一条完整的肽链被水解为三段肽链,并发生构象的改变,形成活性部位,产生蛋白水解酶活性。3可逆的共价修饰:由其他的酶如激酶、磷酸酶等催化共价调节酶进行共价修饰或去除修饰基团,使其结构发生改变,从而在活性形式和非活性形式之间相互转变,以调节酶的活性。例如糖原磷酸化酶可以两种形式存在,一种是Ser14被磷酸化的、高活力的糖原磷酸化酶a,一种是非磷酸化的、低活力的糖原磷酸化酶b,在磷酸化酶激酶的催化作用下,糖原磷酸化酶b 的 Ser14被磷酸化,形成高活力的糖原磷酸化酶a;在磷酸化酶磷酸酶
70、的催化作用下,糖原磷酸化酶a的 Ser14-PO32-被脱磷酸化,形成低活力的糖原磷酸化酶b。4对寡聚酶活性的调节可以通过改变其四级结构来进行,这种作用既包括使无活性的寡聚体解离, 使部分亚基获得催化活性,也包括使无活性的单体聚合形成有催化活性的寡聚体。 前者的例子是蛋白激酶A,该酶由 2 个调节亚基与2 个催化亚基组成,是没有酶活性的寡聚酶,胞内信使cAMP 与调节亚基结合可导致寡聚酶解离成一个调节亚基复合体和两个催化亚基, 此时自由的催化亚基可获得酶活性。后者的例子是表皮生长因子受体,其在细精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 20
71、页,共 32 页21 胞膜上通常以无活性的单体存在,当作为信使的表皮生长因子结合到受体的胞外部分之后,两个单体结合形成二聚体,从而使酶被激活。14以天冬氨酸转氨甲酰酶为例解释蛋白质功能的别构调控。解答 :天冬氨酸转氨甲酰酶ATCase的调控属于酶的别构调控。ATCase 是寡聚酶,由多个催化亚基和调节亚基构成。催化亚基可结合底物,具有催化作用, 调节亚基可结合非底物分子效应物。ATCase 以及该酶的每个亚基、每个活性部位具有两种构象状态,一种与底物有高亲和力T 态,一种与底物有低亲和力R 态。当位于 ATCase 催化亚基的某个活性部位结合底物分子后,其构象发生改变,构象改变的信息通过各亚基
72、内和亚基之间的相互作用传递到其他活性部位,使其构象改变, 增加了它与其他底物分子的亲和力,并最终影响了酶的总活性状态。这种别构调控使ATCase 的S对 v 的动力学曲线不是双曲线,而是S型曲线。当位于 ATCase 调节亚基的调节部位结合非底物效应物CTP 后, CTP 的结合引起ATCase构象的变化,使ATCase 构象向对底物有低亲和力的T 态改变,降低了ATCase 与底物的亲和力,导致酶活性降低,CTP 是别构抑制剂负效应物。当位于 ATCase调节亚基的调节部位结合非底物效应物ATP 后, ATP 的结合引起ATCase构象的变化,使ATCase 构象向对底物有低亲和力的R 态改
73、变,增加了ATCase 与底物的亲和力,导致酶活性升高,CTP 是别构激活剂正效应物。ATP 和 CTP 对 ATCase 的别构调控均具有一定的生理意义,可用于对生物的新陈代谢、基因表达等进行调节。15当加入较低浓度的竞争性抑制剂于别构酶的反应体系中时,往往观察到酶被激活的现象,请解释这种现象产生的原因。解答 :在有少量竞争性抑制剂存在时,抑制剂与别构酶通常为寡聚酶的部分活性部位结合, 引起酶构象变化, 此作用等同于底物的正协同同促效应,从而使酶的整体活性提高。16 酶原激活的机制是什么?该机制如何表达“蛋白质一级结构决定高级结构”的原理?解答 :酶原激活的机制是在相应的蛋白水解酶的作用下,
74、原本没有催化功能的酶原在特定肽键处断裂, 一级结构发生变化,从而导致其高级结构变化,形成活性部位,具备了特定的催化功能。这种变化是一种不可逆的过程。在酶原激活的机制中,由于高级结构的改变是由于一级结构的改变造成的,因此这说明了不同的一级结构可导致不同高级结构的产生,这是“蛋白质一级结构决定高级结构”原理的表达。7 维生素1什么是维生素?列举脂溶性维生素与水溶性维生素的成员。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 21 页,共 32 页22 解答 :维生素的科学定义是参与生物生长发育与代谢所必需的一类微量小分子有机化合物。脂溶性维生素主要包括
75、维生素A、维生素 D、维生素 E、维生素 K 等,水溶性维生素主要包括维生素B 族维生素B1、维生素 B2、维生素 PP、维生素B6、维生素 B12、叶酸、泛酸、生物素 、硫辛酸和维生素C。2为什么维生素D 可数个星期补充一次,而维生素C 必须经常补充?解答 :维生素D 是脂溶性的维生素,可以贮存在肝等器官中。维生素C 是水溶性的,不能贮存,所以必须经常补充。3维生素A 主要存在于肉类食物中,为什么素食者并不缺乏维生素A?解答 :维生素 A 可在人体内由植物性食物中的胡萝卜素转化而成。4将下面列出的酶、辅酶与维生素以短线连接。解答 :5在生物体内起到传递电子作用的辅酶是什么?解答 :NAD+、
76、NADP+、 FMN 、FAD。6试述与缺乏维生素相关的夜盲症的发病机理。解答 :视网膜上负责感受光线的视觉细胞分两种:一种是圆锥形的视锥细胞,一种是圆柱形的视杆细胞。视锥细胞感受强光线,而视杆细胞则感受弱光的刺激,使人在光线较暗的情况下也能看清物体。在视杆细胞中, 11顺视黄醛与视蛋白组成视紫红质。当杆状细胞感光时,视紫红质中的11顺视黄醛在光的作用下转变成全反视黄醛,并与视蛋白别离,视黄醛分子构型的改变可导致视蛋白分子构型发生变化,最终诱导杆状细胞产生与视觉相关的感受器电位。全反式视黄醛通过特定的途径可重新成为11顺视黄醛,与视蛋白组合成为视紫红质, 但是在该视循环中部分全反视黄醛会分解损
77、耗,因此需要经常补充维生素A。当食物中缺乏维生素A 时,必然引起11顺视黄醛的补充不足,视紫红质合成量减少,导致视杆细胞对弱光敏感度下降,暗适应时间延长,出现夜盲症状。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 22 页,共 32 页23 7 试述与缺乏维生素相关的脚气病的发病机理,为什么常吃粗粮的人不容易得脚气病?解答 :脚气病是一种由于体内维生素B1不足所引起的以多发性周围神经炎为主要症状的营养缺乏病,硫胺素在体内可转化成硫胺素焦磷酸,后者作为辅酶参与糖代谢中丙酮酸、酮戊二酸的氧化脱羧作用,所以,缺乏维生素B1时,糖代谢受阻, 一方面导致神
78、经组织的供能不足,另一方面使糖代谢过程中产生的酮酸、乳酸等在血、尿和组织中堆积,从而引起多发性神经炎等症状。维生素B1在谷物的外皮和胚芽中含量很丰富,谷物中的硫胺素约 90%存在于该部分, 而粗粮由于加工时保留了部分谷物外皮,因此维生素B1含量充足,常吃粗粮的人不容易缺乏维生素B1,因此不易得脚气病。8试述与缺乏维生素相关的坏血病的发病机理。解答 :坏血病是一种人体在缺乏维生素C 的情况下所产生的疾病。维生素 C 参与体内多种羟化反应, 是胶原脯氨酸羟化酶及胶原赖氨酸羟化酶维持活性所必需的辅助因子,可促进胶原蛋白的合成。当人体缺乏维生素C 时,胶原蛋白合成产生障碍,胶原蛋白数量不足致使毛细血管
79、管壁不健全,通透性和脆性增加,结缔组织形成不良,导致皮下、骨膜下、肌肉和关节腔内出血,这些均为坏血病的主要症状。9完整的鸡蛋可保持4 到 6 周仍不会腐败,但是去除蛋白的蛋黄,即使放在冰箱内也很快地腐败。试解释为什么蛋白可以防止蛋黄腐败?解答:蛋清中含有抗生物素蛋白,它能与生物素结合使其失活,抑制细菌生长,使鸡蛋不容易腐败。10多项选择题:1以下哪一个辅酶不是来自维生素A CoQ B FAD C NAD+D pLp E Tpp 2分子中具有醌式结构的是A维生素A B维生素B1C维生素C D维生素E E维生素 K 3具有抗氧化作用的脂溶性维生素是A维生素C B 维生素E C维生素A D 维生素B
80、1E 维生素 D 4以下维生素中含有噻唑环的是A 维生素B2B 维生素B1C 维生素 PP D 叶酸E 维生素 B65以下关于维生素与辅酶的描述中,哪几项是正确的A. 脂溶性维生素包括维生素A、维生素C、维生素D 和维生素E B. 维生素 B1的辅酶形式为硫胺素焦磷酸C. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是FMN 与 FAD 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 23 页,共 32 页24 D. 维生素 C 又名抗坏血酸,是一种强的复原剂6以下关于维生素与辅酶的描述中,哪几项是错误的A. 维生素 A 的活性形式是全反式视黄醛,它与暗视觉有关
81、B. 辅酶 I 是维生素PP的辅酶形式C. FMN 与 FAD 是氧化复原酶的辅基D. 硫胺素焦磷酸是水解酶的辅酶7转氨酶的辅酶含有以下哪种维生素?A维生素 BlB维生素 B2C维生素 PP D维生素 B6E维生素 Bl28四氢叶酸不是以下哪种基团或化合物的载体?A CHO B CO2CCHD CH3E CHNH解答 : 1 A; 2 E; 3 B; 4 B; 5 B、D; 6A、D; 7D; 8B。8 新陈代谢总论与生物氧化1已知 NADH+H+经呼吸链传递遇O2生成水的过程可以用下式表示:NADH + H+ + 1/2O2H2O + NAD+试计算反应的E、G。解答 :在呼吸链中各电子对标
82、准氧化复原电位E的不同 , 实质上也就是能级的不同。自由能的变化可以由反应物与反应产物的氧化复原电位计算。氧化复原电位和自由能的关系可由以下公式计算: GnFEG代表反应的自由能,n为电子转移数 ,F为 Farady 常数, 值为 96.49kJ/V, E为电位差值。G以 kJ/mol 计。NADH+H+ 1/2O2 NAD+ + H2OG=-2 -(-0.32)=- 220 kJ/mol2在呼吸链传递电子的系列氧化复原反应中,请指出以下反应中哪些是电子供体,哪些是电子受体, 哪些是氧化剂, 哪些是复原剂 E-FMN 为 NADH 脱氢酶复合物含铁硫蛋白,辅基为 FMN ?精选学习资料 - -
83、 - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 24 页,共 32 页25 1NADH+H+E-FMNNAD+E-FMNH22E-FMNH2+2Fe3+E-FMN+2Fe2+2H+(3) 2Fe2+2H+Q2Fe3+QH2 解答 :在氧化复原反应中, 如果反应物失去电子, 则该物质称为复原剂;如果反应物得到电子 , 则该反应物称为氧化剂。所以得出如下结论:反应电子供体电子受体复原剂氧化剂123NADH E-FMN NADH E-FMN E-FMNH2Fe3+ E-FMNH2 Fe3+ Fe2+ QFe2+Q 3组成原电池的两个半电池,半电池A 含有 1mol/L 的甘
84、油酸 3磷酸和1mol/L 的甘油醛 3磷酸, 而另外的一个半电池B 含有 1mol/L NAD+和 1mol/L NADH 。答复以下问题:1哪个半电池中发生的是氧化反应?2在半电池B中,哪种物质的浓度逐渐减少?(3 电子流动的方向如何?4总反应半电池 A+半电池 B的E是多少?解答 :氧化复原电位E的数值愈低 , 即供电子的倾向愈大, 本身易被氧化成为复原剂, 另一种物质则作为氧化剂易得到电子被复原。根据该理论判断:1半电池A 中发生的是氧化反应;(2) 当甘油醛 3磷酸被氧化后NAD+减少;(3) 电子由半电池A 流向半电池B;(4) 总反应的E是+0.23V。4鱼藤酮是一种的极强的杀虫
85、剂,它可以阻断电子从NADH 脱氢酶上的FMN 向 CoQ的传递。1为什么昆虫吃了鱼藤酮会死去? 2鱼藤酮对人和动物是否有潜在的威胁? (3) 鱼藤酮存在时 , 理论上 1mol 琥珀酰 CoA 将净生成多少ATP? 解答 :电子由 NADH 或 FADH2经电子传递呼吸链传递给氧,最终形成水的过程中伴有ADP 磷酸化为ATP,这一过程称电子传递体系磷酸化。体内95%的 ATP 是经电子传递体系磷酸化途径产生的。(1) 鱼藤酮阻断了电子从NADH脱氢酶上的FMN 向 CoQ 的传递,复原辅酶不能再氧化, 氧化放能被破坏,昆虫将不能从食物中获得足够的维持生命活动需要的ATP。(2)所有需氧生物电
86、子传递系统十分相似,都包含有FMN 和 CoQ 这种共同的环节,因精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 25 页,共 32 页26 此鱼藤酮对人体和所有的动物都有潜在的毒性。(3) 当鱼藤酮存在时, NADH 呼吸链的电子传递中断,但不影响 FADH2呼吸链和底物水平磷酸化的进行,理论上1mol 琥珀酰辅酶A 还将生成5molATP 。52, 4二硝基苯酚(DNP) 是一种对人体毒性很大的物质。它会显著地加速代谢速率,使体温上升、出汗过多,严重时可导致虚脱和死亡。20 世纪 40 年代曾试图用DNP 作为减肥药物。(1) 为什么 DNP的
87、消耗会使体温上升, 出汗过多 ? (2)DNP 作为减肥药物的设想为何不能实现? 解答 :(1)因 DNP是解偶联剂 ,电子传递释放的自由能不能以ATP 的形式捕获而是以热的形式散失 ,从而使体温升高,大量出汗。(2)因 DNP 可促进细胞代谢速率而增加能量的消耗起到减轻体重的作用,但是 DNP 有明显的副作用,使其不能作为减肥药物。6某女教师24h 需从膳食中获得能量8?360kJ(2?000kcal) ,其中糖类供能占60%,假设食物转化为ATP 的效率是50%,则膳食糖类可转化为多少摩尔ATP?解答 :略。7标准条件下,下述反应是否能按箭头反应方向进行?假定每个反应都有各自的酶催化(1)
88、 FADH2 + NAD+FAD + NADH + H+ (2) 琥珀酸+ FAD延胡索酸+ FADH2(3) - 羟丁酸+ NAD+乙酰乙酸+ NADH + H+ 解答 : 3可按反应方向进行。FAD+2H+2e-FADH2-延胡索酸 +2H+2e-琥珀酸-乙酰乙酸 +2H+2e- - 羟丁酸-NAD+2H+2e-NADH -(1)FADH2 + NAD+FAD + NADH + H+ = - - = - 0.14 反应不能进行。(2)琥珀酸+ FAD延胡索酸+ FADH2= - - = - 0.15 反应不能进行。(3) -羟丁酸+ NAD+乙酰乙酸+ NADH + H+ = - - =
89、0.026 反应能进行。8已知共轭氧化复原对NAD+/NADH 和丙酮酸 /乳酸的 E0分别为- 0.32V 和- ,试问:(1) 哪个共轭氧化复原对失去电子的能力大? (2) 哪个共轭氧化复原对是更强的氧化剂? 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 26 页,共 32 页27 (3) 如果各反应物的浓度都为lmol/L, 在和 25时 , 下面反应的G是多少 ? 丙酮酸+ NADH + H+乳酸+NAD+解答 :(1)氧化复原电位E0的数值愈低,即供电子的倾向愈大,愈易成为复原剂,所以NAD+/NADH 氧化复原对失去电子的能力强;2丙
90、酮酸 /乳酸氧化复原对的氧化复原电位E0的数值较高,得到电子的能力较强,是更强的氧化剂;(3) 根据公式G=- nF E计算,G=- 26 kJ/mol。9 糖代谢1假设细胞匀浆中存在代谢所需要的酶和辅酶等必需条件,假设葡萄糖的C-1 处用14C标记 ,那么在以下代谢产物中能否找到14C 标记。1CO2; 2乳酸; 3丙氨酸。解答 :1能找到14C 标记的 CO2 葡萄糖 丙酮酸 (*C1) 氧化脱羧生成标记的CO2。2能找到14C 标记的乳酸丙酮酸 (*C1)加 NADH+H+复原成乳酸。3能找到14C 标记的丙氨酸丙酮酸 (*C1) 加谷氨酸在谷丙转氨酶作用下生成14C 标记的丙氨酸。2某
91、糖原分子生成n 个葡糖 - 1- 磷酸,该糖原可能有多少个分支及多少个- 16糖苷键 *设:糖原与磷酸化酶一次性作用生成?如果从糖原开始计算,lmol 葡萄糖彻底氧化为 CO2和 H2O,将净生成多少mol?ATP? 解答 :经磷酸化酶作用于糖原的非复原末端产生n 个葡萄糖 - 1- 磷酸 , 则该糖原可能有n+1 个分支及n+1 个 -16糖苷键。 如果从糖原开始计算,lmol 葡萄糖彻底氧化为CO2和 H2O, 将净生成33molATP 。3试说明葡萄糖至丙酮酸的代谢途径,在有氧与无氧条件下有何主要区别? 解答 : (1) 葡萄糖至丙酮酸阶段,只有甘油醛 - 3- 磷酸脱氢产生NADH+H
92、+ 。NADH+H+代谢去路不同 , 在无氧条件下去复原丙酮酸; 在有氧条件下,进入呼吸链。(2) 生成 ATP 的数量不同 ,净生成 2mol ATP; 有氧条件下净生成7mol ATP 。葡萄糖至丙酮酸阶段,在无氧条件下,经底物磷酸化可生成4mol ATP 甘油酸 - 1,3- 二磷酸生成甘油酸- 3-磷酸 , 甘油酸 - 2- 磷酸经烯醇丙酮酸磷酸生成丙酮酸, 葡萄糖至葡糖 - 6-磷酸,果糖 - 6- 磷酸至果糖1,6二磷酸分别消耗了1mol ATP, 在无氧条件下净生成2mol ATP。在有氧条件下,甘油醛- 3- 磷酸脱氢产生NADH+H+进入呼吸链将生成mol ATP ,所精选学
93、习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 27 页,共 32 页28 以净生成7mol ATP 。4O2没有直接参与三羧酸循环,但没有O2的存在 ,三羧酸循环就不能进行,为什么 ?丙二酸对三羧酸循环有何作用? 解答 :三羧酸循环所产生的3 个 NADH+H+和 1 个 FADH2需进入呼吸链,将H+和电子传递给 O2生成 H2O。没有 O2将造成 NADH+H+和 FADH2的积累,而影响三羧酸循环的进行。丙二酸是琥珀酸脱氢酶的竟争性抑制剂,加入丙二酸会使三羧酸循环受阻。5患脚气病病人丙酮酸与酮戊二酸含量比正常人高尤其是吃富含葡萄糖的食物后 ,请说
94、明其理由。解答 :因为催化丙酮酸与酮戊二酸氧化脱羧的酶系需要TPP作酶的辅因子, TPP 是VB1的衍生物 , 患脚气病病人缺VB1, 丙酮酸与酮戊二酸氧化受阻, 因而含量比正常人高。6油料作物种子萌发时,脂肪减少糖増加,利用生化机制解释该现象,写出所经历的主要生化反应历程。解答 :油料作物种子萠发时,脂肪减少,糖増加,说明脂肪转化成了糖。转化途径是:脂肪酸氧化分解成乙酰辅酶A,乙酰辅酶A 经乙醛酸循环中的异柠檬酸裂解酶与苹果酸合成酶催化, 生成草酰乙酸,再经糖异生转化为糖。7激烈运动后人们会感到肌肉酸痛,几天后酸痛感会消失.利用生化机制解释该现象。解答 : 激烈运动时 , 肌肉组织中氧气供给
95、不足, 酵解作用加强, 生成大量的乳酸, 会感到肌肉酸痛 , 经过代谢 , 乳酸可转变成葡萄糖等其他物质, 或彻底氧化为CO2和 H2O, 因乳酸含量减少酸痛感会消失。8写出UDPG 的结构式。以葡萄糖为原料合成糖原时,每增加一个糖残基将消耗多少ATP? 解答 :以葡萄糖为原料合成糖原时, 每增加一个糖残基将消耗3molATP 。过程如下:ATPG6PADP葡萄糖( 激酶催化 ), G6PG1P( 己糖磷酸异构酶催化), 2G1PUTPUDPGPPiPPiH O2Pi(UDPG焦磷酸化酶催化), 再在糖原合成酶催化下,UDPG 将葡萄糖残基加到糖原引物非复原端形成 -1,4-糖苷键。9在一个具
96、有全部细胞功能的哺乳动物细胞匀浆中分别加入1mol 以下不同的底物,每种底物完全被氧化为CO2和 H2O 时,将产生多少摩尔?ATP 分子 ? (1) 丙酮酸2烯醇丙酮酸磷酸 (3) 乳酸 (4) 果糖 -l ,6- 二磷酸5二羟丙酮磷酸 (6)草酰琥珀酸解答 :(1) 丙酮酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生mol ATP ;(2磷酸烯醇式丙酮酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生mol ATP ;精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 28 页,共 32 页29 (3) 乳酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生15mol ATP ;(
97、4) 果糖1,6二磷酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生34mol ATP ;(5) 二羟丙酮磷酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生17mol ATP ;(6)草酰琥珀酸被氧化为CO2和 H2O 时,将产生20mol ATP 。10 脂质的代谢1脂肪是如何分解和合成的? 解答 :生物体利用三酰甘油是通过脂肪酶水解三酰甘油生成甘油与脂肪酸。甘油和脂肪酸在组织内进一步氧化生成CO2、水及能量。合成脂肪所需的甘油- 3- 磷酸可由糖酵解产生的二羟丙酮磷酸复原而成,亦可由脂肪发动产生的甘油经脂肪组织外的甘油激酶催化与ATP作用而成。脂肪酸经活化生成的脂酰辅酶A 与甘油 - 3- 磷酸缩合生成磷脂酸
98、;二羟丙酮磷酸也能与脂酰CoA 作用生成脂酰二羟丙酮磷酸,然后复原生成溶血磷脂酸,溶血磷脂酸和脂酰 CoA 作用可生成磷脂酸。磷脂酸在磷脂酸磷酸酶作用生成二酰甘油及磷酸。二酰甘油与另一分子的脂酰CoA 缩合即生成三酰甘油。详见和节。2什么是- 氧化? 1mol 硬脂酸彻底氧化可净产生多摩尔ATP? 解答 :脂肪酸氧化作用是发生在碳原子上,逐步将碳原子成对地从脂肪酸链上切下,这个作用即- 氧化。 它经历了脱氢辅酶FAD ,加水,再脱氢 (辅酶 NAD+),硫解四步骤,从脂肪酸链上分解下一分子乙酰CoA。1mol 硬脂酸十八碳饱和脂肪酸彻底氧化可净产生 120mol 摩尔 ATP。1.5 8+2.
99、5 8+10 9-2=12+20+90-2=120 mol ATP 。详见 10. 2. 2 中的“脂肪酸- 氧化过程中的能量转变”。3脂肪酸除- 氧化途径外,还有哪些氧化途径? 解答 :脂肪酸除主要进行- 氧化作用外,还可进行另两种方式的氧化,即- 氧化与- 氧化。在- 氧化途径中长链脂肪酸的- 碳在加单氧酶的催化下氧化成羟基生成- 羟脂酸。羟脂酸可转变为酮酸,然后氧化脱羧转变为少一个碳原子的脂肪酸。此外脂肪酸的末端甲基(- 端)可经氧化作用后转变为- 羟脂酸, 然后再氧化成,- 二羧酸进行- 氧化, 此途径称为- 氧化。含奇数碳原子的脂肪酸也可进行- 氧化 ,但最后一轮,产物是丙酰CoA
100、和乙酰 CoA。丙酰 CoA 经代谢生成琥珀酰CoA 。也可以经其他代谢途径转变成乳酸及乙酰CoA进行氧化。详见 10. 2. 3 中的“奇数碳链脂肪酸的氧化”和10. 2. 3 中的“- 氧化和- 氧化” 。4C16:1 与相同碳原子数的饱和脂肪酸氧化途径有何区别? 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 29 页,共 32 页30 解答 :几乎所有生物体的不饱和脂肪酸都只含有顺式双键,且多在第9 位,而-氧化中的2- 反烯脂酰CoA 水化酶和- 羟脂酰 CoA 脱氢酶具有高度立体异构专一性,所以不饱和脂肪酸的氧化除要有- 氧化的全部酶外
101、,还需要3- 顺 , 2- 反烯脂酰CoA 异构酶和2-反,4- 顺二烯脂酰CoA 复原酶。详见10. 2. 2. 5“不饱和脂肪酸的氧化”。不饱和脂肪酸C16:1比相同碳原子数的饱和脂肪酸少生成个ATP。5酮体是如何产生和氧化的?为什么肝中产生的酮体要在肝外组织才能被利用 解答 : 丙酮、 乙酰乙酸、 - 羟丁酸在医学上称为酮体,其如何产生和氧化详见10. 2. 4. 1 “酮体的生成”和10. 2. 4. 2 “酮体的氧化” 。肝产生的酮体要在肝外组织才能被利用,是因为肝中有活力很强的生成酮体的酶,但缺少利用酮体的酶。6脂肪酸是如何进行生物合成的? 解答 :详见“脂肪酸的生物合成” 。71
102、mol 三辛脂酰甘油在生物体内分解成CO2和 H2O 时,可净产生多少摩尔ATP? 解答 :1mol 三辛脂酰甘油在生物体内加H2O 分解成 1mol 甘油和 3mol 辛酸。甘油氧化成 CO2和 H2O 时,可净产生 18.5mol ATP ,3mol 辛酸经 3 次- 氧化,生成4mol 乙酰 CoA。3mol 辛酸: 3 【1.5 3+2.5 3+10 4-2】=150mol ATP ,1mol 三辛脂酰甘油可净产生168.5mol ATP。8试以磷脂酰胆碱为例表达磷脂合成和分解的途径。解答 :磷脂酰胆碱的合成详见节,分解见10. 1.2“磷脂的酶促水解” 。9胆固醇在体内是如何生成、转
103、化和排泄的? 解答 :详见 10. 5 节。11 蛋白质分解和氨基酸代谢1蛋白质在细胞内不断地降解又合成有何生物学意义? 解答 :细胞不停地将氨基酸合成蛋白质,并又将蛋白质降解为氨基酸。这种看似浪费的过程对于生命活动是非常必要的。首先可去除那些不正常的蛋白质,它们的积累对细胞有害。其次,通过降解多余的酶和调节蛋白来调节物质在细胞中的代谢。研究说明降解最迅速的酶都位于重要的代谢调控位点上,这样细胞才能有效地应答环境变化和代谢的需求。另外细胞也可以蛋白质的形式贮存养分,在代谢需要时将其降解产生能量供机体需要。2何谓氨基酸代谢库? 解答 :所谓氨基酸代谢库即指体内氨基酸的总量。3 氨基酸脱氨基作用有
104、哪几种方式?为什么说联合脱氨基作用是生物体主要的脱氨基方式? 解答 :氨基酸的脱氨基作用主要有氧化脱氨基作用、转氨基作用、联合脱氨基作用和非精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 30 页,共 32 页31 氧化脱氨基作用。生物体内L- 氨基酸氧化酶活力不高,而L- 谷氨酸脱氢酶的活力却很强,转氨酶虽普遍存在, 但转氨酶的作用仅仅使氨基酸的氨基发生转移并不能使氨基酸真正脱去氨基。故一般认为L- 氨基酸在体内往往不是直接氧化脱去氨基,主要以联合脱氨基的方式脱氨。详见氨基酸的脱氨基作用。4试述磷酸吡哆醛在转氨基过程中的作用。解答 :转氨酶的种类
105、虽多,但其辅酶只有一种,即吡哆醛-5 - 磷酸,它是维生素B6的磷酸酯。吡哆醛 -5 - 磷酸能接受氨基酸分子中的氨基而变成吡哆胺-5 - 磷酸,同时氨基酸则变成- 酮酸。吡哆胺 -5 - 磷酸再将其氨基转移给另一分子- 酮酸,生成另一种氨基酸,而其本身又变成吡哆醛-5 - 磷酸,吡哆醛-5 - 磷酸在转氨基作用中起到转移氨基的作用。5假设给因氨中毒导致肝昏迷的病人注射鸟氨酸、谷氨酸和抗生素,请解释注射这几种物质的用意何在? 解答 :人和哺乳类动物是在肝中依靠鸟氨酸循环将氨转变为无毒的尿素。鸟氨酸作为C和 N 的载体,可以促进鸟氨酸循环。谷氨酸可以和氨生成无毒的谷氨酰胺。抗生素可以抑制肠道微生
106、物的生长,减少氨的生成。6什么是鸟氨酸循环,有何实验依据? 合成 lmol 尿素消耗多少高能磷酸键? 解答 :尿素的合成不是一步完成,而是通过鸟氨酸循环的过程形成的。此循环可分成三个阶段: 第一阶段为鸟氨酸与二氧化碳和氨作用,合成瓜氨酸。 第二阶段为瓜氨酸与氨作用,合成精氨酸。 第三阶段精氨酸被肝中精氨酸酶水解产生尿素和重新放出鸟氨酸。反应从鸟氨酸开始,结果又重新产生鸟氨酸,形成一个循环, 故称鸟氨酸循环(又称尿素循环)。 合成 1mol尿素需消耗4mol 高能键。详见“排泄”和“ 2尿素的生成机制和鸟氨酸循环”。7什么是生糖氨基酸、生酮氨基酸、生酮兼生糖氨基酸?为什么说三羧酸循环是代谢的中心
107、 ?你是如何理解的? 解答 :在体内可以转变为糖的氨基酸称为生糖氨基酸,其按糖代谢途径进行代谢;能转变成酮体的氨基酸称为生酮氨基酸,其按脂肪酸代谢途径进行代谢;二者兼有的称为生糖兼生酮氨基酸,部分按糖代谢,部分按脂肪酸代谢途径进行。一般说,生糖氨基酸分解的中间产物大都是糖代谢过程中的丙酮酸、草酰乙酸、- 酮戊二酸,琥珀酰CoA或者与这几种物质有关的化合物。生酮氨基酸的代谢产物为乙酰辅酶A 或乙酰乙酸。在绝大多数生物体内,三羧酸循环是糖、脂肪、蛋白质、氨基酸等物质的共同分解途径。另一方面三羧酸循环中的许多中间体如- 酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸、苹果酸、草酰乙酸等又是生物体各物质合成的共同前体。因
108、此三羧酸循环是各物质代谢的中心。8什么是必需氨基酸和非必需氨基酸? 解答 :生物体自身不能合成必需由食物供给的氨基酸为必需氨基酸。如成年人体不能合成苏氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸等8 种氨基精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 31 页,共 32 页32 酸,此 8 种氨基酸称为必需氨基酸,缺少其中任一种都将影响生物体内蛋白质的合成。而生物体自身能合成的氨基酸为非必需氨基酸。9何谓一碳单位?它与氨基酸代谢有何联系? 解答 :生物化学中将具有一个碳原子的基团称为一碳单位。在物质代谢过程中常遇到一碳基团从
109、一个化合物转移到另一个化合物的分子上去,而一碳单位的载体往往为四氢叶酸,体内一碳单位的产生与以下氨基酸代谢有关。甘氨酸、丝氨酸的分解反应可产生N5, N1 0- 亚甲基四氢叶酸,组氨酸降解为谷氨酸的过程中可以形成N5- 亚氨甲基四氢叶酸,苏氨酸在代谢过程中可产生甘氨酸所以也能生成N5,N10- 亚甲基四氢叶酸。另外甲硫氨酸也是体内重要的甲基化试剂,可以为很多化合物提供甲基。详见“氨基酸代谢与一碳单位”。10氨基酸生物合成途径可分为哪几种衍生类型?解答 :不同氨基酸生物合成途径不同,但许多氨基酸生物合成都与机体内的几个主要代谢途径相关。 因此, 可将氨基酸生物合成相关代谢途径的中间产物,看作氨基
110、酸生物合成的起始物,并以此起始物不同划分为六大类型:- 酮戊二酸衍生类型,草酰乙酸衍生类型,丙酮酸衍生类型,甘油酸 - 3- 磷酸衍生类型, 赤藓糖 - 4-磷酸和烯醇丙酮酸磷酸衍生类型,组氨酸生物合成。详见“氨基酸合成途径的类型”。111 分子丙氨酸在哺乳动物体内彻底氧化可净生成多少ATP?解答 : 丙氨酸通过转氨基作用将氨基转给 - 酮戊二酸产生丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸经过氧化脱羧形成乙酰CoA 和 NADH 。 1 分子乙酰 CoA 在细胞内彻底氧化可产生10 分子的 ATP,1 分子 NADH 通过呼吸链的氧化可产生2. 5 分子 ATP。谷氨酸在谷氨酸脱氢酶的催化下形成 1 分子 NA
111、DH 、1 分子 - 酮戊二酸和1 分子 NH4+。2 分子NH4+在哺乳动物体内经过尿素循环转变成尿素需要消耗4 分子 ATP。 因此 1 分子丙氨酸在哺乳动物体内被彻底氧化可净产生 12.5+2.5-2=13分子的ATP。如果是鱼类,则脱下的氨基可直接排出体外,不需要消耗ATP,那么就可净产生15 分子的 ATP。12给哺乳动物喂食15N 标记的丙氨酸,能否在动物体内找到15N 标记的苏氨酸、赖氨酸和谷氨酸?解答 :在动物体内可以找到15N 标记的谷氨酸,15N 标记的丙氨酸与 - 酮戊二酸在谷丙转氨酶的作用下生成谷氨酸和丙酮酸。苏氨酸和赖氨酸是由食物供给的必需氨基酸,动物体自身不能合成。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 32 页,共 32 页