常用抗凝剂的配制及用法

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1、在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要 求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。一、肝素(1)肝素抗凝作用原理 肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血 致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。(2)配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65125 ml血液(按lmg等于125U, 1020U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂 的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成 1肝素生理盐溶液,用时取 0.1毫升于试管内,100C烘干,

2、每管能抗凝510ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直 接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2. 53. 0mg/200300g 体质量,兔10mg/kg体质量,狗510mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白 质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。二、草酸盐合剂(1)原理草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按 3: 2比例配置,可使 血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。(2

3、)配制方法及用量草酸铵1. 2g、草酸钾0. 8g、福尔马林1. 0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0. 1ml(即相 当草酸铵1. 2mg,草酸钾0. 8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0. 5 ml 于试管,烘干后每管可使 5ml 血不凝固。(3)注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能 过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。三、枸橼酸钠常配成35%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加35mg,即可达到抗凝目的。枸橼酸钠可使钙失去活性

4、,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于 红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸橼酸钠为 56溶液。四、草酸钾(一)原理和注意事项草酸钾为最常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血 液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶 的活性,故应注意。(二)配制及使用方法取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使 510ml血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0. 1ml可使12ml血液不 凝。五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除 不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝

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