临床免疫学检验

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1、临床免疫学检验一、免疫球蛋白检测概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体 相似的球蛋白统称。由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、 外分泌液和某些细胞的膜上。（一）分类按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD、IgEIgG于出生后三个月开始合成， 35 岁接近成人水平。是血液中 含量最高的Ig，占血清总Ig的75%80%,是抗感染的主要抗 体。是唯一能通过胎盘的抗体。IgA分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸 道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总 Ig 的 1020%。IgM是分子量最大的Ig。占血清Ig的5-10%。是个体发育过程中 最早出现的抗体，在胚胎

2、发育晚期的胎儿即能产生IgM。在机 体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。IgM是血管内抗感染的 主要抗体。IgE是正常人血清中含量最少的Igo约0.1一0.9mg/L。占总血清Ig 的0.02%,为亲细胞抗体。参与I型超敏反应，与变态反应、寄 生虫病及皮肤过敏有关。（四）临床意义1 免疫球蛋白增高 （1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症）IgG、 IgA 、 IgD 或 IgE 增高。见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、 淋巴样异常增生性疾病等。（2）多克隆免疫球蛋白增高 感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、 螺旋体感染，IgG、IgM增高 自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、 IgM

3、增高多见，类风关以IgM增高为主 慢性肝病：IgG、IgA、IgM可增高， 慢活肝 IgG、 IgM 增高明显IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、 变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、 急慢肝、肾综2 免疫球蛋白减少IgGV6.0g/L, IgM、IgAV0.4g/L（1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症 先天无胸腺症（2）获得性： 见于 大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎 中毒性骨髓病、白血病淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病 长期使用免疫抑制剂Ig减少易引起反复感染IgG 缺乏：易患化脓性感染IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症

4、IgA 缺乏：易患呼吸道感染二、血清 M 蛋白检测.M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相 同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。M 蛋白检测的临床意义 多发性骨髓瘤 巨球蛋白血症:重链病：a型、丫型、型:半分子病：一条重链+条轻链 恶性淋巴瘤:良性M蛋白血症二、补体检测 补体是人或动物血清中的一组具有酶活性的糖蛋白，在机体免 疫系统中发挥抗感染和免疫调节的作用，也参与免疫病理反应。 CH50 测定 CH50 临床意义 主要反应补体经典激活途径的溶血功能，其结果与 C1-C9 各组 分的量和活性均有关增高见于：急性炎症、组织损伤 降低见于：急、慢性肾小球肾炎 各种自身免

5、疫病 感染性疾病 作为判断肝病严重程度的指标 C1q 测定的临床意义1q:是补体经典途径激活的始动因素 :增加：见于骨髓炎、类风关、痛风降低：见于SLE、肾小球肾炎、肾病综合症、重度营养不良 C3 测定的临床意义补体中含量最咼，是经典途径和旁路途径的关键物质，也是一 种急性时相反应蛋白增咼见于：急性炎症或传染病早期、 急性组织损伤、恶性肿瘤、 移植排异反应 C3 测定的临床意义降低见于：补体合成能力降低：慢性肝病、肝坏死补体合成原料不足：营养不良补体消耗或丢失太多：急性肾小球肾炎链球菌感染后 肾炎、狼仓性肾炎、SLE活动期、化疗后先天补体缺乏 C4 测定的临床意义增咼：见于各种传染病、急性炎症

6、（如急性风湿热、皮肌炎、 关节炎等）和组织损伤等降低：见于自身免疫性肝炎、狼仓性肾炎 SLE 、类风关、 IgA 型肾病等在 SLE， C4 的降低常早于其他补体成分，且缓解时较其他成 分回升迟B因子测定的临床意义 主要反应补体旁路途径的溶血功能 增咼：见于某些自身免疫性疾病、肾综、 慢性肾炎、恶性肿瘤 降低：见于肝病、急性肾小球肾炎、 自身免疫性溶贫三、细胞免疫检测免疫细胞 泛指执行机体免疫功能的各种细胞，主要包括 T 、B 和 NK 细胞等与免疫应答有关的细胞。 不同的细胞群或亚群各有其不同的表面标志和功能，可反映 机体的细胞免疫状态或功能细胞免疫检测的应用自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤

7、患者治疗前后细胞免疫功 能的检测骨髓移植和器官移植过程中免疫功能监护 感染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测 某些疾病的发病机制研究T 细胞抗原标记：CD2、CD3、CD4、CD5 、CD7、 CD8B 细胞抗原标记：CD10、CD19、CD20、CD21、CD22 髓系（粒-单系）抗原标记：CD11b、CD31-36、CD64、CD68、CD13、 CD14、CD15、MPO巨核系抗原标记： CD41a、CD41b、CD42b、CD61干细胞抗原标记：CD34祖细胞抗原标记： CD38红细胞抗原标记；CD71、血型抗原A、H非谱系抗原标记： HLA-DR急性白血病免疫分型 分型基础：正常血

8、细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功 能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现，表达增 多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表 现出与细胞系列及其分化程度相关的特性。这些细胞表面和细 胞浆内的抗原随着分化成熟过程不断发生改变，称为造血细胞 分化抗原。分化抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基 础。T 淋巴细胞表面标志检测一、T淋巴细胞表面标志检测1. E玫瑰花结形成试验:CD2+2. T细胞分化抗原测定：CD3+、 CD4+、 CD8+免疫荧光法和流式细胞术临床意义： 自身免疫性疾病、免疫缺陷病、肿瘤患者治疗前后细胞免疫功 能的检测骨髓移植和器官移植过程中免疫功能监护感

9、染性疾病和变态反应性疾病的免疫功能监测 某些疾病的发病机制研究CD3+检测的临床意义：总T淋巴细胞的重要标志评价免疫缺陷症及白血病、淋巴瘤的分型诊断自身免疫性疾病如SLE、类风湿关节炎等的免疫调节治疗器官移植或骨髓移植时免疫监测及指导免疫抑制治疗CD3+CD4+检测的临床意义：辅助、诱导T淋巴细胞的标志机体免疫功能检测白血病、淋巴瘤的分型诊断免疫抑制治疗效果评价病毒感染性疾病时常降低CD3+CD4+检测的临床意义：CD4+绝对计数是HIV （ + ）者/AIDS诊断和分型指标之一。HIV（ +）者分型：一期：500X106/L;二期：（200-499） X106/L；三期：200X106/LC

10、D3+CD8+检测的临床意义抑制、杀伤性 T 淋巴细胞的标志 病毒感染性疾病时常增高CD4+/CD8+减低:常见于爱滋病、恶性肿瘤进行期及复发时CD4+/CD8+增高:在器官移植时预示可能发生排斥反应、自身免疫病二、 B 淋巴细胞表面标志检测1.B 淋巴细胞膜表面免疫球蛋白测定： SmIgM、 SmIgD 免疫荧光法、流式细胞术2.B 淋巴细胞分化抗原检测：CD10、 CD19、 CD20、 CD21、 CD22、 CD40二、 B 淋巴细胞表面标志检测临床意义：1.B 淋巴细胞膜表面仅表达 SmIgM 则为未成熟 B 淋巴细胞， 而同时表达SmlgM、SmIgD则为成熟B淋巴细胞 2.SmI

11、g+细胞增多：慢淋、毛细胞性白血病、巨球蛋白血症 3.SmIg+细胞减低：体液免疫缺陷如丙种免疫球蛋白缺乏症等二、B淋巴细胞表面标志检测临床意义：CD19为全部B淋巴细胞共有的表面标志 CD19增高见于B淋巴细胞系统的恶性肿瘤 CD19减低见于体液免疫缺陷病 三、淋巴细胞亚群功能检测淋巴细胞转化试验：1. 形态学方法： 有丝分裂原： T 淋巴细胞 - 植物血凝素、刀豆蛋白A、美洲商陆B 淋巴细胞-美洲商陆、葡萄球菌A蛋白三、淋巴细胞亚群功能检测 临床意义：反映机体的细胞免疫功能水平， 估计疾病的疗效和预后NK细胞的免疫检测1 数量检测免疫荧光法、流式细胞术CD16+562 功能的检测NK 细胞

12、活性测定：酶释法、 放射性核素法、免疫荧光法抗体依赖性细胞介导的细胞毒（ADCC）测定：NK细胞的免疫检测临床意义1. NK细胞活性增高：病毒感染早期、器官移植患者2. NK细胞活性减低：恶性肿瘤、AIDS、联合免疫缺陷病3. 抗肿瘤疗效观察和预后评价4.免疫调节功能：释放IFN- Y、TNF-B等，增强抗感染 和免疫监视能力第三节 感染免疫检测一、血清抗链球菌溶血素“0”试验（P434）链球菌溶血素“0”是A群溶血性链球菌产生的溶血外毒素， 可刺激机体产生特异的抗链球菌溶血素“0”（ ASO）一、血清抗链球菌溶血素“0”试验临床意义.链球菌感染1周后ASO开始升高，4-6周达高峰，以后逐渐下

13、降，在体内可持续存在数月甚至数年2. 增高见于：风湿性疾病、急性肾小球肾炎、扁桃体炎3 正常人血清中可存在 ASO二、伤寒和副伤寒沙门菌免疫检测1. 肥达反应（WR）：利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检 测患者血清中有无相应抗体的一种凝集试验。参考值 :直接凝集法伤寒 “H”V1： 160； “0”V1： 80。副伤寒甲、乙、丙都V1： 80o肥达反应的临床意义WR阳性一般出现在伤寒发病后一周，阳性率10%；第二周上升为 60-70%；第四周可达 90%以上。单份血清抗体效价“0”1： 80及“H”于1： 160者有诊断意义；若动态观察，WR持续超过参考值或较原效价升高4倍以上者更有价值。.

14、“0”不高，“H”升高见于预防接种后或非特异回忆反应 “0”升高， “H” 不高见于感染早期或其他沙门菌感染2. 伤寒和副伤寒沙门菌抗体IgM测定参考值：ELISA法正常人为阴性或滴度V1: 20 临床意义：发病后一周即可出现升高，有早期诊 断价值，若其滴度1： 20对诊断伤寒带 菌者也有意义。3伤寒和副伤寒沙门菌可溶性抗原测定参考值 ： 胶乳凝集法为阴性临床意义：阳性对确诊沙门菌感染更有重要意义三、梅毒螺旋体抗体检测（P438）初筛试验（非特异性反应素）： 快速血浆反应素试验（ RPR） 不加热血清反应素试验（ USR） 美国性病研究实验室实验（ VDRL）确诊试验（特异性抗体）： 梅毒螺旋体血凝试验（ TPHA） 荧光螺旋体抗体吸收试验（ FTA-ABS）临床意义：l.USR、RPR法：感染梅毒螺旋体后1-2周检出率为76%, 二期梅毒为 95-100%，晚期梅毒为 70-95%，隐性感染期为 70-80%, SLE、疟疾、结核、瘤型麻风病等可出现阳性反应。 可作定量，用于疗效观察。2.筛选试验阳性的情况下必须做确认试验，阳性可肯定梅毒 的诊断。确诊试验灵敏度高，特异性强，不受药物治疗的影响 特异性抗体可持续数年甚至终身。不能用于疗效观察。四、 TORCH 试验.TO：刚地弓型虫.R：风疹病毒.C：巨细胞病毒