药理学实验指导讲解

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1、药理学实验指导中药教学部重庆邮电学院生物学院二 O O 四 年六月药理学实验教学的目的， 不仅是验证药理学理论， 还可培养学生基本操作技能， 观察和分 析解决问题的能力， 以及体验科学研究的基本原则和基本程序， 从而提高学生实验研究能力 和严密的科学思维方法。 为了使各专业的学生能深入理解药理学的基本理论和基本知识， 特 编写了这本药理学实验实验指导。本实验指导选择的实验内容经典、 实用， 做到既与理论课有密切联系， 又有实验课的独 特体系；既有整体动物（包括清醒动物和麻醉动物）实验，又有器官水平实验；既有验证性 实验，又有设计性实验 ,还有综合性实验。从而使学生初步具备对客观事物进行观察、比

2、较、 分析、综合和解决问题的能力， 并验证、 巩固和加深理解基本理论，从而初步掌握药理学实 验的基本方法。为了达到上述目的，要求同学们做到下列事项：一、遵守纪律，提前 5 分钟到达实验室，因故外出或早退应向老师请假。进入实验室必须 身穿白大衣，不许穿拖鞋，衣着整洁干净。实验时应严肃认真，不高声谈笑，不进行实验室 无关的活动。违者将给予一定的处罚。二、实验前： 1. 仔细阅读实验指导，了解实验目的、要求、方法和操作步骤，领会其设计原 理； 2.结合实验内容，复习有关药理学和生理学、生化学等方面理论知识做到充分理解；3.预测实验中各个步骤可能出现的情况； 4. 注意实验中可能发生的问题。三、实验时

3、： 1. 实验者必须先熟悉仪器的使用要点，而后运用。仪器损坏或失灵，应请老师 修理或调换。违章操作使仪器损坏者，要进行赔偿。各小组实验器材不得调换。公用物品用完后放回原处。 2. 实验时将实验器材妥善安排好，正确装置；严格按照实验指导上的步骤进 行操作，准确计算给药量，防止出现差错意外；3. 认真仔细地观察实验过程中出现的现象，随时记录药物反应出现的时间、表现以及最后转归，联系课堂讲授内容进行思考。4. 注意节约实验材料。四、实验后： 1.整理实验结果，经过分析思考，写出实验报告（. 名、班级、组别、日期、操作者题目、目的、简要方法（包括仪器，药品等）实验结果是实验中最重要的部分， 应该忠实，

4、 正确地记述实验过程中所观察到的现象。一定随时记录，不可单凭记忆，否则容 易发生错误或遗漏） 。时交给指导教师； 2 .整理实验器材，洗净擦干，妥为安好，放回原处。 将用过的动物进行处死动物及其他废物丢入指定处所。有班长安排各组进行轮流打扫清洁， 做好实验室的清洁卫生工作（桌、凳、地板、收拾干净，摆放整齐） ，离开时关闭所有的水、 电、气关好门窗。生物信息学院中药学教学部刘圣蓉 刘毅 编著二0 0 四年六月目录实验一实验动物的捉持法和给药法3 .8实验二不同给药途径对药物作用的影响8实验三传出神经系统药物对麻醉兔血压的作用9 10实验四 氯丙嗪的安定和抗激怒反应作用 11实验五吗啡的镇痛作用1

5、213实验六有机磷药物的中毒及其解救1415实验七强心苷对在体蛙心的作用16附录常用生理溶液的成分和配制17 18#实验一实验动物的捉持法和给药法一、常用实验动物的捉持法1 .小鼠(1)双手法：右手提鼠尾，放在鼠笼盖或其他粗糙面上，向后方轻拉鼠尾，使小鼠前肢固定在粗糙面上。迅速用左手拇指和食指捏其双耳间颈背部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤和尾部，便可将小鼠牢固捉持(图1 )。图1小鼠双手捉持法(2)单手法：小鼠置于笼盖上，先用左手食指和拇指抓住鼠尾，后手掌尺侧和小指夹住鼠尾，然后左手拇指与食指捏住颈部皮肤(图 2 )。图2小鼠单手捉持法2. 大鼠大鼠容易激怒咬人，捉持时应戴防护手套。先用

6、右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住头 部，其余手指与掌部握住背部和腹部。注意不要捏其颈部， 以防用力过大、过久，窒息死亡。3 .家兔一只手抓住兔颈背部皮肤，将兔轻轻提起，另一只手托住臀部，使兔呈蹲坐姿势（图3 ）。切不可用手握持双耳提起兔子。图3家兔捉持法4 豚鼠豚鼠性情温和，不咬人，用手轻轻握住身体即可抓起。5. 猫应戴好防护手套。轻声呼唤，慢慢将手伸入猫笼，轻抚猫头、颈和背部，一只手抓住颈背部皮肤，另一只手抓住腰背部。性情凶暴的猫可用布袋或网套捉持，操作中应防其利爪和牙齿伤人。6. 狗驯服的狗可戴上特制嘴套，用绳带固定于耳后颈部；凶暴的狗可用长柄捕狗夹钳住狗的颈部，然后套上嘴套。狗嘴也可

7、用绳带固定， 操作时先将绳带绕过狗嘴的下颌打结，再绕到颈后部打结，以防绳带滑落。狗麻醉后四肢固定于手术台上，取下嘴套或绳带，将一金属棒经两侧嘴角，穿过口腔压于舌上，再用绳带绕过金属棒绑缚狗嘴，并固定于手术台上。应将狗舌拉 出口腔，以防窒息。二、常用实验动物给药法1.经口给药法此法有口服与灌胃两种方法。适用于小鼠、大鼠、豚鼠、兔、犬等动物。口服法可将药物放入饲料或溶于饮水中令动物自由摄取。若为保证剂量准确，可应用灌胃法。（1）灌胃法小鼠：左手捉持小鼠，腹部朝上，右手持灌胃管经口角插入口腔，使灌胃管与食管成一直线，再沿上颚壁缓慢插入食管，稍感有阻力时（大约灌胃管插入1/2），如动物安静，呼吸无异常

8、，即可注入药液。如遇阻力应抽出灌胃管重新插入，若药液误注气管，小鼠可立即死亡。一次灌注药量0.1 - 0.3ml/10g体重。操作宜轻柔，防止损伤食管（图 4）。灌胃管可用粗大的 注射针头制作，磨钝针尖制成，管长4-5cm，直径1mm，连接于1-2ml注射器上即成。图4小鼠灌胃法大鼠：左手捉持大鼠，右手持灌胃器，灌胃方法与小鼠相同。若两人合作时，可由助手协助固定后肢与尾巴。但灌胃管必须长6 8cm，直径1.2mm，尖端呈球状，并安装在 5 10ml的注射器上。注药前应回抽注射器，证明未插入气管（无空气逆流）方可注入药液。一次投药量1 2ml / 100g体重。家兔：需两人合作，一人坐好将兔躯体

9、夹于两腿之间，左手紧握双耳固定头部，右手抓住两前肢固定前身，使兔头稍向后仰；另一人将木或竹制开口器横放于兔口中，将兔舌压住，以8号导尿管经开口器中央小孔，沿上颚壁慢慢插入食管15 - 18cm。为避免误入气管，可将导尿管外口端放入清水杯中，无气泡逸出方可注入药液， 并应再注入少量清水以保证管内药液全部进入胃内。灌毕，慢慢拔出导尿管取出开口器(图5)。图5家兔灌胃法豚鼠：如用灌胃器，灌胃法与大鼠相同。如用开口器和导尿管，操作方法与兔灌胃法相同。猫和狗：灌胃方法与兔相似， 将导尿管从鼻腔或口腔经食管插入胃内给药。操作时应防止动物咬伤与抓伤。(2) 口服法片剂药物可在扒开动物上下齿列后，用镊子夹住药

10、物放在舌根部， 迅速合起上下颌即可咽下药物。给药前若先以水湿润口腔内部，更易咽下。液体药物可在轻轻固定动物头部后，从口角齿列间注入药液， 动物多能自动咽下。 溶于水的药物也可加入饮水中口服，不溶于水的药物可加入饲料中给药。但这两种给药法必须是 无味的药物，且难以保证剂量准确。2.注射给药法(1)皮下注射法：小鼠：一般需两人合作，一人把小鼠头与鼠尾牵向两端并固定，另一人左手提起背部皮肤，右手持注射器刺入皮下，若针头容易向左右摆动即可注入药液。拔针时左手捏住针刺部位， 防止药液外漏(图6)。一人操作可把小鼠放在金属网上，左手拉鼠尾，小鼠以其习性向前 移动，此时右手持注射器从头端向尾部刺入背部皮下。

11、注药量0.1 0.3 ml/10g体重。图6小鼠皮下注射法大鼠：以捉持法握住大鼠，于背部或大腿拉起皮肤，将注射针刺入皮下。一次注射药量小于1.0ml/100g 体重。家兔：左手将兔背部皮肤提起，右手持注射器，针尖刺人皮下松开左手，进行注射。豚鼠：注射部位可选用大腿内侧面、背部、肩部等皮下脂肪少的部位。通常为大腿内侧面注射。一般需两人合作，一人固定豚鼠，一人进行注射。猫：将臀部皮肤拉起，将注射针刺入皮肤与肌肉之间，注入药液。犬：将犬的颈部或背部皮肤拉起，注射针刺入皮下进行注射。(2)皮内注射法：15 角刺入皮内，注射药液，注先将注射部位剪去毛。左手绷紧皮肤，右手持注射器，小于 射处出现一白色小皮

12、丘。（3）腹腔注射法：小鼠：左手捉持小鼠，腹部向上，右手将注射器针头刺入皮肤，其部位是距离下腹部腹白线稍向左或右的位置。向前推进3 5mm，接着使注射器针头与皮肤呈45。角刺入腹肌，继续向前刺人，通过腹肌进入腹腔后抵抗消失，这时即可轻轻注入药液。小鼠的一次注射量为0.1 0.2m1/10g 体重（图 7）。图7小鼠腹腔注射法大鼠：腹腔注射与小鼠相同。注射量为1 2ml/100g体重。豚鼠、猫、免等：豚鼠、猫腹腔注射部位同小鼠。兔在下腹部近腹白线左右两侧约lcm处,犬在脐后腹白线侧边 1 2cm处注射为宜。（4）静脉注射法：大鼠和小鼠：一般采用尾静脉注射， 事先将小鼠和大鼠置于固定的筒内或铁丝罩

13、内，或扣于烧杯内，使尾巴露出，于 45 50 C温水中浸泡、或用 60-100瓦电灯泡烘烤、或用 75 %酒 精棉球擦之，使血管扩张，选择尾巴左右两侧静脉注射，注射时若出现隆起的白色皮丘，说明未注入血管，应重新向尾根部移动注射。一次注射量小鼠为 0.05 0.1ml/10g体重（图8）。注射完毕后用棉球按压止血。图8小鼠尾静脉注射法家兔：一般米用耳缘静脉注射。可用酒精棉球涂擦耳部边缘静脉，或用电灯泡烘烤兔耳使血管扩张。以左手指在兔耳下作垫，右手持注射器，针头经皮下进入血管。注射时若无阻力或无发生隆起现象，说明针头在血管内，注射完毕，压住针眼，拔去针头，继续压迫数分钟止血（图9）。图9家兔耳缘静

14、脉注射法豚鼠：一般用前肢皮下头静脉注射，后肢小隐静脉注射也可以。接近下部比较容易刺入静脉。 注射量一般不超过 2ml。猫：一般采用前肢皮下头静脉注射。注射前先将猫装入固定袋或笼内，左手抓住前肢，酒精棉球涂擦后，从前肢的末稍端将注射器针头刺入静脉。证实针在静脉内后，即可注射。犬：可选用前肢皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。以手或橡皮带把静脉向心端扎紧，使血管充血。酒精棉球涂檫后，针头向近心端刺入静脉，回抽针栓，倘有回血即可推注药液（图10 ）。图10犬后肢外侧小隐静脉（左）和前肢背侧皮下头静脉 （右）注射法实验二不同给药途径对药物作用的影响目的观察不同给药途径对尼可刹米作用的影响。器材注射器（1ml

15、 Xl）、小鼠灌胃器、玻璃钟罩。药品5 %尼可刹米溶液。动物小鼠方法小鼠 3 只，称重，编号甲、乙和丙。先观察正常活动，如呼吸、活动度和运动协调程度等。 然后将甲、乙、丙鼠以 5尼可刹米溶液 0.2m1/10g 体重，分别灌胃、皮下和腹腔注射，观 察给药后各鼠是否出现兴奋、惊厥等症状，并记录出现症状的时间和小鼠的最终结局。结果 将观察结果列表比较。思考题 不同给药途径为什么会影响药物效应？实验三 传出神经系统药物对麻醉兔血压的作用目的 观察传出神经药物对心血管系统的作用，并根据受体学说初步分析其作用机制。器材 RM6240 信号采集系统、 压力换能器、 手术台、动脉套管、 动脉夹、手术刀， 小剪刀、普通剪刀、止血钳、头皮针、纱布、弹簧夹、螺旋夹、三通管、