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1、实验一细胞多糖的PAS反应目的：掌握细胞中多糖（如淀粉、细胞壁纤维素等）原位显示的PAS反应原理，熟悉PAS 的技术。一、PAS反应原理过碘酸（HI02H0）作为一种强的氧化剂，能够打开CC键，将-CHOH-CHOH-、42-CHOH-CHO、 -CHOH-COOH、 -CHOH-CHNH 等的羟基氧化为醛基。但它不继续氧化新形成的22醛基。所以，有充分的醛基与 Schiff 试剂中的无色碱性品红化合而形成紫红色物质， 使细胞中的多糖（如淀粉、细胞壁纤维素等）原位显示出来。二、器材、试剂及材料1 、器材 显微镜，载/盖玻片、镊子、刀片、吸水纸。2、试剂（ 1）过碘酸酒精溶液过碘酸(HI02H0
2、)420.4g95%乙醇35ml0.2M 醋酸钠(27.2g+1000mlH0)25ml蒸馏水10ml（2）Schiff 试剂先将 100ml 蒸馏水煮沸，然后加人 0.5g 碱性品红，充分搅拌，必要时可再煮 5 分 钟，使之充分溶解。待溶液冷却至50C时，过滤，向溶液中加10ml INHCl。冷却至25C 时。加0.5g偏重亚硫酸钠（NaSO ）盖严，置于暗处，经几天后红色稍裉，溶液呈白或225淡黄色。如果仍有红色，可加活性炭0.25g摇l分钟，过滤，装入棕色瓶并外包黑纸， 放入冰箱中备用。（3）亚硫酸（临用时配制）普通自来水200ml,10%偏重亚硫酸钠10ml,1NHCl 10ml。（4
3、）1NHCl取82.5ml比重为1.19的浓盐酸加蒸馏水至1000ml.（5）70%乙醇3、材料洋葱鳞茎表皮及鳞片肉细胞，橡胶种子胚乳.三、实验方法1、取洋葱鳞茎表皮细胞（或徒手切取鳞片肉细胞、橡胶种子的胚乳的切片）,浸于 过碘酸酒精溶液中 10分钟左右（对照为 70%酒精）。2、用 70%酒精洗 1-2 分钟。3、入 Schiff 试剂中染 15 分钟。4、亚硫酸水洗三次。5、蒸馏水洗 1-3 次,装片镜检。 结果:多糖部分（如细胞壁、淀粉粒等）呈紫色。四 、作业1、比较经过碘酸酒精溶液处理与对照间的细胞多糖部分的显色情况，说出细胞中 多糖（如淀粉、细胞壁纤维素等）原位显示的PAS反应原理。并图示葱鳞茎表皮细胞的 细胞壁。2、比较洋葱鳞茎不同部位的多糖含量。五、注意事项1、各位同学实验完后应将用过的载玻片和盖玻片放回讲台；2、废液不能倒入培养皿，应倒入指定的烧杯中；3、应将青霉素瓶洗干净后放回原处；4、应节约使用药品。
