《补肾益精方延缓老年雄性大鼠骨与脑衰老的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《补肾益精方延缓老年雄性大鼠骨与脑衰老的实验研究（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、补肾益精方延缓老年雄性大鼠骨与脑衰老的实验研究内容提要目的：评价补肾益精方延缓老年雄性大鼠骨衰老与脑衰老的作用，讨论此方延缓整个机体衰老的机制。方法：40只24月龄SD雄性大鼠随机分为24月龄本底对照组、30月龄增龄对照组、补肾益精方低剂量组、补肾益精方高剂量组，每组各10只。低剂量组、高剂量组均自24月龄给药至30月龄。各组相应处理以后分别测定各组大鼠的骨参数(左侧股骨近段、中段、远段的骨密度和右侧股骨的弯曲断裂载荷)以及脑参数(脑组织受体结合容量和胆碱酯酶活性)。结果：在骨方面，补肾益精方既能量效依赖性地增加大鼠股骨各段骨密度，又能量效依赖性地进步大鼠股骨弯曲断裂载荷；在脑方面，补肾益精方
2、不仅能上调大鼠脑组织受体结合容量，而且又能抑制大鼠脑组织胆碱酯酶活性。结论：补肾益精方具有同时延缓雄性大鼠骨衰老与脑衰老的作用；推测该方似通过神经内分泌免疫网络的介导从整体角度调整衰老机体肾虚精亏之异常。ExperientalStudynEffetfBushenYijingReipeinDelayingSenilityfBneandBrainfAgedaleRatsbjetive:TevaluatetheeffetfBushenYijingreipe(BSYJR)indelayingsenilityfbneandbrainfagedaleratsandinferitsehanisindelay
3、ingsysteisenility.ethds:FrtyaleSDrats,24nthsldererandlydividedint4grups,thebaselinentrlgrup,theagedntrlgrup(30nthsld),theBSYJRhighdsegrupandtheBSYJRldsegrup.ThelattertgrupsreEivedBSYJRtreatentfr24nthsldt30nthsld.Bneindexes(bnedensityftheprxial,iddleanddistalsegentsfleftfeurandbreakbendingladfrightfe
4、ur)andbrainindexes(bindingapaityfreeptrandhlinesteraseativityfbrain)ereeasuredafterrespndingtreatent.Results:Inbne,BSYJRuldntnlyinreasethebneineraldensityinvariussegentsffeur,butalsraisethebendingbreakladffeurdse-effetdependently.Inbrain,BSYJRuldbthup-regulatethebindingapaityfreeptrandinhibittheativ
5、ityfhlinesterase.nlusin:BSYJRulddelaythesenilityfbneandbraininalerats,inferringthatitightregulateintegrallytheabnralityfaginginKidneyAstheniaandEsseneDefiienythrughediatinfnerve-endrine-iunitynetrk.TevaluatetheeffetfBushenYijingreipe(BSYJR)indelayingsenilityfbneandbrainfagedaleratsandinferitsehanisi
6、ndelayingsysteisenility.ethds:FrtyaleSDrats,24nthsldererandlydividedint4grups,thebaselinentrlgrup,theagedntrlgrup(30nthsld),theBSYJRhighdsegrupandtheBSYJRldsegrup.ThelattertgrupsreeivedBSYJRtreatentfr24nthsldt30nthsld.Bneindexes(bnedensityftheprxial,iddleanddistalsegentsfleftfeurandbreakbendingladfr
7、ightfeur)andbrainindexes(bindingapaityfreeptrandhlinesteraseativityfbrain)ereeasuredafterrespndingtreatent.Results:Inbne,BSYJRuldntnlyinreasethebneineraldensityinvariussegentsffeur,butalsraisethebendingbreakladffeurdse-effetdependently.Inbrain,BSYJRuldbthup-regulatethebindingapaityfreeptrandinhibitt
8、heativityfhlinesterase.nlusin:BSYJRulddelaythesenilityfbneandbraininalerats,inferringthatitightregulateintegrallytheabnralityfaginginKidneyAstheniaandEsseneDefiienythrughediatinfnerve-endrine-iunitynetrk.KeyrdsBushenYijingReipe,agedrats,bnedensity,bnelad,integratedregulatin,nerve-endrine-iunitynetrk
9、,reeptr,hlinesterase根据中医学的整体观念和“肾主骨生髓，脑为髓之海的理论，80年代以来国内中西医结合学者分别应用不同的补肾益精类中药复方有效地延缓骨衰老(老年性骨质疏松症)、脑衰老(老年性痴呆)的研究报告已经屡见不鲜(17)，但是分别观察同一个补肾益精的中药复方延缓骨衰老、脑衰老的研究尚不多见；然而这种类型的研究却具有非常重要的意义；因为一方多效的研究结果可以提供基于整体观念的中医抗衰老理论最直接的药效学证据。因此，本项研究通过观察由何首乌、肉苁蓉等数种天然植物组成的具有补肾益精成效的中药复方补肾益精方对雄性大鼠骨衰老与脑衰老的影响，旨在评价本方延缓老年大鼠骨衰老与脑衰老的
10、作用以及讨论该方延缓机体衰老的机制，为中医药抗衰老提供整体防治的证据。材料与方法1动物24月龄SD雄性大鼠40只，(45020)g，由上海中医药大学实验动物中心提供，上海市医学实验动物管理委员会实动合格证书号0017500；各组大鼠分笼饲养；自由摄取标准大鼠饲料(钙1.01%，磷0.78%)；自由饮用蒸馏水；室温(182)。2药物补肾益精方(仙灵脾10g何首乌15g肉苁蓉10g骨碎补10g)由上海中医药大学根底医学院中医根底实验室提供。应用蒸馏水将补肾益精方胶囊制剂药粉配制成为悬浊液(浓度0.6g药粉/l药液)，低剂量组按照10l药液/kg体重的剂量给药(相当于成人用量的10倍)、高剂量组按照
11、30l药液/kg体重的剂量给药(相当于成人用量的30倍)。3仪器SPA-型单光子骨密度仪(中国成都测试技术研究院)，放射源125I；INSTRN-1122型万能材料试验机(英国)；alla1410液体闪烁计数器(Pharaia)；ellsanK2酶标仪(LabsystesDragn)。4动物分组与处理40只24月龄SD雄性大鼠随机分为24月龄本底对照组、30月龄增龄对照组、补肾益精中药复方低剂量组、补肾益精中药复方高剂量组，每组各10只。24月龄本底对照组大鼠适应性正常喂养1周以后，全部处死；30月龄增龄对照组大鼠自24月龄正常喂养至30月龄时全部处死；低剂量组、高剂量组大鼠均自24月龄正常喂
12、养的同时自由饮用补肾益精中药复方制剂悬浊液，至30月龄时全部处死。5观察指标及其检测方法5.1股骨近、中、远段骨密度及其测定处死大鼠以后，取出左侧股骨，应用70%乙醇固定，剥离软组织；使用HB铅笔在剥离软组织的股骨的近、中、远段分别标记3条线(A线：股骨近段股骨小转子根部远侧；B线：股骨远段股骨髌面近侧；线：A线与B线之中点)。沿标记的每一条线作骨横越扫描3次，计算3次获得的骨密度平均值，作为此线代表的股骨某段的骨密度。5.2股骨弯曲断裂载荷及其测定处死大鼠以后，取出右侧股骨，应用70%乙醇固定，剥离软组织；置于万能材料试验机的支架上(跨距24)，以10/in的速度下压股骨中段，记录纸上呈现力
13、线突然断裂的时候，记下此时股骨承受的弯曲载荷。5.3受体结合容量及其测定处死大鼠以后，断头取脑，别离脑组织，迅速参加制备缓冲液(50l/LKH2P4-NaH，10l/Lgl2，0.25l/L蔗糖，pH7.7)，用高速分散器匀浆。然后以3000r/in离心10in，取上清液，再以27000r/in离心15in，取沉淀，加反响缓冲液(50l/LKH2P4-NaH，10l/Lgl2，0.2%维生素，pH7.7)，用高速分散器制成悬浮液备用。同时采用微量Lry法改良法测蛋白含量。以上操作均在04进展。按受体放射性配基结合分析法，测定受体结合容量。5.4乙酰胆碱酯酶活性及其测定处死大鼠以后，断头取脑，别
14、离脑组织，称重后加1/15l/L磷酸缓冲液，制成匀浆，然后以1500r/in离心15in，上清液即为酶样本。按羟胺比色法(8)，略加改良测定乙酰胆碱酯酶活性。6统计学处理各组测定值以均数标准差表示，两组均数之间比拟采用t检验法。结果1补肾益精方对老年雄性大鼠股骨各段骨密度及其弯曲断裂载荷的影响见表1。由表1可知，增龄对照组大鼠股骨各段骨密度明显低于本底对照组大鼠(P0.05)，增龄对照组大鼠股骨弯曲断裂载荷明显低于本底对照组大鼠(P0.05)；与增龄对照组比拟，低剂量组近段、中段、远段骨密度分别增加了18%(P0.05)、16%(P0.05)、1%(P0.05)，高剂量组近段、中段、远段骨密度
15、分别增加了30%(P0.05)、23%(P0.05)、12%(P0.05)，但是与本底对照组比拟，高剂量组各段骨密度尚未到达本底对照组的程度(P0.05)；低剂量组股骨弯曲断裂载荷增加了24%，高剂量组股骨弯曲断裂载荷增加了33%，但是与本底对照组比拟，高剂量组股骨弯曲断裂载荷尚未到达本底对照组的程度(P0.05)。表1补肾益精方对老年雄性大鼠股骨各段骨密度及其弯曲断裂载荷的影响(s)组别n近段骨密度中段骨密度远段骨密度弯曲断裂载荷(N)(g/2)本底对照100.270.010.310.030.230.02143.0014.17增龄对照100.190.030.220.030.180.02102
16、.0012.39低剂量100.220.030.250.040.190.01127.0027.50高剂量100.250.01*0.270.01*0.200.01*137.007.50*注：与增龄对照组比拟，*P0.05；与本底对照组比拟，P0.052补肾益精方对老年雄性大鼠脑组织受体结合容量和乙酰胆碱酯酶活性的影响见表2。增龄对照组大鼠脑组织受体结合容量明显低于本底对照组大鼠(P0.05)，增龄对照组大鼠乙酰胆碱酯酶活性与本底对照组大鼠比拟没有明显差异；与增龄对照组比拟，低剂量组与高剂量组大鼠脑组织受体结合容量明显上升(P0.05)，并且与本底对照组比拟，低剂量组与高剂量组均到达本底对照组的程度；低剂量组与高剂量组大鼠乙酰胆碱酯酶活性明显受到抑制(P0.05)。表2补肾益精方对老年雄性大鼠脑组
