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1、革兰氏染色一.实验流程：1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用 marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液 滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。2、涂片：液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近 5cm左右打开管盖；右手持接 种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环 ，在洁净无脂的载玻片上涂 直径2mm左右的涂膜，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌.固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体，涂在载玻片 上，使其薄而均匀3、晾干：让涂片在空气中自然干燥。4、 固定：让菌膜朝上，通过火焰23次固定（以不烫手为宜）。5、染色：将固定过的涂片放报纸上，滴加草酸铵
2、结晶紫液 ，染1min。6、水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，用吸水纸吸干。简单染色结束可观察细胞 形态。7、媒染：滴加1滴碘液，染1min，水洗。8、 脱色：吸去残留水，连续滴加95%乙醇脱色2030s至流出液无紫色,立即水洗。9、复染：滴加蕃红复染35min，水洗。至此，革兰氏染色结束。 二染色结果：革兰氏阳性菌都呈紫色，革兰氏阴性菌都呈红色。备注：1. 革兰氏阳性菌：葡萄球菌属（主要是 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等）、链 球菌属（肺炎链球菌、草绿色链球菌、肠球菌等）、白喉杆菌、炭疽杆菌、破伤风杆 菌、蜡样芽抱杆菌等，其中，金黄色葡萄球菌、 肠球菌等为临床重要等病原菌。2。 革兰氏阴性菌：埃希氏菌属、枸橼酸菌属、假单胞菌属（ 绿脓杆菌等）、莫拉 菌属（卡他莫拉菌等）、奈瑟菌属（淋球菌、脑膜炎双球菌等）、不动杆菌属（鲍曼不 动杆菌、罗菲不动杆菌等）、克雷伯菌属（主要是 肺炎克雷伯杆菌）、沙门氏菌属、志 贺氏菌属（痢疾杆菌等）、黄杆菌属、变形杆菌属、军团菌属、耶尔森菌属、嗜血杆 菌属（杜克雷嗜血杆菌、流感嗜血杆菌等）、产气杆菌属、霍乱弧菌、阴沟肠杆菌等。
