维生素C含量的测定

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1、水果中维生素C含量摘要：不同价钱品牌的水果罐头中果肉所富含的维生素 C 的含量是不同的，采 用分光光度法测定黄桃罐头中维生素 C 的含量的多少，样品为不同厂家 的罐头。在常温下测定，得出不同厂家罐头中VC的含量。测得结果为： 康士利桃罐头 维生素C的含量为4.276g/mL,欢乐家桃罐头维生素C 的含量为2.631g/mL，冠之林桃罐头维生素C的含量为3.677g/mL。 所得结果表明，康士利桃罐头维生素C含量最高。关键词：水果；分光光度法；不同品牌桃罐头；维生素C含量Determination of the vitamin C content of fruit inLi Shuya & Fu

2、 JiaHarbin Institute of Technology (Weihai) College of Marine Science and Technology, Biological Sciences 1107201Abstract: different price brand canned fruit pulp are rich in vitamin C content, the use of spectrophotometric determination of the how much of the vitamin C content of canned yellow peac

3、h, canned samples for different manufacturers. Draw the different manufacturers canned VC content was measured at room temperature. The measured: Kang Shili canned peaches vitamin C content of 4.276 g /mL vitamin C content of canned peaches, joy home for 2.631g /mL vitamin C content crown forest of

4、canned peaches for 3.677 g /mL. The results show that the highest Kang Shili canned peaches vitamin C content.Keywords: fruits; spectrophotometry; different brands of canned peaches;vitamin C content引言维生素C (Vitamin C , Ascorbic Acid)广泛存在于新鲜水果中，它具有保 持肌肤润滑、防止衰老、抗坏血酸等作用，是人体必需的主要维生素之一，是人 体正常生理代谢不可缺少的一类有

5、机物 1。维生素 C 在水果中主要以还原型 (ASA)存在。维生素C又名抗坏血酸，能溶于水、乙醇和甲醇，而不溶于其他 有机溶剂，具有酸性和还原性，有4种异构体，即L抗坏血酸、D抗坏血酸、 L异抗坏血酸、D异抗坏血酸。天然抗坏血酸主要以L抗坏血酸为主，其 效力最高。抗坏血酸在合适的条件下，可氧化成脱氢抗坏血酸，脱氢后的L脱 氢抗坏血酸在生物体内可还原为L抗坏血酸，且这种变化是可逆的，故仍有生 物活性。脱氢抗坏血酸可进一步被氧化，生成二酮古洛糖酸，而这一过程是不可 逆的。在许多水果和蔬菜中，维生素 C 主要以还原型抗坏血酸存在。维生素 C 的固体较稳定，水溶性最容易受氧化，所以测定VC的准确性很大

6、程度上取决于 分析技术。水果中 VC 含量的测定一般采用 2,6-二氯靛酚滴定法2、碘量法3、 2,4 二硝基苯肼法4、荧光分光光度法5高效液相色谱法6和点位滴定法7等，这些方 法都有所用试剂不稳、操作程序复杂、费时等缺点，为此，此实验采用分光光度 法8,首先测定维生素C的标准曲线，以吸光度差值AA对抗坏血酸浓度C绘 制标准曲线，以此为基础测定样品的AA，并求得水果中维生素C的含量。本方 法与常规方法比较，具有准确、快速、稳定、试剂易得等优点。2 实验部分2.1 实验原理维生素C是烯醇化合物，具有C=C基，在可见光区无吸收，在紫外区 有吸收。按实验方法，分别对不同浓度的标准维生素 C 与试剂空

7、白溶液在 200400nm 波长范围内进行扫描，通过吸收光谱曲线确定维生素 C 水溶液的最 大吸收波长。又根据维生素 C 对碱不稳定的特性，于最大吸收波长处测定样品 溶液与碱处理样品两者吸收光度之差，通过查标准维生素 C 的标准曲线，即可 计算样品维生素 C 的含量。这种方法具有准确、快速、重现性好等优点，还适 合深色样品的测定。由于维生素 C 极度不稳定，在样品前处理过程中，防止抗坏血酸的氧化是非 常重要的。可采用添加偏磷酸、草酸的方法加以解决。因为它们均能抑制抗坏血 酸的氧化酶，而起稳定作用。但由于2%草酸在波长200400nm处有非常强的吸 收，所以不能作为维生素C的提取液，而2%偏磷酸

8、虽然在波长200400nm处有 微弱的吸收，可通过扣除其空白吸光值，便可计算出样品维生素C的吸光值差 AAO因此，本实验选择2%偏磷酸作为分光光度法的溶剂。2.2 实验原材料与仪器所用原材料包括：欢乐家桃罐头，广东湛江市欢乐家食品有限公司提供；冠 之林桃罐头，山东临沂市康发食品有限公司提供；康士利桃罐头，山东盛德泰食 品有限公司提供；标准抗坏血酸溶液(0.1mg/mL)：精确称取抗坏血酸10mg(精确至0.1mg), 用2%偏磷酸溶解并定容至100mL，此溶液应贮存在棕色瓶中，最好现配现用；2% （W/V）偏磷酸溶液，0.5mol/mLNaOH，哈尔滨工业大学（威海）海洋科学 与技术学院实验室

9、提供。所用仪器包括：紫外可见光光度计、石英比色皿、组织捣碎机、高速离心 机、50mL容量瓶、lOOOmL容量瓶、10mL移液管、10mL比色管。2.3 标准曲线的测定（1）绘制吸收光谱曲线：以蒸馏水为参比，取标准抗坏血酸溶液 6.00mL，在 220320nm 范围内绘制维生素 C 的吸收光谱曲线，并确定最大吸收峰所对应的入射光波长入max （经测定，最大吸收峰所对应的入射光波长入max=245nm）。（2）绘制标准曲线：吸取0.00、0.20、0.40、0.80、1.00、1,20mL抗坏血酸 标准溶液，置于10mL比色管中；用2%偏磷酸定容，摇匀。此标准系列抗坏血 酸的浓度分别为 0.00

10、、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.0、12.0g/mL。以蒸 馏水为参比，在波长入max处，用1cm石英比色皿测定标准系列抗坏血酸溶液 的吸光度。抗坏血酸吸光度为A,试剂空白吸光度为A。，计算吸光度差值AA=A A。，以吸光度差值对抗坏血酸浓度C绘制标准曲线。表1标准系列抗坏血酸溶液在波长入max处的吸光度值Table 1 - Stan dard Series ascorbic acid soluti on at the wavele ngth 入max at the absorbance value吸光度值A吸光度差值A抗坏血酸浓度C0.058000.0860.028

11、10.1650.10720.2830.12540.3950.33760.5370.47980.6390.581100.7720.71412表 2 维生素 C 的浓度与吸光度值的关系标准曲线Table 2 - relationship of the concentration of vitamin C and the absorbance values ofthe standard curve抗坏血酸浓度C与吸光度值的关系的标准曲线y = 15. 964x+0. 6436 R2 = 0. 981442086420IX IX 一=1抗坏血酸浓度c一线性抗坏血釀浓度c)2.4 样品的提取将罐子里面的

12、桃拿出，用吸水纸将其表面的水分吸干，称取具有代表性的样 品lOOg，放入组织捣碎机中，加入100mL2.0%偏磷酸溶液，迅速捣成匀浆。称 取31.5g浆状样品，用2.0%偏磷酸将样品移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度， 摇匀。有浑浊现象，用高速冷离心机离心，7500rpm，离心lOmin,取其上清液。2.5 样品的测定准确移取澄清透明的0.4mL的提取液，置于10mL的比色管中，用2.0%偏磷 酸溶液稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为参比，在波长入max处，用1cm石英比 色皿测定其吸光度。每个样品做三次重复。待测碱处理样溶液的测定：分别吸取 0.4mL 澄清透明提取液，加入 6 滴 0.5mol

13、/L的NaOH溶液，置于10mL比色管中混匀，在室温放置40min后，加入 2.0%偏磷酸溶液稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为参比，在波长入max处，用1cm 石英比色皿测定其吸光度。每个样品做三次重复。2.6 结果计算由待测样品与待测碱处理样品的吸光度值之差校准曲线，即可计算出样品中 维生素C的含量，也可以直接以待测碱处理液样为参比，测得待测液的吸光值, 通过查校准曲线，计算出样品的维生素C的含量。维生素 C 的含量 mg/100g= ( 200 X C) /( mX V )式中：m样品重量(g)；200稀释倍数；C从校准曲线上查得抗坏血酸的含量，p g/mL；V测试时吸取提取液体积，mL。表

14、3 实验结果与数据处理Table 3 - experimental results with the data processing不同品牌未处理AA加碱A0A0VC含量|J g/mL冠之林0.2570.2610.2600.2590.0690.0700.0680.0690.1903.677欢乐家0.2350.2410.2380.2380.1100.1130.1160.1130.1252.631康士利0.2620.2540.2630.2600.0330.0320.0320.0320.2284.2762.7 注意事项(1) 在优化的实验条件下得到的校准曲线，表明维生素C在1.0012.0卩g /m

15、L范围内吸光度与浓度C之间呈良好的线性关系服从朗伯比尔定律。所以测定 的最大吸光度值最好不要超过0.8A,否则浓度过高易造成曲线的弯曲。(2) 要求每批测定样品都要有校准曲线。( 3)在处理药品时，如遇到泡沫产生，可加入数滴辛酸消除。(4) 若样品浑浊，可用离心机分离用转速7500rpm,时间10min,至样液澄 清、透明，取上清液。(5) 一般分析纯抗坏血酸纯度为 99%以上，可不标定，若试剂发黄，则弃 去不用。3 结果分析与启示经过分析，我们发现康士利桃罐头维生素 C 含量最高。对于一个健康人来说，人体 每日对维生素C的需要量是50mgL0Gtogo由于在运动时，水溶性的维生素C会大量流失,所以, 运动后应及时补充维生素C,这对提高机能有重要用。因此林维生素C会使得人体健廉所以在选择桃罐头为自己补充维生素C时，建议优先选择买康士利桃罐头。 参考文献1 王喜生人体营养状况的评价方法M.天津：天津科学出版社，1987,323