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1、常用溶剂的配制方法1 磷酸缓冲液：0.15M , pH=7.4磷酸缓冲液：KH2PO4 : 2.041 g+100ml 水K2HPO4 3 出 0： 10.3g+300mL水两液混合即成400mL, 0.15M , pH=7.4的磷酸缓冲液0.2mol/L不同pH的磷酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的磷酸二氢钾溶液和0.2mol/L的磷酸二氢钾溶液，然后按下表配制：pHKH 2PO( mL)K2HPO4 3H2O ( mL)pHKH 2PO4K2HPO4 3H2O ( mL)5.793.56.56.945.055.05.892.58.07.039.061.05.990.010.07.133.
2、067.06.087.712.37.228.072.06.185.015.07.323.077.06.281.018.57.419.081.06.377.522.57.516.084.06.473.526.57.613.087.06.568.531.57.710.590.06.662.537.57.88.591.56.756.543.57.97.093.06.851.049.08.05.394.72硼酸缓冲液0.15M , pH=8.2硼酸缓冲液：四硼酸钠溶液：2g+35 mL水硼酸溶液：3.246g硼酸+350 mL水两液混合即成700 mL, 0.15M, pH=8.2的硼酸缓冲液0.2
3、mol/L (硼酸根)，不同pH的硼酸缓冲液：先配制0.2 mol/L的硼酸溶液和0.05 mol/L的四硼酸钠溶液，然后按下表配制：pH四硼酸钠mL硼酸mLpH四硼酸钠mL硼酸mL7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.03甘氨酸盐酸缓冲液：0.2 mol/L0.2 mol/L 甘氨酸溶液(15.01g/L)pH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mLpH0.2 mol/L甘氨酸mL0.2 mol/L盐酸mL2.05044.43.05011.42.45032.43.2508.2
4、2.65024.23.4506.42.85016.83.6505.04柠檬酸缓冲液：O1mol/LCeHsO? H2O:0.1mol/L 溶液为 21.01g/LNaaCeHsO? 2H2O： O.1mol/L 溶液为 29.41 g/LpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mLpH0.1mol/L柠檬酸mL0.1mol/L柠檬酸钠mL3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.2
5、12.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.44.89.210.80.1MpH=4柠檬酸缓冲液222mLVi:柠檬酸V2 :柠檬酸钠Vi=131mL0.1*0.131*210.14=2.75gV2=91mL0.1 *0.091 *294.10=2.68g0.1 M pH=2.3 柠檬酸缓冲液412mLVi:柠檬酸V2 :柠檬酸钠Vi=400mL0.1 *0.4*210.14=8.40gV2=12mL0.1 *0.012*294.10=0.353g1MpH=10碳酸缓冲液211mLVi:碳酸钠V2 :碳酸氢钠Vi=150mL1*
6、0.15*106=15.9gV2=61mL1*0.061 *84=5.12g原来1MpH=7.4磷酸缓冲液203mLVi： K2HPO4-3H2OV2: KH2PO4Vi=150mL0.15*1*228.22=34.23gV2=53mL0.053*1*136.08=7.21 g现在1MpH=7.4磷酸缓冲液134mLVi： K2HPO4-3H2OV2: KH2PO4Vi=100mL0.1*1*228.22=22.82gV2=34mL0.034*1 *136.09=4.3g0.1MpH=8磷酸缓冲液 20.15mLVi： K2HPO4-3H2OV2: KH2PO4Vi=20mL0.1*0.02*
7、228.22=0.46gV2=0.15mL0.1 *0.15*103*136.08=0.002g0.5M pH=8Tris-HCI缓冲液165mLVi： TrisV2： HCIV 仁 105mL0.5*0.105*12.1.=6.36gV2=60mL (0.5M HCI)0.2M pH=4.3 柠檬酸缓冲液372mLVi:柠檬酸V2 :柠檬酸钠Vi=300mL0.3*0.2*210.14=12.61gV2=72mL0.2*0.072*294.10=4.24g0.2M pH=4柠檬酸缓冲液340mLVi:柠檬酸V2 :柠檬酸钠Vi=200mL0.1*0.2*210.14=8.41gV2=140m
8、L0.2*0.14*294.10=8.23g5. Tris-HCI 缓冲液:O.1mol/L100mL0.1mol/L三疑甲基氨基甲烷（Tris）溶液与一定量的O.1mol/L盐酸混匀，可得O.1mol/L,不同pH的缓冲液。pH0.1mol/L盐酸(mL)pH0.1mol/L盐酸(mL)pH0.1mol/L盐酸(mL)7.289.47.869.08.434.47.386.87.964.08.529.47.484.08.058.48.624.87.580.68.152.48.720.67.677.08.245.88.817.07.773.28.339.88.914.0200mL 0.1 M T
9、ris (2.42g)加入 0.1 M HCI 24mL pH=9, 0.1 M Tris-HCI buffer6.醋酸缓冲液:0.2mol/L0.2mol/L醋酸钠：27.22g三水醋酸钠(无水的为16.4g) +1L水0.2mol/L 醋酸:11.55mL 冰醋酸 +1L 水pH醋酸钠mL醋酸mLpH醋酸钠mL醋酸mL3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.607碳酸缓冲液
10、：0.1 mol/L （Ca2+、Mg?*存在时不得使用）pH0.1 mol/L碳酸钠(mL)0.1 mol/L碳酸氢钾（mL）20 C37 C9.168.77199.409.12289.519.40379.789.50469.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.57910.1 mol/L MES 缓冲液:1.921gMES+100mL 水，pH=4.098.电泳溶液：电泳缓冲液：3gTris碱、14.4g甘氨酸和IgSDS溶于水中，调pH至8.3左右，加水定容至1L。丙烯酰胺溶液（49.5%T，3%C）:48g丙烯酰胺和15g
11、bis溶于100 mL重蒸水中。分离胶缓冲液（4X）:75ml2 mol/L Tris-HCI 缓冲液（pH=8.8） +4ml 0.1 mol/L SDS+46mL 重蒸水。浓缩胶缓冲液(4X):50ml 2mol/L Tris-HCI 缓冲液(pH6.8) +4ml 0.1mol/L SDS+46mL 重蒸水2%前三酮溶液：50mL 95%乙醇+1g前三酮(避光，4C保存)2%乙醇胺溶液：2mL 乙醇胺 +98mL 硼酸缓冲液(0.15M , pH=8.2)，调 pH=8.22M醋酸溶液：1144mL冰醋酸+去离子水定容至1L0.5mol/LEDTA :配制等摩尔的NazEDTA和NaOH溶液(0.5mol/L )，混合后形成EDTA的三钠 盐。或称取186.1g的NazEDTA 2出0和20g的NaOH,并溶于水中，定容至1L考马斯亮蓝溶液：考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50ml 95%乙醇中，充分搅拌溶解，加入100mL85%磷 酸，用蒸馆水1000mL容量瓶定容，真空抽滤。最终试剂中含有0.01% (w/v)考马斯 亮蓝 G250，4.7% (w/v)乙醇，8.5% (w/v)磷酸。10%SDS (十二烷基硫酸钠)：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全 溶解。 用水定容至1L。
