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1、专业实践能力一、病理解剖技术1. 病理尸体解剖的方法和步骤1病理尸体解剖的准备2体表检查一体表检查称体重，量体长，观察发育、营养状况，检查体表有无黄疸，发疳，出血点，疤痕，创 口等，与其部位，大小；眼、耳、鼻、口腔等有无溃疡、分泌物或液体流出，外生殖器有病变，浅表淋巴 结肿大否；有无尸冷、僵、腐败现象。3胸腹腔检查二体腔检查1, 胸、腹壁皮肤切开与剥离：根据情况，选择Y形、T形或直线切口切开皮肤。切开腹膜时，先切一小 孔，插入两指，再从两指之间剪开，以免划破脏。剥离胸壁皮肤时，应注意将胸肌一并剥离，但勿损 与肋间肌。2，腹腔检查：检查腹腔有无积液和积气，腹膜情况，各器官的位置。与关系，有无粘连
2、，肝脾肿大否， 其边缘在锁骨中线肋缘下与剑突下几厘米，检查左右横膈的高度。三胸腔检查1、必要时在胸腔未切开前检查有无气胸。可有注射器吸水后，在第一肋间处自胸壁刺入，观察有无气体 自水面下上升。2在肋骨软骨联接线侧约0.5cm处，将第二肋骨到肋弓的软骨切断，紧沿胸骨后壁将横与纵隔割离，注意 勿损与心包与大血管，然后检查胸腔有无积液，其量与性质，必要时涂片检查与细菌培养。3. 切断第一肋骨，别离胸锁关节，将胸骨与肋骨取下，观察各器官的位置，两肺外表情况，胸腺是否已经 脂肪化。锯开胸骨，看骨髓造血情况。4. 自心尖部向上，作人形剪开心包，检查腔液量，心包膜壁情况，必要时取心血作细菌培养。5. 疑有空
3、气体栓塞时，将心包剪开一小口，用镊子拉紧切口两侧心包膜，心包腔注满水，然后，在水上剪 开右心房与肺动脉，观察有无气泡逸出，或者先结扎进出心脏的大血管，取出心脏，淹没于水下剪开右心， 观察有无气泡逸出。4脏器官的取出与检查四各脏器的取出 各器官取出前，应仔细检查周围情况与与其他器官的关系，检查有困难时，一时不能明确者，可与其它器 官一并取出，然后再仔细检查。检查各器官前，应称其重量，量大小。1. 心脏的取出与检查，在体剖开右心，检查肺动脉有无栓塞后，将心脏提起，从根部或心包膜壁分别剪断 上、下腔静脉，于距瓣膜2cm处肺静脉和主动脉于距瓣膜5cm处，取出心脏，假设有心、血管 畸形，那么应将心脏连同
4、肺脏一并取出。检查心脏增大否，外膜光滑度，有无渗出物等，心脏按血流方 向剖开，测量各瓣膜的周径与左右心室的厚度。A：右心剖开法：第一步，用刀或剪将右心从上、下静脉入口处直线剖开，如欲防止破坏窦房结，从 下腔静脉向上，剖至房室间沟上lcm处，向右心耳剪开，保持上腔静脉口完整，上腔静脉至少保存lcm。 第二步，从此线中点沿心脏右缘剖至心尖部，检查三尖瓣，并用手指检查动脉有无血栓或狭窄。第三 步，从心尖部沿心室中隔剖至肺动脉，检查肺动脉瓣。B：左心剖开法：第一步，用刀或剪将左心房从左、右静脉入口之间作直线剖开，以手指检查二尖瓣 是否狭窄。第二步，从此线的左端沿心脏左缘剖开至心尖剖。第三步，从心尖部沿
5、心室中隔，避开肺 动脉剖开肺动脉剖开主动脉，检查二尖瓣与主动脉瓣。剖开有瓣膜病变的心脏时，应注意防止破坏有病变的瓣膜。 心脏剖开后，检查心肌厚度、硬度、色泽、心膜光滑度，瓣膜周围有无增厚，与赘生物，有无狭 窄或关闭不全，检查冠状动脉开口情况。2. 肺脏的取出：可由肺根部将主支气管和血管切断取出，或与颈部器官一并取出。如两层胸膜间有粘 连，需细心别离，勿损与肺，如粘连结实，可连同胸膜壁层一并剥离，取出肺脏。取出后检查其外表 情况。切开检查肺切面的改变，有无病灶、气肿、萎陷等，肺门淋巴结肿大否，切面情况。3颈部器官的取出：A,充分别离颈部皮肤与软组织，用长刀刺入割断舌下系带，紧沿下颌骨面向左、 右
6、尽量地将下颌与舌间的软组织别离B,将舌拉下，自硬腭后缘割离软腭，注意应将两侧扁桃体完全 取下。C,将舌、咽、喉头、气管、食管、肺拉下于横膈上将食管、下腔静脉与主动脉切断，连同胸腔 器官一并取出。4.腹腔与盆腔器官的取出： 一般先将脾脏摘出，继之取出小肠、肾上腺、肝、胆囊、胃、十二指肠、胰，最后取出肾与盆腔器官。 将脾脏提至腹腔前方，割断脾门部血管，取出脾脏。检查其大小，重量，硬度，外表色泽。切面有无外 翻；有无糊状物刮下，脾门血管与脾小体、脾小梁的情况等。 小肠与大肠的取出前，应检查肠系膜淋巴结与血管，找出空肠的起端，切断，自肠系膜附着处将肠割下， 直至直肠处将其切断取出，肠的断端应钳紧或结扎
7、，以免粪便污染腹腔。待其他器官检查完毕后再检查肠。 先量其长度，在肠系膜附着处沿纵轴剪开肠腔，检查粘膜有无病变，腔有无寄生虫等，必要时可保持肠与 肠系膜的关系，并将其一并取出。 十二指肠在原位从前面剪开，用手挤压胆囊：看胆道通畅否。沿胃大弯剪开胃，检查粘膜病变，将胃与 十二指肠从后壁别离，与胰脏一并取出，在检查胰脏前，注意观察脾静脉有何变化。检察胰脏重量，大小， 硬度，作多横切面，检查切面情况。 小心别离肾上腺周围组织，取出肾上腺，别离右侧肾上腺时，将肝向上方推，注意别离与皮肤上腺相连 的肝组织，肾上腺取出后，作多人横切面，检察皮质与髓质的特征，有无出血等。 取出肝与胆囊前，应仔细检查胆管、门
8、静脉、肝静脉，然后剪断肝门的胆管与血管，别离镰状韧带，将 门静脉与肝背部部一段下腔静脉与肝一并取出。检查肝的大小，重量，硬度，色泽，注意检查肝静脉与腔 静脉，切面外翻否，小叶结构清楚否与有无其它病变。 别离肾周围脂肪结缔组织，将肾提出，凸面向上剖开，注意包膜剥离要难否，检查外表的性状，切面皮 质与髓质纹理是否清楚，肾盂粘膜有无病变。然后连输尿管一起取出肾脏。 盆腔器官的取出：先别离腹膜与周围组织，再取盆腔器官，男性可将直肠、膀胱一并取出，结肠断端应 结扎或缝合。5尸检后的修复尸检时应尽少破坏尸体的外形，检查完毕后，应吸去体腔的血水，凡不需保存的器官，均应放回体腔，并 应以木屑或其它吸水物质填塞
9、，逢合切口。缝合时要尽量注意整副尸体外形，将体表洗净擦干，包裹或穿 着妥善后放入尸箱。6微生物和寄生虫检查 采取细菌培养的方法1. 心血培养标本：1.1 用无菌镊子提起右心耳，在下腔静脉入口处的上方进展烧灼消毒，用一有柄铜片在酒精灯上烧红， 烧灼器官外表，面积约2*2cm.1.2用无菌吸管或注射器从消毒部位插入，顺下腔静脉入口推进，取血液2-3ml1.3 在无菌操作下，将吸取之血液立即注入无菌的肉汤培养基，或有玻璃珠的培养瓶，立即洗净吸管或注 射器，以免凝固，假设在右心取不到血液，可从下腔静脉吸取。1.4 腔胸腔、腹腔渗出液，心包腔积液，必要时作细菌培养，采取液体时应尽量防止污染。采取脑脊 液
10、培养时，于尸检前用无菌手术，在第二与第三腰椎间隙作穿刺，取脑脊液2-3ml,置于无菌试管送检。1.5 肠容物培养：在回肠末端与乙状结肠下端，或病变明显处的浆膜面经烧灼灭菌后剪开，用棉花拭子插 入肠腔，在粘膜面擦取粘液、渗出物粘膜，放入无菌试管或培养基送检。1.6脏器细菌培养：脏器外表灼烧灭菌，切取不小于2*2*1.5cm的组织块，装无菌容器送检。1.7脑组织作病毒别离：用无菌手术取大脑皮质，中脑，海马，脑桥组织块，每块不小于2*2*1.5cm,以 冰瓶保藏迅速送检。路途遥远者，可将检材放入无菌甘油瓶，在低温下送检。7化学和毒物检查8尸检记录 尸体检时所见由尸检室技术人员或指定工作人员，按剖检者
11、口述填写临时记录单，必要时摄影记录，做为 书写尸检记录的根底二、病理大标本制作技术1. 大体标本的收集、取材、固定和保存 1收集（尸体解剖和活体组织检查、其次是动物实验的模型收集标本） 2取材越新鲜越好，标本应仔细处理，尽可能的修掉多余的组织 3固定甲醛气饱和于水的甲醛液，浓度40%；体积10%，浓度4%的甲醛固定，10%福尔马林 4保存含血多的标本用凯氏法；胆色素用柯氏法；虐色素、脂肪等标本用甲醛 4.大体标本的装缸与封存法封存在玻璃或有机玻璃标本缸 :修整标本、适当标本缸、标本支架、拴好 的标本略加冲洗、封口松香蜂蜡、502胶、玻璃胶封口法三、组织的取材、固定方法和切片技术2. 组织固定
12、1固定的方法单纯固定液甲醛、重铬酸钾、苦味酸、升汞、醋酸、铬酸、饿酸、丙酮、三氯醋酸、 乙醇和混合固定液B-5液淋巴组织、Bouin液结缔组织三色染色、Carnoy液染色体、Muller液媒染和硬 化组织、Orth液胚胎神经脂肪、PFG液肽类抗原、PLP和PLPD液糖类组织、Rossman液糖原、Zenker液细胞 核细胞质三色染色、4%多聚甲醛免疫组化、甲醛钙液脂肪组织组织化学、乙醇甲醛皮下组织肥大细胞、乙 醚乙醇细胞涂片、中性缓冲甲醛液免疫组化、中性甲醛液常用2固定后洗涤：一般冲洗24h小组织210h1用水配制的固定液固定的组织洗涤法、2用含乙醇固定液 固定的组织洗涤法、3特殊固定液固定的
13、组织洗涤法3. 组织的脱水1脱水的方法：2考前须知 乙醇纯乙醇不宜过长否那么组织过度硬化丙酮收缩比乙醇更严重异丙醇、过氧己环、四氢呋喃、 环己酮、松脂醇4. 组织的透明1透明的方法2考前须知二甲苯易使组织变硬变脆氯仿易挥发和吸收水分香柏油透明时间长松油醇、丁香油、冬青油5. 组织的浸蜡与组织处理程序1浸蜡的方法2石蜡的应用3自动组织处理机的应用4组织处理程序人工操作程序自动组织处理机程序6. 骨和含钙组织脱钙方法1脱钙的方法 硝酸脱钙法：10%硝酸水溶液、硝酸10ml和10%甲醛90ml的混合液。 盐酸脱钙法：盐酸8.5ml,甲酸5ml,氯化铝7g，蒸馏水100ml；盐酸和甲酸各20ml，蒸馏
14、水100ml。8. 石蜡切片法 1切片前准备和黏附剂：固定后标本经脱水、透明、浸蜡和包埋后，制成蜡块。锋利的刀片；充足的经处理的载玻片和恒温烤箱，毛笔和铅笔。2切片制作方法：组织经石蜡包埋制成蜡块，用切片机制成切片的过程。 3切片的考前须知：组织的固定和取材；组织的脱水、透明和浸蜡；切片；切片刀和切片机；特殊切 片的制作。9. 冰冻切片方法 1直接冰冻切片法：恒冷箱切片；半导体制冷冷冻切片法；甲醇制冷器；二氧化碳冷冻法。2冰冻切片粘片法：蛋白甘油粘片法；Lille明胶粘片法；乙醇明胶粘片法四、木精-伊红染色方法HE染色1. HE染色的方法1人工操作程序2自动染色机程序3冰冻切片染色方法2. H
15、E染色试剂的配制1木精染液配制Harris木精的配制：木精1g；硫酸铝钾15g；氧化汞0.5g；乙醇10ml，蒸馏水200ml；先用蒸馏水加热溶解 硫酸铝钾，用无水乙醇溶解木精再倒入已溶解的硫酸铝钾的蒸馏水中，煮沸1分钟，稍冷却，慢慢参加红 色氧化汞0.5g，继续加热至染液变为紫红色，用纱布盖住瓶口，用前滤纸过滤后每100ml加冰醋酸5ml。2伊红染液的配制水溶性伊红：伊红-Y0.51g；蒸馏水100ml。先将水溶性伊红参加蒸馏水中，再用玻璃棒将伊红搅溶解后 过滤，每100m l加冰醋酸1滴。乙醇性伊红液：伊红-Y0.51g； 90%乙醇100ml。先将伊红溶于乙醇中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加 冰醋酸1滴。直接用85%乙醇脱水。3分化液配制（浓盐酸0.51ml； 75%乙醇99ml）4返蓝液的配制（1%的氨水）5考前须知（脱蜡、染色、脱水、透明与封胶）五、常用的特殊染色技术1. 结缔组织染色法2Masson三色染色法2. 胶原纤维染色法1VG染色法2Sirius red苦味酸法3. 网状纤维染色法
