《建立大鼠体外循环中肺保护液灌注模型.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《建立大鼠体外循环中肺保护液灌注模型.docx（8页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、建立大鼠体外循环中肺保护液灌注模型【关键词】 肺灌注 摘要：目的 为研究大鼠体外循环(CPB)中肺损伤机制与肺保护方法,建立大鼠CPB肺保护液灌注模型。方法 用大鼠离体肺作为氧合器，建立大鼠CPB，肺动脉置管行低温保护液肺灌注。结果32例模型均建立成功。结论 离体大鼠肺能够作为氧合器用于CPB研究,大鼠CPB中肺动脉灌注肺保护液在方法上是可行的。 关键词：动物模型; 肺灌注; 体外循环; 大鼠A Model of Protective Solution Infusion Into Pulmonary ArteryDuring Cardiopulmonary Bypass in RatAbstr
2、act: OBJECTIVE Cardiopulmonary bypass(CPB) is known to introduce inflammatory response and reperfusion injury in association with lung injury,to study this,32 cases of rat CPB model were made. METHODS Isolated rat lungs were used as the oxygenator. Venous blood from experimental rats was oxygenated
3、in isolated lungs and then was perfused into the aorta of experimental rats by pump. The experimental rat pulmonary artery was perfused with a protective solution. RESULTS All models were successfully established. CONCLUSION The isolated rat lung can be used as oxygenator instead of a mechanical oxy
4、genator in the rat CPB model.Key words：model；cardiopulmonary bypass；lung injury；rat体外循环(CPB)后肺部并发症依然是困扰心外科的一大难题，是小儿心脏手术后主要死亡原因之一。CPB中的肺损伤主要由体外循环中血液与非生理性管道界面接触引发的全身炎症反应以及肺的缺血再灌注损伤造成1。研究肺损伤发生机制、减轻炎症反应与缺血再灌注损伤成为肺保护研究的热点，在CPB时灌注低温肺保护液是术中实施肺保护的主要手段之一2。为研究CPB中肺保护液灌注及相关药物与手段的肺保护效果，以离体肺作为CPB氧合器,建立了32例大鼠体外循环
5、及肺保护液灌注模型，效果良好。1 材料与方法实验动物SD大鼠，雌雄不限，体重300350g。实验仪器stockert double head rollerpump，江湾型人工微型呼吸器，HX-10555恒温循环器，相应测压装置。实验方法将实验用大鼠，经腹腔注射3戊巴比妥麻醉，经股静脉注射肝素盐水使之肝素化，切开胸部皮肤至颈部，游离出气管，行气管插管接呼吸器(吸入氧浓度100，潮气量：10ml/kg，呼吸频率：5060次min)。仔细开胸避免损伤肺脏，游离右侧颈总动脉和上腔静脉，置双道结扎线，分别置入22号和20号穿刺针分接动静脉体外循环管道，结扎线固定，并结扎血管远端。管道经恒温循环器保持温度
6、在38。游离肺动脉，置10号丝线以备阻断。经右室流出道置24号穿刺针入肺动脉，右室表面置管处用微型血管夹固定并避免出血。取另一只大鼠，麻醉肝素化后，气管插管接呼吸器(呼吸指标同上)，开胸后剪断右侧颈总动脉放血，加入少量胶体用作预充液预充管道，将心肺一同取下，剪去心尖部及左室侧壁组织，经右室流出道插管入肺动脉，插管接CPB静脉引流管，剪开右心耳以利肺静脉回流，固定于实验架，置入连接恒温循环器的血液回收器，回流肺静脉血用转流泵经动脉管道动脉穿刺针泵入实验动物主动脉。如图1。经主动脉穿刺针抽取实验前血液标本后开始CPB，灌注流量5ml/min，阻断肺动脉，停实验动物呼吸器，经肺动脉插管灌注肺保护液，
7、30min后开放肺动脉并打开呼吸器，CPB灌注流量逐渐减半，追加半量肝素，继续转流60min后，测取气道压及相应指标，经左心耳抽取血液标本后停止体外循环，留取肺组织标本，实验结束。2实验结果转流中测定血气分析，氧分压、氧饱和度、红细胞压积、气道压均在正常范围。本实验中有一只大鼠因注射麻醉药刺破大血管致死；两例因恒温循环器温度失控致水温过高，转流10min后出现溶血引起肺严重水肿；两例因上腔静脉插管失败或不理想转而取血取肺用作预充和氧合器，另取大鼠用作实验鼠。其余均顺利成功。只要血管结扎可靠，术中无明显渗血；肺动脉阻断后，因失去前负荷心跳减慢，松阻断后心跳逐渐恢复正常。3 讨论动物CPB实验模型
8、多以较大动物为主，大鼠CPB模型较少报道3；外文文献报道有人以大鼠整体作为动力辅助用于离体保存后的肺的再灌注4。本实验在此基础上，以离体肺作为氧合器用于大鼠CPB获得成功，避免了小动物机械氧合器难以制作的问题，并成功施行了大鼠CPB中肺保护液灌注；因SD大鼠为近交系大鼠，其基因序列基本相同，组织相容性较好，不会出现明显的组织排斥和溶血反应，本实验中确未见有明显的溶血现象发生。但因动物较小，开胸、血管游离及穿刺要求动作精细，其血容量较少，因而要求操作细心尽量减少术中出血。综合起来有以下几点体会：麻醉肝素化后尽早行气管插管接呼吸器，时间过长会因呼吸抑制导致心跳停止；术中绝对避免刺伤肺脏以免术中漏气
9、；应将所需穿刺之血管外组织剥离干净，减少穿刺针误入夹层的机会以减少出血甚至穿刺失败；可靠结扎插管后的动静脉远端可减少出血渗血；游离肺动脉时，因大鼠肺动脉壁极薄，直接游离很容易分破，应用小剪刀剪开靠近肺动脉一侧主动脉外膜，以小血管钳向主动脉一侧游离，先将阻断线将主动脉包绕，再经横窦将主动脉右侧的阻断线一头过渡到肺动脉左侧以完成对肺动脉的包围；先行处理实验动物，若动静脉插管失败即可取肺取血，再以另一只大鼠作为实验鼠，这样可以减少动物的无谓浪费，本组实验中有两例相似情况发生；取肺时应避免肺动脉的损伤，以免术中氧合肺肺动脉漏血致静脉血氧合不足；上腔静脉置管应确实插入右房以利引流，肺动脉阻断后注意加大引
10、流避免右室发胀，主动脉置管不可过深以免插入左室影响冠脉灌注；肺动脉松阻断后如心跳恢复不好可行心脏按摩加以辅助；术中应紧密观察机械部分工作状态，避免出现意外导致实验失败，本组中两例溶血即发生于恒温循环器温控失灵。本实验动物模型的建立，需要精细的外科操作技术，故于实验初期，应将血管游离及穿刺技术熟练掌握，尽量保证实验中外科技术的稳定，可以减少人为因素对实验结果的影响。参考文献： 1Yoshitaka H,Yoshiki S,Motonobu N,et al. P-selectin monoclonal antibody may attenuate the whole body inflammato
11、ry response induced by cardiopulmonary bypassJ. ASAIO Journal,2000,46: 334-337. 2Liu Y,Wang Q,Zhu X,et al. Pulmonary artery perfusion with protective solution reduces lung injury after cardiopulmonary bypassJ. Ann Thorac Surg,2000,65:1402-1407. 3张根成，易定华，汪曾炜，等.兔体外循环动物模型的建立J.中国循环杂志，1998，13：313. 4Adrian J,Levine FRCS,Karen P,et al. The effect of adhesion molecule blockade on pulmonary reperfusion injuryJ. Ann Thorac Surg,2002,73: 1101-1106.
