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1、实验一 火焰原子吸收光谱法测定水中的痕量铜一、目的要求1. 了解SOLAAR-SS 原子吸收分光光度计的结构、性能和使用方法2. 掌握火焰原子吸收光谱法测定水中的痕量铜的方法二、方法原理利用待测元素的空心阴极灯发出被测元素的特征光谱辐射，被火焰原子化器产生的样品蒸汽中待测元素的基态原子所吸收，通过测量特征辐射被吸收的大小，求出待测元素的含量。三、仪器与试剂仪器：SOLAAR-SS 原子吸收分光光度计（美国热电公司）；空气压缩机；铜空心阴极灯；乙炔钢瓶。试剂：金属铜99.9%以上；硝酸，优级纯；乙炔气，高纯。铜标准溶液：由100g/mL1%HNO3的溶液稀释而成四、实验步骤1. 配制标准溶液分别
2、移取上述标准溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL于100mL容量瓶中，用1%HNO3的溶液稀释至刻度,其浓度分别为0、1、2、3、4、5g/mL。2. 仪器调节（1）打开稳压电源，然后打开主机电源开关，等待批示灯亮。（2）打开PC进入SOLAAR软件（3）打开空心阴极灯（4）打开“显示方法” 窗口，分别对概述、序列、光谱仪、火焰、校正进行操作，这几步操作完成后回到概述进行保存，调出方法用“载入”。（5）调整光路，打开“光谱仪状态”窗口看调整结果，若不理想再自动调一次零。（6）点火：打开乙炔气0.65Kg，打开空气2.1Kg，等仪器前面的指示灯闪光后，按下此键数秒点火。（7）打
3、开“分析”，按提示依次标准溶液和未知样品进行测定。打开“结果”窗口可看到分析结果，打开“校正”窗口可看到工作曲线和相关系。3. 关机（1）关掉乙炔高压阀等火焰自动熄灭（2）关掉空气压缩机，并放气、放水。（3）关元素灯，退回软件。（4）关主机电源。（5）关开稳压电源。五、结果处理取未知样品溶液经23次测定结果的平均值，从工作曲线上查出该溶液中铜的含量。六、注意事项1. 乙炔为易燃、易爆气体，必须严格按照操作步骤进行。在点燃乙炔火焰之前，应先开空气，然后开乙炔气；结束或暂停实验时，应先关乙炔气，再关空气。必须切记，以保安全。2. 乙炔气钢瓶为左旋开启，开瓶时，必须慢慢开启，否则冲出气流会使温度过高
4、，易引起燃烧或爆炸。七、思考题 1. 为什么要用空白液调零？2. 为什么点燃火焰前，必须先开助燃气，后开燃气；而在结束时，要先关燃气，后关助燃气？3. 在原子吸收光度法中，为什么要用待测元素的空心阴极灯作光源？能否用氘灯或钨灯代替？为什么？实验二 分光光度法同时测定维生素C和维生素E一、目的要求学习在紫外光谱区同时测定双组分体系一维生素C和维生素E。二、方法原理维生素C（抗坏血酸）和维生素E（-生育酚）起抗氧剂作用，即它们在一定时间内能防止油脂变酪。两者结合在一起比单独使用的效果更佳。因为它们在抗氧剂性能方面是“协同的”。因此，它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。 抗坏血酸是水溶性的，-
5、生育酚是酯溶性，但它们都能溶于无水乙醇，因此，能用在同一溶液中测定双组分的原理来测定它们。三、仪器与试剂仪器：Cintra10型紫外可见分光光度计；石英比色皿2只；50mL容量瓶9只；10mL吸量管2只。试剂：7.5010-5molL-1抗坏血酸（称0.0132 g抗坏血酸，溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL）；1.1310-4molL-1-生育酚（称0.0488g -生育酚溶于无水乙醇中，并用无水乙醇定容于1000mL）；无水乙醇。四、实验步骤1. 配制标准溶液（1）分别取抗坏血酸贮备液4.00、6.00、8.00、10.00mL于4只50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀
6、。（2）分别取-生育酷贮备液4.00、6.00、8.00、10.00mL于4只50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。2. 绘制吸收光谱以无水乙醇为参比，在320 220nm范围测绘出抗坏血酸和-生育酚吸收光谱，并确定1和2。3. 绘制标准曲线以无水乙醇为参比，在波长1和2分别测定步骤1配制的8个标准溶液的吸光度。4. 未知液的测定取未知液5.00mL于50mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，播匀。在1和2分别测其吸光度。五、结果处理1. 绘制抗坏血酸和-生育酚的吸收光谱，确定1和2。2. 分别绘制抗坏血酸和-生育酚在1和2时的4条标准曲线，求出4条直线的斜率，即、和。3. 计算未知液中
7、抗坏血酸和。-生育酚的浓度。六、注意事项抗坏血酸会缓慢地氧化成脱氢抗坏血酸，所以必须每次实验时配制新鲜溶液。七、思考题1. 写出抗坏血酸和-生育酚的结构式，并解释一个是“水溶性”，一个是“酯溶性”的原因。2. 使用本方法测定抗坏血酸和-生育酚是否灵敏？解释其原因。附 Cintra 10型紫外-可见分光光度计的操作使用说明1、打开仪器、计算机、显示器和打印机电源2、点开显示器上“紫外光谱”图标，进入“Spectral”软件操作系统3、待仪器自检结束，点击OK，进入操作主页面4、吸收光谱测量（1）点开“Online:GBCUV INSTRUMENT”（2）狭缝宽度“slit width”设置1.5
8、nm（3）在操作模式“Operation Mode”中有以下3种，选择波长扫描波长扫描“wavelength scan” 时间扫描“Time Scan” 固定波长“Fixed Wavelength”（4）光度测定模式“photometric mode”有以下4种，选择吸光度 吸光度“Absorbance” 百分比透过率 “%Transmittance” 反射率“Reflectance” 透过率“Transmittance”（5）波长扫描参数“Wavelength scan parameters”设置 扫描范围“Scan range”：输入感兴趣的波长范围 扫描速度“Scan speed”：70
9、005nm/min一般选1000nm/min 数据间隔点“Date interval”：根据不同的扫描速度，数据间隔点以小为好（6）在“File”中 点击“Select” 选择储存结果文件的路径, 例如:C:ProgramSpectralspdata Name:：输入结果文件名 Text：输入需要的注释文件 （7）做基线“Baseline” 把空白液注入两个比色皿内，并分别放入参比光路和样品光路，点击“Baseline”开始进行基线扫描（8）将盛有样品的比色皿放入样品光路，点击“Scan”开始扫描5、结果处理（1）十字法线“cursor”：以手动方式显示出光谱图上任一点的X、Y坐标值。点击光谱
10、图工具栏中“cursor”即成十字法线，将十字法线移至感兴趣处即可读出X、Y坐标值（2）检出峰表“peak table”：通过定义阈值及噪音值，让软件自动将扫描出的峰及谷检测出来，通过点击Store按键可将峰及谷标注在光谱图上，通过点击report按键可将峰及谷报告出来 （3）重叠“Joinvisible”：点击光谱图工具栏中“Joinvisible”可将多个单独图形合并成一张图形。（4）分开“Split”：点击光谱图工具栏中“Split”可将合并在一张图形中的多个图形分开成单个的图形实验三 荧光分析法测定铝（以8-羟基喹啉为络合剂）一、目的要求1. 掌握铝的荧光测定方法，以及荧光测量、萃取等
11、基本操作。2. 了解930型荧光光度计结构、性能及使用方法。二、方法原理铝离子能与许多有机试剂形成会发光的荧光络合物，其中8-羟基喹啉是较常用的试剂，它与铝离子所生成的络合物能被氯仿萃取，萃取液在365nm紫外光照射下，会产生荧光，峰值波长在530nm处，以此建立铝的荧光测定方法。其测定范围为0.0020.24 gmL-1Al。Ga3+及In3+会与该试剂形成会发光的荧光络合物，应加以校正。存在大量的Fe3+、Ti4+、VO3-会使荧光强度降低，应加以分离。实验使用标准硫酸奎宁溶液作为荧光强度的基准。三、仪器与试剂仪器：930型荧光光度计（附液槽一对、滤光片一盒）；玻璃器皿一套。试剂：1.00
12、0 gL-1铝标准储备液（溶解17.57g硫酸铝钾Al2(SO4)3K2SO424H2O于水中，滴加11硫酸至溶液清澈，移至1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）；2.00 gmL-1铝标准工作液（取2.00mL铝的储备液于1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀）；2% 8-羟基喹啉溶液（溶解2g 8-羟基喹啉于6mL冰醋酸中，用水稀释至100mL。）；缓冲溶液（每升含NH4Ac200g及浓NH3H2O 70mL）；50.0gmL-1标准奎宁溶液（0.500g奎宁硫酸盐溶解在1L 2 molL-1硫酸中，再取此溶液10mL，用2 molL-1硫酸稀释到100mL）。四、实验步骤1. 系列标准溶液的配
13、制取6个125mL分液漏斗，各加入40 50mL水，分别加入0，1.00，2.00，3.00，4.00及5.00mL2.00 molL-1铝的工作标准液。沿壁加入2mL2% 8-羟基喹啉溶液和2mL缓冲溶液至以上各分液漏斗中。每个溶液均用20mL氯仿萃取2次。萃取氯仿溶液通过脱脂棉滤人50mL容量瓶中，并用少量氯仿洗涤脱脂棉，用氯仿稀释至刻度，摇匀。2. 荧光强度的测量选择合适的激发滤光片及荧光滤光片，用标准奎宁溶液调节荧光强度读数为100，然后在930型荧光光度计上分别测量系列标准溶液各自的荧光强度。3. 未知试液的测定取一定体积未知试液，按步骤1、2方法处理并测量。五、结果处理1. 记录系
14、列标准溶液的荧光强度，并绘出标准曲线。2. 记录未知试样的荧光强度，由标准曲线求得未知试样的铝浓度。六、思考题标准奎宁溶液的作用是什么?如不用标准奎宁溶液，测量应如何进行?附 荧光分光光度计说明荧光分光光度计主要由光源、激发单色器、样品池、发射单色器、检测系统及信号显示系统六个部分组成，仪器的结构框图见下图。光源用来激发试样；激发单色器将光源发出的复合光色散成单色光组成的光谱带，并分离出所需的单色激发光；发射单色器则是用来将试样发出的多波长光色散成光谱带，并滤出所需检测的单色光。光源样品池激发单色器 发射单色器信号显示检测器1. 光源要求发射强度大、波长范围宽。常用高压汞灯和氙弧灯。高压汞灯发
15、射的365、405、436nm三条谱线是荧光分析中常用的。氙弧灯发射连续光在200700nm波长范围。高功率连续可调染料激光光源是一种单色性好、强度大的新型光源。因脉冲激光的光照时间短，避免被照物质分解。但其设备复杂，应用不广。2. 滤光片和分光器用滤光片为单色器时，干涉滤光片性能最好，精密的荧光光度计均用分光器作单色器。分光器多采用光栅。3. 检测器简单的荧光计用目视或硒光电池作检测器。精密的荧光光度计则采用光电倍增管。实验四 红外吸收光谱法测定固体有机化合物的结构一、 目的要求1. 掌握用压片法制备固体试样的方法2. 学习用红外吸收光谱进行化合物的定性分析3. 熟悉傅里叶变换红外光谱仪的工作原理及其使用方法二、 方法原理红外吸收光谱图中的吸收峰的数目及所对应
