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1、第六篇:兽医微生物学与免疫学一:细菌的结构与生理1细菌形态：具有细胞壁和核质的单细胞原核细胞型微生物。无成形的细胞核， 无完整的细胞器。以微米为测量单位。在固体培养基上培养，肉眼可见菌体集落。2. 细菌结构（一）细胞壁：G-菌 1.肽聚糖：为聚糖骨架；原核生物细胞特有。2. 磷壁酸：G+菌特有；其抗原性较强：黏附宿主细胞。G-菌：1.肽聚糖：（少量）2. 外膜：外膜蛋白：脂蛋白微孔蛋白。脂质双层：脂多糖：类脂A：内毒素成分。核心多糖：具有属特异性。 特异性多糖：具有种型特异性。3. 周浆间隙：外膜与细胞膜之间，可获得营养，解除病毒。（二）细胞膜：定义：为脂质双层，并镶嵌有特殊功能的载体蛋白酶类
2、；不含胆 固醇。功能：物质交换分泌胞外酶产生与利用能量有关细胞生物合 成的场所。（三）细胞质：成分：水蛋白质脂类核酸少量无机盐核糖体质粒。（为超 微结构）核糖体：由RNA和蛋白质组成；是蛋白质合成场所。质粒：定义：细胞染色体外的遗传物质,为双股DNA分子。包括：F质粒：决定细菌的致育性。R质粒：决定耐药性。毒力质粒：决定致病性。（四）核体：染色体（裸露的双链DNA）3. G+菌：革兰氏染色为紫色;G-菌：革兰氏染色为红色。4. 细胞壁的功能：维持固有形态.物质交换.携带有抗原决定簇与致病性有关。5细菌特殊结构：荚膜：为黏液样物质；为多糖或多肽或透明质酸奶；在营养品丰富时才 形成；能抵抗吞噬；有
3、特异性抗氧。鞭毛：细长波浪状物业；成分为蛋白质；能运行（沙门菌）；有特异的 H抗氧；与黏附有关。菌毛：普通菌毛：有黏附功能的；性菌毛：F菌毛。成分为pro；有良好的呓抗原性。芽抱：定义：一定条件下胞质脱水浓缩形成；有多层膜包裹；通透性低；有完 整核质和酶系统；代谢静止；不能分裂繁殖。是抵抗不良环境的特殊形成。灭活方法：160C干热灭菌或高压蒸气灭菌6.细菌染色方法 革兰氏染色法的程序:草酸铵结晶紫染色lminf碘液染lmin95%醇脱色30s f碳酸复红lmin.意义：鉴别细菌选择抗菌药物。 瑞氏染色法：将细菌染成蓝色；组织细胞的细胞核染成蓝色；背景和细胞浆染 成红色。 抗酸染色法：常用于结核
4、杆菌副结核杆菌的染色（红色）。顺序是：碳酸复红微热3 5minf3%盐酸酒精脱色f碱性美兰复红lmin. 特殊染色法：包括抗酸染色法芽抱/荚膜/鞭毛染色法。7细菌的生长条件：营养物质；酸碱度（最宜pH为7.2-7.6）；温度（最适 为3%）；气体（氧气二氧化碳）；渗透性。8. 世代时间：一个菌体以二分裂方式繁殖为两个菌体所需的时间。9. 细菌的生长曲线分为四个时期： 迟缓期：菌体增大，代谢活跃；分裂迟缓,细菌数增加不显著。 对数期：活菌数对数直线上升；生物活性典型；对抗生素敏感。 稳定期：新繁殖的活菌数与死菌数平衡；产生芽抱，外毒素等。 衰亡期：死菌数超过活菌数；菌体形态改变。10. 细菌新成
5、代谢的能量由ATP供给。11. 细菌生物氧化的类型 发酵：以有机物为受氢体。 有氧呼吸：以氧气为受氢体。 厌氧呼吸：以无机物硝酸盐为受氢体。12. 细菌合成的代谢产物： 致热源：（操作时严格注意无菌操作）。 毒素：内毒素为G-菌死后释放，外毒素为G+菌分泌的蛋白质。 侵袭性酶类：透明质酸酶（促使细菌扩散）。 色素：铜绿假单胞菌产绿色色素。 细菌素：仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质，如：绿脓菌素。 抗生素：多有放线菌和真菌产生。 维生素：大肠杆菌能合成维生素B维生素K。13. 细菌的分解代谢试验： 氧化发酵试验：大肠杆菌产酸产气；沙门菌产酸不产气。 氧化酶试验：阳性者为什么紫色。（阳性菌有假单胞菌
6、气单胞菌；阴性菌有: 肠科杆菌） 过氧化氢酶试验：阳性者产生气泡。（阳性：葡萄球菌微球菌。阴性：链球菌。） 硫化氢试验：产生黑色为阳性（阳性：变形杆菌；阴性：大肠杆菌） 尿素酶试验：阳性者呈红紫色（阳性：变形杆菌；阴性：沙门菌） 吲哚试验：阳性呈红色（阳性：大肝杆菌变形杆菌） 甲基红试验（MR）:红色反应为阳性（阳性：大肠杆；阴性：产气杆） VP试验：阳性呈红色（阳性：产气杆菌；阴性：大肠杆菌） 枸橼酸盐利用试验（C）：培养基变深兰为阳性（阳性：产气杆菌；阴性：大肠杆 菌） IMVC试验：大肠杆菌+；产气杆菌 +14. 固体培养基中琼脂含义2%；半固体培养基中琼脂含量0.5%。15. 基础培养
7、基：常用普通肉汤培养基，含蛋白胨牛肉浸膏.NaCl.水等；常用于 糖发酵试验。16. 营养培养基：在基础培养基中加入葡萄糖血液血清酵母浸膏等；常用血琼 脂平板（链球菌）。17. 选择培养基：麦康凯培养基抑制G+生长，利于用大肠杆菌.沙门菌生长。18. 鉴别培养基：另加入底物及指示剂，而鉴别细菌。19. 厌氧培养基 常用疱肉培养基；即在肉浸液中加入煮过的肉渣，用凡士林封口。 20液体培养基生长现象：混浊生长（葡萄球菌）；沉淀生长（链球菌）；菌 膜生长（枯草杆菌）。21. 半固体培养基中的生长现象：沿穿刺线生长或穿刺线向四周扩散呈放射状生 长。22. 固体培养基中的生长现象：平板上划线后形成菌落；
8、斜面上划线重叠形成菌 苔。二细菌的感染1. 正常菌体的分布： 口腔：球菌乳杆菌棒状杆菌； 胃：乳杆菌.幽门螺杆菌； 反刍前胃：无芽抱厌氧菌； 大肠：双歧，拟杆菌,肠球菌，大肠杆菌，乳杆菌； 鼻咽：葡萄酒球菌； 喉扁桃体：甲型链球菌，卡他球菌； 阴道：乳杆菌； 尿道口：葡萄球菌，棒状杆菌； 支气管肺：无菌；2正常菌群的生理作用：生物颉颃作用，营养作用，免疫作用。3. 柯赫法则：是确定某种细菌是否有具有致病性的主要依据。 特定的病原菌应在同一疾病中可见，在健康者不存在； 此病原菌能被分离培养而得到纯种； 此病原菌纯培养物接种易感动物能导致同样病症； 自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养物
9、。4. 细菌的毒力因子：侵袭力黏附因子F1菌毛：无特异性；F4菌毛K88:黏附猪小肠前段；F6菌毛987P:黏附猪小肠后段。侵袭性酶透明质酸酶链激酶：链球菌产生；胶原酶：梭菌，气单胞菌产生； 血液凝固酶：致病葡萄菌产生。II型分泌系统沙门氏菌.大肠杆菌等具有。干扰防御荚膜：抵抗吞噬；细菌表面蛋白：抗吞噬避免抗体补体作用；蛋白酶：细胞内逃逸：如产生过氧化氢，中和吞噬细胞中的氧自由基。毒素外毒素由G+及少量G-（如产毒性大肠埃希氏菌）产生；0.3%甲醛 刺激外毒素ffff类毒素fff产生抗毒素；机体神经毒素：包括破伤风毒素，肉毒毒素。内毒素是G-菌细胞壁的脂多糖,当细菌死亡后才游离出来；产生症状：
10、发热毒血症休克.内凝血.出血。5. 破伤风梭菌及其芽抱必须侵入缺氧的深部创口才能致病。6. 菌血症：病原菌侵入血统，但不繁殖。 毒血症：病原菌不的入血，但其产生内毒素入血，引起症状。 败血症:病原菌入血，并繁殖产生毒性物质，引起中毒症状(高热.皮肤黏膜淤斑. 肝脾肿大)。 脓毒血症：化脓性细菌入血并繁殖，产生新的化脓灶。7. 药敏试验结果判定标准： 敏感：用常用剂量时，该抗菌药物治疗有效。 中介：指被测菌株的MIC与该抗菌药物常用剂量所能达到的血清和组织浓度相 近。 耐药：指被测菌株不能被该抗菌药物常用剂量达到的血液浓度所抑制，临床治 疗无效。三.细菌感染的诊断1采集样本的原则： 严格无菌操作
11、； 根据不同疾病或同一疾病不同时期采集不同的标本； 应在使用抗菌药前米集,且米集时不得使用消毒剂； 样本须新鲜，尽快送检；多数可冷藏运输，粪便样本常加入甘油缓冲盐水保存液；按规定包装.冷藏.专人递送；做好标记。2. 抗体检测：最好检测急性期和恢复双份血清样本，后者为前者4倍以上才具诊 断价值。3. 聚合酶链式反应(PCR)的4种主要材料：DNA模板.引物.耐热DNA聚合酶.脱氧 核苷酸。4. 核酸杂交技术的设计原理：DNA双螺旋分子的碱基互补原理。5. 利用生化反应对肠道杆菌进行鉴定是必不可少的。四消毒与灭菌I. 消毒：指杀灭病原微生物，但不一定能杀死芽抱。2灭菌：指杀灭病原微生物非病原微生物
12、及其芽抱。3高压蒸汽灭菌法：应用最广灭菌效果最好的方法。其条件为什么103.4 kp.l21.3C .维持 15-30min.4. 煮沸法：100C时5min可杀死细菌的繁殖体，1-3h杀死芽抱，加入2%碳酸钠则 沸点升至少105C5. 流通蒸汽法：100C 30min杀死细菌的繁殖体，不可杀死芽抱。6. 巴氏消毒法：主要用于食品消毒，如下65C维持30min.7热空气灭菌法：160C,2h可杀死芽抱。用于玻璃器皿消毒。8紫外线灭菌：265nm波长的紫外线杀菌能力最强。用于实验室，养殖场入口的 消毒室手术室.种蛋等的空气消毒。9. 电离辐射灭菌：称“冷灭菌”，用于一次性医用塑料制品消毒。10.
13、 滤过除菌法：所器具为滤菌器，其孔径为0.22-0.45um即细菌不能通过，但病 毒支原体可通过。II. 紫外线消毒：有效距离不超过2-3m.12消毒剂作用机制：使菌体蛋白变性凝固（醇酚醛）；干扰细菌代谢（酚 类）；改变细胞膜通透性（新洁尔灭）。13. 能杀灭芽抱的消毒剂：氯制剂.过氧化化物.醛类。14. 影响消毒药作用的因素：浓度性质作用时间；温度和酸碱度；细菌 种类数量状态；有机物。五主要的动物病原菌1.G+菌：球菌.李氏杆菌.炭疽.芽抱杆菌.梭菌.分支杆菌。2链球菌：a链球菌：条件致病菌；B溶血链球菌：致病力强；r溶血链 球菌：无溶血环，不致病；其血液琼脂平板：灰白光滑边缘整齐小菌落；
14、猪链球菌z型在绵羊血平板呈a溶血，马血平板为B溶血；无芽抱无鞭毛； 症.败血症.脑膜炎.关节炎。3蜂房球菌：即欧洲幼虫腐臭病原。厌氧培养：白色边缘光滑表面微突起的菌 落。4.大肠杆菌： 为G-菌,无芽抱.有菌毛.有鞭毛.兼性厌氧； 琼脂平板：圆形.隆起.光滑.湿润.灰白色.中等大小菌落；肉汤中：均匀混浊管底形成黏性沉淀；发酵乳糖可产酸产气；麦康凯琼脂板：形成红色菌落；伊红美兰琼脂：产生黑色带金属闪光的菌落；绵羊血平板：呈B溶血；其中产肠毒素大肠杆菌ETEC最常见；毒力因子：包括菌毛（黏附素）肠毒素类脂A.K抗原.0特异多糖；诊断：取肝.脾肾.小肠内容物.肠系膜淋巴结，分别在麦康凯和血平板上培养, 再取典型菌落进行生化试验。5沙门氏菌 为G-菌,无芽抱，无荚膜,有鞭毛，兼性厌氧； 但鸡白痢与鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛，无纤毛； 普通肉汤中：均匀浑浊； 不可分解乳糖； 麦康凯琼脂培养：无色，透明，圆形，光滑，扁平小菌落； 毒力因子：菌毛，内毒素，肠毒素； 诊断：需分离培养，生化鉴定；鼠伤寒沙门氏菌：致各种畜禽的副伤寒及人类食物中毒。6多杀性巴氏杆菌 为G-菌，无鞭毛,无芽抱，两极着色，兼性厌氧； 麦康凯培养：不生长； 血琼脂平板：露滴样小菌落，不溶血； 血清肉汤中：液面形成菌环,管底出现粘
