临床标本收集及保存

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1、临床样本的收集与保存样本 类型米集方法处理方法保存方法血液 根据研究需要采集治 依据科研需求确定样 血清：室温血凝后W样本疗前，治疗中及治疗本份数。30min内进行分离、后的空腹外周静脉 分离提取血浆、血清、分装；4C，24h内进血。白细胞层、血凝块进行分离、分装。 采集时尽量选择与其行分装，每例样本不 血浆：4C, 24h内进他常规检验同时进行少于3份。行分离、分装。 分别采集抗凝血（依 血清/血浆:分装3管， 全血/血清/血浆/血据研究目的选择抗凝0.5ml/管。凝块W -80 C长期保剂）和非抗凝（干燥 血凝块：分装2管，存。或促凝）血液样本1cmA3/管。 肿瘤庄血液样本米集 EDTA

2、抗凝：用于DNA英确保放/化疗前有提取、淋巴母细胞系进行建立和蛋白组学研 血浆样本分离应进行究。分装3管、0.5ml/两次离心管外周 血液样本用EDTA抗 依据科研需求确定样单个核细胞：4C,24h血单凝米集本份数。内进行分离、分装。个核 全血样本米集后应尽 水平室温离心分离 分装后W -150 C液氮细胞快用淋巴细胞分离液PBMC, 4C低温洗涤。中保存。样本分离单个核细胞 分离后单个核细胞加 分离后的单个核细胞入细胞冻存液，混匀应加入细胞冻存液，后进行分装，每管并利用程序降温仪或0.5ml。程序降温盒进行梯度降温。 冻存液配置为90%FCS+10%DMSO组织 样本米集严禁影响临 依据科研

3、需求确定样 样本置于液氮内转样本床病理诊断。肿瘤直本份数。运。径1cmA3不建议采 肿瘤、瘤旁及非瘤（正 石蜡样本置于中性福集或在病理医生指导常）组织各2-3份。尔马林中常温转运，下采集，采集部位应 石蜡/OCT样本1份或尽快制成蜡块。与用于石蜡切片相一5张组织切片，用于形RNA later样本常温转致。态学对照。运（W24h）, W-20C 样本米集应在离体后 需留取质控样本（）保存。30min内完成采集，留取份数依据科研目 OCT样本W -20 C保米集时应避免坏死区的而定）存。及纤维化区，肿瘤细 每份样本应三 新鲜组织样本置于液胞应50%。0.5cmA3 或 300mg 或氮中保存。样本

4、米集时应在洁净1*10A7 细胞。环境中操作，保存石蜡样本不小于RNA时应尽量在无菌0.5*0.5*0.2cm。环境卜进彳丁；米集不样本/福尔马林液比例冋样本时应更换米集 器材、防止交叉污染。 4采集顺序：标明“远 癌-近癌-癌灶”顺序， 正常组织（距癌灶边 缘3cm或最远端） 癌旁组织（距离癌灶 边缘3cm）癌组织 vv/ 来4 一二 441 - 口？= 十、升K应三1/5。米集后样本置于液态 液氮中应使用内旋式 冻存管，置于气相液 氮或-80 C冰箱中可 使用外旋式冻存管。每份肿瘤样本应有配 对的血液样本。培养米集容器应无菌、干依据科研需求确定样样本置于液氮内转细胞燥、洁净、具有防漏本份数

5、。运。样本瓶盖。每皿细胞对应1个冻W-150C长期保存。吸出培养皿培养液，存管保存。用PBS冲洗2次，加传代细胞建议取处于入胰蛋白酶37C消化指数生长期、较大瓶1min。皿培养的80%-90%汇除去胰蛋白酶，加入合单层细胞。5ml培养液混匀后取收集培养液时，出细胞液进行离心。1000g/min离 心除去上清液后加入细5-10min。胞保护剂0.5ml,胎牛加入胰蛋白酶后需放血清0.5ml及DMSO入恒温箱37 C恒温0.1-0.2ml混匀放入内 旋式冻存管内，进行 程序降温。1min。干细胞保存加入特定 细胞培养液及高浓度 胎牛血清。尿液米集容器应无菌、干依据科研需求确定样常温保存：W4h样本

6、燥、洁净、具有防漏本份数。0-4CW24h。瓶盖。尿液样本Wl00ml。全尿W -80 C长期保进仃毒理分析时应使分装5管，1ml/管。存.用咼密度聚丙烯类容尿液样本可处理为：细胞W -150 C长期保臾 方器。全尿。存。 检测特殊分析物时应 在分管前加入EDTA 或焦亚硫酸钠等防腐 齐U。 避免经血、白带、精 液、前列腺液、粪便 污染。 特殊样本应避光保存 建议米集首次晨尿。 尿液样本含有细胞碎 片等杂质，应进行离 心。 尿液内细胞采集/分 离方法冋血液样本。 不冋时段尿样研究方 向：首次晨尿：白细 胞、红细胞和激素浓 度较咼；随机尿样： 适合常规筛查和细胞 学检测；分级尿样： 适用于分析物

7、浓度； 定时尿样：可用于比 较生物分子排泄模 式。粪便 样本 粪便应取新鲜标本， 盛器应洁净，不得混 有尿液，不可有消毒 剂及污水。 采集标本时应用干净 的竹签选取含有粘 液、脓血等病变成分 的粪便；外观无异常 的粪便需从表面、深 处及粪端多处取材， 其量至少指头大小。 冷冻采集后的样本 依据科研需求确定样 本份数。 采集量230g。 分装3管，10g/管。 冷冻干燥保存。 2W-80C长期保存.胆汁 样本 米集容器应无菌、干 燥、洁净、具有防漏 瓶盖。 米集清晨胆汁、米集 时尽量选择与其他常 规检验同时进行。 胆汁保存应加入细胞 培养液(RPMI1640) 依据科研需求确定样 本份数。 采集

8、量210ml。胆汁/RPMI1640比例为： 1/25。 分装5管，2ml/管。 米集后4C保存，时 间W 12h内进行分 装。 W-150C长期保存。 胆汁内细胞采集分离 方法同血液样本。脑脊液 样本米集后应转入含 有EDTA和氯化钠混 合液中。2. 如果含有红细胞或颗粒 物时应低温离心。3. 米集细胞应使用专业米 集方法。4脑脊液保存应加入保护 剂(DMSO)并使用程序降 温仪进行梯度降温。 依据科研需求确定样 本份数。2. 采集量23ml。3. 分装 3 管，0.5-1ml/管。 样本置于液氮内转 运。2上清液-80C长期保存。3.分离细胞W-150C长期 保存。唾液 样本 使用蛋白酶抑制剂处 理样本 进行离心、分离上清 和可能存在物质、米 集上清和颗粒物。 依据科研需求确定样 本份数。 分装3-5管,0.5ml/管。 样本置于液氮内转 运。 W-80C长期保存。