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1、所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光 基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲 线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法I.SYBRGreenl 法：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料 特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR 染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与 PCR 产物的增加完全同步。SYBR 定量 PCR扩增荧光曲线图PCR产物熔解曲线图（单一峰图表明PCR扩增产物的单一性）2.TaqMan 探针法：探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩 增时，Taq酶的
2、5-3外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团 和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩 增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR 产物的形成完全同步。服务流程1. 客户认真写好订单，提供待检基因相关信息;2. 签订技术服务合同，支付预付款（30-50%）;3. 设计合成定量PCR引物（或客户提供文献引物委托本公司合 成）;4. DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录；5. PCR 预实验，主要检测引物的特异性和扩增效率;6. 正式定量实验:对所有样品上机检测；7. 实验结果和数据分析，形成报告。收费标准优惠包干价:120元/样/基因（SYBRgree nl法，相对定量）（含RNA提取，反转录，引物合成费用，上机测试费用（3个重复）；一个内参免费（内参3个重复）
