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1、糖醛酸含量测定硫酸-咔唑(523 nm)1实验材料1.1药品：半乳糖醛酸、四硼酸钠、浓硫酸、无水乙醇、咔唑、漩涡混合器、具塞试管1.2对照品溶液的配制精密称取干燥至恒质量的半乳糖醛酸10mg,用适量的蒸馏水溶解，并定容于100mL容量瓶中，配成100 n g/mL的对照品溶液。1.3供试品溶液的配制精密称取多糖10mg,加入蒸馏水溶解，并定容于10mL容量瓶中，配制成浓度为1mg/mL溶液。1.4四硼酸钠- 硫酸溶液的配制精密称取0.478g四硼酸钠溶解于100mL浓硫酸中备用3。1.5咔唑溶液的配制精密称取咔唑75mg,溶解于50mL无水乙醇中，配制成0.15%的咔唑溶液备用。2实验方法2.
2、1测定波长的选择分别吸取对照品溶液、供试品溶液1mL，置于10mL具塞试管中，在冰水浴中分别加入四硼酸钠-硫酸溶 液5mL，用漩涡混合器混匀，于沸水浴中加热20min，取出后立即冷却至室温，加0.15%咔唑溶液0.2mL， 摇匀，在室温下保持2h，另取1mL蒸馏水同法操作作参比，在波长400800nm扫描，2.2标准曲线的制作分别精密吸取对照品溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL 于 10mL 具塞试 管中，各管加水至1mL，分别在冰水浴中加入四硼酸钠-硫酸溶液5mL，取出后立即冷却至室温，力加0.15% 咔唑溶液0.2mL,摇匀，在室温下
3、保持2h,在最佳测定波长下测定其吸光度。编 号100yg/mL半乳糖醛 酸溶液 (ml)蒸馏水 (ml)浓度(yg/mL)四硼 酸钠- 硫酸 溶液用漩涡 混合器 混匀， 于沸水 浴中加热20min,0.15% 咔唑溶 液(ml)OD1OD2OD3平均值标101050. 2标20. 10. 91050. 2标30. 20. 82050. 2标40. 30. 73050. 2标50. 40. 64050. 2标60. 50. 55050. 2标70. 60. 46050. 2标80. 70. 37050. 2标90. 80. 28050. 2标100. 90. 19050. 2标111. 0010
4、050. 22.3样品糖醛酸含量的测定取供试品溶液各1 mL,同时做三个重复，以空白试剂为参比，按上述标准曲线的测定法，分别测定其吸 光度值， 计算样品中蛋白质的含量。蕨麻多糖（1 mg/ml）编号OD1OD2OD3平均值浓度 (mg/ml)蛋白含 量硒多糖PAP1-1粗糖1-11-21-21-31-32-1精糖1 mg/ml2-20. 5mg/ml3200440058006120077000ASP8ASPJ9ASPC103001160012900131300145000白沙蒿15ASP16ASPJ17S2(7.4)185(6.992)1910 (6.7)20W-2(6.4)21正 9(5.9
5、)22黑沙蒿23粗糖24精糖2519 (9.9)2630 (8. 4)2725 (7.9)2813 (7.3)29WH (5.9)30瓜尔豆胶31G3233G3K7.1)34G32(6.7)35G25(6)36G26(5.7)3.1 稳定性实验取同一供试品溶液1 mL, 按下列时间梯度 测定3 次,观测其稳定性, 结果见表。时间 (min )102030405060708090120150OD1OD20D3平均值静置时间过长？3.2 精密度实验精密吸取100 Ag/mL标准溶液0.5 mL进行精密度试验，连续进行6次测定其吸光度,时间(min )1223456OD3.3重现性实验精密吸取来自同一批原料的试样, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 检验该测定方法的重现性, 表明重复性较好,样品号123OD1OD2OD3平均值456平均值3.4回收率实验精密吸取1mg/mL供试品溶液0.1mL,分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL的对照品溶液，按样品测 定方法，分别测定其吸光度，计算回收率样品号0.100.20.30.40.5OD1OD2OD3平均值结果标样量mL吸光值、0.100.20.30.40.5OD1OD2OD3平均值
