食品厂微生物沉降涂抹操作步骤.docx

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1、食品厂微生物沉降涂抹操作步骤参考标准GB/T 16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准涂抹操作(菌落总数、大肠菌群)一、配制药品:生理盐水(试管中+棉签)或直接采购无菌涂抹棒、PCA培养基、VRBA培养基二、培养基灭菌:PCA12TC, 15 分钟;VRBA无需灭菌,煮沸即可;生理盐水-一12VC, 15分钟。注:灭菌后的生理盐水需冷却彻底后才可以进行涂抹操作三、涂抹操作:a. 取待测物(人员手部、操作案板、工器具表面等)涂抹面积为5*5cnf;b. 涂抹后将与手部接触的棉签棒的部分折掉;C.检样作出2-3个稀释度ImL (

2、原液)-无菌平皿中(10 ) , 2板菌落总数,2板大肠菌群=4板 9ml灭菌生理盐水中(10-2) , 2板菌落总数,2板大肠菌群=4板于10”试管中吸取1ml,加入9ml灭生理盐水中(10-3), 2板菌落总数,2板大肠菌群=4板注:菌落倒入配置后灭菌的PCA, 15-20H1L,大肠倒入配制后灭菌的VRBA, 15-20mLo d.培养:待琼脂凝固后放入培养箱中,平皿倒置(除霉菌PDA外,其余平皿均倒置培 养),361C,大肠培养24小时,菌落培养48小时。c. 查板计数:于N+1天,查大肠结果,N+2天,查菌落结果。沉降菌(菌落总数、霉菌)一、配制培养基:PCA、PDA;二、倒板:按照计划沉降点数,计算所需培养基及倒板的数量,PCA约20mL/板,PDA不得少于20mL/板(培养时间长,琼脂少就干了);三、沉降:车间在30m2以上者,于东、西、南、北(距墙Im处)、中五点;小于3 Om2者,于一条对角线里、中、外三点,高度均在1.5m处采样,打开平皿盖,使平 板在空气中暴露5 min (操作时,周围不得有人员走动,防止结果不准);四、收板:将手部用75%酒精消毒后再收板,切忌触碰到平板内琼脂五、培养:PCA, 36TC,培养48小时;PDA, 28C,培养5天; 六、查板计数:于N+2天,查菌落结果,N+5天,查霉菌结果。

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