《BCA法测蛋白浓度》由会员分享，可在线阅读，更多相关《BCA法测蛋白浓度（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、【目的】:掌握BC法测定蛋白质浓度的原理。【原理】：BCA（icinchnininc acd)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿，即BC工作试剂。在碱性条件下，BC与蛋白质结合时,蛋白质将C2复原为Cu+,一个Cu螯合二个CA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。【操作】标准曲线的绘制：取试管七支、编号,按下表操作:【计算】一 绘制标准曲线。二 以测定管吸光度值,查找标准曲线,求出待测血清中蛋白质浓度（gL)。三 再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度（g/L）。【优缺点】（一) 操作简单，快速，
2、45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快倍且更加方便；（二） 准确灵敏，试剂稳定性好,BA试剂的蛋白质测定范围是020/ml，微量BC测定范围在0.510g/ml。（三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行,大大节约样品和试剂用量;（四) 抗试剂干扰能力比拟强，如去垢剂，尿素等均无影响【器材】一 7220型分光光度计 二 恒温水浴箱 三 中试管7支四 枪式移液管【试剂】、 试剂A:1%BCA二钠盐 2无水碳酸钠 .1%酒石酸钠 0.4%氢氧化钠 .5%碳酸氢钠 混合调H值至1。 2、 试剂B：4硫酸铜。 3、 BC工作液:试剂A10ml 试剂B 2混合。 4、 蛋白质标准液：用结晶牛
3、血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成15mg/m的蛋白质标准液。纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定、待测样品：用双缩脲测定法的样品稀释而成。此法测定蛋白质浓度,近些年被科研工作者广泛选用。目前C法的试剂盒市面有售。总之，虽然蛋白质含量的测定方法很多,但是，还没有一个完美的方法。在选择测定方法时，可根据实验要求和实验室条件决定。内容总结1【目的】:掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理2(三)经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行,大大节约样品和试剂用量3纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定 、 待测样品：用双缩脲测定法的样品稀释而成总之,虽然蛋白质含量的测定方法很多,但是，还没有一个完美的方法
