《生物技术实践》

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1、选修一 生物技术实践专题一 传统发酵技术的应用3. (理综1卷)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述,错误的是A.发酵时需要不断通入无菌空气,否则会积累乳酸B.发酵时常采用的培养基为液体天然培养基C.从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产D.当菌体生长进入稳定期时,补充营养物可提高谷氨酸产量专题二 微生物的培养和应用40(宁夏).【生物选修1生物技术实践】(15分) (1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基

2、和培养皿进行_(消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和_;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的_。 (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。 (5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_。 (6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。答案:(1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌 消

3、毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生. (6)灭菌33.(10分)(全国理综2)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。(1)实验步骤:配置_(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为_。将_接入已灭菌的培养基平板上。立即用适当剂量的紫外线照射,其目的是_。菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_现象的菌落即为初选菌落,经分离、纯化后即可达到实验目的。(2)若已得到

4、二株变异菌株I和II,其淀粉转化率较高,经测定菌株I淀粉酶的催化活性高,菌株II的淀粉酶蛋白含量高,经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株I的突变发生在_区,菌株II的突变发生在_区。答案:(1)固体、玉米淀粉;野生菌株;(诱发野生菌株发生基因突变)对野生菌株进行诱变;(透明圈)浅色范围大;(2)编码区、非编码区6. (安徽)下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上C将实验组和对照组平板倒置,370

5、C恒温培养24-48小时D确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数3(重庆)下列有关大肠杆菌的叙述,正确的是A大肠杆菌以复制方式进行繁殖,其拟核是一个环状DNA分子B在含葡萄糖和乳糖的培养基上,大肠杆菌首先利用乳糖作碳源C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时应及时添加核酸等生长因子D处于对数期的大肠杆菌常作为生产用的菌种和科研的材料专题三 植物组织培养技术34(山东)(8分)(生物一生物技术实践)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下:请回答:(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行 。 接种前,要对人参根进行 。(2)用

6、于离体培养的根切块,叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于 污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于 污染。(3)用少量 酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法,操作时应采用 加热。答案:(1)灭菌 消毒(2)外植体 真菌(霉菌) 细菌(3)果胶(4)萃取(浸取) 水浴专题四 酶的研究与应用3(江苏)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是 A固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解

7、氧C利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件 D利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物22(江苏多选)加工橘子罐头,采用酸碱处理脱去中果皮(橘络),会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络,可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物,可以大量产生所用酶的有 A生长在麦麸上的黑曲霉 B生长在酸奶中的乳酸菌C生长在棉籽壳上的平菇 D生长在木屑上的木霉32.(17分)(全国理综2)请用所给的实验材料和用具,设计实验来验证哺乳动物的蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有专一性。要求完成实验设计、补充实验步骤、预测实验结果、得出结论,并回答问题。实验材料与用具:适宜浓度的蔗糖酶、唾液

8、淀粉酶、蔗糖、淀粉四种溶液,菲林试剂、试管、37恒温水浴锅,沸水浴锅。(1)若“+”代表加入适量的溶液,“”代表不加溶液,甲、乙等代表试管标号,请用这些符号完成下表实验设计,请在答题卡上作答。 溶液试管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液甲+(2)实验步骤:按照上表中的设计,取试管、加溶液。(3)结果预测:_。(4)结论:_。(5)在上述试验中,如果仅将37恒温水浴锅的温度调到20。而在其他条件不变的情况下重做上述实验,出现砖红色试管中的颜色会比37时的浅,其原因是_。32、答案:(1) 溶液试管蔗糖溶液淀粉溶液蔗糖酶溶液唾液淀粉酶溶液甲+乙+丙+丁+(2)混匀,37恒温水浴一段时间;取出

9、试管,分别加入适量的斐林试剂,混匀,沸水浴一段时间;观察实验现象并记录实验结果。(3)含有蔗糖和淀粉酶溶液的试管(试管甲),以及含有淀粉和淀粉酶溶液的试管(试管乙)中出现砖红色沉淀,其他试管中不出现砖红色沉淀;(4)(哺乳动物的蔗糖酶和淀粉酶)酶的催化作用具有专一性;(5)20低于酶的最适温度,酶活性低,水解产生的还原糖少。31(理综1卷)(10分)桃果实成熟后,如果软化快,耐贮运性就会差。下图表示常温下A、B两个品种桃果成熟后硬度等变化的实验结果。据图回答:(1)该实验结果显示桃果实成熟后硬度降低,其硬度降低与细胞壁中的 降解有关,该物质的降解与 的活性变化有关,也与细胞壁中的 降解有关,该

10、物质的降解与 的活性变化有关。(2)A、B品种中耐贮运的品种是 。(3)依据该实验结果推测,桃果实采摘后减缓变软的保存办法应该是 ,因为 。(4)采摘后若要促使果实提前成熟,科选用的方法有 和 。(5)一般来说,果实成熟过程中还伴随着绿色变浅,其原因是 。答案:(10分)(1)纤维素,纤维素酶,果胶质,果胶酶(2)A(3)适当降低温度,低温可降低有关酶的活性,延缓果实软化(4)用乙烯进行处理,适当提高贮存温度(5)叶绿素含量降低31(江苏)(6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶

11、液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。 试管编号项目IV 蒸馏水(mL)2O1111 缓冲液(mL)0210.50.50.5果胶酶液(mL)O0O0.5O0蜗牛酶液(mL)O0OO0.50纤维素酶液(mL)0O0O00.5 实验结果(绿色深浅程度)+ + + + + + +(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验

12、中 是空白对照组,其设置意义是 。(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 洗涤。(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 。答案:(6分)(1)为了使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果 (2)果胶酶和纤维素酶I、排除无关变量的干扰 (3)等渗溶液 (4)低渗涨破法专题五 DNA和蛋白质技术23(江苏多选)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有 A提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化38. (广东A卷)(10分)生物技术实践(1)商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸

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