流式细胞项目参考值和意义

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1、【参考范围】CD34+细胞在正常外周血中占有核细胞的0.000010.0001(0.001%0.01%),骨髓0.005 0.015(0.5%1.5%),脐血 0.0050.035(0.5%3.5%)。【影响因素】骨髓或外周血白细胞要用PBS稀释至1X10A6/ml后进行免疫标记,并注意设立相应的同型 对照。【临床意义】1. 外周血造血干细胞(PBSC)采集前CD34阳性细胞动员有效性的监测可以指导临床制定 采集计划。一般来说,外周静脉血有核细胞中CD34+细胞达到0.001(0.10%)以上时,可以 考虑行PBSC单采术。否则,应继续动员。2各种造血干细胞移植物的CD34+细胞剂量控制BMT

2、、PBSCT的CD34+细胞剂量2X 10A6/kg,脐血干细胞移植时,CD34+细胞剂量可少至BMT成PBSC的1/10,即2X10P/kg。3. 化疗强弱的掌握化疗后血象的恢复快慢取决于对造血干/祖细胞损伤的强度。CD34+细 胞的测定可以判断化疗的强度。要求化疗强度控制在杀伤一定比例而非所有CD34+细胞为 度。4. 贫血的鉴别(如再障、缺铁性贫血)如果再障的原因属于细胞受累,则CD34+细胞可以 明显降低(0.01),缺铁性贫血时,CD34+细胞数量应在正常范围之内。5. 基因治疗CD34+的HSC作为缺陷基因的靶细胞有它独特的优点,因为HSC具有自我更新 的能力,因此,缺陷基因导入此

3、类细胞后能维持终身,从而彻底治愈疾病。显然,CD34+HSC 的精确测定显得非常重要。【参考范围】CD19+:0.10 0.15(10% 15%)。【影响因素】1. 标本最好用EDTA抗凝,其次用肝素。2. 标本要新鲜采集,不能发生凝血。3. 制备细胞悬液时,使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。4. 血液采集后,应尽快进行免疫荧光染色和固定,最迟不能超过6h。5. 标记后的细胞应尽快上机检测,最迟不能超过72h。【临床意义】1. B细胞与免疫缺陷免疫缺陷可以是先天性或获得性的。低丙种球蛋白白血病和无丙种球蛋 白白血病常伴有免疫球蛋白分泌的紊乱,因此有必要分析B细胞。2. B细胞与淋巴瘤非霍奇金病

4、的淋巴瘤,80%来源于B细胞。因而一旦怀疑为淋巴瘤,就应 仔细用FCM对B细胞的表现型进行分析,可以分析血、骨髓及活检淋巴结等。首先确定肿 瘤细胞的来源:B细胞性(CD19+ )或丁细胞性(CD3+)。也有可能某些淋巴病来源于单核 细胞(CD11+ )或裸细胞而表现出非T非Bo【参考范围】不同试剂参考范围不同。【影响因素】BD建议在每一次测试样本前,同批处理一个已知HLA-B27阳性和HLA-B27阴性的样本,作 为测试系统的质控品。同时要求:1. 获取的细胞中至少有2%为T淋巴细胞,以保证软件能够设门。2. CD3+和 CD3-细胞群要能清楚分开,软件能够识别。【临床意义】HLA-B27抗原

5、的表达与强直性脊椎炎有高度相关性,超过90%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性,普通人群中仅5%10%为阳性,而强直性脊椎炎由于症状与许多 疾病相似而难以确诊,因此HLA-B27的检测在病情的诊断中有着重要意义。此外,许多其他 的疾病与HLA-B27抗原的表达有或多或少的相关性,比如Reiter s综合征,HLA-B27阳性率 70%90%;银屑病性关节炎,HLA-B27阳性率为50%60%;葡萄膜炎,HLA-B27阳性率为 40%50%等。因此HLA-B27的检测在这些疾病的诊断中是一个非常有价值的指标。【参考范围】CD3- / CD16+56+O050.10(5%10%)。【

6、影响因素】1. 标本最好用EDTA抗凝,其次用肝素。2. 标本要新鲜采集,不能发生凝血。3. 制备细胞悬液时,使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。4. 血液采集后,应尽快进行免疫荧光染色和固定,最迟不能超过6h。5. 标记后的细胞应尽快上机检测,最迟不能超过72h。【临床意义】自然杀伤细胞(NK)细胞在体内具有免疫监视功能,对癌的生长及转移具有抑制作用。许 多临床资料表明,胃、乳腺、卵巢、肺癌及白血病等患者NK细胞功能低下。研究发现恶性 脑瘤、胃及直肠癌患者外周血NK活性的测定值都低于正常对照组,其中晚期癌症患者下降 尤为显著,提示NK活性与癌症的发生,发展及预后相关。【参考范围】CD3+CD4

7、+CD8-: 0.340.70 (34.0%70.0%);CD3+CD4-CD8+: 0.250.54 (25.0%54.0%);CD4+/CD8+: 0.682.47。【影响因素】1. 标本最好用EDTA抗凝,其次用肝素。2. 标本要新鲜采集,不能发生凝血。3. 制备细胞悬液时,使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。4. 血液采集后,应尽快进行免疫荧光染色和固定,最迟不能超过6ho5. 标记后的细胞应尽快上机检测,最迟不能超过72ho【临床意义】正常机体中各T淋巴细胞亚群相互作用,维持着机体的正常免疫功能。当不同淋巴细胞亚群 的数量和功能发生异常时,机体就可导致免疫紊乱并发生一系列的病理变化。目

8、前越来越多 的研究说明,T淋巴细胞亚群在各种临床疾病如自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病、变态反 应性疾病、再生障碍性贫血、病毒感染、恶性肿瘤等都有异常改变。因此,T淋巴细胞亚群 的检测对控制这些疾病的发生、发展、了解疾病的机制、指导临床治疗都有极其重要的意义, 它已作为临床研究的一种重要手段。1. T淋巴细胞亚群与自身免疫和免疫缺陷病现已普遍认为在自身免疫病中,CD8+细胞的数量 和功能的低下是发病的重要因素,有时也CD4+细胞数量和功能的增高。最典型的例子就是 活动性系统性红斑狼疮(SLE)患者,这种疾病患者外周血单个核细胞中CD8+细胞百分率下 降,常伴有CD4+细胞百分率增高,CD4+/C

9、D8+比值升高。其他自身免疫病象HBsAg阳性的 乙型肝炎,多发性硬化症活动期,自身溶血性贫血,类风湿症,重症肌无力,急性5VHD或 排斥反应时患者都具有类似的T淋巴细胞亚群异常分布的特征。CD4+/CD8+比值减小是免疫缺陷病的重要指征。在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者中, 就存在着CD4+细胞数显著减少的现象,因而常常出现CD4+ / CD8+比值倒置。在一些上呼吸 道感染的患者中,体内T抑制细胞的数量和功能都有异常增高的现象。2. 人类T淋巴细胞亚群和病毒感染现已证明,很多感染性疾病者和免疫抑制有关,CD4+/ CD8+比值的倒置被认为是病毒感染性疾病的重要指征。在水痘、猩红热、麻

10、疹患者中就发 现有CD3+、CD4+细胞数减少,CD8+细胞数增多,CD4+/CD8+比值降低。在急性期和复发的 传染性单核细胞增多症中也有CD4+ / CD8+比值降低的现象,它是由CD8+细胞数增高引起的。 此外HBsAg阳性的乙型肝炎、疱疹感染,以及血吸虫病患者都有类似的CD4+ / CD8+比值下 降的报道。3. T细胞亚群和肿瘤发生许多研究都证实肿瘤患者外周血中T淋巴细胞亚群数值异常。其特 征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少,而CD8+细胞明显增加,CD4+/CD8+比值显著 降低。在实体瘤患者像消化道癌症、肝癌、乳腺癌等患者中都有CD3+、CD4+细胞数降低, CD8+

11、细胞数增多,CD4+ / CD8+比值明显降低的现象。在血液性肿瘤患者中T淋巴细胞亚群 的异常变化就更为复杂。上述结果说明肿瘤患者的细胞免疫功能处于免疫抑制状态,患者对 识别和杀伤突变细胞的能力下降,形成了肿瘤的生长、转移。通过检测肿瘤患者T淋巴细胞 亚群的异常变化,了解机体的免疫动态,可指导临床上使用免疫调节剂及其他药物治疗肿瘤 患者,以调节其免疫功能,增强机体的抗肿瘤能力。4. T淋巴细胞亚群与造血随着T淋巴细胞亚群检测技术在各方面的应用,现已发现骨髓造血细胞的增殖和分化障碍与T淋巴细胞亚群异常有关。如在再生障碍性贫血与粒细胞减少症中, 患者体内外周血CD4+细胞数减少,CD8+细胞数增多

12、,CD4+ / CD8+比值明显下降。在血小板 减少症患者中CD3+、CD4+细胞百分比都有明显的下降,相应地CD4+/CD8+比值显著下降。 在探讨淋巴细胞亚群异常对造血的影响时,发现患者体内激活的Ts细胞能抑制体外GM-CFUC的生长。由此可推测粒细胞减少症患者体内增生的Ts细胞是发病的重要因素。骨 髓重建期患者的T淋巴细胞亚群也存在着数量上的不平衡,它可能是骨髓移植后患者免疫功 能低下的重要原因。骨髓异常增生综合征(MDS)患者的CD4+细胞百分比减少,CD8+细胞 百分比增高,CD4+ / CD8+比值下降。这可能是骨髓异常增生的继发表现,也可能是其发病 的原发因素。【参考范围】DI判

13、定标准: DI=1.00.1(0.91.0)为二倍体; DI=1.00.15 (0.851.15)为近二倍体; DI=2.02CV(1.90 2.10)为四倍体; DI2.10为多倍体。【影响因素】1. 实验应设正常对照,一般以人外周血淋巴细胞作为正常二倍体参照,若检测标本为组织, 则应以同种正常组织细胞为参照。2. 人为因素造成的死细胞都会影响荧光参数。死细胞会成为G0 / G1期前峰,可误认为是亚 二倍体峰或凋亡峰。死细胞超过20%,免疫实验多不可靠。【临床意义】DNA的非整倍体出现与癌变率和癌前病变增生程度有关,是癌前病变发生癌变的一个重要指 标。DNA非整倍体出现是鉴别良性与恶性肿瘤的

14、特异性指标:良性肿瘤和正常组织良性增生 不出现DNA非整倍体细胞而恶性肿瘤常可出现异倍体细胞,实体瘤以超三倍体或多倍体居多。 实体恶性肿瘤的非整倍体出现率70%,淋巴瘤和白血病以亚二倍体居多,出现率达50%。 交界性肿瘤形态学介于良恶性之间,难于鉴别。如果交界性肿瘤出现异倍体即已具有恶性特 征,尽管病理形态学尚不能证实,也应视为恶性。非整倍体的肿瘤:恶性程度高,复发率高, 转移率高,预后差。近二倍体和二倍体肿瘤,预后差。但少数肿瘤的DNA分析对预后无判断 价值。【参考范围】CD62P+W0.048(4.8%)(血液)。【影响因素】1. 标本最好用EDTA抗凝,其次用肝素。2. 标本要新鲜采集,

15、不能发生凝血。3制备细胞悬液时,使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。4. 血液采集后,应尽快进行免疫荧光染色和固定,最迟不能超过6h。5. 标记后的细胞应尽快上机检测,最迟不能超过72h。【临床意义】血小板黏附分子CD62P不但可以诊断处于血栓前状态或已有血栓形成的患者,为手术中血 小板活化提供特异性指标,对抗血小板药物的应用具有指导意义,而且与肿瘤转移密切相关。 国内外研究表明,肿瘤患者尤其是中晚期肿瘤患者血小板黏附分子的表达和释放增加,处于 激活状态;血管内皮损伤、血小板与肿瘤细胞相互作用及作用时释放的生物活性物质是血小 板激活和释放的主要原因;血小板可增强肿瘤细胞与内皮细胞,内皮下细胞外基质的黏附, 对肿瘤细胞血行转移的所有中间步骤多有促进作用,并直接参与肿瘤细胞的转移过程。【参考范围】P-gP+W0.05(5%)(血液)。【影响因素】1. 标本最好用EDTA抗凝,其次用肝素。2. 标本要新鲜采集,不能发生凝血。3制备细胞悬液时,使用标准溶血剂以使红细胞充分溶解。4. 血液采集后,应尽快进行免疫荧光染色和固定,最迟不能超过6ho5. 标记后的细胞应尽快上机检测,最迟不能超过72ho【临床意义】1.P-糖蛋白是一种分子量170KD的跨膜糖蛋白(P170),它具有能量依赖性“药泵”功能。 P-gP既能与药物结合,又能与ATP结合,ATP供能,使细胞内药

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