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1、Siemens Advia 系列生化仪参数详解本详解主要针对的是市场上常见的四种西门子机型： ADVIA1200/1650/1800/2400。大致分为五个章节：简介、根本参数介绍、读点前移、前带监测、参数设置。一、简介：ADVIA1650 是最早进入中国的拜耳生化仪，虽然师出日本，也是日本电子制造，但还是能看出拜耳的设计理念在里面。后来拜耳被西门子收购，ADVIA 生化也保存了下来。ADVIA 系列生化仪都是将 ISE 作为标配安装，ADVIA1200 生化速度是 800 测试每小时， ISE400 测试每小时； ADVIA1650 和升级版 1800 的生化速度都是 1200 测试每小时，
2、 ADVIA2400 的生化速度是 1800 测试每小时。Advia 系列的操作把握软件都大同小异，几乎没有什么本质上的变化，所以连续性较强。加上西门子特有的流水线兼容性，使ADVIA 系列的生命力变得特别坚韧，在国内流水线市场里占据相当大的份额。在 ADVIA 老版本的程序中，是支持四种试剂的，也就是R1、R2、R3 和 R4；但在后续版本中，四种试剂变为 2 种，只有R1 和R2，这一点厂家并没有说明为什么。全部的Advia 系列，都是两个试剂盘，两个试剂针，反响盘是单盘，塑料反响杯，一根样本针。除ADVIA1200 外，都有一个稀释盘和稀释样本针，稀释样本针将原始样本参与到稀释样本盘中，
3、依据最高可达 1:75 的比例进展样本稀释，然后通过样本针将稀释后的样本转移到反响盘中。同样，在反响盘上也可以进展最高 1:75 的样本稀释，这样二者相乘，样本的稀释比例高达 1:5625。稀释样本盘也是塑料杯，有自己单独的搅拌器、冲洗站。ADVIA 的试剂也可以进展稀释，所以节约试剂。但由于设计理念的关系，其孵育介质有孵育油，也就是油浴。3M 生产的孵育油价格较贵，而且需要半年更换。除常规的清洗剂外， 反响杯空白比色也需要单独的活化剂，加上稀释样本或试剂用的生理盐水，总体下来 ADVIA 的耗材较多，而且总本钱也不少。全部的ADVIA 系列都是R1+S+R2 方式。反响时间可选择：3 分钟、
4、4 分钟、5 分钟、10 分钟、15 分钟、长程反响 21 分钟和 31 分钟。ADVIA1200 没有稀释样本盘，所以样本直接被转移到反响杯上。加样速度 4.5 秒，读点 13.5秒，R1+S 后读第一点，10 分钟反响读点 42 个，R2 在 19 点前参与。反响杯总数 231 个，反响体积为 80-430ul，R1 和 R2 参与体积范围在 5-300ul 之间。反响时间可选择：3 分钟最终读点 14、4 分钟最终读点 18、5 分钟最终读点 21、10 分钟最终读点 42、15 分钟最终读点 63、长程反响 21 分钟和 31 分钟。ADVIA1650 和 1800 加样速度为 3 秒
5、，读点时间是6 秒，R1+S 后读第一点，10 分钟反响读点 98 个，R2 在 49 点前参与。反响杯总数 221 个，反响体积为 80-300ul，R1 和 R2 参与体积范围在 15-150ul 之间。ADVIA2400 加样速度为 2 秒，读点时间是 14 秒，R1+S 后读第一点，10 分钟反响读点 41个，R2 在 22 点前参与。反响杯总数 340 个，反响体积为 60-180ul，R1 和 R2 参与体积范围在 10-100ul 之间。二、根本参数介绍：主读点：M.DET.Pm/n 也就是Main Detect point 的简写，m 和n 是主读点区的起止点，0mn，也就是说
6、 m 和 n 两点是在启动反响后的两个点，m 点的读点必需设置，n 可以不设置填写 0 就是不设置，双试剂中是指R2 参与之后的一组时间点，据此计算吸光度速率或平均值用于浓度计算；子读点：S.DET.Pp/r。也就是 subsidiary Detectpoint 的简写，p 和r 是子读点区的起止点，0pr,r点可以不设置。子读点是指需要读取反响空白的区域，一般指启动反响之前的试剂和样本空白，在双试剂中是指R2 参与前的一组时间点。读点：N，在终点法反响中，读点不小于三个，假设小于三个，系统自动前移满足三个。在速率法当中，读点不能少于六个，假设小于六个，系统自动前移满足六个。依据反响方法，子读
7、点可以选择也可以不选择。u/d 和 U/D 旗标：U 和 u 表示上限，D 和 d 表示下限，当超过小写u/d 范围时，用大写U/D显示。空白：Blanku/d U/D，这里指的是试剂空白的上下限。就是以去离子水为样本的检测， 主要用来监测试剂性能，是以主读点区主波长的吸光度值为基准的，当试剂的空白吸光度超 过 u/d 上下限范围，就会用 U/D 显示出来，提示操作人员留意试剂问题。试剂空白是可以选择是否进展监测的。Blank u/d 的定义是，在下降速率当中，Blank u 也就是空白上限为 2ABS，Blankd 为主读点吸光度的 50%；在上升速率当中，Blank u 也就是空白上限为最
8、高主读点吸光度的 150%， Blank d 为主读点吸光度的 50%。图 1 Blank u/U/d/D 示意图修正点： E2。E2 表示试剂和样本参与后的几个点的吸光度值，用来进展 LIH乳糜、黄疸、溶血等标本或底物耗尽的监测。E2 都将监测试剂空白以及样本加试剂的结果，也就是说 E2=样本+R1 的 E2 吸光度 减去 试剂空白的 E2 吸光度。读点前移：Point-Forwarding。在速率法中，高浓度样本往往很快消耗完反响物， 而底物却大量存在，速率反响很快停顿。当系统监测到这种状况时，会自动将主读点前移至发生速率反响的区域。在使用读点前移的技术时，需要增加一个主读点M.DET.P
9、 l，lmn。假设m 和 n 主读点被监测到发生底物耗尽，那么自动前移读取 l 和 m 之间的读点。图 2 读点前移示意图图 2 所示中，m 和 n 点之间消灭底物耗尽现象，由于设置了l 点，所以自动将读点移至 l 和 m 之间读取。同样，l 和 m 以及 m 和 n 之间要多于 6 个读点。假设推断底物耗尽，就要借助样本吸光度限制这个概念。样本吸光度限制：Sampleu/d。Sample u 或 d 只能选择一个，这是依据反响方向的不同而设定的，下降速率反响将只有 Sample d，上升速率反响将只有 Sample u。其要求监测 R2 参与之前和之后的数个读点的吸光度值，照旧是主波长的吸光
10、度值。R2 参与之前的监测点就是我们前面说的 E2，R2 参与之后的监测点是主读点区的最终两个点，叫做选择点。E2 和选择点进展计算：Sample u/d=选择点的吸光度-E2*K其中：E2=样本和 R1 的 E2 点吸光度值 试剂空白的 E2 点吸光度值K=R1+S/R1+S+R2是体积系数。当 E2 用于底物耗尽探测时，读点自动选取第 7 点，这样会避开 LIH 因素干扰。推断依据，在下降速率反响中，当 Sample d 大于选择点吸光度时，认为是底物耗尽；在上升速率反响中，当Sample u 小于选择点吸光度时，认为是底物耗尽。图 3 底物耗尽示意图图 3 的所示中，Sample d 大
11、于主读点区 m 和 n 最终两点的吸光度值，所以推断为底物耗尽，自动将读点前移到 l 和 m 点。这里有一个问题，假设 m 点也处于底物耗尽的区域怎么办？前移的结果也会不准确。所以 ADVIA 的读点前移技术并不是那么牢靠，为了保证牢靠，其承受了格外简洁的计算方式，目的只有一个，躲避东芝的弹性速率法。这里简洁的介绍一下弹性速率法。其原理是监测速率反响的主读点区，并依据设置的吸光度差值进展没两个相邻读点的吸光度差，当实际读取的吸光度差值小于设定的吸光度差值时，就会推断为底物耗尽。而底物耗尽推断后自动将读点前移至预先设置的两个点的区域，这样可以充分避开 ADVIA 中的假设 m 点也在底物耗尽区域
12、的可能。读点前移不在这里做具体介绍，后面有单独的章节。 反响方法：有五个选择，EPA、RRA、2PA、CRA 和 IMA；EPA 反响方法：就是常说的终点法，可以是一点终点法，也可以是两点终点法。一点终点法时，子读点p 和 r 无效，填为 0；两点终点法时，子读点p 和 r 要填写，而且要在 R2 参与之前。终点法读点要求至少三个点，缺乏三个点时，系统自动前移补足。图 4 EPA 终点法示意图RRA 反响方法：也就是常说的速率法，可以是单速率法，也可以是双速率法。承受单速率法时，读取主读点区的 m 和 n 的区域进展每分钟速率计算。承受双速率法时，还要读取 R2 参与之前的子读点区 p 和 r
13、 的区域进展每分钟速率计算，然后主读点和子读点相减再进展浓度计算。使用速率法时，系统将自动进展 E2 吸光度计算。但在参数设置，可以选择是否选择 E2 corre ，也就是是否选择 E2 修正。用 DO 或 Not Do 选择。在速率法当中，Blank u/d 必需输入，并且可以选择在 R2 参与前一点插入检查点 CHECK D.P.I，此检查点将于试剂空白数据进展比较，借以推断试剂是否有问题。但此法仅在下降速率法和 IMA 方法中使用。假设不使用，则填写 0。固然，在速率法当中，也可以选择底物耗尽监测而增加的主读点 M.DET.P.l。图 5 RRA 速率法示意图2PA 反响方法：也就是常说
14、的两点速率法。也是速率法的变种，区分在于不进展主读点间的两个点的线性监测。其余与速率法完全一样。图 6 2PA 两点法示意图CRA 反响方法：官方说法为随着时间的变化反响接近恒定，曲线由最小二乘法拟合，也有称为固定点法。大致意思是选择读点区的两个点进展吸光度值得最小二乘法计算。是依据时间和吸光度的数值进展计算的，无论是速率法还是终点法均可承受。当子读点被承受时，p=r0，或p0，r=0 时，是速率法，速率计算是依据两点间曲线的正切线；当 pr 时，用两点间连接直线进展计算。当不承受子读点时， 为终点法，承受最大时间吸光度和空白吸光度进展计算。说实话，真不知道这个方法是做什么工程的，中文没有解释，英文的解释很少， 也没觉察实例。图 7 CRP 固定点法示意图IMA 反响方法：也就是免疫比浊法。是承受最小二乘法计算的速率法。对于 R1 的参与量太少，无法进展 E2 计算时，这个方法就变得有用了。也就是说，在很多免疫比浊工程里，R1 的参与量往往小于 R2 的量，所以引发了一系列的计算和判别上的困难，IMA 就是为了解决这个
